Mirus全能型转染试剂：TransIT-X2®应对多种核酸/蛋白及细胞类型

发表于2024年6月22日由上海金畔生物科技有限公司

基于需要递转不同种类核酸/蛋白类型研究，在细胞转染环节，研究者们常碰到如下三类问题：

1、细胞对化学试剂较为敏感，转染后，细胞活率下降或死亡；

2、研究常用细胞类型较多，不同类型细胞，转染效率差异较大，导致单个转染试剂或者实验流程，无法满足实验需求；

3、递转多种类型核酸或蛋白，需要挑选对应的转染试剂，并且需要大量实验优化，才可以得到较高的转染效率。

有没有一款化学转染试剂，可以同时应对常规到难转染的细胞类型，有着较低的细胞毒性，并且适用于多种核酸/蛋白类型递转呢？兼具多重功能、高性能的TransIT-X2^®转染试剂，可同时应对常见细胞及难转染细胞类型，避免条件摸索、大量的重复性实验，轻松地得到您理想的实验结果。

● 已验证在大多数细胞类型中(如贴壁/悬浮细胞、原代细胞、神经细胞等)，都有着优异的转染效率、低毒性(特别相对于形成脂质体复合物的Lipofectamine^®系列试剂)、高性能的表现；

● 适用于多种研究领域，包括不限于干细胞研究、基因编辑CRISPR研究、RNAi基因干扰/沉默、稳转细胞株构建、低毒性的转染实验、共转染实验等；

● 允许高效且稳定的同时递转多种核酸/蛋白类型，包括不限于质粒 DNA、siRNA/miRNA 和 CRISPR/Cas9 组分。

图1、Mirus产品年鉴

Mirus全能型转染试剂：TransIT-X2®应对多种核酸/蛋白及细胞类型

为什么 Mirus TransIT-X2^® Dynamic Delivery System （请见访问链接：https://www.mirusbio.com/product/transit-x2-dynamic-delivery-system-0-3-ml-0-3-ml/ ）有着如此高性能及广泛适应性呢？这归因于Mirus强大且高效的专利递转平台设计，可进行多重、多功能组合的转染试剂组分筛选并优化。成立于1995年的Mirus，专注及深耕核酸递转领域多年，从最早具有低毒性的TransIT ^® -LT1到GMP级别、可用于AAV和LV生产的TransIT-VirusGEN^®，都是基于该递转平台进行设计及开发。直至文稿发布时，使用Mirus产品发表文章已超过1万篇，并且发表文章及Mirus数据库涵盖了超过1千2百种细胞类型，更多文章及数据查询，请见访问链接：https://www.mirusbio.com/citation-search/。

图2、Mirus转染试剂原理示意图

Mirus全能型转染试剂：TransIT-X2®应对多种核酸/蛋白及细胞类型

不同于传统基于单组分的转染试剂(如阳离子聚合物或阳离子脂质体)，为了进一步提高转染效率，以应对不同细胞类型或特定的应用。Mirus将专利的多聚物(Polymer)及脂质(Lipids)技术进行多重组合，在不形成脂质体复合物(liposome，通常具有细胞毒性)前提条件下，得到多种类、高性能的转染方案，克服细胞递转过程中的多重阻碍，以实现更高效转染和更低的细胞毒性(图2)。

图3、Mirus独有智能迭代设计，转染试剂优化流程示意图

Mirus全能型转染试剂：TransIT-X2®应对多种核酸/蛋白及细胞类型

基于上述Mirus强大、高效的专利递转平台设计，在进行多重、多组合筛选、优化及后续验证。独有的智能迭代设计流程，优化转染技术中的每个组分。Mirus推出一系列经典转染试剂，以应对多种需求：

1、广谱、高性能、低毒性的转染试剂家族: TransIT-X2^®、TransIT^®-LT1、TransIT^®-2020

2、针对特定细胞类型的转染试剂家族：TransIT^®-293、TransIT^®-BrCa、TransIT^®-CHO、TransIT-HeLaMONSTER^®、TransIT^®-Insect、TransIT^®-Jurkat、TransIT^®-Keratinocyte

3、针对特定应用的转染试剂家族：

★.病毒生产：VirusGEN^® 转染试剂及配套试剂盒、TransIT^®-Lenti

★.蛋白/抗体生产：TransIT-PRO^®、CHOgro^® Expression System、CHOgro^® High Yield Expression System

4、寡核苷酸递转的转染家族：TransIT^®-Oligo、TransIT-siQUEST^®、TransIT-TKO^®

5、mRNA及长链RNA递转：TransIT^®-mRNA

Mirus TransIT-X2^®转染试剂性能数据展示图

4、TransIT-X2^®Dynamic Delivery System在包括原代细胞多种细胞类型中，具有较高转染效率。

Mirus全能型转染试剂：TransIT-X2®应对多种核酸/蛋白及细胞类型

Mirus TransIT-X2^®Dynamic Delivery System递转表达EGFP质粒DNA分别至A549、CHO-K1、Hep G2、MDCK、LNCaP、PC-12、原代人乳腺上皮细胞(HMEC)和正常人真皮成纤维细胞(NHDF)细胞中。实验使用96孔板， TransIT-X2^®试剂加入量为0.2-0.4µl，DNA加入量为0.1µg(使用试剂:DNA=2:1、3:1或4:1)。转染后48小时，使用Guava^® easyCyte™ 5HT流式细胞仪重复检测三次，评估转染效率。

图5、相较于使用单一组分且形成阳离子脂质体复合物(liposome)的Lipofectamine^®系列转染试剂，TransIT-X2^®有着更高的转染效率及更低细胞毒性

Mirus全能型转染试剂：TransIT-X2®应对多种核酸/蛋白及细胞类型

使用TransIT-X2^®(Mirus Bio)、Lipofectamine^®2000 (Thermo Fisher Scientific)或Lipofectamine^®3000 (Thermo Fisher Scientific)转染荧光素酶编码质粒DNA至A549 (A)或MDCK (B)细胞中，转染24小时，通过荧光素酶活性评估转染效率，定量受损细胞中释放的LDH评估细胞毒性。与Lipofectamine^®2000或Lipofectamine^®3000的细胞相比，在最佳试剂:DNA比例下，Trans – x2^®有着更高的荧光强度及更低的细胞毒性。

实验Tips: 针对更多特定细胞类型，试剂使用建议，详细请见：https://hub.mirusbio.com/m/d6a018920beec12e/original/Protocol-Optimization-Card.pdf

Mirus TransIT-X2^®在RNAi干扰实验中性能数据展示

图6、不同RNAi干扰途径示意图

Mirus全能型转染试剂：TransIT-X2®应对多种核酸/蛋白及细胞类型

基因沉默相关功能研究在分子和细胞生物学中发挥着重要作用，化学转染也在该研究领域扮演者重要角色。常见参与RNAi干扰途径的天然RNA分子包括：

★.小干扰 RNA (Small interfering RNAs, siRNA) ：由双链 RNA(dsRNA)断裂所产生的短双链 RNA(20-25bp)；

★.微小 RNA(MicroRNAs, miRNAs) ：非编码 RNA 处理后所产生的一类短的、单链 RNA(20-22nt)。

利用 RNAi 抑制基因表达的另一种方法为短发夹 RNA(short hairpin RNA , shRNA)，这些短 RNA 序列可通过病毒或非病毒载体方式进行表达，更多详细信息可查阅Mirus Applications | RNAi Gene Silencing。

请见访问链接：https://www.mirusbio.com/applications-rnai-gene-silencing/

图7、基于siRNA核酸递转类型的基因沉默研究，相比Lipofectamine^® 2000，TransIT-X2^®有着更高的基因沉默效率

Mirus全能型转染试剂：TransIT-X2®应对多种核酸/蛋白及细胞类型

TransIT-X2^®Dynamic Delivery System和Lipofectamine^®2000转染试剂用于转染siRNA(靶点为内源性蛋白质– GAPDH和AHA1)，对照使用正常人类真皮成纤维细胞(NHDF)递转非靶向siRNA。Trans IT-X2^®加入量为4µl， Lipofectamine^®2000加入量为6µl，siRNA加入量都为25 nM。使用qRT-PCR相对于18s rRNA水平测量GAPDH或AHA1 mRNA进行检测，转染后48小时均一化至非靶向对照组的mRNA水平，误差则为三次复孔实验的标准差。

图8、基于miRNA (miRNA Precursor及miRNA mimic)基因沉默研究，相比Lipofectamine^® 2000，TransIT-X2^®有着更高的基因沉默效率

Mirus全能型转染试剂：TransIT-X2®应对多种核酸/蛋白及细胞类型

TransIT-X2^®Dynamic Delivery System和Lipofectamine^®2000转染试剂用于转染Pre-miR™ hsa-miR-1 miRNA Precursor 或者mirVana™ miRNA mimic, miR-1 (两者都已验证，可降低PTK9 mRNA表达水平)。Pre-miR™阴性质控用于评估mRNA表达水平基线值。Trans IT-X2^®及Lipofectamine^®2000试剂加入量都为3µl，加入50 nM miRNA。使用qRT-PCR相对于18s rRNA水平，经过阴性质控的均一化，得到PTK9 mRNA表达水平值。

Mirus TransIT-X2^®在CRISPR基因编辑实验中性能数据展示

经过改造及优化的细菌 CRISPR/Cas9 系统，已被广泛应用到哺乳细胞的基因编辑中。基于CRISPR基因编辑实验常见两组分：Cas9蛋白及引导RNA(gRNA)。当Cas9蛋白切割了靶向基因组DNA，会触发两种内源性修复机制，即非同源末端连接(NHEJ)和同源定向修复(HDR)，以应对细胞中产生的DNA断裂。基于NHEJ细胞修复通路，为非精准、且容易出错细胞修复通路，可引入导致基因功能缺失的Indel。基于HDR的细胞修复通路，则需要额外的同源 DNA 作为修复模板，从而实现“精准”修复，在目的基因插入特定的基因或长片段序列。

Mirus全能型转染试剂：TransIT-X2®应对多种核酸/蛋白及细胞类型

【根据研究者们不同的实验需求】

CRISPR基因编辑可以有多种类型实验设置，这意味需要面对不同核酸类型的转染甚至共转染，举例如下：

1、质粒pDNA转染

作为CRIPSR实验关键两组分：Cas9蛋白及gRNA，可以设计单个质粒DNA，共同表达两组分(A)；或者使用两质粒系统，其中一个质粒表达Cas9蛋白，另外一个质粒表达gRNA(B)；当使用Cas9切口酶(Nickase)，则需要两条gRNA，这时可能需要三质粒系统的递转实验。

Mirus全能型转染试剂：TransIT-X2®应对多种核酸/蛋白及细胞类型

2、质粒DNA及RNA寡核苷酸共转染

此时，与上述实验设计不同的是，gRNA以寡核苷酸形式进行递转，这就意味着递转实验需要同时转染质粒DNA以及RNA寡核苷酸(A和B)。

Mirus全能型转染试剂：TransIT-X2®应对多种核酸/蛋白及细胞类型

3、mRNA及RNA寡核苷酸共转染

为了避免由于质粒DNA基因组整合而导致的脱靶效应，可以共转染编码Cas9蛋白的mRNA及gRNA (RNA寡核苷酸)。

Mirus全能型转染试剂：TransIT-X2®应对多种核酸/蛋白及细胞类型

4、Cas9/gRNA RNP复合物递转

随着Cas9蛋白及gRNA商品化趋于成熟，越来越多的研究者们选择直接从第三方购买高保真Cas9蛋白，以及有着额外化学修饰且在细胞内更稳定的gRNA寡核苷酸。除了极大的缩短和简化CRISPR实验流程外，相对于质粒或者mRNA方式合成，直接递转RNP复合物的方式有着更高的特异性及编辑效率。

Mirus全能型转染试剂：TransIT-X2®应对多种核酸/蛋白及细胞类型

实验Tips: 针对上述不同CRISPR实验设计及递转情形，TransIT-X2^® Dynamic Delivery System经优化的具体实验说明

下载链接如下：

https://tools.mirusbio.com/assets/technical-documents/transit-x2-dynamic-delivery-system-for-crispr-cas9-plasmid-and-grna-delivery.pdf

https://tools.mirusbio.com/assets/technical-documents/transit-x2-dynamic-delivery-system-for-crispr-cas9-plasmid-delivery.pdf

https://tools.mirusbio.com/assets/technical-documents/transit-x2-dynamic-delivery-system-for-crispr-cas9-rnp-ssodn-delivery.pdf

https://tools.mirusbio.com/assets/technical-documents/transit-x2-dynamic-delivery-system-for-crispr-cas9-rnp-delivery.pdf

图9、质粒DNA和gRNA寡核苷酸共转染：TransIT-X2^®分别在293T/17、U2OS和NHDF细胞中共转Cas9质粒DNA与gRNA(RNA寡核苷酸)，都有着较高的基因编辑效率(18-48%)

Mirus全能型转染试剂：TransIT-X2®应对多种核酸/蛋白及细胞类型

使用TransIT-X2^® Dynamic Delivery System (2 µl/孔，24孔板, Mirus Bio)共转染0.5 µg质粒DNA(表达Cas9蛋白)及50nM 2-part gRNA (PPIB基因)至HEK293T/17, U2OS 及NHDF细胞中，转染后48小时，T7E1验证切割效率。

图10、Cas9/gRNA RNP复合体递转：相较于Lipofectamine^®系列转染试剂，TransIT-X2^®有着更高的切割效率

Mirus全能型转染试剂：TransIT-X2®应对多种核酸/蛋白及细胞类型

2-part gRNA (PPIB基因，IDT) 及Cas9 蛋白(PNA Bio)形成RNP复合体，分别使用TransIT-X2^® Dynamic Delivery System(1 µl/孔， Mirus Bio)、Lipofectamine^® CRISPRMAX™ (1.5 µl/孔， ThermoFisher) 、Lipofectamine^® RNAiMAX (1.5 µl/孔, ThermoFisher) 、Lipofectamine^® 3000 (1.5 µl/孔ThermoFisher) 递转至293T/17及U2OS细胞中。测试gRNA两种使用量(6 nM或12 nM)，相同Cas9 蛋白加入量(6 nM)，转染后48小时，T7E1验证切割效率。

Mirus TransIT-X2^®产品优势

☑、新型基于多组分开发的广谱型转染试剂(适用于多种细胞，包括难转细胞)；

☑、可同时转染核酸及蛋白，包括不限于DNA，siRNA/miRNA和CRISPR/Cas9复合物；

☑、不形成脂质体复合物，降低细胞毒性；

☑、满足多种应用：基因过表达、基因沉默、基因编辑、干细胞研究、稳转细胞株构建等。

相关产品信息

产品名称	规格	货号
TransIT-X2^® Dynamic Delivery System	1×0.3ml	MIR6003
	1×0.75ml	MIR6004
	1×1.5ml	MIR6000
	5×1.5ml	MIR6005
	10×1.5ml	MIR6006

更多详情请咨询Mirus全国代理-上海金畔生物

Mirus Label IT®——高效、一步法用于In vitro 及 in vivo的多种核酸的新型标记技术

发表于2024年6月21日由上海金畔生物科技有限公司

Mirus Label IT®——高效、一步法用于In vitro 及 in vivo的多种核酸的新型标记技术

细胞转染这一环节，在科学实验中扮演着十分重要的角色，但也最容易被忽略的一环。转染或递转效率不仅影响实验结果，并且，最终得到的实验结果也可能是无效的。在多种类型核酸的细胞转染实验中，研究者们常需要进一步优化转染条件以达到最优的转染效率，特别是较难转染的细胞，而针对特定细胞类型选择对应专业化的转染试剂只是迈向转染实验成功的第一步。

成立于1995年的Mirus Bio，专注及深耕核酸递转领域多年，从最早具有低毒性的TransI^®-LT1到GMP级别、可用于AAV和LV生产的TransIT-VirusGEN^®(产品年鉴请见图1)。直至文稿发布时，使用Mirus产品发表文章已超过1万篇，并且发表文章及Mirus数据库涵盖了超过1千2百种细胞类型。

图① Mirus 产品年鉴

Mirus Label IT®——高效、一步法用于In vitro 及 in vivo的多种核酸的新型标记技术

在细胞转染实验中，研究者们常忽略转染效率/成功率的评估，那么是否有对应技术或者方法允许实时监测DNA/RNA的成功递送以及细胞内的分布状态呢？Mirus Bio Label IT^®核酸标记试剂盒为广大的科研工作者提供了一个方向。Label IT^®核酸标记试剂盒可对任何类型核酸，进行高效、直接的标记，并且为on-step的实验操作。基于非酶反应的标记方法，在不损伤核酸完整性、不影响基因表达的前提下，将选择的标记 (荧光、生物素、地高辛等)以共价的方式连接到核酸上。

Label IT^®试剂盒有多种标签可供选择，包括 Cy^®3、Cy^®5、CX-罗丹明、TM-罗丹明、荧光素、MFP488、地高辛、生物素和二硝基苯基(DNP)。Label IT^®核酸修饰试剂盒（胺）也可用于基于胺的功能基团进行 DNA 或 RNA修饰。产品特点如下：

● 可用于标记任何 DNA 或 RNA 模板

适用于多种应用 (In vitro & in vivo)，如Crispr基因编辑、核酸递转、RNA干扰/表达实验、FISH、Microarray等；

● 一步法标记

简单、轻松即可完成稳定的模版标记反应；

● 可根据实验需求或应用，调节标记的密度

以获得最佳检测标记 DNA 或RNA 的灵敏度；

● 基于共价化学反应

对核酸残基的修饰为永久性、无损伤的，是多种科研应用的理想选择。

► 什么是核酸标记？如何标记核酸？如何检测？

绝大多数基于分子和生物学的In vitro 及 in vivo研究都依赖于核酸的标记或标签，理想情况下，此类标记或标签不会影响核酸功能以及研究结果。因此，也发展出来多种核酸标记方式，大致可以归为以下两类：

Mirus Label IT®——高效、一步法用于In vitro 及 in vivo的多种核酸的新型标记技术

化学标记法：基于结合核酸的反应基团，比如Mirus Label IT^®核酸标记试剂盒属于此类，并且整个反应过程并不需要酶的参与。

Label IT^®化学标记试剂由三个部分组成：

① 标签/标记 (绿色区域)；

② Linker，与核酸进行静电相互作用 (黄色区域)；

③ Label IT^®试剂以共价形式连接到核酸中活性杂原子的烷基化基团(蓝色区域)。

基于酶反应标记法：通过酶促反应，在该反应过程中加入标记修饰的核酸。

当待研究的核酸加入标记后，可通过以下两种方式进行检测：

直接检测：这时，标记的核酸中包含了可用于光学、发光或产生荧光信号的报告分子。

间接检测：标记的核酸带有标签或标记，该标记需要特异性的结合报告偶联分子，如生物素结合带有荧光标记的链霉亲和素，地高辛结合带有荧光标记的特异性抗体等。

► Label IT^®核酸标记试剂盒——不改变核酸结构功能

基因沉默相关功能研究在分子和细胞生物学中发挥着重要作用，化学转染也在该研究领域扮演者重要角色。小干扰 RNA (Small interfering RNAs, siRNA)，常作为研究各种类型细胞中蛋白功能核酸类型，有效的knockdown从而影响基因表达。那么，加入Label IT^®标记的核酸，是否会改变核酸结构，从而影响到后续实验结果呢？

评估测试使用Label IT^®siRNA Tracker™ 试剂盒，将相同siRNA加入不同标记 (CyTM3, CyTM5, 荧光素, CX-罗丹明 )以及没有标记siRNA，转染后，可通过荧光显微镜观察到带有标记的siRNA。基因表达结果显示，带有不同标记的siRNA，其目的基因表达水平近似，意味着加入Label IT^®标记的核酸，并不影响目的基因表达及功能 (图2)。

图② Label IT^®siRNA Tracker™ 试剂盒评估测试

Mirus Label IT®——高效、一步法用于In vitro 及 in vivo的多种核酸的新型标记技术

► Label IT^®核酸标记试剂盒——前沿应用举例

应用一：使用Label IT^®技术，富集CRISPR’d细胞

Nasri 和 Mir 等人在文章中阐述了如何通过 Label IT^®技术，富集 CRISPR/Cas编辑成功的细胞。基因组编辑实验面临最大的挑战之一是如何从未编辑的细胞中成功的筛选/富集出成功编辑的细胞，特别当未被编辑的细胞相对于成功编辑的细胞，具有生长/增殖优势，使得细胞筛选变得更加困难。

为了高效的区分经过基因编辑及未编辑的细胞，作者在CRISPR引导RNA ( gRNA) 与 Cas9 形成复合物及转染细胞前，使用Label IT^®对gRNA进行了荧光标记，实验流程示意图如下：

Mirus Label IT®——高效、一步法用于In vitro 及 in vivo的多种核酸的新型标记技术

研究结果表明，使用Label IT^®标记的gRNA 不会影响基因编辑效率，并且可通过荧光分选/富集成功编辑的细胞群。进一步地，研究者们将该 CRISPR 实验流程应用于针对多种细胞类型的GADD45B基因编辑实验。根据细胞类型的不同，经过Label IT^®标记的细胞亚群中，其成功编辑细胞占比相对于总细胞群体提了15-40%。

发表文章信息：

标题: Fluorescent labeling of CRISPR/Cas9 RNP for gene knockout in HSPCs and iPSCs reveals an essential role for GADD45b in stress response
作者: Masoud Nasri, Perihan Mir et al.
杂志: Blood Adv, Volume 3(1), Jan 2019.
DOI: 10.1182/bloodadvances.2017015511

应用二：使用Label IT^®技术，聚焦于免疫系统研究

Label IT^®核酸标记技术可用于一种新型疫苗注射方法-微针阵列(microneedle array, MNA)的表征研究。传统的疫苗注射方法是通过 3 厘米以上长度的针头进行皮下注射，而微针阵列则是由微米级针头所组成(示意图如下)，以无痛的方式细微的的穿透皮肤，进入到富含免疫细胞群，可减少患者的不适感。

Mirus Label IT®——高效、一步法用于In vitro 及 in vivo的多种核酸的新型标记技术

为了提高疫苗的效力(efficacy)，通常会将免疫刺激分子或 “激动剂(agonists) “与疫苗的靶标或抗原一同加入疫苗制剂中。Edwards 等人的研究表明，双链 polyIC RNA 和单链 CpG DNA 寡核苷酸可作为微阵列中的激动剂(agonists)。并且，研究者们认为带负电荷的核酸激动剂(agonists)和带正电荷的抗原之间的静电相互作用，帮助了微阵列的组装。通过使用 Label IT^®Cy^®3 和 Cy^®5 ，分别针对以上两种核酸类型进行荧光标记，方便用于查看标记核酸在微针上的分布，这样就允许了研究者们按照所需要的特定比例，将两种激动剂均一的加入到微阵中，从而使得精确的调整微针阵列 MNA 疫苗的免疫反应成为可能。

发表文章信息：

标题: Tuning innate immune function using microneedles containing multiple classes of toll-like receptor agonists
作者: Camilla Edwards, Robert Oakes et al.
杂志: Nanoscale, Volume 15, Apr 2023.
DOI: 10.1039/D3NR00333G

► Label IT^®核酸标记试剂盒-产品选择

● Label IT^®试剂盒共有以下四种形式可供选择，以应对研究人员核酸标记实验的不同应用场景需求：

● Label IT^®Nucleic Acid Labeling Kits

● Label IT^®Tracker™ Intracellular Nucleic Acid Localization Kits

● Label IT^®siRNA Tracker™ Intracellular Localization Kits

●Label IT^®Nucleic Acid Modifying Kits

下表总结了不同种类Label IT^®试剂盒区别：

	Label IT^®Nucleic Acid Labeling	Label IT^®Tracker™	Label IT^®siRNA Tracker™	Label IT^®Nucleic Acid Labeling Modifying
应用	in vitro & in vivo应用的多种类型核酸标记	in vitro & in vivo质粒追踪实验	in vitro & in vivo siRNA追踪实验	DNA氨基修饰
试剂盒组分	Label IT^®Reagent Reconstitution Solution 10X Labeling Buffer Reagent D1& Buffer N1 G50 Microspin Columns	Label IT^®Reagent Reconstitution Solution 10X Labeling Buffer	Label IT^®Reagent Reconstitution Solution 10X Labeling Buffer siRNA Dilution Buffer	Label IT^®Reagent Reconstitution Solution 10X Labeling Buffer Reagent D1& Buffer N1 G50 Microspin Columns
Label IT^® : 核酸比例	1µl : 1µg	0.5 µl : 1µg	1µl : 1µg	0.5µl : 1µg
标记密度	每20-60bp 1个标记	每60-140bp 1个标记	每15-40bp 1个标记	每20-6 bp 1个标记
	Cy^®3 Cy^®5 荧光素 CX-罗丹明 TM-罗丹明生物素 MFP488 地高辛 DNP	Cy^®3 Cy^®5 荧光素 CX-罗丹明 TM-罗丹明生物素	Cy^®3 Cy^®5 荧光素 CX-罗丹明 TM-罗丹明生物素	氨基
试剂盒规格	25µl 100µl	50µl	50µl	25µl 100µl

更多有关产品常疑问FAQ，请查看官网链接

► Label IT^®核酸标记试剂盒-实验优化之核酸标记密度

理想的密度取决于被标记的核酸类型及后续下游应用。在需要直接追踪核酸的实验中，更适合较高的核酸标记密度；而在想要维持/完整的还原标记核酸的生物学功能的实验中，则更加适合较低的标记密度。使用 Label IT^®核酸标记技术，可以轻松调整到理想的标记密度。

Label IT^®试剂与核酸的比例(v:w)的改变与标记密度呈线性相关性(图 3)。例如，按照说明的初次实验建议，需加入 5 µl Label IT^®试剂标记 5 µg DNA，此时v:w比例为1:1。在保证孵育时间和 DNA 量不变的条件下，如将 Label IT^®试剂的量降低为 2.5 µl 或增加到10 µl，标记密度将分别降低一半或增加一倍。

实验Tips：使用过高的 Label IT^®试剂量（超过建议量的 4 倍），可能会导致核酸裂解或引起 Label IT^®荧光基团淬灭。

图③ Label IT^®核酸标记密度与所使用的 Label IT^®试剂量/孵育时间线性相关

核酸标记密度与所使用的 Label IT^®试剂量及反应的孵育时间呈正线性相关。可通过调整反应中 Label IT^®试剂的用量或反应的孵育时间 (孵育温度仍为37°C)，可轻松灵活的调整到所需要的理想标记密度。

Mirus Label IT®——高效、一步法用于In vitro 及 in vivo的多种核酸的新型标记技术

实验Tips：如何计算核酸标记密度，详细实验步骤及方法请见“Calculate Nucleic Acid Labeling Density”。

Mirus Bio公司介绍

Mirus成立于1995年，始终秉承着为基因递转提供最佳方法及最高效的工具。凭借超过 25 年转染领域的深根细作，获得了多项技术突破，已成为核酸递送领域的全球领导者和值得信赖的品牌。Mirus科学家团队不断突破转染技术的极限，推出了VirusGEN^®转染试剂与RevIT™增强剂，进一步提升AAV/Lv产量，助力推动生物治疗药物的降本增效，为CGT领域客户赋能。

更多详情请咨询 Mirus 全国一级代理-上海金畔生物

热烈祝贺Mirus Bio荣获ISO13485:2016认证

发表于2024年6月21日由上海金畔生物科技有限公司

热烈祝贺Mirus Bio荣获ISO13485:2016认证

2024年1月31日，Mirus Bio宣布其质量管理体系（QMS）已获得ISO 13485:2016认证。Mirus Bio目前正在开发核酸递送的创新解决方案，以支持细胞和基因治疗、生物制药和研究应用。ISO 13485:2016标准由国际标准化组织（ISO）制定，Mirus完成相关的全面认证过程，凸显了GMP产品组合所采用流程的高质量。

热烈祝贺Mirus Bio荣获ISO13485:2016认证

GMP相关产品

产品编号	产品名称	描述	规格
MIR 6815-GMP	VirusGEN GMP AAV Transfection Kit	适用于悬浮293细胞生产AAV病毒（GMP级别）	1 Kit – for 50 L of cell culture
MIR 6825-GMP	VirusGEN GMP LV Transfection Kit	适用于悬浮或贴壁293细胞生产慢病毒（GMP级别）	1 Kit – for 50 L of cell culture
MIR 6845-GMP	TransIT-VirusGEN GMP Transfection Reagent	适用于AAV和慢病毒生产的转染试剂（GMP级别）	150 ml – for 50 L of cell culture

详情请见Mirus Bio官网原文链接：

https://www.mirusbio.com/mirus-bio-receives-iso-134852016-certification/

MirusBio公司成立于1995年，是世界上最早开发高效、低细胞毒性转染试剂的公司之一，同时也是目前该类试剂最主要的供应商之一。MirusBio首先研发出siRNA转染试剂，率先向市场推出“一步法”核酸标记技术，拥有独特的小分子RNA如microRNA标记技术。作为转染试剂行业的领跑者，为您提供多种广谱性转染试剂、DNA转染试剂、RNA转染试剂、细胞系特异性转染试剂、寡核苷酸转染试剂、电转染试剂和体内转染试剂，助您转染无忧！

如需了解更多详细信息或相关产品，请联系MirusBio中国代理商-上海金畔生物

Mirus活体核酸递送(转染)实验试剂

发表于2024年6月19日由上海金畔生物科技有限公司

Mirus活体核酸递送(转染)实验试剂

活体转染是指可以直接应用于动物体的转染方法。Mirus的活体核酸递送(转染)实验试剂专门为小鼠设计，可以将核酸安全高效地注入活体实验室小鼠，可用于基因敲除研究中siRNA的传递或肝脏中的基因表达研究的DNA传递。

TransIT^®-QR Delivery Solution MIR 5240

特点：

裸核酸传递–与聚赖氨酸和PEI方法相比，实现更高水平的基因表达。

多功能平台–用于DNA或siRNA传递，使用流体动力尾静脉注射进小鼠体内。

超低细胞毒性:与生理盐水注射相比，心脏输出量损失最小，可在注射后(几分钟内)迅速恢复。

Mirus活体核酸递送(转染)实验试剂

TransIT-QR Delivery Solution将Label ITCy3 RNAi Delivery Control运送到肝细胞。使用TransIT-QR Delivery Solution通过尾静脉流体动力学将25µg Label ITCy3 RNAi Delivery Control(红色)运送给小鼠。注射45分钟后取肝切片固定，复染细胞核(蓝色)和肌动蛋白(绿色)。

Mirus活体核酸递送(转染)实验试剂

与使用生理盐水注射相比，TransIT-QR溶液最大限度地减少心输出量的损失。将小鼠麻醉后与动脉血压计相连，通过使用流体动力尾静脉注射系统注射TransIT-QR递送溶液（红色）或生理盐水（蓝色）至小鼠体内。以心率乘以脉压（收缩压和舒张压之间的差）来估计相对心输出量，并与注射前心输出量进行对比。

“增强表达”的体内递送试剂-TransIT-EE Delivery Solution MIR 5340

特点：

裸核酸传递–与TransIT- QR递送试剂、TransIT- In Vivo基因传递系统、聚赖氨酸和PEI方法相比，实现更高的基因表达水平。
多功能平台–适合使用流体动力尾静脉注射到小鼠中进行DNA传递。

Mirus活体核酸递送(转染)实验试剂

TransIT-EE试剂可增强肝脏中荧光素酶的表达。使用TransIT-QR或TransIT-EE递送试剂10 μg荧光素酶表达载体通过流体动力传递尾静脉注射系统运送给小鼠。注射24小时后收集肝脏并测定荧光素酶活性。

Mirus活体核酸递送(转染)实验试剂

TransIT-EE溶液可增强多种器官中荧光素酶的表达。使用TransIT-QR或TransIT-EE递送液，采用流体动力尾静脉注射系统将10µg pCI-Luc (CMV启动子驱动荧光素酶表达载体)运送至小鼠。注射24小时后收集器官并测定荧光素酶活性。

实验室小鼠肝脏中实现长期表达的载体系统—pLIVE体内表达/报告载体

货号	名称
MIR 5420	pLIVE Vector
MIR 5520	pLIVE Vector/lacZ Control Vector Kit
MIR 5620	pLIVE Vector/SEAP Control Vector Kit
MIR 5320	pLIVE Vector Complete System

特点：

持续的基因表达–注射后8个月，小鼠肝脏实现长期的肝脏基因表达

通用平台–可用于表达LacZ或SEAP的阳性对照载体

Mirus活体核酸递送(转染)实验试剂

pLIVE载体中的启动子在肝脏长期表达方面优于CMV启动子。pLIVE-SEAP载体(20 μg)和pCMV-SEAP (10 μg, CMV启动子驱动的SEAP载体)分别通过水动力尾静脉注射系统和TransIT-QR水动力运送液(MIR 5240)给4只ICR小鼠。在注射后的指定天数，收集每只小鼠的血清，使用Phospha-Light™SEAP测定试剂盒(Applied Biosystems)测定SEAP活性水平。比较每组的平均SEAP活性。

水动力尾静脉注射pLIVE-lacZ载体后ß-半乳糖苷酶在肝脏的强表达。 pLIVE-lacZ载体(图A)通过流体动力尾静脉注射系统和TransIT-QR流体动力运送溶液(MIR 5240)被输送到ICR小鼠体内。注射24小时后，取肝脏切片，X-gal染色，检测ß-半乳糖苷酶活性(蓝色细胞)。然后用苏木精和伊红Y复染细胞，分别染色细胞核和细胞质。图B中的对照组小鼠(lacZ阴性)与图A平行染色，未发现ß-半乳糖苷酶活性。

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Mirus Bio 核酸标记试剂盒

发表于2024年6月18日由上海金畔生物科技有限公司

Mirus Bio 核酸标记试剂盒

Mirus Bio公司是世界上最早开发高效、低细胞毒性转染试剂的公司之一，同时也是目前该类试剂最主要的供应商之一。本文主要给大家提供Mirus Bio 核酸标记试剂盒产品及其列表，如您需要购买以下产品或Mirus Bio公司其它产品，请联系代理商上海金畔生物。

Mirus Bio 核酸标记试剂盒

产品名称	产品货号	规格	品牌
Label IT® Nucleic Acid Labeling Kit, CX-Rhodamine/核酸标记试剂盒,CX-罗丹明	MIR 3100	labels 100 µg nucleic acid	Mirusbio
Label IT® Nucleic Acid Labeling Kit, CX-Rhodamine/核酸标记试剂盒,CX-罗丹明	MIR 3125	labels 25 µg nucleic acid	Mirusbio
Label IT® Nucleic Acid Labeling Kit, Fluorescein/核酸标记试剂盒,荧光素	MIR 3200	labels 100 µg nucleic acid	Mirusbio
Label IT® Nucleic Acid Labeling Kit, Fluorescein/核酸标记试剂盒,荧光素	MIR 3225	labels 25 µg nucleic acid	Mirusbio
Label IT® Nucleic Acid Labeling Kit, Digoxin/核酸标记试剂盒,地高辛	MIR 3300	labels 100 µg nucleic acid	Mirusbio
Label IT® Nucleic Acid Labeling Kit, Digoxin/核酸标记试剂盒,地高辛	MIR 3325	labels 25 µg nucleic acid	Mirusbio
Label IT® Nucleic Acid Labeling Kit, Biotin/核酸标记试剂盒,生物素	MIR 3400	labels 100 µg nucleic acid	Mirusbio
Label IT® Nucleic Acid Labeling Kit, Biotin/核酸标记试剂盒,生物素	MIR 3425	labels 25 µg nucleic acid	Mirusbio
Label IT® Nucleic Acid Labeling Kit, Cy®3/核酸标记试剂盒,Cy3	MIR 3600	labels 100 µg nucleic acid	Mirusbio
Label IT® Nucleic Acid Labeling Kit, Cy®3/核酸标记试剂盒,Cy3	MIR 3625	labels 25 µg nucleic acid	Mirusbio
Label IT® Nucleic Acid Labeling Kit, Cy®5/核酸标记试剂盒,Cy5	MIR 3700	labels 100 µg nucleic acid	Mirusbio
Label IT® Nucleic Acid Labeling Kit, Cy®5/核酸标记试剂盒,Cy5	MIR 3725	labels 25 µg nucleic acid	Mirusbio
Label IT® Nucleic Acid Labeling Kit, DNP/核酸标记试剂盒,DNP	MIR 3800	labels 100 µg nucleic acid	Mirusbio
Label IT® Nucleic Acid Labeling Kit, DNP/核酸标记试剂盒,DNP	MIR 3825	labels 25 µg nucleic acid	Mirusbio
Label IT® Nucleic Acid Modifying Kit, Amine/核酸修饰试剂盒,Amine	MIR 3900	Sufficient reagent for modifying 100 µg of nucleic acid	Mirusbio
Label IT® Nucleic Acid Modifying Kit, Amine/核酸修饰试剂盒,Amine	MIR 3925	Sufficient reagent for modifying 25 µg of nucleic acid	Mirusbio
Label IT® Nucleic Acid Labeling Kit, TM-Rhodamine/核酸标记试剂盒,TM-罗丹明	MIR 4100	labels 100 µg nucleic acid	Mirusbio
Label IT® Nucleic Acid Labeling Kit, TM-Rhodamine/核酸标记试剂盒,TM-罗丹明	MIR 4125	labels 25 µg nucleic acid	Mirusbio
Label IT® Nucleic Acid Labeling Kit, MFP488/核酸标记试剂盒,MFP488	MIR 7100	labels 100 µg nucleic acid	Mirusbio
Label IT® Nucleic Acid Labeling Kit, MFP488/核酸标记试剂盒,MFP488	MIR 7125	labels 25 µg nucleic acid	Mirusbio
Label IT® siRNA Tracker™ Intracellular Localization Kit, Cy®3/siRNA细胞内定位示踪标记试剂盒,Cy3	MIR 7212	labels 50 µg siRNA	Mirusbio
Label IT® siRNA Tracker™ Intracellular Localization Kit, Cy®5/siRNA细胞内定位示踪标记试剂盒,Cy5	MIR 7213	labels 50 µg siRNA	Mirusbio
Label IT® siRNA Tracker™ Intracellular Localization Kit, CX-Rhodamine/siRNA 细胞内定位示踪标记试剂盒,CX-Rhodamine	MIR 7214	labels 50 µg siRNA	Mirusbio
Label IT® siRNA Tracker™ Intracellular Localization Kit, TM-Rhodamine/siRNA 细胞内定位示踪标记试剂盒,TM-Rhodamine	MIR 7215	labels 50 µg siRNA	Mirusbio
Label IT® siRNA Tracker™ Intracellular Localization Kit, Fluorescein/siRNA细胞内定位示踪标记试剂盒,荧光素	MIR 7216	labels 50 µg siRNA	Mirusbio
Label IT® siRNA Tracker™ Intracellular Localization Kit, Biotin Labeling/siRNA细胞内定位示踪标记试剂盒,生物素	MIR 7217	labels 50 µg siRNA	Mirusbio

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Mirus Bio RNA转染试剂及产品用途

发表于2024年6月18日由上海金畔生物科技有限公司

Mirus Bio RNA转染试剂及产品用途

Mirus Bio公司是世界上最早开发高效、低细胞毒性转染试剂的公司之一，同时也是目前该类试剂最主要的供应商之一。本文主要给大家提供Mirus Bio RNA转染试剂产品列表及用途，如您需要购买以下产品或Mirus Bio公司其它产品，请联系代理商上海金畔生物。

Mirus Bio RNA转染试剂及用途

产品名称	产品货号	规格	品牌
TransIT-siQUEST® Transfection Reagent/高效低毒的哺乳动物细胞siRNA转染试剂	MIR 2110	1.5 ml	Mirusbio
TransIT-siQUEST® Transfection Reagent/高效低毒的哺乳动物细胞siRNA转染试剂	MIR 2114	0.4 ml	Mirusbio
TransIT-siQUEST® Transfection Reagent/高效低毒的哺乳动物细胞siRNA转染试剂	MIR 2115	5 x 1.5 ml	Mirusbio
TransIT-siQUEST® Transfection Reagent/高效低毒的哺乳动物细胞siRNA转染试剂	MIR 2116	10 x 1.5 ml	Mirusbio
TransIT-TKO® Transfection Reagent/高效低毒的哺乳动物细胞siRNA和质粒DNA转染试剂	MIR 2150	1.5 ml	Mirusbio
TransIT-TKO® Transfection Reagent/高效低毒的哺乳动物细胞siRNA和质粒DNA转染试剂	MIR 2154	0.4 ml	Mirusbio
TransIT-TKO® Transfection Reagent/高效低毒的哺乳动物细胞siRNA和质粒DNA转染试剂	MIR 2155	5 x 1.5 ml	Mirusbio
TransIT-TKO® Transfection Reagent/高效低毒的哺乳动物细胞siRNA和质粒DNA转染试剂	MIR 2156	10 x 1.5 ml	Mirusbio
TransIT®-mRNA Transfection Kit/适用于大分子量RNA和CRISPR guide RNA的高效低毒转染试剂	MIR 2225	0.4 ml	Mirusbio
TransIT®-mRNA Transfection Kit/适用于大分子量RNA和CRISPR guide RNA的高效低毒转染试剂	MIR 2250	1 ml	Mirusbio
TransIT®-mRNA Transfection Kit/适用于大分子量RNA和CRISPR guide RNA的高效低毒转染试剂	MIR 2255	5 x 1 ml	Mirusbio
TransIT®-mRNA Transfection Kit/适用于大分子量RNA和CRISPR guide RNA的高效低毒转染试剂	MIR 2256	10 x 1 ml	Mirusbio

关于Mirus Bio转染试剂：

Mirus Bio的大部分转染试剂可以在含有血清的培养基中进行转染，省去了更换培养基的麻烦。TransIT-L1是Mirus产品的王牌，自1995年开发出来就申请了美国专利(US 5,744,335)。该项专利技术后来License给了Roche公司，以Fugene 6的品牌对外销售。TransIT-TKO & siQUEST转染试剂是常规siRNA转染试剂的王牌，与脂质体介导的转染试剂相比，该转染试剂可以高效转染siRNA，并且极大地降低了细胞的损伤程度。该试剂与siRNA混合转染细胞时，可以特异性剔除某些基因的表达，用于siRNA介导的基因沉默现象的研究。TransIT-Oligo转染试剂是即用型试剂，可以高效地将各种类型的寡聚核苷酸和寡聚脱氧核苷酸转染至受体细胞中。此外，Mirus Bio还开发了专门针对特殊细胞的体外转染试剂，例如分别针对Jurkat，COS，3T3等细胞的转染试剂。Mirus Bio的科学家们新近开发了一种新的DNA转染试剂：TransITTM-2020 Transfection Reagent。TransITTM的性能优于FuGENETM、LipofectamineTM 2000和 LipofectamineTM 2000 CD；可在多种类型的细胞（包括难转染细胞）中实现高表达。

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Mirus Bio DNA转染试剂

发表于2024年6月18日由上海金畔生物科技有限公司

Mirus Bio DNA转染试剂

Mirus Bio公司是世界上最早开发高效、低细胞毒性转染试剂的公司之一，同时也是该类试剂最主要的供应商之一。本文主要给大家提供Mirus Bio DNA转染试剂产品列表，如您需要购买以下产品或Mirus Bio公司其它产品，请联系代理商上海金畔生物。

Mirus Bio DNA转染试剂

产品名称	产品货号	规格	品牌
TransIT®-Jurkat Transfection Reagent/适用于Jurkat和其他难转细胞系的高效DNA转染试剂	MIR 2120	1 ml	Mirusbio
TransIT®-Jurkat Transfection Reagent/适用于Jurkat和其他难转细胞系的高效DNA转染试剂	MIR 2124	0.4 ml	Mirusbio
TransIT®-Jurkat Transfection Reagent/适用于Jurkat和其他难转细胞系的高效DNA转染试剂	MIR 2125	5 x 1 ml	Mirusbio
TransIT®-Jurkat Transfection Reagent/适用于Jurkat和其他难转细胞系的高效DNA转染试剂	MIR 2126	10 x 1 ml	Mirusbio
TransIT®-CHO Transfection Kit/适用于各种CHO细胞系的高效低毒DNA转染试剂	MIR 2170	1 ml	Mirusbio
TransIT®-CHO Transfection Kit/适用于各种CHO细胞系的高效低毒DNA转染试剂	MIR 2174	0.4 ml	Mirusbio
TransIT®-CHO Transfection Kit/适用于各种CHO细胞系的高效低毒DNA转染试剂	MIR 2175	5 x 1 ml	Mirusbio
TransIT®-CHO Transfection Kit/适用于各种CHO细胞系的高效低毒DNA转染试剂	MIR 2176	10 x 1 ml	Mirusbio
TransIT®-LT1 Transfection Reagent/广谱低毒的DNA转染试剂	MIR 2300	1 ml	Mirusbio
TransIT®-LT1 Transfection Reagent/广谱低毒的DNA转染试剂	MIR 2304	0.4 ml	Mirusbio
TransIT®-LT1 Transfection Reagent/广谱低毒的DNA转染试剂	MIR 2305	5 x 1 ml	Mirusbio
TransIT®-LT1 Transfection Reagent/广谱低毒的DNA转染试剂	MIR 2306	10 x 1 ml	Mirusbio
TransIT®-293 Transfection Reagent/适用于293细胞系的DNA转染试剂	MIR 2700	1 ml	Mirusbio
TransIT®-293 Transfection Reagent/适用于293细胞系的DNA转染试剂	MIR 2704	0.4 ml	Mirusbio
TransIT®-293 Transfection Reagent/适用于293细胞系的DNA转染试剂	MIR 2705	5 x 1 ml	Mirusbio
TransIT®-293 Transfection Reagent/适用于293细胞系的DNA转染试剂	MIR 2706	10 x 1 ml	Mirusbio
TransIT®-Keratinocyte Transfection Reagent/适用于角质形成细胞的DNA转染试剂	MIR 2800	1 ml	Mirusbio
TransIT®-Keratinocyte Transfection Reagent/适用于角质形成细胞的DNA转染试剂	MIR 2804	0.4 ml	Mirusbio
TransIT®-Keratinocyte Transfection Reagent/适用于角质形成细胞的DNA转染试剂	MIR 2805	5 x 1 ml	Mirusbio
TransIT®-Keratinocyte Transfection Reagent/适用于角质形成细胞的DNA转染试剂	MIR 2806	10 x 1 ml	Mirusbio
TransIT-HeLaMONSTER® Transfection Kit/适用于HeLa细胞的DNA转染试剂	MIR 2900	1 ml	Mirusbio
TransIT-HeLaMONSTER® Transfection Kit/适用于HeLa细胞的DNA转染试剂	MIR 2904	0.4 ml	Mirusbio
TransIT-HeLaMONSTER® Transfection Kit/适用于HeLa细胞的DNA转染试剂	MIR 2905	5 x 1 ml	Mirusbio
TransIT-HeLaMONSTER® Transfection Kit/适用于HeLa细胞的DNA转染试剂	MIR 2906	10 x 1 ml	Mirusbio
TransIT®-2020 Transfection Reagent/无动物成分广谱DNA转染试剂	MIR 5400	1 ml	Mirusbio
TransIT®-2020 Transfection Reagent/无动物成分广谱DNA转染试剂	MIR 5404	0.4 ml	Mirusbio
TransIT®-2020 Transfection Reagent/无动物成分广谱DNA转染试剂	MIR 5405	5 x 1 ml	Mirusbio
TransIT®-2020 Transfection Reagent/无动物成分广谱DNA转染试剂	MIR 5406	10 x 1 ml	Mirusbio
TransIT®-BrCa Transfection Reagent/适用于乳腺癌细胞系的DNA转染试剂	MIR 5500	1 ml	Mirusbio
TransIT®-BrCa Transfection Reagent/适用于乳腺癌细胞系的DNA转染试剂	MIR 5504	0.4 ml	Mirusbio
TransIT®-BrCa Transfection Reagent/适用于乳腺癌细胞系的DNA转染试剂	MIR 5505	5 x 1 ml	Mirusbio
TransIT®-BrCa Transfection Reagent/适用于乳腺癌细胞系的DNA转染试剂	MIR 5506	10 x 1 ml	Mirusbio
TransIT®-Insect Transfection Reagent/专门用于昆虫细胞系的DNA转染试剂	MIR 6100	1 ml	Mirusbio
TransIT®-Insect Transfection Reagent/专门用于昆虫细胞系的DNA转染试剂	MIR 6104	0.4 ml	Mirusbio
TransIT®-Insect Transfection Reagent/专门用于昆虫细胞系的DNA转染试剂	MIR 6105	5 x 1 ml	Mirusbio
TransIT®-Insect Transfection Reagent/专门用于昆虫细胞系的DNA转染试剂	MIR 6106	10 x 1 ml	Mirusbio

关于Mirus Bio转染试剂：

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Mirus新上市RevIT™ AAV Enhancer，提高AAV产量的又一利器！

发表于2024年6月18日由上海金畔生物科技有限公司

Mirus新上市RevIT™ AAV Enhancer，提高AAV产量的又一利器！

腺相关病毒 (AAV) 是基因治疗中使用最广泛的传递机制。近年来，基于AAV病毒所开发的基因疗法的研发及临床试验注册数量也呈指数级增长。截止本文撰写之时，美国食品和药物管理局已批准五项AAV疗法，也是全球市场上最为昂贵的药物，其中售价最高的Hemgenix®，每剂约为350万美元。由于该疗法每剂量可能需要1011-1016病毒载量，如何实现高效的AAV生产，已成为工艺流程优化中的重要一环。

Mirus成立于1996年，在核酸递送领域深耕多年，TransIT-VirusGEN® GMP 转染试剂支持 AAV及慢病毒(LV)从科研到GMP商业级别生产。不同于传统基于单组分的转染试剂(如阳离子聚合物聚乙烯亚胺，PEI)，Mirus将专利的多聚物及脂质技术进行多重组合，针对不同细胞类型，不同应用场景，有着不同转染方案。

Mirus新上市RevIT™ AAV Enhancer，提高AAV产量的又一利器！

在病毒生产工艺方面，除了需要克服细胞递转过程中的多重阻碍，以实现更高效转染和更低细胞毒性；增强子的加入，可大幅度提升多种血清型AAV病毒生产载量。但Mirus并没有止步于此，为了进一步提高下游生产中的AAV病毒基因组产量，今年七月底Mirus发布用于AAV生产的RevIT™ AAV Enhancer，可搭配Mirus TransIT-VirusGEN® GMP 转染试剂或其他品牌转染试剂 (PEI)。基于HEK293悬浮细胞数据，相对于老版本AAV生产，RevIT™ AAV Enhancer可提高AAV基因组滴度1.2-4.9倍，并且便于使用，很容易整合入现有AAV生产工艺工作流程中。Mirus RevIT™ AAV Enhancer的推出，使得AAV上产上游成本进一步降低成为可能，降低了基因治疗单剂量成本。

Mirus新上市RevIT™ AAV Enhancer，提高AAV产量的又一利器！

● RevIT™ AAV Enhancer：可1.2-4.9X提升AAV病毒基因组滴度

平行对比Mirus TransIT-VirusGEN®搭配老版本AAV增强子(VirusGen + Enh 1.0)以及新版本RevIT™ AAV Enhancer (VirusGen + RevIT)，针对不同血清型 AAV2、AAV8、AAV9，AAV基因组滴度分别有着1.6、4.9以及1.2倍提升。除此之外，实验结果显示，在测试的所有血清型中，使用RevIT™ AAV Enhancer也在不同程度上得到更高比例的实心率 (图1)。实验结果表明，在搭配Mirus TransIT-VirusGEN®转染试剂时，可显著提高病毒基因组滴度(GC/mL)及实心率(%Full Capsids)。

✍图1. 在加入RevIT™ AAV Enhancer后，相比Mirus老版本增强子，可1.2-4.9X提升AAV基因组拷贝数，改善AAV病毒实心率。

Mirus新上市RevIT™ AAV Enhancer，提高AAV产量的又一利器！

● RevIT™ AAV Enhancer：具有广泛适配性，可搭配其他品牌转染试剂（PEI），AAV病毒基因组滴度有着显著提升

平行测试两个品牌转染试剂：Polyplus FectoVIR® 病毒转染试剂(“Polymer F”)以及Polyplus PEIpro®病毒转染试剂(“Polymer P”)，在加入Mirus RevIT™ AAV Enhancer，针对不同血清型AAV2、AAV8、AAV9，AAV基因组滴度分别有着1.7-2.0x、1.7-2.2x、2.2-2.3x提升(图2)。实验结果表明，在搭配其他品牌病毒转染试剂时，Mirus RevIT™ AAV Enhancer可显著提高AAV病毒基因组滴度(GC/mL)。

✍图2. “Polymer F”以及“Polymer P”病毒转染试剂，在搭配Mirus RevIT™ AAV Enhancer，针对不同血清型，其AAV病毒基因组滴度都有着显著提升。

Mirus新上市RevIT™ AAV Enhancer，提高AAV产量的又一利器！

● RevIT™ AAV Enhancer：具有广泛的适配性，可适用于不同培养基体系

TransIT-VirusGEN®转染试剂搭配RevIT™ AAV Enhancer，在不同类型病毒生产培养基中，具有很好的兼容性。测试使用293-VP 2.0细胞，搭配培养基类型包括VPM (Thermo Fisher) 及 BalanCD HEK 293 (Irvine Scientific)。实验结果表明，针对不同血清型AAV2、AAV5、AAV8、AAV9，RevIT™ AAV Enhancer在不同培养基实验条件下，AAV病毒基因组滴度提升方面并无显著差异。

✍图3. 更换不同品牌病毒生产培养基，AAV病毒基因组滴度的增加无显著差异。

Mirus新上市RevIT™ AAV Enhancer，提高AAV产量的又一利器！

● RevIT™ AAV Enhancer：实验流程灵活性，不同加入时间窗口有着近似表现

为了进一步确定加入RevIT™ AAV Enhancer可有效提高AAV病毒基因组载量，是否需要严格把控加入时间窗口。平行测试不同加入时间点，包括转染前30或60分钟、转染时及转染后。实验结果显示，相对于对照，在加入RevIT™ AAV Enhancer不同测试时间点， AAV8病毒基因组滴度都有稳步的提升(2倍)，并且病毒实心率稳定保持在相同水平。该组实验结果表明，RevIT™ AAV Enhancer加入时间点的灵活性，一定程度上简化了生产工作流。

✍图4. RevIT™ AAV Enhancer加入时间点的灵活性

Mirus新上市RevIT™ AAV Enhancer，提高AAV产量的又一利器！

● 实验tips：如何进行病毒转染试剂评估？什么是病毒载量？如何检测？

更多详细信息，请查看Technical Resources中Virus Titer Reference Card

Mirus新上市RevIT™ AAV Enhancer，提高AAV产量的又一利器！

➦ 相关产品信息

产品名称	规格	货号	链接
RevIT™ AAV Enhancer	1.5 ml	MIR 8000	link
RevIT™ AAV Enhancer	10 x 1.5 ml	MIR 8006
VirusGEN® AAV转染试剂及RevIT™ AAV Enhancer	For 1L of Culture	MIR 8007
VirusGEN® AAV转染试剂及RevIT™ AAV Enhancer	For 10L of Culture	MIR 8008
TransIT-VirusGEN®转染试剂	0.3 ml	MIR 6703	link
	0.75 ml	MIR 6704
	1.5 ml	MIR 6700
	5 x 1.5 ml	MIR 6705
	10 x 1.5 ml	MIR 6706
	30 ml	MIR 6720
TransIT-VirusGEN® GMP级别转染试剂	150 ml	MIR 6845-GMP	link
VirusGEN® AAV转染试剂(套装)	1 kit for 1 L of cell culture	MIR 6750	link
VirusGEN® GMP级别AAV转染试剂(套装)	1 Kit – for 50 L of cell culture	MIR 6815-GMP	link
VirusGEN® LV转染试剂(套装)	1 kit for 1 L of cell culture	MIR 6760	link
VirusGEN® GMP级别LV转染试剂(套装)	1 Kit – for 50 L of cell culture	MIR 6825-GMP	link

➦ 需要查找或者选择适合转染试剂产品？

请登录Mirus官网线上工具Reagent Agent®，支持超过1000种细胞类型、多种核酸类型转染试剂查询。

Mirus新上市RevIT™ AAV Enhancer，提高AAV产量的又一利器！

➦ Mirus产品年鉴

Mirus新上市RevIT™ AAV Enhancer，提高AAV产量的又一利器！

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Mirus TransIT-VirusGEN®Lentivirus System ——用于大规模生产慢病毒的转染工具

发表于2024年6月17日由上海金畔生物科技有限公司

Mirus TransIT-VirusGEN®Lentivirus System ——用于大规模生产慢病毒的转染工具

越来越多的病毒载体作为转运核酸的重要工具。慢病毒，重组腺相关病毒，逆转录病毒和逆转录病毒是目前主要的系统。

慢病毒是一种包膜的单链RNA病毒，来自逆转录病毒，可以感染分裂和不分裂的细胞。慢病毒系统已经被广泛应用到各种细胞系的基因过表达、RNA 干扰、microRNA 研究以及活体动物实验中。腺病毒与有效的宿主基因组结合整合，这种能力导致重组慢病毒成为中心基因用于目标细胞中稳健和稳定的转基因表达的交付工具。然而受限于慢病毒平台的病毒滴度较低，需要在使用前浓缩。为了解决由于这一限制，Mirus Bio开发了VirusGEN^®慢病毒表达系统（VirusGEN^®Lentivirus System），能够通过增强 gag，pol，rev和VSV-G 基因的递送和表达实现在贴壁或悬浮的HEK293来源的细胞类型中产生的高滴度慢病毒。

TransIT^®慢病毒系统有以下几个组分，如果需要较大规格，请联系我们：

慢病毒表达系统	组分货号	名称	规格
MIR 6650	MIR 6603	TransIT®-Lenti Transfection Reagent	0.3ml
	MIR 6630	Lentivirus Packaging Mix*	5rxn(0.25ml)
	MIR 6620	TransduceIT™ Reagent	1ml
MIR 6655	MIR 6600	TransIT®-Lenti Transfection Reagent	1.5ml
	MIR 6640	Lentivirus Packaging Mix*	34rxn(1.7ml)
	MIR 6620	TransduceIT™ Reagent	1ml

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Mirus — CHO蛋白表达系统提供高蛋白产率

发表于2024年6月16日由上海金畔生物科技有限公司

Mirus — CHO蛋白表达系统提供高蛋白产率

在原有CHOgro™ Expression System产品基础上，Mirus公司推出第二代悬浮CHO细胞瞬时转染和高滴度蛋白生产表达系统，该产品中包含CHOgro®滴度增强剂这一重要组分，大大提高了载体转染到悬浮CHO细胞的转染效率以及蛋白的产量。与市场上同类产品相比，具有其独特的优势。

产品组成：

CHOgro® High Yield Expression System

CHOgro® Expression Medium（CHOgro®表达培养基）(2 x MIR 6200, 2 x 1L);

CHOgro® Complex Formation Solution CHOgro®络合物形成溶液(MIR 6210, 100mL);

Poloxamer 188 Solution泊洛沙姆188 (MIR 6230, 100mL);

L-Glutamine 左旋谷氨酰胺(MIR 6240, 100mL);

TransIT-PRO® Transfection Reagent（TransIT-PRO®转染试剂） (MIR 5740, 1mL);

CHOgro® Titer Enhancer（CHOgro®滴度增强剂） (20mL)

注：除了 CHOgro® Titer Enhancer组分，其他组分均可单独购买。

CHOgro® Transfection and Titer Enhancer Kit

TransIT-PRO® Transfection Reagent （TransIT-PRO®转染试剂）(MIR 5740, 1mL);

CHOgro® Titer Enhancer (20mL) （CHOgro®滴度增强剂）;

注：除了 CHOgro® Titer Enhancer组分，其他组分均可单独购买。 CHOgro® High Yield Expression System

产品特点：

高产量：可在转染7天内达到较高的抗体滴度水平，比ExpiCHO表达系统更高效；

简单方便：一天内可完成转染以及CHOgro®滴度增强剂的添加；

无忧转染：无需商业许可，无动物源性成分


上图为使用 CHOgro® HighYieldExpressionSystem和 ExpiCHOExpressionSystem,将不同的构建载体转染到CHO细胞中，蛋白的产量。从结果可以看出，使用CHOgro® HighYield Expression System表达系统可得到更高产量的蛋白。	上图结果表明：使用CHOgro®滴度增强剂不会对转染后的细胞生长和活力产生不利影响。

上图为单独使用TransIT-PRO®以及联合使用CHOgro®滴度增强剂对不同Fc-融合构建载体进行转染。结果表明使用CHOgro®滴度增强剂可显著提高转染效率，得到更高滴度的蛋白。	上图为使用不同的转染试剂将DNA转染到细胞后,观察IgG蛋白的产量。实验结果表明TransIT-PRO®+CHOgro®滴度增强剂显著优于PEImax和线性25 kDa PEI转染试剂，可得到更高产量的IgG。

产品名称	产品货号	规格
CHOgro® High Yield Expression System	MIR 6270	1Kit
CHOgro® Transfection and Titer Enhancer Kit	MIR 6225	1Kit

试剂盒组分信息	产品货号	规格
TransIT-PRO Transfection Reagent	MIR 5740	1×1 ml
CHOgro™ Expression Medium	MIR 6200	2x1000ml
CHOgro™ Complex Formation Solution	MIR 6210	1x100ml
Poloxamer 188, 10% Solution	MIR 6230	1x100ml
L-Glutamine, 200mM Solution in 0.85% NaCl	MIR 6240	1x100ml

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