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磷脂酶A2(PLA2)检测试剂盒

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磷脂酶A2(PLA2)检测试剂盒

磷脂酶A2(phospholipaseA2, PLA2)是一种能催化磷脂甘油分子上二位酰基的水解酶, 亦是花生四烯酸(AA)、前列腺素及血小板活化因子(PAF)等生物活性物质生成的限速酶, 所产生的脂质介质在炎症和组织损伤时膜通道的活化、信息传递、血流动力学及病理生理过程中, 以及在调节细胞内外代谢中起关键性作用。 

PLA2主要有 3种类型 , 即 sPLA2, cPLA2, iPLA2。在这三类中, 仅cPLA2具有花生四烯酸特异性, 而其他类的则可催化水解任何脂肪酸。在急性胰腺炎、脓毒休克、创伤及多脏器功能衰竭(MSOF)患者血清中PLA2活性升高。在多发性创伤时, PLA2活性变化或许是导致MSOF组织损伤过程中的早期信号。

相关产品

品牌 产品名称 产品货号 规格
Cayman cPLA2 Assay Kit 765021 96 wells
Cayman sPLA2 Assay Kit 765001 96 wells
Cayman sPLA2 (Type V) Inhibitor Screening Assay Kit 10004883 96 wells

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蜂毒素

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蜂毒素

货号：
IM1270

品牌：
Jinpan

蜂毒素

暂无详情
产品简介
EC EINECS 253-417-7
英文名称 Melittin
CAS 20449-79-0
分子式 C131H229N39O31
分子量 2846.46
纯度 HPLC≥98%
单位 瓶
生物活性 Melittin 是一种PLA2激活剂。[1]
In Vitro 蜂毒肽是一种免疫相关的来自蜂毒的PLA2刺激肽，可增加高分子量酶的活性[1]。蜂毒肽是来自蜂毒的细胞毒性肽。蜂毒肽对A2780CR和A2780细胞均显示出毒性，IC50值分别为4.5和6.8μg/ mL。蜂毒肽具有天然抗菌，抗病毒和抗炎特性。它还被证明在几种不同的癌细胞系中具有多种抗癌作用，包括胃癌，乳腺癌，卵巢癌，肝癌，前列腺癌，宫颈癌和肺癌细胞系。 Melittin，一种两亲性溶血肽，发挥其潜在的抗癌作用的机制包括抑制细胞增殖，诱导细胞凋亡和直接坏死。蜂毒肽还可以通过抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路来预防EGF诱导的细胞侵袭，但这主要与乳腺癌细胞有关[2]。
货期 1-2天
靶点 Phospholipase
细胞实验 通过反相液相色谱法从蜂毒中纯化蜂毒肽，并在无菌水中重构以形成1mg/mL的储备溶液，然后在-20℃储存直至需要进行分析。通过Alamar Blue（AB）细胞活力试剂评估细胞活力。将A2780和A2780CR细胞以1×10 4个细胞/孔接种在96孔板中，并在37℃和5％CO 2下在潮湿气氛中孵育24小时。在该温育期后，在100μL培养基中用各种浓度的0.5％至14μg/ mL的蜂毒肽处理细胞，并在37℃和5％CO 2下再孵育24小时。 1％（v/v）的Triton X和细胞培养基分别用作阳性和阴性对照。此后，以10％（v/v）的终浓度加入AB，并将所得混合物在37℃和5％CO 2下再温育4小时。然后，在560nm的激发波长下读板，在SpectraMax M3酶标仪上记录590nm的发射。通过将它们表示为相对于平均阴性对照值的百分比，将背景校正的荧光读数转换为每个测试孔的细胞活力数据[2]。
数据来源文献 [1]. Steiner MR, et al. Responses of purified phospholipases A2 to phospholipase A2 activating protein (PLAP) and Melittin. Biochim Biophys Acta. 1993 Feb 10;1166(1):124-30.
[2]. Alonezi S, et al. Metabolomic Profiling of the Effects of Melittin on Cisplatin Resistant and Cisplatin Sensitive Ovarian Cancer Cells Using Mass Spectrometry and Biolog Microarray Technology. Metabolites. 2016 Oct 13;6(4). pii: E35
规格 1mg 5mg 10mg

Melittin 是一种PLA2激活剂。

GeneTex新冠病毒膜蛋白邻位连接分析PLA试剂套组

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GeneTex新冠病毒膜蛋白邻位连接分析PLA试剂套组

GeneTex新冠病毒膜蛋白邻位连接分析PLA试剂套组

邻位连接分析(Proximity Ligation Assay, PLA)是近几年建立的一种可以用于研究蛋白质定位、相互作用、修饰以及功能的蛋白质体外分析技术。其作用原理的基础是一对标记了寡核苷酸的抗体：依照实验目标的不同，可以选择共同辨认目标蛋白上不同抗原区、两个可能相互作用的蛋白区块，抑或是目标蛋白的修饰添加物; 而标记在抗体上的寡核苷酸则是选用能与之后加入的连接寡核苷酸(connector oligos)配对的序列。

以GeneTex的新产品SARS-CoV-2 Membrane Protein Proximity Ligation Assay (PLA) Kit (Cy3) (GTX537371-23)为例说明: 当两个抗体对新冠病毒膜蛋白形成双重辨认，且距离足够靠近彼此时(<40nm) (上图步骤A)，抗体上的寡核苷酸会与连接寡核苷酸配对并形成环状单链DNA (步骤B与C)。此环状单链DNA通过设计在寡核苷酸上的启动子片段以及试剂中的DNA聚合酶进行滚环扩增 (Rolling Circle Amplification, RCA) (步骤D)，在原位不断地制造DNA长链。经过此扩增步骤，即便细胞感染的病毒量极低，病毒膜蛋白的讯号也能增幅千倍以上。优异的灵敏度与专一性使得PLA技术被视为是相当具有价值的研究与诊断工具。

GeneTex的PLA试剂除了可以应用于新冠病毒感染组织的膜蛋白侦测之外，也适用于被感染的细胞或是膜蛋白转染细胞。如上文所述，透过RCA扩增后的DNA长链带有多处特殊序列 (上图中黄色片段)，能够被Cy3荧光分子探针标定。因此，使用者可以轻易地使用荧光显微镜观察并撷取所需的视野，可说是相当地便利(步骤E)。

GeneTex有许多经充分验证的抗体与试剂。为推动基础科学与临床研究，近几年来积极投入开发传染性疾病研究领域的抗体、蛋白与试剂。欲了解GeneTex新冠病毒或其他研究领域的相关产品，请联系我们的代理商上海金畔生物或访问我们的网站www.genetex.com以获取更多信息。

重点产品

GeneTex新冠病毒膜蛋白邻位连接分析PLA试剂套组

邻位连接分析优势

侦测内源性蛋白

蛋白与蛋白作用可视化

蛋白质翻译后修饰可视化

高度专一性

单一分子灵敏度

SARS-CoV-2 Membrane Protein Proximity Ligation Assay (PLA) Kit (Cy3)(GTX537371-23)

利用PLA试剂检测转染后的HEK293T 細胞 (SARS-CoV-2 (COVID-19) Membrane FFPE 293T cell pellet Block, GTX435645)。陽性邻位连接分析讯号以黄色荧光呈现，细胞核则以蓝色荧光呈现。

图A: 于病毒膜蛋白转染的HEK293T细胞中测得阳性讯号

图B: 阴性对照组: 模拟测试转染的HEK293T细胞

图C: 阴性对照组: 使用非专一性寡核苷酸标定之抗体检测病毒膜蛋白转染的HEK293T细胞

PLA实验攻略下载

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更多详细信息，请咨询GeneTex代理商-上海金畔生物