Phire Green Hot Start II PCR Master Mix
单位 | 支 |
规格 | 1000 rxns |
Phire Green Hot Start II PCR Master Mix
单位 | 支 |
规格 | 1000 rxns |
上海金畔生物科技有限公司代理Takara酶试剂盒全线产品,欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。
平末端PCR产物克隆用载体pSIMPLE-19 EcoR V/BAP Vector | ||||||
品牌 | Code No. | 产品名称 | 包装量 | 价格(元) | 说明书 | 数量 |
Takara | 6012 | pSIMPLE-19 EcoR V/BAP Vector | 1.0 μg | ¥422 |
■ 制品内容 | |||||||||||
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■ 制品说明 | |||||||||||
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■ pSIMPLE-19 EcoR V/BAP Vector的结构 | |||||||||||
■ 注意事项 | |||||||||||
1. 由于载体上的多克隆酶切位点被破坏,所以使用本载体克隆PCR产物时,注意应在PCR引物上设计导入酶切位点,否则将会难以切下DNA片段进行其它亚克隆实验。 2. 为了避免载体自连,本载体进行了去磷酸化处理,因此Insert DNA片段的5′端必须保证带有磷酸基团,否则无法进行连接。Takara PrimeSTAR HS、Pyrobest、KOD、Pfx、Pfu 等DNA聚合酶扩增的PCR片段须经过磷酸化处理后才能进行连接反应(引物的5′端进行磷酸化标记时除外)。 3. 克隆时使用的Insert DNA片段 (PCR产物) 建议进行切胶回收纯化,否则PCR产物中的短片段DNA (甚至是电泳也无法确认的非特异性小片段)、残存引物等杂质都会影响克隆效率。 4. 按照本实验操作进行连接后,直接进行转化时的连接液不要超过20 μl。当要转化的DNA量较大或准备进行电转化时,需对连接液进行乙醇沉淀,纯化DNA后再进行转化。进行乙醇沉淀时使用Dr. GenTLE Precipitation Carrier (Code No.: 9094) 可以提高DNA的回收率。 5. 连接反应请在25℃以下进行,温度升高 (>26℃) 较难形成环状DNA。连接效率偏低时,可适当延长连接反应时间至数小时。 6. 本制品来源于pUC19载体,因此,适合pUC19载体的感受态细胞都可以使用,如: JM109等。 |
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页面更新:2024-01-25 16:07:10
2xSuper Taq PCR 预混液(含染料)
货号:BL1015C
规格:1ml×10
品牌:biosharp
商品详情:
2xSuper Taq PCR 预混液(含染料)
产品编号 |
产品名称 |
规格 |
BL1015A |
2xSuper Taq PCR 预混液(含染料) |
1 ml |
BL1015B |
2xSuper Taq PCR 预混液(含染料) |
1 ml×5 |
BL1015C |
2xSuper Taq PCR 预混液(含染料) |
1 ml×10 |
产品简介:
本产品是将PCR反应所需的Taq DNA聚合酶、dNTPs、Mg2+、反应缓冲液以及稳定剂等成分预先配制成2倍浓度的混合溶液。本产品所用的Taq DNA聚合酶是一种经优化的混合酶,具有5’-3’ DNA 聚合酶活性和3’-5’的外切酶活性,能够纠正DNA扩增过程中产生的碱基错配现象,在标准缓冲液中其保真度约相当于普通Taq DNA Polymerase的6倍。该酶合成能力很强,即使是复杂的模板,也能快速准确的完成反应,反应速度约为30 s/kb。对于一般性模板可以保证15 kb的扩增长度。
使用含染料的产品在PCR反应完成后,不需添加上样缓冲液即可直接上样进行电泳,红色染料可指示电泳进程;PCR产物经过纯化处理,用于酶切、连接、荧光测序等后续操作。本产品适用于:复杂模板的扩增,快速扩增。同时High-GC Enhancer可适用于高GC含量、具有复杂二级结构的模板的扩增。
产品特点:
本产品适用于复杂难扩增模板扩增,具有快速简便、灵敏度高、稳定性好等优点,使用时只需加入DNA模板和引物,并用水补足体积,可最大限度地减少人为误差、节约时间、降低污染几率。部分PCR产物具有3’端突出碱基,可直接用于TA克隆,加A处理后可提高TA克隆效率。
产品组份:
组分 |
BL1015A |
BL1015B |
BL1015C |
2xSuper Taq PCR 预混液(含染料) |
1 ml |
1 ml × 5 |
1 ml × 10 |
5×High-GC Enhancer |
0.4 ml |
0.4 ml × 5 |
0.4 ml × 10 |
使用方法:
详见说明书。
注意事项:
1. 本产品Taq DNA 聚合酶扩增时延伸速度约为 30 s/1 kb,不要超过 1 min/1 kb。
2. 采用本产品扩增时,当引物长度大于 20 个碱基,退火温度应设定为 Tm+3℃;当引物小于 20 个碱基,退火温度应设定 为最低的 Tm 值。建议使用引物终浓度为 0.5 μM,如果需要可在 0.2-1.0 μM 之间调整。
3. 本产品具有较高的热稳定性,变性温度可以设置为 94-98℃。扩增≥10kb 片段时,推荐的变性温度为 94℃,变性时间 为 30 s。
4. 本产品Taq DNA 聚合酶的 PCR 产物经过纯化后,可直接用于 TA 克隆;如产物经加 A 处理后可进一步提高 TA 克隆效率。
5. 经多个高 GC PCR 项目测试,产品组分“5×High-GC Enhancer”在不同的项目中对 PCR 扩增的促进效果存在波动, 部分项目甚至会出现 PCR 抑制,因此在开展新的 PCR 项目时,需要首先经过测试,再决定是否添加“5×High-GC Enhancer”。
6. 本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品。
7. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期:
-20℃保存,保质期 24 个月,避免反复冻融。
货号 | BL1015C |
规格 | 1ml×10 |
品牌 | biosharp |
CloneJET? PCR Cloning Kit with DH10B Competent Cells
单位 | 支 |
规格 | 40 rxns |
产品货号: UE-96-PCR-4/UE-96-PCR-24
产品规格: 4T/24T
目录价(元):2150.6/10894.3
大包装询价
产品概述:
储存条件
Buffer PCR-A: DNA结合溶液。室温密闭贮存。
Buffer W2 concentrate: 去盐液。 使用前,按试剂瓶上指定的体积加入无水乙醇(可用100%乙醇或95%乙醇),混合均匀,室温密闭贮存。
Eluent: 2.5 mM Tris-HCI, pH 8.5。室温密闭贮存。
流程图
说明书:
UE-UE-96-PCR-4/UE-96-PCR-24
常见问题解答:
◆得率低或者得不到DNA
·Buffer W2中没有加入乙醇
Buffer W2在使用之前必需加入100%或者95%的乙醇。
·不合适的洗脱液
DNA只能在低盐和pH7.0的条件下有效的洗脱。应使用试剂盒提供的洗脱液或者用水(pH7.0)洗脱。在65℃下预热洗脱液可以提高洗脱效率。
·洗脱液体积不够或者没有浸润膜
洗脱液应加在制备膜的中央以确保其均匀的浸润整个膜。
·采用不合适的负压装置
确保负压保持在 -25至-30英尺汞柱。
◆DNA不能很好地用于下游实验
·洗脱时盐浓度过高
确保在洗脱之前盐分都被洗涤去除。正确使用Buffer W1,避免在管体上残留。
·样品上样电泳时样品跑出胶孔
洗脱液中残留有乙醇(样品会飘在琼脂糖凝胶孔中)
仔细的操作说明书中的所有步骤以去除残留的乙醇。
·洗脱液中含有引物二聚体
引物二聚体会影响后续的反应,如测序。任何大于40bp的引物二聚体都将不会被完全去除。结合完后,用750ul盐酸胍(35g盐酸胍溶于100ml去离子水)洗涤UE PCR清洁制备管或者制备板,然后再接着进行说明书中所述的洗涤洗脱步骤。
·洗脱液中含有变性的单链DNA,这在凝胶电泳中可见一条又小又淡又糊的条带
洗脱后,将洗脱液在95℃中温浴2min。在使用前冷却至室温。95℃温浴2min后也可以在洗脱液中加入10 mM NaCl以促进复性。
DreamTaq? Hot Start PCR Master Mix
单位 | 支 |
规格 | 200 rxns |
0.5ml 无色低吸附PCR平盖薄壁管
单位 | 箱 |
英文名称 | 0.5mLMaxymumRecovery ThinWallPCRTubeswithFlatCap,Clear,Nonsterile |
规格 | 1000支/包,10包/箱 |
上海金畔生物科技有限公司代理Takara酶试剂盒全线产品,欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。
PCR相关耗材 | ||||||
品牌 | Code No. | 产品名称 | 包装量 | 价格(元) | 说明书 | 数量 |
Takara | 9148 | TaKaRa PCR Micro Strip 8-Tube | 120 strips | ¥401 | ||
Takara | 9149 | TaKaRa PCR Micro Strip 8-Cap | 120 strips | ¥401 | ||
Takara | NJ200 | 0.2 ml Hi-Tube Dome Cap | 1000 pcs | ¥745 | ||
Takara | NJ300 | 0.2 ml Hi-8-Tube | 125 strips | ¥1,350 | ||
Takara | NJ301 | 0.2 ml Hi-8-Dome Cap | 125 strips | ¥296 | ||
Takara | NJ302 | 0.2 ml Hi-8-Flat Cap | 125 strips | ¥552 | ||
Takara | NJ710 | 96 well snap plate | 10 plates | ¥530 | ||
Takara | NJ720 | Flat cap for snap plate | 120 strips | ¥461 | ||
Takara | NJ204 | 0.2 ml Single-Tube Dome Cap | 1000 pcs | ¥627 | ||
Takara | NJ205 | 0.2 ml Single-Tube Flat Cap | 1000 pcs | ¥627 |
■ 各反应管的适用PCR仪 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
PCR反应管 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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*使用的反应液量少时,会出现反应结果不稳定的情况。Dice Gradient可以设置的最大反应液量是150 μl,Dice Touch可以设置的最大反应液量是100 μl,反应液量设置超过最大反应液量时,需要将Hold时间延长。 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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◎:扩增稳定 △:每孔的扩增产物都有偏差,反应液有蒸发现象。 ×:不适用 ―:未研讨 |
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【反应条件】 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
按照表中所记载的反应体系进行下面的PCR反应。 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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【注意】 0.2 ml Hi-Tube系列反应管和0.2 ml Hi 8联Tube系列反应管,可以用于SP。但不能用于MP、PERSONAL和GP,这3种PCR仪需要与TaKaRa PCR Micro Strip 8-Tube(Code No. 9148)及TaKaRa PCR Micro Strip 8-Cap(Code No. 9149)配套使用。 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
PCR反应板 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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【注意】各反应管和反应板请使用各自的专用Cap。如果使用不配套的cap,反应液可能会有蒸发的现象。 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
【High grade type tube】 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
【特长】 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
· 无需灭菌处理 · Cap有圆顶和平顶两种 · Cap深入孔内的部分长,密封性更好 · Tube内壁不容易残留样品 *灭菌处理会使反应性能下降,请不要灭菌。 |
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0.2 ml Hi-Tube Dome Cap (Code No. NJ200) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
【96孔板】 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
TaKaRa 96 well PCR Hi-Plate (Code No. NJ111) | 96 well snap plate (Code No. NJ710) | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
*未灭菌。使用时,请根据需要进行灭菌处理。 灭菌不会变形。 |
RNase、DNase free(不需要灭菌*) *灭菌处理可能会使反应性能下降,请不要灭菌。 |
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TaKaRa PCR Hi-Caps(8联) (Code No. NJ811) | Flat cap for snap plate (Code No. NJ720) | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
页面更新:2019-12-23 14:50:59
PCR八联排管 0.2ml
单位 | 包 |
规格 | 200条/包 200条/包,20包/箱 |
适用普通的PCR检测,不建议用于荧光定量PCR等检测
Phusion Blood Direct PCR Kit
单位 | 支 |
规格 | 500 rxns |