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NEB® Stable E. coli 感受态细胞（高效级） #C3040H 20 x 0.05 ml-NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品资料 – 感受态细胞 – 克隆菌株

NEB® Stable E. coli 感受态细胞（高效级）                              收藏

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#C3040H
20 x 0.05 ml
5,849.00
无
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#C3040I
6 x 0.2 ml
4,509.00
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相关产品

NEB E. coli 稳定感受态细胞 （高效级）

单独出售的组份

NEB® 10-beta/Stable Outgrowth 培养基（NEB #B9035）
pUC19 载体（NEB #B9035）

优点

 抗噬菌体 T1 感染（fhuA）
 无动物来源产品

概述

化学感受态 E. coli 细胞适用于高效转化及含重复片段的质粒提取。

基因型

F´ proA+B+ lacIq Δ(lacZ)M15 zzf::Tn10 (TetR)/Δ(ara-leu) 7697 araD139 fhuA ΔlacX74 galK16 galE15
e14- f80dlacZΔM15 recA1 relA1 endA1 nupG rpsL (StrR) rph spoT1 Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC)

特性

• endA 突变，可用于制备高质量质粒
• 生长迅速的 recA 菌株

应用

• 不稳定插入片段的克隆
• 慢病毒及逆转录病毒克隆的分离及扩增
• 与 Gibson 组装反应及连接反应兼容

转化效率

 1–5 x 108 cfu/μg pUC19 DNA (NEB #C3040H)

> 1 x 109 cfu/μg pUC19 DNA (NEB #C3040I)

抗性

T1 噬菌体（fhuA）、链霉素、四环素

敏感性

氨苄青霉素、氯霉素、卡那霉素、呋喃妥因、壮观霉素

随产品提供

NEB® 10-beta/Stable Outgrowth 培养基（NEB #B9035）
pUC19 载体

感受态细胞Takara Stable Competent Cells酶试剂盒Takara Clontech

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感受态细胞Takara Stable Competent Cells
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Takara 9132 Takara Stable Competent Cells 100μl × 10 ￥1,700 感受态细胞Takara Stable Competent Cells 感受态细胞Takara Stable Competent Cells 感受态细胞Takara Stable Competent Cells
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■ 制品内容感受态细胞Takara Stable Competent Cells
Takara Stable Competent Cells 100 μl × 10
pUC19 DNA (0.1 ng/μl) 10 μl
SOC media* 1 ml × 10
*SOC Media:     2%   Tryptone
 0.5%   Yeast extract
 10 mM   NaCl
 2.5 mM   KCl
  10 mM   MgSO4
10 mM   MgCl2
 20 mM   Glucose
 
■ 制品说明
Takara Stable Competent Cells通过破坏同源重组相关的遗传基因，来提高DNA的稳定性。因此，它适用于克隆不稳定的DNA，包括poly(A)序列和重复序列等。此外，由于本产品缺失T1噬菌体感染所需的fhuA遗传基因，因此对该噬菌体具有抗性。
推荐使用In-Fusion Snap Assembly Master Mix（Code No. 638943/638944/638947～638949）进行克隆。使用pUC类载体时，可利用β-半乳糖苷酶的α-互补性，通过X-Gal＊分解，对菌落进行蓝白斑筛选。
＊X-Gal：5-Bromo-4-Chloro-3-Indolyl-β-D-Galactoside
 
■ 细胞浓度
1-2×109 bacteria/ml
 
■ Genotype
F-,endA1,supE44,thi-1,recA1,relA1,gyrA96,p>hoA,ΔsbcCD,Φ80 dlacZΔM15,ΔfhuA,Δ(lacZYA-argF)U169,Δ(mrr-hsdRMS- mcrBC) ,ΔmcrA,λ-
 
■ 保存
-80℃。
注意：如果未在-80℃下保存，转化效率将会降低。请使用附带的 pUC19对照质粒来确认保存细胞的转化效率。不能液氮保存。
 
■ 注意事项
· 请按需取用感受态细胞。转移时，请放入干冰/乙醇中。
· 可使用1.5 ml microcentrifuge tubes代替14 ml圆底tubes (BD Code 352059或352057等)（详见使用方法步骤2），但效率可能会降低。
· 使用100μl的感受态细胞时，加入的高纯度DNA样品不要超过 10 ng。否则转化效率会降低。当改变感受态细胞数量或tube类型时，适当调整反应条件。例如，当使用1.5 ml microcentrifuge tubes时，42℃温育60秒（详见使用方法步骤5.）。
· 培养时，请根据所用载体，将抗生素添加至培养基中。
· 当加入X-Gal时，按照以下操作进行：
将20 mg/ml X-Gal（溶解于二甲基甲酰胺)按200-300 μl/100 ml的比例加入到琼脂培养基中。
· 不建议将解冻的感受态细胞再次冷冻保存。
 
 

页面更新：2024-01-31 15:19:42

NEB® 10-beta/Stable Outgrowth Medium #B9035S 100 ml (4 x 25 ml)-NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品资料 – Buffers – Buffers

NEB® 10-beta/Stable Outgrowth Medium                              收藏

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#B9035S
100 ml (4 x 25 ml)
1,279.00
有
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Description:

 

  • >Outgrowth Medium recommended for use with NEB 10-beta or NEB Stable Competent E. coli 
  • >Use to dilute the outgrowth prior to plating

         Add NEB 10-beta/Stable Outgrowth Medium to freshly transformed NEB 10-beta or NEB Stable E. coli cells and incubate for up to 1 hour before plating on selective media. This medium can also be used to dilute the outgrowth prior to plating.

Proterties and Usage

 

Storage Temperature

4°C

Note

 

  1. NEB 10-beta/Stable Outgrowth Medium is shipped at 0°C or -80°C. Upon receipt, store at room temperature or 4°C.