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MHY-1485

发表于由

MHY-1485

货号：
IM1910

品牌：
Jinpan

MHY-1485

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MHY-1485

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产品简介
有效期 2年
描述 是一种 mTOR 活化剂。
MDL MFCD00489974
CAS 326914-06-1
分子式 C17H21N7O4
分子量 387.39
储存条件 -20℃
纯度 ≥98%
外观（性状） White to off-white Solid
单位 瓶
In Vitro MHY1485诱导mTOR活性，这是自噬的另一种调节剂。 MHY1485剂量依赖性地和时间依赖性地显著增加LC3II / LC3I比例[1]。 mTOR活化剂MHY1485刺激mTOR，S6K1和rpS6磷酸化。用MHY1485治疗可增加磷酸化mTOR水平而不影响总mTOR含量。 MHY1485处理也增加了下游S6K1和rpS6蛋白的磷酸化，而不影响总S6K1和rpS6水平[2]。 mTOR活化剂MHY1485也消除了利拉鲁肽对成骨细胞分化的抑制作用，并导致p-mTOR和TGF-β下调，但不会减弱利拉鲁肽诱导的p-AMPK蛋白表达水平的增加。用4nM利拉鲁肽和1μMMHY1485（mTOR活化剂）共同处理，导致Alp，OC，p-mTOR和TGF-β的蛋白质表达水平和基质矿化与阳性对照细胞相当[3]。 MHY1485处理增加核糖体蛋白S6激酶（S6K）和真核翻译起始因子4E结合蛋白1（4E-BP1）磷酸化，它们是mTOR复合物1（mTORC1）的下游靶标，但降低mTOR复合物2（mTORC2）上Akt的磷酸化）靶位点丝氨酸473 [4]。
激酶实验 来自10日龄小鼠的卵巢用10μMMHY1485处理3小时，并使用含有蛋白酶抑制剂混合物的M-PER哺乳动物蛋白质提取试剂提取蛋白质。通过二辛可宁酸法测定上清液中的蛋白质浓度。将等量的蛋白质裂解物加载到MOPS缓冲液中的4-12％NuPAGE Bis-Tris凝胶上，并转移至0.45μM孔硝酸纤维素膜[2]。
SMILES O=[N+](C1=CC=C(NC2=NC(N3CCOCC3)=NC(N4CCOCC4)=N2)C=C1)[O-]
靶点 mTOR
细胞实验 将MC3T3-E1细胞维持在补充有10％胎牛血清（FBS），100U / mL青霉素和100mg / mL链霉素的Dulbecco改良Eagle培养基（DMEM）中，在37℃，5％CO 2的潮湿气氛中。达到70％汇合后，将培养基转换为商业成骨分化培养基。将MC3T3-E1细胞在成骨分化培养基中培养14天，然后在补充有不同浓度的利拉鲁肽（目录编号HY-P0014; MedChem Express）的DMEM中培养另外14天。在存在或不存在化合物C或MHY1485的情况下培养用4nM利拉鲁肽处理的MC3T3-E1细胞。将MC3T3-E1细胞在没有任何处理的情况下在DMEM中保持28天用作阴性对照（NC）;在商业成骨分化培养基中培养14天，在不含利拉鲁肽的DMEM中培养14天，用作阳性对照（PC）[3]。
数据来源文献 [1]. Choi YJ, et al. Inhibitory effect of mTOR activator MHY1485 on autophagy: suppression of lysosomal fusion. PLoS One. 2012;7(8):e43418.

[2]. Cheng Y, et al. Promotion of Ovarian Follicle Growth following mTOR Activation: Synergistic Effects of AKT Stimulators. PLoS One. 2015 Feb 24;10(2):e0117769.

[3]. Hu XK, et al. Liraglutide attenuates the osteoblastic differentiation of MC3T3 E1 cells by modulating AMPK/mTOR signaling. Mol Med Rep. 2016 Oct;14(4):3662-8.

[4]. Rakhmanova V, et al. Inhibition of Mast Cell Function and Proliferation by mTOR Activator MHY1485. Immune Netw. 2018 Jun 4;18(3):e18
规格 5mg 10mg

沙帕色替

发表于由

沙帕色替

货号：
IS3010

品牌：
Jinpan

沙帕色替

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产品简介
有效期 2年
描述 是一种口服有效的 ATP依赖性的 mTOR1/2 抑制剂。
别名 3-(2-氨基-5-苯并恶唑基)-1-(1-甲基乙基)-1H-吡唑并[3,4-D]嘧啶-4-胺
英文名称 Sapanisertib
CAS 1224844-38-5
分子式 C15H15N7O
分子量 309.33
储存条件 -20℃
纯度 ≥98%
外观（性状） White to off-white Solid
单位 瓶
生物活性 Sapanisertib (INK-128) 是ATP依赖性的 mTOR1/2 抑制剂，抑制mTOR激酶的IC50 值为1 nM。[1-2]
In Vitro Sapanisertib（INK-128）对mTOR具有酶抑制活性，对PI3K激酶具有100倍以上的选择性[1]。 Sapanisertib（INK-128）选择性地降低蛋白质中YB1，MTA1，波形蛋白和CD44的表达，但不降低PC3细胞中的转录水平。 Sapanisertib（INK-128）降低PC3前列腺癌细胞的侵袭潜力。此外，Sapanisertib（INK-128）在治疗6小时开始抑制癌细胞迁移，与促入侵袭基因表达减少明显相关，但在细胞周期或整体全球蛋白质合成的任何变化之前[2] 。
In Vivo 在ZR-75-1乳腺癌异种移植模型中，Sapanisertib（INK-128）在0.3mg / kg /天的剂量下显示出肿瘤生长抑制功效[1]。在PtenL / L小鼠中用INK128处理后，4EBP1和p70S6K1 / 2磷酸化完全恢复到野生型水平。 Sapanisertib（INK-128）治疗导致PtenL / L小鼠前列腺上皮内瘤变（PIN）损伤减少50％，并在小鼠的多种癌细胞系中诱导程序性细胞死亡[2]。
SMILES NC1=NC=NC2=C1C(C3=CC4=C(C=C3)OC(N)=N4)=NN2C(C)C
靶点 mTOR
动物实验 裸鼠在右肩胛下区域皮下接种5×106个MDA-MB-361细胞。在肿瘤达到150-200mm 3的大小后，将小鼠随机分配到载体对照组或治疗组中。 Sapanisertib（INK-128）配制成5％聚乙烯丙炔，15％NMP，80％水，并通过口服强饲法以0.3mg / kg和1mg / kg每天施用。
细胞实验 用合适的药物处理PC3细胞48小时，并使用CellTiter-Glo发光试剂测量增殖。使用浓度范围为20.0μM至0.1nM（12点曲线）计算实现细胞生长抑制50％所需的萨潘替尼（INK-128）浓度（IC 50）。
数据来源文献 [1]. Liu A, et al. mTOR Mediated Anti-Cancer Drug Discovery. Drug Discovery Today: Therapeutic Strategies. 2009, 6(2), 47-55.
[2]. Hsieh AC, et al. The translational landscape of mTOR signalling steers cancer initiation and metastasis. Nature. 2012 Feb 22;485(7396):55-61
规格 5mg 10mg 25mg

Dactolisib

发表于由

Dactolisib

货号：
ID1020

品牌：
Jinpan

Dactolisib

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产品简介
MDL MFCD00005880
EC EINECS 1312995-182-4
别名 N-乙基咪唑;NVPBEZ235;BEZ235;NVP-BEZ235
英文名称 Dactolisib/BEZ235
CAS 915019-65-7
分子式 C30H23N5O
分子量 469.55
纯度 ≥98%
单位 瓶
生物活性 BEZ235 是一种双重的 pan-class I PI3K 和 mTOR 抑制剂，作用于 p110α/γ/δ/β 和 mTOR，IC50 分别为 4 nM/5 nM/7 nM/75 nM 和 20.7 nM。BEZ235 抑制 mTORC1 和 mTORC2[1-3]。
In Vitro Dactolisib以ATP竞争方式有效抑制PI3K。 Dactolisib（250nM）显著降低mTOR活化激酶p70S6K的磷酸化水平。 Dactolisib还导致S235/S236P-RPS6水平降低，IC50为6.5 nM，表明Dactolisib可直接抑制mTOR激酶，因为mTOR的激酶结构域与IA类PI3K高度同源。 。使用生化mTOR K-LISA测定法（IC50,20.7nM）确认Dactolisib对mTOR的活性[1]。 Dactolisib对HCT116，DLD-1和SW480细胞系的IC50分别为14.3±6.4,9.0±1.5和12.0±1.6 nM [2]。
In Vivo Dactolisib（45 mg/kg，口服）治疗在散发性PIK3CA野生型CRC的GEM模型中诱导结肠肿瘤消退[2]。通过口服强饲法将Dactolisib（45mg/kg）给予MENX大鼠（每组n = 2），并在处理后1或6小时处死动物。与PEG处理的大鼠相比，P-AKT和P-S6的免疫染色显示在给予Dactolisib后6小时，两种蛋白质，特别是P-S6的显著减少。在治疗后6小时，Dactolisib处理的大鼠的垂体腺瘤具有与安慰剂治疗的大鼠的肿瘤显著不同的蛋白质组学特征[3]。
激酶实验 PI3Kα，β和δ蛋白由p85 NH2的iSH2结构域组成，其末端与全长蛋白p110蛋白融合，但α也不包含最后20个氨基酸。 PI3Kγ作为其前144个氨基酸缺失的全长蛋白质产生。将所有构建体与COOH-末端His标签融合以便于纯化，然后克隆到pBlue-Bac4.5（对于α，β和δ同种型）或pVL1393（对于γ同种型）质粒中。然后使用供应商推荐的方法用BaculoGold WT基因组DNA共转染不同载体以产生相应的重组杆状病毒和蛋白质。使用Kinase-Glo测定法测试化合物对PI3K的活性。激酶反应在384孔黑色板中完成。每孔加载50nL测试项目（在90％DMSO中）和5μL反应缓冲液[10mM Tris-HCl（pH 7.5），50mM NaCl，3mM MgCl 2,1mM DTT和0.05％CHAPS] 10μg/ mL PI底物（L-α-磷脂酰肌醇; Avanti极性脂质;在3％辛基葡萄糖苷中制备）和PI3K蛋白（分别为10,25,10和150 nM的p110α，p110β，p110δ和p110γ） ）然后添加。通过加入在反应缓冲液中制备的5μL1μMATP开始反应，并且运行60（对于p110α，p110β和p110δ）或120分钟（对于p110γ）并且随后通过添加10μL激酶终止反应。 -Glo缓冲区。然后在Synergy 2读数器中读取平板用于发光检测[1]。
SMILES CN(C1=C2C3=CC(C4=CC5=CC=CC=C5N=C4)=CC=C3N=C1)C(N2C6=CC=C(C=C6)C(C)(C#N)C)=O
靶点 PI3K
动物实验 小鼠[2]将携带肿瘤的Apc CKO小鼠随机分配到单独使用对照载体（n = 8）或45 mg/kg体重BEZ235在10％1-甲基-2-吡咯烷酮/ 90％PEG 300中治疗（n = 8）每日口服强饲28天。基于文献选择治疗剂量，表明40-50mg/kg体重BEZ235有效地治疗小鼠肿瘤模型而没有副作用。基于在Dactolisib施用后1小时显示最大组织浓度的药代动力学研究，在最终治疗剂量后1小时处死荷瘤小鼠。使用卡尺（宽×长×高）评估结肠肿瘤体积，收集肿瘤用于蛋白质印迹分析和免疫组织化学。使用大鼠[3] MENX影响的大鼠。在MENX大鼠中测试三剂BEZ235：20,30和45mg/kg。由于两次较高剂量在治疗10天后导致体重减轻> 10％，因此20mg/kg的剂量用于进一步研究。对于MRI研究，在7至8个月大的MENX受影响的大鼠（具有相当大的腺瘤但仍具有良好的一般健康状况）用口服强饲法每日施用BEZ235（20mg/kg）或安慰剂（PEG）治疗14天。
细胞实验 HCT116（PIK3CA突变体; H1047R的激酶结构域），DLD-1（PIK3CA突变体; E545K的螺旋结构域）和SW480（PIK3CA野生型）人CRC细胞系（ATCC）和同基因DLD-1 PIK3CA突变体和野生型将细胞维持在含有10％FBS和1×青霉素/链霉素的DMEM中。以不同的初始密度接种细胞（HCT116：3,000个细胞/孔，DLD-1：5,500个细胞/孔，SW480：4,500个细胞/孔，DLD-1 PIK3CA突变体：7,000个细胞/孔，和DLD-1 PIK3CA野生型） ：9,000个细胞/孔）以解释差异生长动力学。 16小时后，将细胞与浓度增加的BEZ235（10,100,1000nM）一起温育，每24小时更换含药物的生长培养基。使用比色MTS测定CellTiter 96 AQueous One Solution Cell Proliferation Assay，在初始接种后16小时和药物治疗开始后48小时评估细胞活力。药物处理后的细胞活力标准化为也生长48小时的未处理细胞的细胞活力。使用GraphPad Prism 5 [2]中的4参数非线性回归计算IC 50值。
数据来源文献 [1]. Maira SM, et al. Identification and characterization of NVP-BEZ235, a new orally available dual phosphatidylinositol 3-kinase/mammalian target of rapamycin inhibitor with potent in vivo antitumor activity. Mol Cancer Ther, 2008, 7(7), 1851-1863.
[2]. Roper J, et al. The dual PI3K/mTOR inhibitor NVP-BEZ235 induces tumor regression in a genetically engineered mouse model of PIK3CA wild-type colorectal cancer. PLoS One, 2011, 6(9), e25132.
[3]. Lee M, et al. Targeting PI3K/mTOR Signaling Displays Potent Antitumor Efficacy against Nonfunctioning Pituitary Adenomas. Clin Cancer Res. 2015 Jul 15;21(14):3204-15
规格 10mg 25mg 50mg

BEZ235 是一种双重的 pan-class I PI3K 和 mTOR 抑制剂。