OneTaq® RT-PCR 试剂盒 #E5310S 30 次反应-NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品资料 – DNA聚合酶与扩增技术 – 常规 PCR

OneTaq® RT-PCR 试剂盒                              收藏

OneTaq® RT-PCR 试剂盒                                   #E5310S 30 次反应 OneTaq® RT-PCR 试剂盒                                   #E5310S 30 次反应 OneTaq® RT-PCR 试剂盒                                   #E5310S 30 次反应 OneTaq® RT-PCR 试剂盒                                   #E5310S 30 次反应

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#E5310S
30 次反应
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相关产品

小鼠 RNase 抑制剂
M-MuLV 反转录酶
OneTaq 热启动 2X 预混液(提供标准缓冲液)

特性

• 稳定的 RT-PCR 反应
• 便捷的预混液剂型
• OneTaq DNA 聚合酶对各种模板具有超强的扩增能力

概述

OneTaq RT-PCR 试剂盒含有两种强大的预混液,M-MuLV 酶预混液与 OneTaq 热启动 2X 预混液(提供标准缓冲液),可用于两步法的 RT-PCR 实验。这两种混合试剂可确保最快捷的建立反应和最稳定高效的 RT-PCR 反应,为 RT-PCR 反应的提供优秀的重复性和稳定性。
使用两种优化的混合液:M-MuLV 酶混合液和 MMuLV反应混合液合成第一链 cDNA。M-MuLV 酶混合液含 M-MuLV 反转录酶和小鼠 RNase 抑制剂,MMuLV反应混合液中包含 dNTP 和经过优化的缓冲液。该试剂盒还包括两种优化的反转录引物和无核酸酶污染的水。锚定的 Oligo-dT 引物 [d(T)23VN]迫使引物与 polyA 尾的起始端退火。经过优化的随机引物混合液能随机并持续性的与整个 RNA 模板配对,包括 mRNA 与无 polyA 尾的 RNA。

OneTaq RT-PCR 试剂盒组成:

 – 10X M-MuLV 酶混合液

– 2X M-MuLV 反应混合液
– OneTaq 热启动 2X 预混液(提供标准缓冲液)
– 随机引物预混液(60 μM)
– Oligo d(T)23VN 引物(50 μM)**
– 无核酸酶污染的水
OneTaq® RT-PCR 试剂盒                                   #E5310S 30 次反应
 
 
脾总 RNA 为模板合成第一链 cDNA,泳道 1、4 和 7
中加入 dT23VN,泳道 2、5 和 8 中加入随机 6 碱基引
物,泳道 3、6 和 9 为阴性对照反应。使用 OneTaq
热启动预混液分别对 beta-actin 基因、GAPDH 基因和
p532 基因进行 35 个循环的扩增,分别得到 1.5 kb 片
段、0.6 kb 片段和 5.5 kb 片段。Marker M 为 2-Log DNA
Ladder(NEB #N3200)。
 

2 × HiFi PCR Master Mix预混液

2 × HiFi PCR Master Mix预混液

¥200.00

货号:BL1045A

规格:1ml

品牌:Jinpan

商品详情:

2 × HiFi PCR Master Mix预混液

产品编号

产品名称

规格

BL1045A

2 × HiFi PCR Master Mix预混液

1 mL

BL1045B

2 × HiFi PCR Master Mix预混液

5*1 mL

 

产品简介:

产品是将 PCR 反应所需的 DNA 聚合酶、dNTPsMg2+以及反应缓冲液预先配制成 2 倍浓度的混合物。采用超高保真酶,保真度为野生型Taq酶的60倍,延伸速度可以达到5~10s/kb。优化预混的反应体系可使高保真酶表现出最优的性能,使用时只需再加入模板和引物并用水补足体系至反应浓度为 1×,即可进行 PCR 反应,大大地简化了操作过程,减少了 PCR 操作过程中的污染。适用于SNP基因型测序分析等。

 

产品特点:

² 操作简便:只需再加入模板和引物; ²

² 高保真:保真度为野生型Taq酶的60倍。

² 极快的延伸速度:5~10 s/kb

 

 

使用方法:

详见说明书。

 

注意事项:

1.  本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品;

2.  为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

有效期

-20℃保存,保质期 24 个月,避免反复冻融。

货号 BL1045A
规格 1ml
品牌 Jinpan

DNA亚硫酸氢盐处理后的PCR扩增酶TaKaRa EpiTaq™ HS (for bisulfite-treated DNA)酶试剂盒Takara Clontech

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DNA亚硫酸氢盐处理后的PCR扩增酶TaKaRa EpiTaq HS (for bisulfite-treated DNA)
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara R110Q TaKaRa EpiTaq HS (for bisulfite-treated DNA) 50 U ¥495 DNA亚硫酸氢盐处理后的PCR扩增酶TaKaRa EpiTaq™ HS (for bisulfite-treated DNA) DNA亚硫酸氢盐处理后的PCR扩增酶TaKaRa EpiTaq™ HS (for bisulfite-treated DNA) DNA亚硫酸氢盐处理后的PCR扩增酶TaKaRa EpiTaq™ HS (for bisulfite-treated DNA)
Takara R110A TaKaRa EpiTaq HS (for bisulfite-treated DNA) 250 U ¥2,063 DNA亚硫酸氢盐处理后的PCR扩增酶TaKaRa EpiTaq™ HS (for bisulfite-treated DNA) DNA亚硫酸氢盐处理后的PCR扩增酶TaKaRa EpiTaq™ HS (for bisulfite-treated DNA) DNA亚硫酸氢盐处理后的PCR扩增酶TaKaRa EpiTaq™ HS (for bisulfite-treated DNA)
Takara R110B (A × 4) TaKaRa EpiTaq HS (for bisulfite-treated DNA) 250 U × 4 ¥7,425 DNA亚硫酸氢盐处理后的PCR扩增酶TaKaRa EpiTaq™ HS (for bisulfite-treated DNA) DNA亚硫酸氢盐处理后的PCR扩增酶TaKaRa EpiTaq™ HS (for bisulfite-treated DNA) DNA亚硫酸氢盐处理后的PCR扩增酶TaKaRa EpiTaq™ HS (for bisulfite-treated DNA)
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■ 制品内容 (Code No.: R110A)
TaKaRa EpiTaq HS (5 U/μl) 250 U
10 × EpiTaq PCR Buffer (Mg2+ free) 1 ml
dNTP Mixture (各2.5 mM) 1.2 ml
25 mM MgCl2 1.2 ml
 
 
■ 制品说明
TaKaRa EpiTaq HS (for bisulfite-treated DNA) 是用于亚硫酸氢盐修饰后含有尿嘧啶的模板DNA进行PCR扩增时所需的理想DNA聚合酶。亚硫酸氢盐修饰后的DNA有时会影响PCR反应性能,本制品中的镁离子及dNTP浓度经调整后可调节扩增效率和反应特异性,能够很好地扩增难扩增的目的片段。
本制品适用于Hot Start PCR,高温加热前,抗Taq单克隆抗体与Taq酶结合,抑制聚合酶的活性,从而抑制低温条件下由引物的非特异性退火或引物二聚体引起的非特异性扩增。抗体在PCR反应最初的DNA变性步骤已变性,因此无需特殊变性,在常规的PCR反应条件下即可使用。
 
■ 保存
-20℃。
 
 
Technote:
Superior amplification of bisulfite-treated DNA for methylation studies
 

页面更新:2023-11-01 16:15:34

一步法预加染料RT-PCR试剂盒PrimeScript™ One Step RT-PCR Kit Ver.2 (Dye Plus)酶试剂盒Takara Clontech

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一步法预加染料RT-PCR试剂盒PrimeScript One Step RT-PCR Kit Ver.2 (Dye Plus)
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara RR057A PrimeScript One Step RT-PCR Kit Ver.2 (Dye Plus) 50 Rxns ¥1,400
¥515
一步法预加染料RT-PCR试剂盒PrimeScript™ One Step RT-PCR Kit Ver.2 (Dye Plus) 一步法预加染料RT-PCR试剂盒PrimeScript™ One Step RT-PCR Kit Ver.2 (Dye Plus) 一步法预加染料RT-PCR试剂盒PrimeScript™ One Step RT-PCR Kit Ver.2 (Dye Plus)
Takara RR057B (A × 4) PrimeScript One Step RT-PCR Kit Ver.2 (Dye Plus) 50 Rxns × 4 ¥5,042 一步法预加染料RT-PCR试剂盒PrimeScript™ One Step RT-PCR Kit Ver.2 (Dye Plus) 一步法预加染料RT-PCR试剂盒PrimeScript™ One Step RT-PCR Kit Ver.2 (Dye Plus) 一步法预加染料RT-PCR试剂盒PrimeScript™ One Step RT-PCR Kit Ver.2 (Dye Plus)

*红字为促销价格,促销时间: 2024年3月1日-2024年4月30日

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一步法预加染料RT-PCR试剂盒PrimeScript™ One Step RT-PCR Kit Ver.2 (Dye Plus) 一步法预加染料RT-PCR试剂盒PrimeScript™ One Step RT-PCR Kit Ver.2 (Dye Plus) 一步法预加染料RT-PCR试剂盒PrimeScript™ One Step RT-PCR Kit Ver.2 (Dye Plus) 一步法预加染料RT-PCR试剂盒PrimeScript™ One Step RT-PCR Kit Ver.2 (Dye Plus)
 
 
■ 制品内容 (50 次量)
PrimeScript 1 Step Enzyme Mix 100 μl
2X 1 Step Buffer (Dye Plus) 625 μl × 2
Control F-1 Primer (20 μM)*1 20 μl
Control R-1 Primer (20 μM)*2 20 μl
Positive Control RNA (2×105 Copies/μl) 20 μl
RNase Free dH2O 625 μl × 2
 
*1 Positive Control RNA用上游引物。
*2 Positive Control RNA用下游引物。
 
 
■ 制品说明
PCR(Polymerase Chain Reaction;聚合酶链式反应)是一种体外扩增DNA的简单而有效的方法。虽然原理上PCR法是扩增DNA,RNA不能直接被扩增,但是经过反转录酶的作用把RNA反转录成cDNA后,PCR法便可应用于RNA的解析了。目前,RT-PCR方法已广泛应用于RNA的构造解析、cDNA的克隆及RNA水平上的表达解析等多种领域。
本试剂盒采用了一步(One Step)RT-PCR法。RNA→cDNA→PCR反应操作在同一反应体系中连续进行,反应中途不需添加任何试剂,避免污染危害。同时反应液中已含有电泳时所必需的色素试剂(蓝色和黄色色素),反应后可以直接进行电泳。反应液为鲜艳的绿色(Emerald Green),电泳时指示效果明显,容易观察样品的电泳位置。反转录反应使用了具有很强延伸能力的反转录酶PrimeScript RTase。该反转录酶对具有复杂二级结构的RNA模板也具有很强的延伸能力;PCR反应使用了扩增性能优越的Hot Start型DNA聚合酶TaKaRa Ex Taq HS,大大提高了本试剂盒的扩增性能和反应特异性。反应试剂已优化,以实现与不含染料和loading buffer的传统RT-PCR系统具有相同反应效果。在本试剂盒中,已将PrimeScript RTase、TaKaRa Ex Taq HS、RNase Inhibitor以及One Step RT-PCR用稳定剂等配制成了Premix型的PrimeScript 1 Step Enzyme Mix;同时把反应用Buffer、dNTP以及One Step Enhancer Solution配制成了Premix型的2×1 Step Buffer(Dye Plus)的形式,使实验操作时的反应液配制和电泳检测更为简单方便。
本试剂盒具有以下特点:
1. 进行高效的RT-PCR扩增。
2. 反应液制备简单,可直接进行凝胶电泳。
3. 反转录温度可以设定为50℃,能够有效抑制非特异性扩增。
4. 可减少由于错配和引物二聚体造成的非特异性反应。
本试剂盒中含有进行One Step RT-PCR反应用的全部试剂,可以方便有效地对RNA进行扩增分析。
 
■ 各种引物的序列
引物名称 各引物序列
  Control F-1 Primer        5′-CTGCTCGCTTCGCTACTTGGA-3′
  Control R-1 Primer        5′-CGGCACCTGTCCTACGAGTTG-3′
 
■ Positive Control RNA
本试剂盒中的Control RNA是以pSPTet3质粒 (质粒中的SP6启动子下游插入长约1.4 kb的pBR322来源的DNA片段,其DNA片段上含有抗四环素基因) 为模板由SP6 RNA聚合酶经体外转录而得到的。
 
一步法预加染料RT-PCR试剂盒PrimeScript™ One Step RT-PCR Kit Ver.2 (Dye Plus)
图1. Positive Control RNA:使用Control Primer可以扩增462 bp的DNA片段
 
■ 原理
PrimeScript One Step RT-PCR Kit Ver.2(Dye Plus)可在同一反应管中连续进行由PrimeScript RTase将RNA反转录为cDNA,再由TaKaRa Ex Taq HS扩增此cDNA的RT-PCR反应。
 
一步法预加染料RT-PCR试剂盒PrimeScript™ One Step RT-PCR Kit Ver.2 (Dye Plus)
图2. PrimeScript One Step RT-PCR Kit Ver.2 (Dye Plus) 原理图
 
■ 保存
-20℃。
 
■ 试剂盒特点
       RNA模板   适用于所有RNA
       扩增片段大小   ~8 kb
  PrimeScript 1 Step Enzyme Mix   PrimeScript RTase
  DNA Polymerase (TaKaRa Ex Taq HS)
  RNase Inhibitor
  2 × 1 Step Buffer (Dye Plus)
  含有反应Buffer
  dNTP Mixture (终浓度400 μM)
  One Step Enhancer Solution
  色素、比重剂
  1st strand cDNA合成用引物   特异性下游PCR Primer (Oligo-dT Primer和 Random引物不能使用)
       操 作   在同一反应管中连续进行RT-PCR反应
 
■ 使用注意
1. 当同时需要进行数次RT-PCR反应时,应先配制各种试剂的混合液,然后再分装到每个反应管中。这样,可使所取的试剂体积更准确,减少试剂损失,避免重复分取同一试剂。同时也可以减少实验操作或实验之间产生的误差。
2. 使用PrimeScript 1 Step Enzyme Mix时,应轻轻混匀,避免起泡;分取之前要小心地离心收集到反应管底部;由于酶保存液中含有50%的甘油,粘度高,分取时应慢慢吸取。
3. 2 X 1 Step Buffer (Dye Plus) 使用前用Vortex充分混匀,离心后使用。
4. 酶制品应在实验前才从-20℃中取出,使用后也应立即放回-20℃中保存。
5. 为了防止Positive Control RNA分解,应尽量避免反复冻融。有条件的实验室最好保存于-70℃~-80℃。
6. 分装试剂时务必使用新的枪头,以防止样品间污染。
7. 使用本试剂盒进行反转录反应时必须使用特异性的反转录引物,Random Primer、Oligo dT Primer不能使用。
 
 

页面更新:2023-11-01 16:22:23