Lightning-Link® 抗体和蛋白标记试剂盒

Lightning-Link® 抗体和蛋白标记试剂盒

Lightning-Link® 是世界上最快、最简单易用、最高效的抗体偶联方法。这个系列的产品能在30秒的操作时间里完成抗体和蛋白的标记,并且实现100%的抗体回收,不需要分离步骤。


产品优势

• 直接标记一抗–无需使用二抗!

• 简单快捷–无需专业知识

• 没有分离步骤 – 实现100%抗体回收

• 稳定的试剂盒性能,批间重复性好

• 从R&D研发阶段到大规模生产的可扩展性

• 同样化学反应实现40多种标记物的偶联反应


使用方法

科研人员只需将待标记的抗体或其他生物分子加入含有标记物的冻干粉混合物,然后孵育3小时(Lightning-Link®系列)或者15分钟(Lightning-Link® Rapid系列)即可。尽管操作如此简单,用Lightning-Link® 制备的偶联产物仍然和那些通过多步骤的费时方法制备出的偶联产物有同样甚至更优的性能。

Lightning-Link® 抗体和蛋白标记试剂盒

Lightning-Link® 进行标记的操作示意图 – 整个过程没有洗涤、分离步骤

Lightning-Link® 让你的抗体、蛋白标记变得简单、快速。这个系列产品可以使用的标记物包括荧光蛋白与染料、生物素、链霉亲和素和多种酶类(碱性磷酸酶、辣根过氧化物酶)。

产品描述 单位规格和产品编号
3x20ug  3x200ug  1x200ug  1x2mg
Lightning-Link® Rapid Biotin – Type A 370-0030 370-0010 370-0005 370-0015
Lightning-Link® Rapid Biotin – Type B 371-0030  371-0010  371-0005  371-0015
3x10ug  3x100ug  1x100ug  1x1mg
Lightning-Link® Streptavidin 708-0030  708-0010 708-0005 708-0015
Lightning-Link® Alkaline Phosphatase (AP) 702-0030  702-0010  702-0005  702-0015
Lightning-Link® Glucose Oxidase 706-0030  706-0010    706-0015
3x40ug  3x400ug  1x00ug  1x4mg
Lightning-Link® Horseradish Peroxidase (HRP) 701-0030  701-0000 701-0010  701-0002


可使用荧光染料&蛋白一览表

Lightning-Link® 抗体和蛋白标记试剂盒

† (R-)PE 有3个最大吸收波长峰值,这3个峰值都可以使用。最佳的选用波长取决于具体的实验应用。

这些建议的波长选离最大吸收波长有一段距离,因此如果使用建议的波长,实验效果可能会受到影响。

** 这些试剂盒需要3小时的孵育时间(而不是15分钟)。

对比数据

ELISA 数据  直接标记 VS 间接标记
ELISA方法检测两种标记方法处理的偶联碱性磷酸酶的anti-Human IgG (Fc)
Lightning-Link® 抗体和蛋白标记试剂盒 对照是购买的使用间接方法标记的Antihuman  IgG单抗,
这个抗体已经偶联了碱性磷酸酶。
同样未标记的抗体使用Lightning-Link®试剂盒 
(简称为“ LL Kit”)进行碱性磷酸酶标记。
使用Lightning-Link® 的标记产物具有更高的滴度和灵敏度。
流式细胞实验数据 – Lightning-Link® 标记 VS 已标记抗体
Lightning-Link® R-PE 标记  已标记R-PE的抗体
Lightning-Link® 抗体和蛋白标记试剂盒 Lightning-Link® 抗体和蛋白标记试剂盒 这个对比实验中采用两种鼠CD4单抗(RPA-T4克隆),
一种是未标记的抗体,另一种是已经标记了R-PE的抗体。
Lightning-Link® 试剂盒将未偶联抗体结合R-PE
然后用流式细胞仪(人外周血淋巴细胞染色)
对偶联物进行比较。蓝色曲线代表未染色细胞。


蛋白质印迹数据

直接标记 VS 间接标记

使用Lightning-Link® 试剂盒进行HRP直接标记的一抗在Western Blot实验中,相比传统间接法标记显示出更高的灵敏度。

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Thunder-Link® PLUS 寡核苷酸标记试剂盒

Thunder-Link® PLUS 寡核苷酸标记试剂盒

Thunder-Link® PLUS 能简单快捷的偶联抗体和寡核苷酸(Oligo),并且保证高回收率以及高效地清除残余物。这个系列试剂盒使用简单快捷,帮助使用者克服复杂、费时的寡核苷酸偶联难题。


产品优势

• 简单快捷 – 只需30分钟的抗体和寡核苷酸活化时间

• 快速偶联 – 只需一小时!

• 抗体和寡核苷酸回收率高 – 节省昂贵的原料

• 共价键连接 – 稳定的偶联产物

• 使用您的抗体和寡核苷酸,按您选定的比例偶联 – 实验灵活度高

• 可靠灵活的偶联后清理步骤 – 避免未结合寡核苷酸的干扰

• 冻干保存 – 能在常温下运输,有效期长

• 严格的QC检测 – 持续稳定的高性能,优秀的批间重复性

• 单向化学键链接 – 没有交叉反应风险

• 适用于10-120个碱基的单链寡核苷酸或者80个碱基之内的双链寡核苷酸 – 包含了大部分的所需序列

• 能从5’端和3’端进行连接 – 保留进行其他连接修饰的空间

• 试剂盒包含正对照的抗体和寡核苷酸 – 方便验证实验流程的正确性

• 广泛可用的目标蛋白 – 适用于抗体片段和小分子蛋白


常规应用 Thunder-Link® PLUS 寡核苷酸标记试剂盒
• Immuno-PCR
• Proximity Extension Assay
• Proximity Ligation Assay
• Electrochemical Proximity Assays
相关文献
Additional sex combs interacts with enhancer of zeste and trithorax
and modulates levels of trimethylation on histone H3K4 and H3K27
during transcription of hsp70 – Epigenetics Chromatin. (2017)
Label-free and high-throughput detection of biomolecular
interactions using a flatbed scanner biosensor – ACS sens. (2017)
Nanoswitch-linked immunosorbent assay (NLISA) for fast,
sensitive, and specific protein detection – PNAS (2017)
Thunder-Link® PLUS Process Diagram


产品描述 单位规格和产品编号
Thunder-Link® PLUS  1 reaction control: 425-0000  3 reaction control: 425-0300


对比数据

使用Thunder-Link® 试剂盒制备的Immuno-PCR数据

Thunder-Link® PLUS 寡核苷酸标记试剂盒

使用Thunder-Link®试剂盒标记,只需1/1000的捕获抗体和1/100的检测抗体,能达到相当于ELISA检测1000倍的灵敏度。

Hytest公司购买的未标记的鼠抗人CRP C7单抗用Thunder-Link® 试剂盒来进行寡核苷酸偶联,然后用作夹心法Immuno-PCR实验中的检测抗体。实验中的捕获抗体是anti-CRP多抗。

本页第一张图显示的是,在特定抗原浓度下,qPCR循环数与荧光强度(用SYBR green标记的探针)的关系图。经过数据转换,下面这张图片显示了这个实验中不同抗原浓度对应扩增循环数而成的标准曲线。

结果显示,使用1/1000的捕获抗体和1/100的检测抗体就能达到ELISA实验1000倍的灵敏度。



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Lightning-Link® 胶体金

Lightning-Link® 胶体金

我们的胶体金使用特殊工艺生产,拥有非常均一的球形度和大小,减少您实验中的误差。

使用我们专利生产流程,能够快速制造大量质量可靠的纳米金颗粒。如需批量产品,请您联系我们。


产品优势

• 球形均一
• 大小均一
• 超高质量
• 优秀的批间重复性
• 可工业级别批量供应
• 高效结合抗体保证实验灵敏度
• 可选高浓度以便简化实验开发
• 颗粒在生产后已经完成了更换缓冲液以保持稳定的组分

我们的胶体金纳米颗粒存储于柠檬酸盐缓冲液制备的悬浊液中,适用于以下应用:
✓蛋白质吸附     ✓寡核苷酸吸附    ✓表面修饰

我们的生产工艺有严格的颗粒形状控制,完全杜绝同类产品中见到的不规则结构。

Lightning-Link® 胶体金

透射电镜下的不同商业来源的金颗粒对比。请注意中间的Expedeon颗粒具有最规则的形状和最均一的大小。

40NM 金颗粒的质量评估

Lightning-Link® 胶体金 ABSORBANCE SCAN
Peak position: 524-528nm
Peak width (PW75):<43
A650/530 ratio:<0.1
TEM ANALYSIS (~200 PARTICLES)
Particle diameter: 40nm ±4nm
Standard deviation:<4nm
%CV<10%


偶联的其他补充方法
抗体还可以通过化学连接来共价偶联包被纳米金颗粒或者通过传统被动吸附的方式进行连接。

Lightning-Link® 胶体金 左图三种CRP抗体分别通过共价连接或者被动吸附的方式连接胶体金颗粒。
通过左图可以看到,每种单抗适用的连接都是不一样的。所以,用不同的方式来制备纳米金偶联物对于实验结果就非常重要。

我们的胶体金可选不同的大小、浓度和体积来保证您实验的灵活程度。

产品描述 单位尺寸和产品编号
Lightning-Link® 胶体金 10nm Gold Nanoparticles (1 OD)  20ml  3001-0020
10nm Gold Nanoparticles (1 OD)  100ml 3001-0100
10nm Gold Nanoparticles (10 OD)  20ml  3010-0020
10nm Gold Nanoparticles (10 OD)  100ml  3010-0100
Lightning-Link® 胶体金 20nm Gold Nanoparticles (1 OD)  10ml  3201-0010
20nm Gold Nanoparticles (1 OD)  100ml  3201-0100
20nm Gold Nanoparticles (10 OD)  10ml  3210-0010
20nm Gold Nanoparticles (10 OD)  100ml  3210-0100
20nm Gold Nanoparticles (15 OD)  10ml  3215-0010
20nm Gold Nanoparticles (15 OD)  100ml  3215-0100
Lightning-Link® 胶体金 40nm Gold Nanoparticles (1 OD)  10ml  201-0010
40nm Gold Nanoparticles (1 OD)  100ml  201-0100
40nm Gold Nanoparticles (10 OD)  10ml  210-0010
40nm Gold Nanoparticles (10 OD)  100ml 210-0100
40nm Gold Nanoparticles (15 OD)  10ml  212-0010
40nm Gold Nanoparticles (15 OD)  100ml  212-0100
40nm Gold Nanoparticles (20 OD)  10ml  220-0010
40nm Gold Nanoparticles (20 OD)  100ml  220-0100
80nm Gold Nanoparticles (1 OD)  10ml  3801-0010
80nm Gold Nanoparticles (1 OD)  100ml  3801-0100
80nm Gold Nanoparticles (10 OD)  10ml  3810-0010
80nm Gold Nanoparticles (10 OD)  100ml  3810-0100
80nm Gold Nanoparticles (15 OD)  10ml  3815-0010
80nm Gold Nanoparticles (15 OD)  100ml  3815-0100

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imm-Link™ 免疫原制备试剂盒

imm-Link™ 免疫原制备试剂盒

Imm-Link™ 免疫原制备试剂盒能偶联您的半抗原到BSA/KLH或者卵清蛋白。只需把半抗原溶液加到包含载体蛋白和化学偶联试剂的冻干粉混合物中即可。现有三种不同的化学连接基团:carboxylsulfhydryl 和 amine,非常适用于免疫反应。

使用方法

产品优势

• 简单易用
• 提供所有需要的组分
• 广泛的化学反应方法
• 只需20-30秒的操作时间
• 提供透析盒来保证高回收率
• 全面技术支持

只需简单将半抗原加入到专利技术生产的包括载体蛋白和化学偶联试剂的冻干粉混合物中。

当溶解的imm-Link™ 混合物中的专利化学试剂活化后,就会让半抗原在温和可控的条件下偶联到载体蛋白上。整个操作时间只需20-30秒。

一旦偶联反应结束,半抗原-载体蛋白可以简单地使用试剂盒中的透析盒来除去不需要的副产品。这个半抗原的偶联物可以用于生产抗体。我们透析盒的设计能保证高蛋白回收率。


可选产品

产品描述 单位规格和产品编号
1 x 1mg 1 x 2mg 3 x 1mg 3 x 2mg
reaction reaction reactions reactions
imm-Link™ Immunogen Kits
for antigens with amine groups
KLH Immunogen Kit   450-0001    450-0500
Ovalbumin  
Immunogen Kit
  451-0001   451-0500
Target Lysines or free amines (NH2) BSA Immunogen Kit    452-0001   452-0500
imm-Link™ Immunogen Kits
for antigens with Carboxyl groups
KLH Immunogen Kit    470-0001   470-0500
Ovalbumin 
Immunogen Kit
  471-0001   471-0500
Target Glutamic acid, aspartic acid or free
carboxyl groups
BSA Immunogen Kit  472-0015  472-0001  472-0010  472-0500
KLH Immunogen Kit   460-0001   460-0500
imm-Link™ Immunogen Kits Ovalbumin
Immunogen Kit
  461-0001   461-0500
for antigens with Sulfhydryl Groups
Target Cysteines or free sulfhydryl groups
BSA Immunogen Kit   462-0001    462-0500

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Expedeon热销产品—Lightning-Link® Rapid Biotinylation Kit–Type A

Expedeon热销产品—Lightning-Link® Rapid Biotinylation Kit–Type A

ExpedeonLightning-Link® Rapid Biotinylation Kit – Type A标记试剂盒能够直接标记抗体蛋白质和多肽或者其他带氨基的生物分子,几乎是100%的标记率,该试剂盒可以用于链霉亲和素标记的检测试剂。

这个试剂盒标记只需要30s的操作实验,而且链接物在20分钟内就能准备好。该试剂盒可以标记从10ug的量到1g或者更多的量。该试剂盒的可重复性非常好。

生物素标记到大分子上是实验室非常重要的技术生物素能够非常特异性连接到四聚亲和素蛋白上,包括链霉亲和素和中性抗生物素蛋白。该应用能够应用到各种试验中,比如WB,IHC,ELISA中。我们的生物素试剂盒能够保证高品质的标记和低背景。

 

产品特点

• 直接标记一抗–无需使用二抗!

• 简单快捷–无需专业知识

• 没有分离步骤 – 实现100%抗体回收

• 稳定的试剂盒性能,批间重复性好

• 从R&D研发阶段到大规模生产的可扩展性

• 同样化学反应实现40多种标记物的偶联反应

 

使用方法:

科研人员只需将待标记的抗体或其他生物分子加入含有标记物的冻干粉混合物,然后孵育3小时(Lightning-Link®系列)即可。尽管操作如此简单,用Lightning-Link® 制备的偶联产物和那些通过多步骤的费时方法制备出的偶联产物有同样甚至更优的性能。

订购信息

产品名称

货号

规格

Lightning-Link® Rapid Biotin – Type A

370-0005

Type A-1xAb labeling (up to 200ug)

Lightning-Link® Rapid Biotin – Type A

370-0010

Type A-3xAb labeling (up to 200ug)

Lightning-Link® Rapid Biotin – Type A

370-0015

Type A-1xAb labeling (up to 2mg)

Lightning-Link® Rapid Biotin – Type A

370-0030

Type A-3xAb labeling (up to 20ug)


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Expedeon热销产品——Lightning-Link® Alkaline Phosphatase (AP)

Expedeon热销产品——Lightning-Link® Alkaline Phosphatase (AP)

ExpedeonLightning-Link® Alkaline Phosphatase (AP)抗体标记试剂盒能够直接标记抗体蛋白质和多肽或者其他带氨基的生物分子标记上AP只需要30秒,并且几乎是100%的标记率,该试剂盒可以标记从10ug1g的量的范围并且经过严格的质检能保证批次与批次将的重复性


AP是一种常见的用在免疫检测中的酶标记,AP常见的显色底物就是PNPP,可以在405nm处读取吸光值,荧光底物MUP也是可以用于AP的。

 

产品特点

• 直接标记一抗–无需使用二抗!

• 简单快捷–无需专业知识

• 没有分离步骤 – 实现100%抗体回收

• 稳定的试剂盒性能,批间重复性好

• 从R&D研发阶段到大规模生产的可扩展性

• 同样化学反应实现40多种标记物的偶联反应

 

使用方法:

科研人员只需将待标记的抗体或其他生物分子加入含有标记物的冻干粉混合物,然后孵育3小时(Lightning-Link®系列)即可。尽管操作如此简单,用Lightning-Link® 制备的偶联产物和那些通过多步骤的费时方法制备出的偶联产物有同样甚至更优的性能。



订购信息

产品名称

货号

规格

Lightning-Link® Alkaline Phosphatase (AP)

702-0015

1 reaction up to 1mg

Lightning-Link® Alkaline Phosphatase (AP)

702-0005

1 reaction up to 100ug

Lightning-Link® Alkaline Phosphatase (AP)

702-0010

3 reactions each up to 100ug

Lightning-Link® Alkaline Phosphatase (AP)

702-0030

3 reactions each up to 10ug



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Expedeon热销产品——Lightning-Link® Fluorescein

Expedeon热销产品——Lightning-Link® Fluorescein

ExpedeonLightning-Link® FITC antibody labeling kit抗体标记试剂盒能够直接标记抗体,蛋白质和多肽,或者其他带氨基的生物分子,标记上FITC只需要30秒,并且几乎是100%的标记率,该试剂盒可以标记从10ug1g的量的范围,并且经过严格的质检能保证批次与批次将的重复性。

 

FITC是一种常见的荧光标记基团因为FITC能溶于水中,并且有较高的荧光强度和高的吸收性能。FITC的激发波长在498nm处,发射波长在532nm处。

 

产品特点:

直接标记一抗无需使用二抗!

简单快捷无需专业知识

没有分离步骤 – 实现100%抗体回收

稳定的试剂盒性能,批间重复性好

R&D研发阶段到大规模生产的可扩展性

同样化学反应实现40多种标记物的偶联反应

 

使用方法:

科研人员只需将待标记的抗体或其他生物分子加入含有标记物的冻干粉混合物,然后孵育3小时(Lightning-Link®系列)即可。尽管操作如此简单,用Lightning-Link® 制备的偶联产物和那些通过多步骤的费时方法制备出的偶联产物有同样甚至更优的性能。

订购信息:

产品名称

货号

规格

Lightning-Link® Fluorescein

707-0030

3 reactions each up to 20ug

Lightning-Link® Fluorescein

707-0005

1 reaction up to 200ug

Lightning-Link® Fluorescein

707-0010

3 reactions each up to 200ug

Lightning-Link® Fluorescein

702-0015

1 reactions up to 2mg

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Expedeon热销产品——Lightning-Link Horseradish Peroxidase (HRP)

Expedeon热销产品——Lightning-Link Horseradish Peroxidase (HRP)

ExpedeonLightning-Link Horseradish Peroxidase (HRP)抗体标记试剂盒能够直接标记抗体蛋白质和多肽或者其他带氨基的生物分子标记上HRP只需要30秒,并且几乎是100%的标记率,该试剂盒可以标记从10ug1g的量的范围并且经过严格的质检能保证批次与批次将的重复性


HRP是一个有6个赖氨酸残基的分子量大小为44KDa的糖蛋白。酶标记可以通过显色反应可视化,例如DAB通过过氧化氢将DAB转化为不溶于水的棕色物质。其他底物也是可以用来检测HRP活性的,比如ABTSTMBTMBUS

 

产品特点

• 直接标记一抗–无需使用二抗!

• 简单快捷–无需专业知识

• 没有分离步骤 – 实现100%抗体回收

• 稳定的试剂盒性能,批间重复性好

• 从R&D研发阶段到大规模生产的可扩展性

• 同样化学反应实现40多种标记物的偶联反应

 

使用方法:

科研人员只需将待标记的抗体或其他生物分子加入含有标记物的冻干粉混合物,然后孵育3小时(Lightning-Link®系列)即可。尽管操作如此简单,用Lightning-Link® 制备的偶联产物和那些通过多步骤的费时方法制备出的偶联产物有同样甚至更优的性能。

订购信息

产品名称

货号

规格

Lightning-Link® Horseradish Peroxidase (HRP)

701-0030

3 x up to 40ug Ab

Lightning-Link® Horseradish Peroxidase (HRP)

701-0010

1 x up to 400ug Ab

Lightning-Link® Horseradish Peroxidase (HRP)

701-0000

3 x up to 400ug Ab

Lightning-Link® Horseradish Peroxidase (HRP)

701-0002

1 x up to 4mg Ab

Lightning-Link® Horseradish Peroxidase (HRP)

701-0003

5 x up to 4mg Ab

Lightning-Link® Horseradish Peroxidase (HRP)

701-0004

1 x up to 20mg Ab


详情请联系全国代理-上海金畔生物科技

Lightning Link 系列金属标记试剂盒

Lightning Link 系列金属标记试剂盒

还在痛苦地进行金属偶联么?

或者找不到您要的金属标记物?

快看过来~ 


Expedeon 2019 年新产品 Lightning Link 系列金属标记试剂盒现在有多达30种啦!

  • 手工操作只需30秒!

  • 1 小时内完成标记

  • 无繁琐的分离步骤,100% 抗体回收率

  • 温和化学反应,标记物稳定

  • 可选金属多,以便多路测定

  • 批间重复性好

  • 应用广泛

操作步骤

Lightning Link 系列金属标记试剂盒

可选标记

Lightning-Link® 金属标记试剂盒
Lightning-Link®  139La Lightning-Link® 159Tb
Lightning-Link®  141Pr Lightning-Link® 160Gd
Lightning  Link®-142Nd Lightning-Link® 162Dy
Lightning-Link®  143Nd Lightning-Link® 164Dy
Lightning-Link®  144Nd Lightning-Link® 165Ho
Lightning-Link®  146Nd Lightning Link®-166Er
Lightning-Link®  147Sm Lightning Link®-167Er
Lightning-Link®  148Nd Lightning-Link® 168Er
Lightning-Link®  149Sm Lightning-Link® 169Tm
Lightning-Link®  151Eu Lightning-Link® 170Er
Lightning-Link®  152Sm Lightning-Link® 171Yb
Lightning-Link®  153Eu Lightning-Link® 172Yb
Lightning-Link®  154Sm Lightning-Link® 174Yb
Lightning  Link®-156Gd Lightning-Link® 175Lu
Lightning-Link®  158Gd Lightning-Link® 176Yb


实验数据

Lightning Link 系列金属标记试剂盒

Figure 1. Goat Anti-Rabbit was labeled with Lightning-Link® 159Tb at 100 µg single reaction vial and tested with Rabbit IgG in a sandwich ELISA. Detection: Dissociation-enhanced lanthanide fluorescence.

Lightning Link 系列金属标记试剂盒

Figure 2. Goat Anti-Rabbit was labeled with a selection of Lightning-Link® metal labels at 10 µg single reaction vials. 2 μg conjugates per well were run on a 4-12% Bis-Tris gel (Expedeon, NBT41212), under non-reducing conditions for 20 minutes at 50V and 1 hour at 120V in 1x MOPS (Expedeon, NXB75500). The gel was stained with InstantBlue™ (Expedeon, ISB1L) for 1 hour on the gel rocker. The gel showed no free antibody post conjugation for all conjugates except when the reaction was quenched at t=0, where no conjugation was observed.

Figure 3. X-Ray Fluorescence Lα series peaks used to quantify the metal content in Lightning-Link® Metal Labeling kit.

应用

  • X-ray fluorescence

  • Mass cytometry

  • Inductively Coupled Plasma Mass Spectrometry (ICP-MS)

  • Dissociation-enhanced fluorescence immunoassays (**DELFIA®)

Expedeon全国代理-上海金畔生物科技

Oligo修饰Oligo modification:Uni-Link AminoModifier酶试剂盒Takara Clontech

上海金畔生物科技有限公司代理Takara酶试剂盒全线产品,欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

Oligo修饰Oligo modification:Uni-Link AminoModifier
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Clontech 635703 Uni-Link AminoModifier 100 mg ¥3,865 Oligo修饰Oligo modification:Uni-Link AminoModifier Oligo修饰Oligo modification:Uni-Link AminoModifier Oligo修饰Oligo modification:Uni-Link AminoModifier
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Code No. 产品名称
635703   Uni-Link AminoModifier
 
Uni-Link AminoModifier is a cyanoethyl phosphoramidite that allows you to directly incorporate a primary amine onto the 5′ end of an oligonucleotide using automated synthesis. Label-ON reagents provide an efficient way to directly label oligonucleotides with various reporter molecules. All Label-On Reagents possess the patented 2-aminobutyl-1,3-propanediol (ABPD) backbone, which offer distinct benefits.
 
 
产品详情请点击:Oligo修饰Oligo modification:Uni-Link AminoModifier
 
 

页面更新:2024-01-31 15:11:25