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StressMarq α-突触核蛋白和TAU蛋白在神经退行性疾病方面的最新文献引用

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StressMarq α-突触核蛋白和TAU蛋白在神经退行性疾病方面的最新文献引用

StressMarq 作为开发和供应活性病理诱导蛋白聚集体的世界领先制造商，以帮助科学家开发疾病模型并加速神经退行性疾病药物的研发。近年来持续开发了一系列用于神经退行性疾病研究的单体、原纤维和寡聚体蛋白制剂，包括 α 突触核蛋白、Tau和相关抗体等。StressMarq 产品质量可靠稳定，受众多相关研究者信赖认可。近期相关研究者使用StressMarq产品发表了文献，一方面推进了神经退行性疾病方面的的研究进展，另一方面也为客户应用StressMarq产品提供了更多的参考文献。

 

货号：SPR-322

名称：Alpha Synuclein Protein

应用范围：WB, SDS-PAGE, In vivo assay, In vitro assay


最新引用文献：

Satra Nim等人使用SPR-322产品，发表了《破坏α -突触核蛋白- ESCRT与肽抑制剂的相互作用可减轻帕金森病临床前模型中的神经变性》。α-突触核蛋白积聚成毒性低聚物或原纤维与帕金森病多巴胺能神经变性有关。Satra Nim等人进行了高通量，蛋白质组范围内的肽筛选，以确定蛋白质-蛋白质相互作用抑制剂，降低α-突触核蛋白寡聚物水平及其相关的细胞毒性。发现最有效的肽抑制剂破坏α-突触核蛋白的c端区域和带电多泡体蛋白2B (CHMP2B)之间的直接相互作用，CHMP2B是Transport-III (ESCRT-III)所需的内体分选复合物的一个组成部分。发现α-突触核蛋白通过这种相互作用阻碍内溶酶体的活性，从而抑制其自身的降解。相反，肽抑制剂恢复内溶酶体功能，从而在多种模型中降低α-突触核蛋白水平，包括携带致病α-突触核蛋白突变的女性和男性人类细胞。此外，在雌雄同体秀丽隐杆线虫和雌性帕金森病模型中，肽抑制剂可保护多巴胺能神经元免受α-突触核蛋白介导的变性。因此，α-突触核蛋白-CHMP2B相互作用是神经退行性疾病的潜在治疗靶点。（应用：In vitro assay.  Nature Communications, 2023.）

 

 

货号：SPR- 329

名称：Tau Protein

应用范围：WB, SDS-PAGE, In vivo assay, In vitro assay


最新引用文献：

Qing Dong等在PNAS上发表了《β1-肾上腺素能受体突变在Tau病小鼠模型中可以改善快速眼动睡眠和Tau积聚》。其证明了两个家族性自然短睡眠(FNSS)突变，DEC2-P384R和Npsr1-Y206H，是PS19小鼠(一种Tau病模型)中Tau病的强遗传修饰因子。另外也发现Adrb1-A187V突变有助于恢复快速眼动(REM)睡眠，并减轻睡眠-觉醒中心蓝斑(LC)的Tau聚集。

发现在PS19小鼠中，中央杏仁核(CeA)的ADRB1+神经元向LC发送投射，刺激CeAADRB1+神经元活动增加了REM睡眠。此外，突变体Adrb1减弱了Tau蛋白从CeA向LC的扩散。研究结果表明，Adrb1-A187V突变通过减轻Tau积累和减弱Tau扩散来防止Tau病。在此文章中，Qing Dong使用了SPR- 329（重组人Tau-441 (2N4R) P301S突变蛋白预形成原纤维）进行造模实验。（应用：In vivo assay .  PNAS, 2023.）


货号：SMC – 601

名称：Anti-Tau Antibody (pSer202/ pThr205)

应用范围：WB, IHC, ICC/IF


最新引用文献：

Kanza M. Khan等人利用SMC – 601（ 抗Tau抗体(pSer202/ pThr205)）进行实验，最近在Acta Neuropathologica Communications 上发表了《人类过表达Tau蛋白的小鼠再现了早期阿尔茨海默病的脑干受累和神经精神特征》。他们通过评估在认知障碍发病前过度表达人类野生型Tau (hTau)的AD小鼠模型中的抑郁和焦虑样行为，并探究这些行为变化与中脑背核(DRN)和蓝斑(LC)中Tau病理、神经炎症和单胺能失调的关系。通过相关结果表明，脑干单胺能核中的Tau病理以及由此导致的血清素能和/或去甲肾上腺素能驱动的丧失可能是阿尔茨海默病早期抑郁和焦虑样行为的基础。（应用：WB.  Acta Neuropathologica Communications, 2023.）

 

 

 

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TAU蛋白实验操作指南

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TAU蛋白实验操作指南

TAU蛋白实验操作指南


硫黄素T 检测实验操作指南

一.在蒸馏水中制备 1mM 的硫黄素T储备液 (需是新鲜制备并用0.2 µm 注射式过滤器过滤).

二.然后用PBS pH 7.4将每个孔中的硫黄素T 储备液稀释至最终浓度为 25 µM (每孔容量 = 100 µL).

三.向每个孔中加入10 uM肝素.

四.于室温下将分装小份的tau蛋白在使用前进行解冻.

五.将纤维原或单体 (或两者都有) 加入到合适的实验孔中. 用移液器上下吸放混合孔中物质.

六.将孔板密封并放置于震荡孵育器上(800 rpm)，温度为 37°.

七.用 Molecular Devices Gemini XPS 微孔板读板机读取荧光读数, 使用软件是 Softmax Pro 版本为 6.5.1.

八.再次将孔板密封放置于震荡孵育器上, 温度为37°C.

九.在1 到 72 小时之间的固定间隔读数.

孔板: Greiner-Bio 96 Well Non-Binding Cell Culture Microplate, 黑色 (Greiner-Bio Catalog #655900).

XPS 酶标仪参数设置:

温度: 37°C

读取形式: 孔板扫描

波长: 激发光 450 nm，发射光 485 nm

PMT 增益: 自动

闪光每读: 6

震荡: 读数前 20 秒

如需购买TAU蛋白实验相关产品或了解更多实验操作详情，请咨询Stressmarq代理商-上海金畔生物

阿尔茨海默症中的野生型Tau蛋白

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阿尔茨海默症中的野生型Tau蛋白

阿尔茨海默症中的野生型Tau蛋白


阿尔茨海默症中的野生型Tau蛋白

译自Stressmarq 博客-BRENDA KNOX | 文献综述


由MAPT 基因编码的微管相关tau蛋白主要在神经元中表达，该蛋白以六种352-441 个长度不等的氨基酸单体异构体形式存在1。 在正常情况下，tau单体在稳定神经元微管和调节轴突运输方面发挥着重要作用。但是在病理条件下，tau单体与神经元微管的分离导致细胞内聚集体的形成，导致神经元细胞死亡。迄今为止，tau病变引起的病症有20多种，阿尔茨海默病是最普遍的。其中大概10%是由 MAPT 基因的显性突变引起的，统称为额颞痴呆与17号染色体相关的帕金森综合征 (FTDP-17)，尽管最近有人提议停用该名称2,3。其余的偶尔发生和涉及是野生型 tau蛋白2。


野生型tau蛋白是如何在偶发性的神经退行性疾病中发挥作用的？

在病理条件下，野生型tau单体过度磷酸化并与带负电荷的神经元微管分离，然后蛋白发生错误折叠和构象改变，在细胞质中积累并触发纤维生成——低聚物的自发形成，可以纤维化成细胞内成对螺旋丝(PHF)和神经纤维缠结(NFTs)4。Tau寡聚体、PHF和NFTs都可以分泌并传递到邻近细胞，在那进一步寡聚或聚集，最终发展成阿尔茨海默。虽然NFTs一直被认为是tau蛋白疾病认知障碍的主要原因(例如，NFT的数量与阿尔茨海默病的痴呆程度相关)，但最近有研究表明，tau寡聚体才是主要的有毒tau蛋白4,5。


突变的tau蛋白原纤维是如何影响野生型tau蛋白单体的？

MAPT基因的致病突变通常会影响tau编码序列，致使单个氨基酸的改变影响蛋白质的初级结构。根据它们发生的确切位置，这种突变会增强tau蛋白的聚集。为了研究特定tau蛋白突变在疾病发病机制中的作用，实验设置比较不同重组tau蛋白突变体形成原纤原的情况，其中G272V和P301L突变均能显著增加蛋白丝延伸的效率6。此外，利用P301L/V3.37M突变原纤维对野生型tau单体的聚集进行了聚集实验，发现这些原纤维可以产生一种新的纤维构象，并且在多种聚集反应实验中都是如此2。


野生型Tau蛋白在疾病模型中扮演什么样的角色？

野生型tau蛋白以多种不同的方式揭示了阿尔茨海默病等变性疾病的奥秘。最常见的方式包括重组的过表达tau蛋白确定其对正常生理过程的影响，以及比较不同tau蛋白亚型的聚集能力从而发现它们是如何参与疾病的发生和发展的。由于大多数tau蛋白疾病是偶发的，了解更多野生型tau对开发有效的治疗方法至关重要。


Tau蛋白疾病的研究相关的产品

StressMarq能够提供多种试剂用于研究tau蛋白及其在神经退行性疾病中的作用。其中包括Tau441 (2N4R)野生型单体(SPR -479)，它可以与Tau441 (2N4R)野生型预制原纤维(SPR-480)结合，用于研究体外tau蛋白聚集。我们也提供野生型截短Tau片段(AA297-391) (dGAE)前体原纤维(SPR-461)和伴随截短Tau片段(AA297-391) (dGAE)单体(SPR-444)用于聚集研究。欲了解更多关于Tau蛋白的信息，包括所有Tau蛋白纤维化蛋白的列表和关于Tau蛋白PFFs的短视频，请访问我们专门针对Tau蛋白的网页。

 

 重组人 Tau441 (2N4R)的电镜图, 野生型前体原纤维(SPR-480)

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Tau单体：潜在的治疗靶点

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Tau单体：潜在的治疗靶点

由 MAPT 基因编码的微管相关蛋白 tau 主要在神经元中表达，在许多生理进程中发挥重要作用。神经元细胞内tau蛋白的异常过度磷酸化和 tau 聚集是阿尔茨海默病、帕金森病和许多其他所谓的 tau 蛋白病的典型标志，突出了理解和预防或逆转这一过程的必要性。通过针对 tau 进行治疗干预，研究人员希望改善患者的治疗效果，并为目前无法治愈的神经退行性疾病开发有效的治疗方法。

为什么要研究tau单体?

在正常情况下，tau 蛋白以单体的形式存在，在成人大脑中有六种不同的异构体（长度从 352 – 441 个氨基酸不等）1。它们参与调节微管组装和稳定性，这对于轴突生长和突触小泡的运输至关重要。然而，在病理条件下，过度磷酸化的 tau 单体与带负电的微管分离，首先聚集成寡聚体，然后聚集成神经原纤维缠结 (NFT)，随后导致神经元变性 2,3。

尽管tau 蛋白病理学还没有被完全了解，但目前有几种假设。其中一个是，从野生型 tau 衍生出的具有聚集能力的 tau 单体通过结构转变可能可以诱发聚集，而阻止这种转化的就具有治疗潜力4。另一个假说是溶酶体应激可能会刺激具有聚集能力的单体 tau 释放到细胞外空间，促使研究人员考虑抑制溶酶体胞吐作用的治疗效用 5。众所周知，疾病相关的突变会破坏 tau 中易于聚集的 VQIVYK 基序的稳定性，因此这被证明可能是一个有价值的治疗靶点6。

Tau 单体如何用于聚集实验?

各种模型已经被开发用来研究 tau 蛋白聚集过程，其中许多模型依赖重组 tau 单体在体外复制聚集体组装。有一种常用的方法是使用聚集诱导剂，例如聚阴离子（例如肝素）、脂肪酸（例如花生四烯酸）或预先形成的 tau 细丝，使用荧光探针硫黄素 T（结合富β折叠的结构）以实时监测聚集体的形成；利用这种方法可以比较不同 tau 异构体、截短的 tau 结构域或蛋白质突变形式的聚集情况3。其他类型的检测旨在研究在各种细胞系中过度表达 tau 单体的影响，也会使用硫磺素 T 等辅助方法来跟踪聚合的产生。

高品质  tau 蛋白单体用于聚集实验

StressMarq提供各种形态和种类的tau蛋白用于神经衰退研究。这些蛋白包括活性重组人Tau441 (2N4R), P301S 突变蛋白单体，有 E. coli 表达的(SPR-327) 和杆状病毒表达的 (SPR-473), 活性重组人Tau441 (2N4R) 野生型蛋白单体 (SPR-479), 活性重组人 Tau (K18), P301L 突变蛋白单体 (SPR-328), 以及活性重组人 Tau (K18) K280 缺失突变单体 (SPR-476). 另外还有活性重组人截短 Tau 片段(AA297-391) 蛋白单体 dGAE (SPR-444) 和 dGAE C322A 突变单体(SPR-445), 以及活性重组小鼠Tau441 (2N4R), P301S 突变蛋白单体 (SPR-474). 大部分蛋白都经过了硫磺素 T 检测来验证聚集性。

Thioflavin T is a fluorescent dye that binds to beta sheet-rich structures, such as those in tau fibrils. Upon binding, the emission spectrum of the dye experiences a red-shift and increased fluorescence intensity. Thioflavin T emission curves show increased fluorescence (correlated to tau aggregation) over time when truncated tau fragment (AA297-391) (dGAE C322A) monomer is combined with truncated tau fragment (AA297-391) (dGAE C322A) preformed fibrils (Type 1).


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