RNase B(对照底物) #P7817S 250 μg-NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品资料 – 糖生物学与蛋白质工具 – 糖苷内切酶

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#P7817S
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概述

RNase B是一种高甘露糖蛋白,可作为糖苷内切酶切割N-连接糖链的阳性对照。RNase B有一个N-连接糖基化位点,可以用于SDS-PAGE凝胶电泳分析。

来源

牛胰

贮存溶液

Milli-Q

分子量

17,000 Da(去糖基后13,683 Da)

RNase B去糖操作步骤

1. 10 μl 反应体系中,加入2 μl 的RNase B1μl 10X糖蛋白变性缓冲液和 5 μl H2O。
2. 于100°C煮沸 10分钟。
3. 加入1 μl 10X GlycoBuffer 2反应缓冲液和 1 μl 10% NP-40。
4. 加入1 μl糖苷内切酶。
5. 37°C温育 1小时。
6. 将反应产物上样于10-20%的 SDS-PAGE胶。

注意事项

250 μg足够用于约20次反应。

相关产品

糖苷内切酶 H
糖苷内切酶 Hf
PNGase F
PNGase F ( 无甘油 )

参考文献

    1.    Plummer, T.H. and Hirs, C. (1964). J. Biol. Chem. 239, 2530-2538.
    2.    Plummer, T.H. Jr., Tarentino, A. and Maley, F. (1968). J. Biochem. (Tokyo). 243, 5158-5164. 
 3.    Liang, C.-J. Yamashita, K. and Kobata, A. (1980). J. Biochem (Tokyo). 88, 51-58.

RecAf 蛋白 #M0355L 1,000 μg-NEB酶试剂 New England Biolabs

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RecAf 蛋白                              收藏

RecAf 蛋白                                   #M0355L 1,000 μg RecAf 蛋白                                   #M0355L 1,000 μg RecAf 蛋白                                   #M0355L 1,000 μg RecAf 蛋白                                   #M0355L 1,000 μg

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停产通知

 停产通知:该产品于2021年12月15日停产,现有库存售完即止。替代产品为 RecA (NEB #M0249)

相关产品

通用 miRNA 克隆接头

特性

 电镜分析 DNA 结构
 D 环突变
 用 RecA 蛋白包被的探针来进行文库筛选
 RecA 介导全长 cDNA 克隆的亲合捕获  

概述

RecA 蛋白在基因重组中是不可缺少的,它参与 DNA 修复和紫外线诱导的突变。RecA 促进 lexA 抑制子、umuD 蛋白和 lambda 抑制子的自裂解。切割 LexA 能促进 20 多种基因的表达。体外研究证明:在 ATP 参与下,RecA 促进单链 DNA 片断与同源双链 DNA 片断发生链置换。上述反应需要三步来完成:
(i)RecA 与单链 DNA 结合;(ii)核蛋白丝结合到双链 DNA 上寻找同源部分;(iii)链置换。 
 

来源

重组 E. coli 菌株 ER2502,携带有从 E. coli 克隆的 recA 基因。 

RecA是由 E. coli 菌株 ER3010 表达的 N 端 含 6X His标签的重组蛋白,该菌株编码有全长 353 个氨基酸的野生型E. coli RecA 蛋白。 

反应条件

1X RecA 反应缓冲液
[70 mM Tris-HCl,10 mM MgCl2,5 mM DTT(pH 7.6 @ 25℃)],37℃ 温育。
热失活:65℃ 加热 20 分钟。  

质保声明

RecA 蛋白经过严格的质控检测,确保该产品具有最高的活性和纯度。详情请联系我们。   

分子量

RecA:37,973 Da。
RecAf:38,907 Da。  

浓度

2 mg/ml。  

参考文献

关于该酶性质和产品应用的参考文献,请联系我们。   

Furin 蛋白酶 #P8077L 250 units-NEB酶试剂 New England Biolabs

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Furin 蛋白酶                              收藏

Furin 蛋白酶                                #P8077L 250 units

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#P8077L
250 units
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#P8077S
50 units
1,829.00

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Furin 蛋白酶                                #P8077L 250 units

概述

Furin 蛋白酶是一种类似枯草杆菌蛋白酶的蛋白质前体转化酶。它是分泌途径中的主要加工酶,定位于高尔基体反面的网状结构部位。其底物包括:凝血因子,血清蛋白和生长因子受体(如:胰岛素样生长因子受体)。最短的切割识别位点是:Arg-X-X-Arg。然而,该酶倾向作用于 Arg-X-(Lys/Arg)-Arg▼ 位点。在 P6 位置的额外精氨酸似乎能增强切割效率。Furin 活性受 EGTA、α1-抗胰蛋白酶硅酸盐和聚精氨酸化合物抑制。
 注意:底物的三维结构以及切割位点周围的氨基酸类型会影响 Furin 蛋白酶的切割特异性。

来源

分离自草地夜蛾(Spodopter afrugiperda,又称秋粘虫)Sf9 细胞,该细胞感染有截短型人 Furin 基因的重组杆状病毒(R. Fuller 惠赠)。

分子量

截短型人Furin 蛋白的分子量为 52.7 kDa,SDS-PAGE 电泳时的表观分子量为 57 kDa。

单位定义

1 单位指 30℃ 条件下,1 分钟内从荧光肽 BOC-RVRR-AMC(Bachem #I-1645)上释放 1 pmol AMC 所需要的酶量,单位检测条件请联系我们。 www.jinpanbio.com,www.jinpanbio.cn。

浓度

2,000 units/ml。

参考文献

有关该产品特性和应用的相关文献请联系我们。 www.jinpanbio.com,www.jinpanbio.cn。

PsiI (停产有替代) #R0657L 1,000 units-NEB酶试剂 New England Biolabs

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PsiI (停产有替代)                              收藏

PsiI (停产有替代)                                     #R0657L 1,000 units PsiI (停产有替代)                                     #R0657L 1,000 units PsiI (停产有替代)                                     #R0657L 1,000 units PsiI (停产有替代)                                     #R0657L 1,000 units PsiI (停产有替代)                                     #R0657L 1,000 units PsiI (停产有替代)                                     #R0657L 1,000 units

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200 units
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PsiI (停产有替代)                                     #R0657L 1,000 units

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停产通知

 请注意:该产品已停产,库存售完为止,替代产品为R0744

在不同反应缓冲液的活性

NEBuffer 1.1: 10%
NEBuffer 2.1: 100%
NEBuffer 3.1: 10%
CutSmart Buffer: 100%

特性

CutSmart、重组酶。

反应条件

CutSmart 缓冲液,37℃。
热失活:65℃ 20 分钟。

浓度

5,000 units/ml。

甲基化敏感性

dam、dcm 和哺乳动物 CpG 甲基化均不敏感。

注意事项

甘油浓度 > 5% 条件下可能出现星号活性。

蛋白内切酶 GluC #P8100S 50 μg-NEB酶试剂 New England Biolabs

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蛋白内切酶 GluC                              收藏

蛋白内切酶 GluC                                  #P8100S 50 μg 蛋白内切酶 GluC                                  #P8100S 50 μg 蛋白内切酶 GluC                                  #P8100S 50 μg

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#P8100S
50 μg
1,219.00

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蛋白内切酶 GluC                                  #P8100S 50 μg 

特性

 通过质谱进行蛋白质组学分析的理想用酶
 可用于蛋白和多肽的鉴定
 从蛋白酶缺陷型枯草芽孢杆菌中表达,无其它蛋白酶污染

概述

蛋白内切酶 GluC(又称金黄色葡萄菌 V8 蛋白酶)是丝氨酸蛋白酶,能选择性切割谷氨酸羧基端的肽键,同时也能够切割天冬氨酸残基,但其反应速率要比前者慢 100-300 倍。

来源

克隆自金黄色葡萄球菌(Stophylococcus aureus)V8 蛋白酶基因,在枯草芽胞杆菌(Bacillus subtilis)中表达。

反应条件

1X GluC 反应缓冲液[50 mM Tris-HCl,0.5 mM Glu-Glu (pH 8.0 @ 25℃)],37℃ 温育。

随酶提供的试剂

2X GluC 反应缓冲液。

分子量

29,849 daltons。

重溶

用 50-500 μl 的高纯水溶解。快速自裂解效率随酶浓度不同而异。

注意事项

以液态形式于 -20℃ 可贮存 2 周,但液态形式保存会降低其活性。欲达到最佳效果,请使用新鲜重溶的蛋白酶。

参考文献

有关该产品特性和应用的相关文献请联系我们。 www.jinpanbio.com,www.jinpanbio.cn。

热稳定无机焦磷酸酶 #M0296L 1,250 units-NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品资料 – RNA 试剂 – RNA 合成

热稳定无机焦磷酸酶                              收藏

热稳定无机焦磷酸酶                                  #M0296L 1,250 units 热稳定无机焦磷酸酶                                  #M0296L 1,250 units 热稳定无机焦磷酸酶                                  #M0296L 1,250 units

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#M0296L
1,250 units
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#M0296S
250 units
909.00

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特性

  增强 DNA 复制

热稳定无机焦磷酸酶                                  #M0296L 1,250 units 

概述

无机焦磷酸酶(PPase)催化无机焦磷酸盐水解生成正磷酸盐。 
P207–4 + H20 → 2HP04–2 

来源

重组 E. coli 菌株,携带从极度耐热的 Thermococus litoralis 中克隆的无机焦磷酸酶基因。  

单位定义

1 单位指标准反应条件下 [0.5 ml 反应体系,50 mM Tricine(pH 8.5),1 mM MgCl2 和 0.32 mM PPi,75℃ 反应 10 分钟],每分钟催化无机焦磷酸盐生成 1 μmol 磷酸盐的酶量。  

浓度

2,000 units/ml。  

5-甲基化-dCTP #N0356S 1 μmol-NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品资料 – DNA聚合酶与扩增技术 – 核苷酸溶液和缓冲液

5-甲基化-dCTP                              收藏

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#N0356S
1 μmol
959.00

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概述

dNTP 套装:
四种独立包装的超纯脱氧核苷三磷酸的溶液(dATP、dCTP、dGTP 和 dTTP)。每种的浓度为 100 mM。

dNTP 混合液:
含相同摩尔数的超纯 dATP、dCTP、dGTP 和 dTTP。每种的浓度为 10 mM。

rNTP 套装:
四种独立包装的核苷三磷酸溶液(ATP、CTP、GTP 和 UTP),pH 7.5,以钠盐形式存在。

rNTP 混合液:
含相同摩尔数的四种核苷三磷酸:rATP、rCTP、rGTP 和 rUTP。每种浓度为 25 mM(rNTP 总浓度相当于 100 mM)。

7-去氮-dGTP:
含有 5 mM 7-去氮-dGTP 的二锂盐溶液。

5-甲基-dCTP:
10 mM 溶液,pH 7.0。

dATP 溶液:

含有 100 mM dATP,pH 7.4 的钠盐溶液。

acyNTP 套装:
四种独立包装的 acyNTP (acyATP、acyCTP、acyGTP 和 acyTTP)。以干粉形式提供,加入 50 μl 蒸馏水或去离子水(Milli-Q®)后,acyNTP 的终浓度为 10 mM。

acyNTP 可作为链终止基团,因而可用于一般采用 ddNTP 的实验,如 DNA 测序和 SNP 分析。acyNTP 尤其适用于古生菌 DNA 聚合酶的反应,特别是 Therminator DNA 聚合酶。Therminator DNA 聚合酶经过基因工程改造后,拥有更强的掺入核苷酸类似物的能力,这些类似物的糖环发生了改变,如 rNTP,ddNTP,2´ 脱氧核苷酸,特别是 acy 碱基类似物。  

参考文献

  

pCLIPf 载体 #N9215S 20 µg-NEB酶试剂 New England Biolabs

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#N9215S
20 µg
2,219.00

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特性

 提供可在哺乳动物和细菌中表达的载体
 
pCLIPf  载体                               #N9215S 20 µg
 
pCLIPf  载体                               #N9215S 20 µg

 

概述

NEB 提供几种表达载体,该载体能表达携带有 SNAP-tag 和 CLIP-tag 的融合蛋白,适用于在哺乳动物及细菌中标记,相应的启动试剂盒也包含有相应的载体。哺乳动物 SNAPf 和 CLIPf 载体表达 SNAP- 和 CLIP-tags 的速度较之前的载体更快。表达载体中,tag 的上、下游具有改造后的多克隆位点,使得 tag 可以表达在目的蛋白的任何一端,该表达过程受 CMV 启动子调控。SNAPf-tag 和 CLIPf-tag 表达载体中携带新霉素抗性基(NeoR),可用于筛选稳定转染子。载体上还带有一个 IRES 元件,有助于融合蛋白和 NeoR 的高效表达。为在哺乳动物细胞中高效表达,Tag 基因中的密码子已经过优化。NEB 还提供对照质粒,这些质粒编码的融合蛋白分别定位于细胞(H2B)、线粒体(Cox8A)和细胞表面(ADRβ2, NK1R),启动试剂盒中包含相应的对照质粒(见 290 页)。
 
细菌表达载体 pSNAP-tag(T7)-2 包含位于SNAP-tag 上、下游的克隆位点,受 T7 启动子调控。为在E. coli中高效表达,SNAP-tag 基因中的密码子已经过优化。

 

来源

通过标准的质粒纯化程序,分离自 E. coli 菌株。质粒无内毒素污染,可用于高效转染。

浓度

500 μg/ml。

限制图谱

pSNAPf 载体的详细描述和限制性酶切图谱请见 389 页。查看所有表达载体和对照质粒的序列和图谱文件,请联系我们。 www.jinpanbio.com,www.jinpanbio.cn。
 
pCLIPf  载体                               #N9215S 20 µg

BioBrick® 组装试剂盒 #E0546S 50 次反应-NEB酶试剂 New England Biolabs

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BioBrick® 组装试剂盒                              收藏

BioBrick® 组装试剂盒                                #E0546S 50 次反应

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#E0546S
50 次反应
3,269.00

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停产通知

 停产通知:该产品于2021年12月15日停产。

概述

BioBrick® 组装试剂盒为克隆提供了一种简便有效的方法,它能 BioBrick 组装到多种基因系统中。BioBrick 是已知生物功能的 DNA 序列,能与其它 BioBrick 进行组装。组装任意两种 BioBrick 的方法完全相同,组装后形成一个新的 BioBrick。

请仔细阅读说明书中的每种试剂的使用方法和保存条件。


BioBrick® 是 BioBricks 公司的商标。(http://www.biobricks.org)

BioBrick® 组装试剂盒                                #E0546S 50 次反应 

BioBrick 组装试剂盒包含

– EcoRI-HF
– XbaI
– SpeI
– PstI
– 10X NEBuffer 2.1
– T4 DNA 连接酶
– 10X T4 DNA 连接酶缓冲液 

BioBrick® 组装试剂盒                                #E0546S 50 次反应

组装两种标准 BioBrick 过程。上游片段用 EcoRI-HF 和 SpeI 消化,下游片段用 XbaI 和 PstI 消化,目的质粒用 EcoRI-HF 和 PstI 消化。三个片段用 T4 连接酶连接并转化 E. coli。然后在带有目的质粒抗性的 LB 琼脂板上挑选出含有 BioBrick 的重组子。

StyI(停产有替代) #R0500S 3,000 units-NEB酶试剂 New England Biolabs

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StyI(停产有替代)                                      #R0500S 3,000 units StyI(停产有替代)                                      #R0500S 3,000 units StyI(停产有替代)                                      #R0500S 3,000 units StyI(停产有替代)                                      #R0500S 3,000 units StyI(停产有替代)                                      #R0500S 3,000 units StyI(停产有替代)                                      #R0500S 3,000 units StyI(停产有替代)                                      #R0500S 3,000 units

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#R0500S
3,000 units
759.00

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识别位点

StyI(停产有替代)                                      #R0500S 3,000 units

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停产通知

 请注意:该产品已停产,库存售完为止,替代产品为R3500

在不同反应缓冲液的活性

NEBuffer 1.1: 10%
NEBuffer 2.1: 25%
NEBuffer 3.1: 100%
CutSmart Buffer: 10%

特性

重组酶、省时酶。

反应条件

NEBuffer 3.1,37℃。
热失活:65℃ 20 分钟。

浓度

10,000 units/ml。

甲基化敏感性

dam、dcm 和哺乳动物 CpG 甲基化均不敏感。