钙离子探针Fura-2 AM

钙离子探针Fura-2 AM

货号:
IF1510

品牌:
Jinpan

钙离子探针Fura-2 AM

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产品简介
有效期 2年
MDL MFCD00036976
英文名称 Fura-2 AM
CAS 108964-32-5
分子式 C44H47N3O24
分子量 1001.85
储存条件 -20℃
纯度 ≥95%
外观(性状) Powder
单位
SMILES O=C(C1=CN=C(C2=CC3=CC(OCCOC4=CC(C)=CC=C4N(CC(OCOC(C)=O)=O)CC(OCOC(C)=O)=O)=C(N(CC(OCOC(C)=O)=O)CC(OCOC(C)=O)=O)C=C3O2)O1)OCOC(C)=O
规格 50ug 1mg

FURA-2AM是一种可渗透细胞的高亲和力钙离子荧光探针。FURA-2AM是FURA-2的酯形式,FURA-2是极性大的酸性化合物,无法进入活细胞内,在其负性基团上加上乙酰氧甲酯(AM)后,显著增加了细胞渗透性。

FURA-2AM穿透细胞膜进入活细胞后,被细胞内的酯酶去酯化变成FURA-2游离酸,后者可与胞浆内的游离Ca2+特异性地结合(结合比例为1:1)。当FURA-2结合胞质内的游离Ca2+后,表现出吸收位移,激发波长峰值从380 nm变为340 nm,而510 nm附近的发射峰值保持不变。荧光强度与结合Ca2+的浓度存在定量关系。一般用340 nm(钙离子-Fura 2)和380nm(Fura 2)波长激发Fura-2,通过使用与两种激发对应的荧光强度比率来计算细胞内的钙离子浓度。比率测量可最大程度地减少混合物中的光漂白,荧光探针的泄漏,探针的不均匀装载和细胞厚度差异的影响,从而提供更可靠和可再现的结果。

钙离子探针Fluo-3AM

钙离子探针Fluo-3AM

货号:
IF0150

品牌:
Jinpan

钙离子探针Fluo-3AM

暂无详情
产品简介
别名 Fluo-3-pentaacetoxymethyl ester
CAS 121714-22-5
分子式 C51H50Cl2N2O23
分子量 1129.85
纯度 HPLC≥93%
单位
SMILES ClC(C=C1C(C2=CC(OCCOC(C=C(C)C=C3)=C3N(CC(OCOC(C)=O)=O)CC(OCOC(C)=O)=O)=C(N(CC(OCOC(C)=O)=O)CC(OCOC(C)=O)=O)C=C2)=C(C=C4Cl)C5=CC4=O)=C(C=C1O5)OCOC(C)=O
规格 50ug 1mg

Fluo-3, AM是最常用的检测细胞内钙离子浓度的荧光探针之一。它穿透细胞膜 进入细胞后被细胞内的酯酶剪切形成 Fluo-3 ,从而被滞留在细胞内,Fluo-3 若以游离配体形式存在 时几乎是非荧光性的,但是当它与细胞内钙离子结合后可以产生较强的荧光,最大激发波长为 506nm ,最大发射波长为 526nm 。实际检测时推荐使用的激发波长为 488nm 左右,发射波长为 525~530nm 。可以使用激光共聚焦显微镜或流式细胞仪检测细胞内钙离子浓度的变化。 

使用方法(仅供参考): 

  1. 用 HBSS 稀释 Fluo-3, AM 溶液,制备 4-5µM 的 Fluo-3, AM 工作液。 

  2. 将 Fluo-3, AM 工作液加入细胞,在 37℃培养 20 分钟。

  3. 加入 5 倍体积的含有 1%胎牛血清的 HBSS,再继续培养 40 分钟。

  4. 用 HEPES buffer saline 洗涤细胞 3 次,然后用 HEPES buffer saline 使细胞重悬浮,制成 1×105 cells/mL 的溶液。

  5. 37℃下培养 10 分钟,然后用该细胞进行荧光钙离子检测。激发波长 506nm,发射波长 526nm。

    *标记的条件因细胞种类而异,在每次实验前,请先确定最佳条件。

    注意事项: 1、 如果使用含有血清的培养基,血清中的脂酶会分解 AM 体,从而降低 Fluo-3, AM 进入细胞的效 果。

                      2、含有酚红的培养基会使本底值略微偏高,所以加工作液之前,应该尽量去除培养基 残留。

                      3、 Pluronic F127 可以防止 Fluo-3,AM 在 HBSS 中聚合并能够帮助其进入细胞。故,可以向 Fluo-3,AM溶液中加入适量的 Pluronic F127 溶液,不建议在 Pluronic F127 中长期保存 Fluo-3,AM 溶液。

                      4、荧光染料均存在萃灭问题,请注意避光,以减缓荧光萃灭。