总SOD活性检测试剂盒(WST-8法)

总SOD活性检测试剂盒(WST-8法)

货号:BL903A

规格:100T

品牌:biosharp

Total Superoxide Dismutase Assay Kit with WST-8

SOD活性检测试剂盒(WST-8法)

产品编号

产品名称

规格

BL903A

SOD活性检测试剂盒(WST-8法)

100T

 

产品简介

SOD活性检测试剂盒(WST-8法)是一种基于WST-8的显色反应,通过比色来检测细胞、组织或其它样品中SOD即超氧化物歧化酶活性的试剂盒。超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase, SOD)能催化超氧化物阴离子O2发生歧化作用,生成过氧化氢(H2O2)和氧气(O2),是生物体内一种重要的抗氧化酶。

目前有多种SOD活性测定法,其中NBT(氮蓝四唑)法由于使用方便而被广泛使用。但NBT法产生的甲臜染料水溶性差,易和被还原的黄嘌呤氧化酶相互作用,抑制百分率达不到100%等,从而使检测的灵敏度和精确度受到影响;细胞色素C法也是一种常用来检测SOD活性的方法,但细胞色素C氧化活性高,易受样品中的还原剂干扰,另外该方法需要连续测定吸光度值,对于SOD的检测灵敏度比较低,所以不太适合大批量样本的检测。

目前测定SOD比较先进的方法包括WST-1法和WST-8法,其中WST-8法比WST-1法更加稳定、灵敏度更高。本试剂盒采用了目前测定SOD方法中稳定性更好、灵敏度更高的WST-8法,可以检测出低达0.5U/ml的超氧化物歧化酶。WST-8法的原理参考图1WST-8可以和黄嘌呤氧化酶(Xanthine Oxidase, XO)催化产生的超氧化物阴离子反应产生水溶性的甲臜染料(formazan dye),由于SOD能催化超氧化物阴离子发生歧化作用,所以该反应步骤可以被SOD所抑制,因此SOD的活性与甲臜染料的生成量成负相关,从而通过对WST-8产物的比色分析即可计算SOD的酶活力

 

   WST-8的反应产物是稳定的水溶性产物,可以通过单个时间点的吸光度检测来测定SOD活力,适合高通量筛选研究。同时WST-8法测定SOD酶活力时,最大抑制百分率可以接近100%,并且可以不受一些常见的干扰因素的干扰,使检测效果比其它的一些常见方法显著改善。

   本试剂盒的性能优于同类产品总SOD活性检测试剂盒(NBT法)。本产品的用途与同类产品总SOD活性检测试剂盒(NBT法)相同,等量SOD导致的吸光度变化值显著大于NBT法,线性范围更宽。本试剂盒提供的SOD样品制备液能直接裂解细胞,无需匀浆,操作更加便捷。

   本试剂盒的检测不受样品中过氧化氢的干扰。很多细胞和组织样品中含有内源性的过氧化氢,会干扰SOD的检测。本试剂盒通过添加适量过氧化氢酶等特殊方法,能有效去除常规样品中过氧化氢的干扰。例如,对于SOD标准品的检测,标准品中添加高达0.1mM的过氧化氢时,对于检测结果仍无显著影响。本试剂盒可以检测细胞或组织匀浆液上清、全血、红细胞抽提物、血清等生物样品中的SOD活性。

 

产品组成:

组分

规格

SOD样品制备液

50 ml

SOD检测缓冲液

50 ml

WST-8

800 μl

酶溶液

100 μl

反应启动液(40×

60 μl

 

注意事项

1、待测样品-70℃可保存1个月。需注意反复冻融会导致SOD部分失活。

2、细胞或组织等样品制备时不能采用含有Triton X-100等去垢剂的溶液,否则会干扰本试剂盒的检测。     

3、抗氧化物会对本试剂盒的检测产生干扰,例如0.1mM ascorbic acid5mM GSH都会使测定出来的吸光度显著升高。所以需要设置使用说明中的空白对照3来消除样品中的抗氧化物的干扰。

4、标准品稀释时所用的稀释液应尽量与样品一致。样品用试剂盒提供的SOD样品制备液制备时,标准品也建议使用SOD样品制备液进行稀释;当样品为血液等无需处理的样品时,建议使用试剂盒提供的SOD检测缓冲液稀释标准品。

5、酶溶液有时会被分成两层,因此忽略离心混匀步骤会导致实验结果不准确。

6、为提高实验准确性,建议每个样品进行复孔实验。

7、本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品。

8、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

保存条件:

-20℃避光保存,有效期一年。

货号 BL903A
规格 100T
品牌 biosharp
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细胞增殖检测试剂Premix WST-1 Cell Proliferation Assay System酶试剂盒Takara Clontech

上海金畔生物科技有限公司代理Takara酶试剂盒全线产品,欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

细胞增殖检测试剂Premix WST-1 Cell Proliferation Assay System
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara MK400 Premix WST-1 Cell Proliferation Assay System 2500 Tests ¥3,507 细胞增殖检测试剂Premix WST-1 Cell Proliferation Assay System 细胞增殖检测试剂Premix WST-1 Cell Proliferation Assay System 细胞增殖检测试剂Premix WST-1 Cell Proliferation Assay System
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■ 制品内容
Premix WST-1 25 ml
 
■ 制品说明
本制品是通过吸光度比色分析法对细胞增殖和细胞活力进行检测的试剂。其检测原理是利用活细胞线粒体中的琥珀酸四唑盐还原酶 (succinate-tetrazolium reductase) 将四唑盐WST-1还原为水溶性formazan dye,进而通过吸光度比色分析法进行检测。此方法取代了[3H]-thymide掺入法,实现了非放射性检测。琥珀酸四唑盐还原酶存在于线粒体中,只有在活细胞中才具有活性,培养基中添加的四唑盐在琥珀酸四唑盐还原酶的作用下,还原生成formazan dye,活细胞数越多,样品中的琥珀酸四唑盐还原酶活性就越强,生成的formazan dye就越多,生成的formazan dye数量与活细胞数成线性正比关系。使用本制品检测时,无需洗涤细胞和使用放射性同位素,从微量培养开始,即可使用酶标仪在同一个微孔板上测定其光吸收值。本制品通过检测细胞活力,可以用于药物敏感性分析和药物筛选。
 
■ 保存
-20℃避光保存。
 
■ 特点
◇ 无需使用放射性同位素。
◇ 无需使用有机溶剂来溶解反应生成的formazan dye。
◇ 吸光度值与活细胞数成线性正比关系。
◇ 与MTT法相比,灵敏度更高。
◇ 可在同一个微孔板上进行不同反应时间的结果测定。
 
■ 用途
◇ 检测生长因子、cytokines、mitogens、nutrients等细胞增殖能力的影响。
◇ 分析抗癌药等具有细胞毒性和抑制细胞生长的化合物。
◇ 评估具有抑制细胞生长作用的抗体与生理介质。
 
 

页面更新:2023-11-01 16:30:04

总SOD活性检测试剂盒(WST-1法)

总SOD活性检测试剂盒(WST-1法)

货号:BL902A

规格:100T

品牌:biosharp

Total Superoxide Dismutase Assay Kit with WST-1

SOD活性检测试剂盒(WST-1法)

产品编号

产品名称

规格

BL902A

SOD活性检测试剂盒(WST-1法)

100T

 

产品简介:

       超氧化歧化酶(SOD)能够催化超氧阴离子(O2。-)歧化,生成过生成过氧化氢(H2O2)和单质氧气(O2),是一种重要的抗氧化酶。目前有许多间接或者直接测定SOD的方法,其中NBT(氮蓝四唑)法由于使用方便而被广泛使用,但是,NBT法有几个缺点,例如生成的染料水溶性差,而且会和黄嘌呤氧化酶的还原型发生反应。虽然cytochrome C法也常被用来做SOD检测,但它和超氧化物反应过于剧烈,不能测定低水平的SOD。目前测定SOD比较先进的方法包括WST-1法和WST-8法,本试剂盒采用了目前测定SOD方法中稳定性和灵敏度较好的WST-1法。使用了易溶于水的噻唑盐:WST-1(2-(4-碘苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯基)-2氢-四唑盐,二钠盐),能够和超氧阴离子反应生成水溶性的染料,因此可以简便地进行SOD的检测。WST-1与超氧阴离子反应的剧烈程度比cytochrome C小70倍;因此,它的检测灵敏度非常高,并且能够通过将样品用buffer稀释,使背景的吸光度最小化。WST-1不会和黄嘌呤氧化酶(Xanthine Oxidase, XO)的还原型发生反应,因此,能够检测SOD 100%的抑制率。WST-1被超氧阴离子还原的比率与黄嘌呤氧化酶的活性线性相关,并且会被SOD所抑制(见下图)。因此,SOD或者SOD类似物的IC50(50%的抑制浓度)就能用比色法来测定。

      WST-1的反应产物是稳定的水溶性产物,可以通过单个时间点的吸光度检测来测定SOD活力,适合高通量筛选研究。同时WST-1法测定SOD酶活力时,最大抑制百分率可以接近100%,并且可以不受一些常见的干扰因素的干扰,使检测效果比其它的一些常见方法显著改善。

本试剂盒的性能优于同类产品总SOD活性检测试剂盒(NBT法)。本产品的用途与同类产品总SOD活性检测试剂盒(NBT法)相同,等量SOD导致的吸光度变化值显著大于NBT法,线性范围更宽。本试剂盒提供的SOD样品制备液能直接裂解细胞,无需匀浆,操作更加便捷。

本试剂盒的检测不受样品中过氧化氢的干扰。很多细胞和组织样品中含有内源性的过氧化氢,会干扰SOD的检测。本试剂盒通过添加适量过氧化氢酶等特殊方法,能有效去除常规样品中过氧化氢的干扰。例如,对于SOD标准品的检测,标准品中添加高达0.1mM的过氧化氢时,对于检测结果仍无显著影响。本试剂盒可以检测细胞或组织匀浆液上清、全血、红细胞抽提物、血清等生物样品中的SOD活性。

 

产品组成:

组分

规格

SOD样品制备液

50 ml

SOD检测缓冲液

50 ml

WST-1

800 μl

酶溶液

100 μl

反应启动液(40×

60 μl

 

注意事项

1、待测样品-70℃可保存1个月。需注意反复冻融会导致SOD部分失活。

2、细胞或组织等样品制备时不能采用含有Triton X-100等去垢剂的溶液,否则会干扰本试剂盒的检测。

3、抗氧化物会对本试剂盒的检测产生干扰,例如0.1mM ascorbic acid5mM GSH都会使测定出来的吸光度显著升高。所以需要设置使用说明中的空白对照3来消除样品中的抗氧化物的干扰。

4、标准品稀释时所用的稀释液应尽量与样品一致。样品用试剂盒提供的SOD样品制备液制备时,标准品也建议使用SOD样品制备液进行稀释;当样品为血液等无需处理的样品时,建议使用试剂盒提供的SOD检测缓冲液稀释标准品。

5、酶溶液有时会被分成两层,因此忽略离心混匀步骤会导致实验结果不准确。

6、为提高实验准确性,建议每个样品进行复孔实验

7、本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品。

8、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

保存条件:

-20℃避光保存,有效期一年。

货号 BL902A
规格 100T
品牌 biosharp
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细胞增殖检测试剂Premix WST-1 Cell Proliferation Assay System酶试剂盒Takara Clontech

上海金畔生物科技有限公司代理Takara酶试剂盒全线产品,欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

细胞增殖检测试剂Premix WST-1 Cell Proliferation Assay System
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara MK400 Premix WST-1 Cell Proliferation Assay System 2,500 次 ¥3,507 细胞增殖检测试剂Premix WST-1 Cell Proliferation Assay System 细胞增殖检测试剂Premix WST-1 Cell Proliferation Assay System 细胞增殖检测试剂Premix WST-1 Cell Proliferation Assay System
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■ 制品内容
Premix WST-1 25 ml
 
■ 制品说明
本制品是通过吸光度比色分析法对细胞增殖和细胞活力进行检测的试剂。其检测原理是利用活细胞线粒体中的琥珀酸四唑盐还原酶 (succinate-tetrazolium reductase) 将四唑盐WST-1还原为水溶性formazan dye,进而通过吸光度比色分析法进行检测。此方法取代了[3H]-thymide掺入法,实现了非放射性检测。琥珀酸四唑盐还原酶存在于线粒体中,只有在活细胞中才具有活性,培养基中添加的四唑盐在琥珀酸四唑盐还原酶的作用下,还原生成formazan dye,活细胞数越多,样品中的琥珀酸四唑盐还原酶活性就越强,生成的formazan dye就越多,生成的formazan dye数量与活细胞数成线性正比关系。使用本制品检测时,无需洗涤细胞和使用放射性同位素,从微量培养开始,即可使用酶标仪在同一个微孔板上测定其光吸收值。本制品通过检测细胞活力,可以用于药物敏感性分析和药物筛选。
 
■ 保存
-20℃避光保存。
 
■ 特点
◇ 无需使用放射性同位素。
◇ 无需使用有机溶剂来溶解反应生成的formazan dye。
◇ 吸光度值与活细胞数成线性正比关系。
◇ 与MTT法相比,灵敏度更高。
◇ 可在同一个微孔板上进行不同反应时间的结果测定。
 
■ 用途
◇ 检测生长因子、cytokines、mitogens、nutrients等细胞增殖能力的影响。
◇ 分析抗癌药等具有细胞毒性和抑制细胞生长的化合物。
◇ 评估具有抑制细胞生长作用的抗体与生理介质。
 
 

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