● RevIT™ AAV Enhancer：可1.2-4.9X提升AAV病毒基因组滴度

平行对比Mirus TransIT-VirusGEN®搭配老版本AAV增强子(VirusGen + Enh 1.0)以及新版本RevIT™ AAV Enhancer (VirusGen + RevIT)，针对不同血清型 AAV2、AAV8、AAV9，AAV基因组滴度分别有着1.6、4.9以及1.2倍提升。除此之外，实验结果显示，在测试的所有血清型中，使用RevIT™ AAV Enhancer也在不同程度上得到更高比例的实心率 (图1)。实验结果表明，在搭配Mirus TransIT-VirusGEN®转染试剂时，可显著提高病毒基因组滴度(GC/mL)及实心率(%Full Capsids)。

✍图1. 在加入RevIT™ AAV Enhancer后，相比Mirus老版本增强子，可1.2-4.9X提升AAV基因组拷贝数，改善AAV病毒实心率。

● RevIT™ AAV Enhancer：具有广泛适配性，可搭配其他品牌转染试剂（PEI），AAV病毒基因组滴度有着显著提升

平行测试两个品牌转染试剂：Polyplus FectoVIR® 病毒转染试剂(“Polymer F”)以及Polyplus PEIpro®病毒转染试剂(“Polymer P”)，在加入Mirus RevIT™ AAV Enhancer，针对不同血清型AAV2、AAV8、AAV9，AAV基因组滴度分别有着1.7-2.0x、1.7-2.2x、2.2-2.3x提升(图2)。实验结果表明，在搭配其他品牌病毒转染试剂时，Mirus RevIT™ AAV Enhancer可显著提高AAV病毒基因组滴度(GC/mL)。

✍图2. “Polymer F”以及“Polymer P”病毒转染试剂，在搭配Mirus RevIT™ AAV Enhancer，针对不同血清型，其AAV病毒基因组滴度都有着显著提升。

● RevIT™ AAV Enhancer：具有广泛的适配性，可适用于不同培养基体系

TransIT-VirusGEN®转染试剂搭配RevIT™ AAV Enhancer，在不同类型病毒生产培养基中，具有很好的兼容性。测试使用293-VP 2.0细胞，搭配培养基类型包括VPM (Thermo Fisher) 及 BalanCD HEK 293 (Irvine Scientific)。实验结果表明，针对不同血清型AAV2、AAV5、AAV8、AAV9，RevIT™ AAV Enhancer在不同培养基实验条件下，AAV病毒基因组滴度提升方面并无显著差异。

✍图3. 更换不同品牌病毒生产培养基，AAV病毒基因组滴度的增加无显著差异。

● RevIT™ AAV Enhancer：实验流程灵活性，不同加入时间窗口有着近似表现

为了进一步确定加入RevIT™ AAV Enhancer可有效提高AAV病毒基因组载量，是否需要严格把控加入时间窗口。平行测试不同加入时间点，包括转染前30或60分钟、转染时及转染后。实验结果显示，相对于对照，在加入RevIT™ AAV Enhancer不同测试时间点， AAV8病毒基因组滴度都有稳步的提升(2倍)，并且病毒实心率稳定保持在相同水平。该组实验结果表明，RevIT™ AAV Enhancer加入时间点的灵活性，一定程度上简化了生产工作流。

✍图4.  RevIT™ AAV Enhancer加入时间点的灵活性

● 实验tips：如何进行病毒转染试剂评估？什么是病毒载量？如何检测？

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