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Klenow 片段（3’→5’exo-） #M0212L 1,000 units-NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品资料 – DNA聚合酶与扩增技术 – DNA 处理（DNA 标记、末端平齐化等）

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货 号
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#M0212L
1,000 units
2,989.00
有
有
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#M0212M
高浓度（10X）1,000 units
2,989.00
有
有
无
无
无
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#M0212S
200 units
749.00
有
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#M0212V
100 units
419.00
有
有
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特性

 用随机引物制备探针
 随机引物法标记

 cDNA 第二条链的合成 

概述

Klenow 片段（3´→5´ exo–）是 DNA 聚合酶 I 的 N 末端截短物，它保留了 DNA 聚合酶活性，但失去了 5´→3´ 核酸外切酶活性。该酶经突变（D355A，E357A）去除了其 3´→5´ 的核酸外切酶活性（1）。 

来源

重组 E. coli 菌株，其携带的质粒上含有 E.coli polA (D355A，E357A)基因的片段，片段起始位置在密码子 324 处。 

浓度

5,000 和 50,000 units/ml。 

热失活

75℃ 20 分钟。 

使用注意事项

Klenow 片段（3´→5´ exo–）因去除了 3´→5´ 核酸外切酶的活性，故不适用于生成平末端的反应。 

参考文献

 

DNA 聚合酶 I 大片段（Klenow） #M0210L 1,000 units-NEB酶试剂 New England Biolabs

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DNA 聚合酶 I 大片段（Klenow） #M0210L 1,000 units DNA 聚合酶 I 大片段（Klenow） #M0210L 1,000 units DNA 聚合酶 I 大片段（Klenow） #M0210L 1,000 units DNA 聚合酶 I 大片段（Klenow） #M0210L 1,000 units DNA 聚合酶 I 大片段（Klenow） #M0210L 1,000 units

货 号
规 格
价 格(元)
北京库存
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#M0210L
1,000 units
2,989.00
有
有
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#M0210M
高浓度（10X）1,000 units
2,989.00
无
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#M0210S
200 units
749.00
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#M0210V
100 units
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特性

·用随机引物制备探针
·切除 3´ 突出端或补平 5´ 突出端，形成平末端

·cDNA 第二条链的合成 

概述

DNA 聚合酶 I，大片段（Klenow 片段）是 E. coli DNA 聚合酶 I 的蛋白水解产物，具有 DNA 聚合酶活性和 3´→5´ 核酸外切酶活性，但缺失了 5´→3´ 核酸外切酶活性。Klenow 既保留了全酶的高保真性，又不会降解 DNA 5´ 末端。

来源

重组 E. coli 菌株，携带有 E. coli polA 基因，该基因去除了 5´→3´ 核酸外切酶结构域。 

浓度

5,000 和 50,000 units/ml。 

热失活

75℃ 20 分钟。 

使用注意事项

由于该酶具有 3´→5´ 核酸外切酶活性，升高反应温度、加入过量的酶、未加入 dNTP 或反应时间过长均会导致 DNA 末端碱基被切除形成凹陷。 

参考文献

Klenow片段-Klenow Fragment酶试剂盒Takara Clontech

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Klenow片段-Klenow Fragment
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Takara 2140A Klenow Fragment (Large Fragment E. coli DNA Polymerase I) 200 U ￥227 Klenow片段-Klenow Fragment Klenow片段-Klenow Fragment Klenow片段-Klenow Fragment
Takara 2140B (A × 5) Klenow Fragment（Large Fragment E. coli DNA Polymerase I） 200 U × 5 ￥1,035 Klenow片段-Klenow Fragment Klenow片段-Klenow Fragment Klenow片段-Klenow Fragment
Takara 2140AK Klenow Fragment（Large Fragment E. coli DNA Polymerase I) (2 U/μl） 200 U ￥176 Klenow片段-Klenow Fragment Klenow片段-Klenow Fragment Klenow片段-Klenow Fragment
Takara 2140BK (AK × 5) Klenow Fragment（Large Fragment E. coli DNA Polymerase I) (2 U/μl） 200 U × 5 ￥794 Klenow片段-Klenow Fragment Klenow片段-Klenow Fragment Klenow片段-Klenow Fragment
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■ 制品内容
Code No.: 2140A
Klenow Fragment (5 U/μl) 200 U
10X Klenow Fragment Buffer 1 ml
 
Code No.: 2140AK Klenow片段-Klenow Fragment
Klenow Fragment (2 U/μl) 200 U
 
■ 制品说明
本酶在DNA模板和引物存在的条件下，选择性地催化底物dNTP沿5’→3’方向合成与模板互补的DNA。本酶是从大肠杆菌中纯化得到，其中克隆了2/3的E.coli DNA polymerase I基因片段 (3’端计算) 。因此具有3’→5’外切酶活性但是没有5’→3’外切酶活性。2140AK/BK制品是Kilo-Sequencing Deletion Kit（Code No.: 6030）的组份之一。
 
■ 保存
-20℃。
 
■ 用途
1. 双脱氧法DNA序列测定 (Sanger法)。
2. 双链DNA 5’突出末端的平滑化。
3. 寡核苷酸定向诱变 (Oligonucleotide directed mutagenesis) 中双链DNA的合成。
4. 使用随机引物进行DNA标记。
 
■ 使用注意
1. 本酶有高度稳定性，稀释时不失活，但剧烈搅拌会失活。
2. 由于不含有5’→3’的外切核酸酶活性，因此不表现切口平移活性。适合双链DNA末端以及缺口 (Gap) 的修复。
3. 与T4 DNA Polymerase相比，对模板高级结构的抵抗性能较好。
4. 由于对DNA的亲和性较强，过量使用易发生凝集作用 (Aggregation) 从而抑制反应进行。
5. 若用于5’突出末端的修饰时，补平后有时会多加一个碱基。
6. 与E.coli DNA Polymerase I相同，ddNTPs的掺入不受底物抑制。
 
 

页面更新：2024-01-25 14:43:50