LRRK2-IN-1
货号：
IL1500
品牌：
Jinpan
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产品简介
| CAS | 1234480-84-2 |
| 分子式 | C31H38N8O3 |
| 分子量 | 570.69 |
| 储存条件 | -20℃ |
| 纯度 | ≥98% |
| 单位 | 瓶 |
| 生物活性 | LRRK2-IN-1 是一种有效的, 选择性的 LRRK2 抑制剂, 作用于 LRRK2 (G2019S) 和 LRRK2 (WT) , IC50 值分别为 6 nM 和 13 nM[1-4]。 |
| IC50 | IC50: 13 nM (WT) , 6 nM (G2019S) [1-4] |
| In Vitro | 野生型和G2019S转导导致TR-FRET信号高2.5倍, LRRK2-IN-1可以剂量依赖性方式抑制, IC50值分别为0.08μM和0.03μM[1]。 LRRK2-IN-1对DCLK2的抑制具有45nM的IC50, 并且当在AURKB, CHEK2, MKNK2, MYLK, NUAK1和PLK1的生化测定中评估时, IC50显示大于1μM。确认LRRK2-IN-1抑制MAPK7, EC50为160nM。 LRRK2-IN-1诱导Ser910和Ser935磷酸化的剂量依赖性抑制, 伴随14-3-3与野生型LRRK2和稳定转染HEK293细胞的LRRK2 [G2019S]的结合丧失[2]。 LRRK2-IN-1具有中等细胞毒性, HepG2细胞中IC50为49.3μM。 LRRK2-IN-1在存在和不存在S9时分别在15.6和3.9μM时表现出遗传毒性[3]。 LRRK2-IN-1抑制增殖, 迁移和诱导细胞死亡, 具有HCT116和AsPC-1细胞凋亡的标志[4]。 |
| In Vivo | LRRK2-IN-1 (100 mg / kg, ip) 诱导小鼠肾脏中LRRK2的去磷酸化[2]。瘤周注射LRRK2-IN-1 (100mg / kg) 导致肿瘤体积和AsPC-1肿瘤异种移植物重量的显着降低[4]。 |
| 激酶实验 | 活化GST-LRRK2 (1326-2527) , GST-LRRK2 [G2019S] (1326-2527) , GST-LRRK2 [A2016T] (1326-2527) 和GST-LRRK2 [A2016T + G2019S] (1326-2527) 酶被纯化在瞬时转染合适的cDNA构建体后36小时, 用来自HEK293细胞裂解物的谷胱甘肽琼脂糖凝胶。一式两份进行肽激酶测定, 在50mM Tris / HCl, pH 7.5, 0.1mM的50mM Tris / HCl中, 含有0.5μgLRRK2激酶 (纯度约10％, 终浓度为8 nM) 的总体积为40μL。 EGTA, 10mM MgCl2, 20μMN含, 0.1μM[γ-32P] ATP (500cpm / pmol) 和指定浓度的抑制剂溶解在DMSO中。在30℃温育15分钟后, 通过将35μL反应混合物点在P81磷酸纤维素纸上并浸入50mM磷酸中终止反应。广泛洗涤样品, 通过切伦科夫计数定量[γ-32P] ATP向Nictide中的掺入。使用GraphPad Prism使用非线性回归分析计算IC 50值。 |
| SMILES | O=C(C1=CC(OC)=C(NC2=NC=C3C(N(C4=C(C(N3C)=O)C=CC=C4)C)=N2)C=C1)N5CCC(CC5)N6CCN(CC6)C |
| 靶点 | LRRK2 |
| 动物实验 | 将LRRK2-IN-1溶解于Captisol中, 并通过腹膜内注射给予野生型雄性C57BL / 6小鼠, 剂量为100mg / kg。对照小鼠注射等体积的Captisol。在1小时和2小时的时间点, 通过颈椎脱位对小鼠进行熄灭, 并快速解剖肾脏和脑组织并在液氮中快速冷冻。 |
| 细胞实验 | 将细胞 (每孔104个细胞) 一式三份接种到96孔组织培养板中。在存在LRRK2-IN-1的情况下, 用DMSO作为载体, 在0, 0.31, 0.63, 1, 2和5, 10和20μM下培养细胞。处理后48小时, 向每个孔中加入10μLTACSMTT试剂, 并将细胞在37℃温育直至细胞中可见深色结晶沉淀。然后将100μL在DMSO中的266mM NH 4 OH加入孔中并以低速放置在平板振荡器上1分钟。摇动后, 将平板在光照下孵育10分钟, 并使用酶标仪读取每个孔的OD550。将结果平均并计算为DMSO (媒介物) 对照的百分比+/-平均值的标准误差。 |
| 数据来源文献 | [1]. Hermanson SB, et al. Screening for Novel LRRK2 Inhibitors Using a High-Throughput TR-FRET Cellular Assay for LRRK2 Ser935 Phosphorylation.PLoS One. 2012; 7 (8) :e43580. Epub 2012 Aug 28.
[2]. Deng, Xianming., et al. Characterization of a selective inhibitor of the Parkinson’s disease kinase LRRK2. Nature Chemical Biology (2011) , 7 (4) , 203-205. [3]. Koshibu K, et al. Alternative to LRRK2-IN-1 for Pharmacological Studies of Parkinson’s Disease. Pharmacology. 2015; 96 (5-6) :240-7. [4]. Weygant N, et al. Small molecule kinase inhibitor LRRK2-IN-1 demonstrates potent activity against colorectal and pancreatic cancer through inhibition of doublecortin-like kinase 1. Mol Cancer. 2014 May 6; 13:103 |
| 备注 | 以上数据均来自公开文献, Jinpan暂未进行独立验证, 仅供参考。 These protocols are for reference only. Jinpan does not independently validate these methods. |
| 规格 | 5mg 10mg |
LRRK2-IN-1 是一种有效的，选择性的 LRRK2 抑制剂。