标签归档：hst

感受态细胞E.coli HST08 Premium Competent Cells酶试剂盒Takara Clontech

发表于由

上海金畔生物科技有限公司代理Takara酶试剂盒全线产品，欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

感受态细胞E.coli HST08 Premium Competent Cells
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Takara 9128 E.coli HST08 Premium Competent Cells 100 μl × 10 ￥413 感受态细胞E.coli HST08 Premium Competent Cells 感受态细胞E.coli HST08 Premium Competent Cells 感受态细胞E.coli HST08 Premium Competent Cells
收藏产品 加入购物车

无标题文档

 
 
感受态细胞E.coli HST08 Premium Competent Cells → 感受态细胞E.coli HST08 Premium Competent Cells → 感受态细胞E.coli HST08 Premium Competent Cells → 感受态细胞E.coli HST08 Premium Competent Cells → 感受态细胞E.coli HST08 Premium Competent Cells
 
感受态细胞E.coli HST08 Premium Competent Cells
感受态细胞E.coli HST08 Premium Competent Cells  
感受态细胞E.coli HST08 Premium Competent Cells
 
 
■ 制品内容感受态细胞E.coli HST08 Premium Competent Cells
E.coli HST08 Premium Competent Cells 100 μl × 10
pUC19 plasmid (0.1 ng/μl) 10 μl
SOC Medium* 1 ml × 10
*SOC Medium:     2%   Tryptone
 0.5%   Yeast extract
 10 mM   NaCl
 2.5 mM   KCl
  10 mM   MgSO4
10 mM   MgCl2
 20 mM   Glucose
 
■ 制品说明
Takara在Hanahan's method基础上进行了改良，制备出具有很高转化效率的E. coli HST08 Premium Competent Cells。另外，E.coli HST08是mrr, hsdRMS, mcrBC, mcrA (这些基因是大肠杆菌切除外源甲基化DNA所必需的基因) 缺失的菌株，这使得其可广泛应用于甲基化质粒的制备、基因文库的制作以及亚克隆。当和较大质粒一起使用时，也可维持较高转化效率和菌落生长率*。10 kb以上长片段DNA克隆和基因文库构建时，可与TaKaRa DNA Ligation Kit LONG (Code No. : 6024) 一起使用，效果很好。
*：与其他相同基因型的感受态细胞相比较。
对于pUC系列质粒，可通过β-半乳糖苷酶的α-互补性，在培养基中添加X-gal进行蓝白筛选，以筛选阳性克隆。
X-Gal：5-Bromo-4-Chloro-3-Indolyl-β-D-Galactoside
 
■ 细胞浓度
1-2×109 bacteria/ml
 
■ Genotype
E. coli HST08 Premium： F-, endA1 , supE44 , thi -1 , recA1 , relA1, gyrA96 , phoA , Φ80d lacZ ΔM15,Δ(lacZYA - argF)U169 , Δ(mrr - hsdRMS - mcrBC), ΔmcrA , λ-
 
■ 保存
-80℃。
注意： 如果不在-80℃下保存，转化效率将会降低。此时，在使用前，请使用附带的pUC19 对照质粒来确认细胞的转化效率。不能液氮保存。
 
■ 质量标准
[1] 转化效率
转入1 ng 的pUC19 plasmid，涂于含有ampicillin的L-plate进行筛选。
转化效率 : >1 x 108 colonies/μg pUC19 plasmid
[2] β-半乳糖苷酶的α-互补性
转化pUC19 DNA时，含有100 μg/ml ampicilin 和 60 μg/ml X-Gal的L-agar plate上出现蓝色菌落。
 
■ 注意事项
1. 将感受态细胞从-80℃冷冻取出后请立即置于干冰/乙醇中。使用前保存于干冰/乙醇中。
2. 可使用1.5 ml microcentrifuge tubes代替14 ml 圆底 tubes (CORNING Code No. 352059 或 352057,等)，但效率可能会降低。
3. 当使用100 μl感受态细胞时，加入不超过10 ng的高纯度DNA样品。否则转化效率会降低。
4. 当改变感受态细胞使用体积或tube类型时，适当调整反应条件。例如，当使用1.5 ml microcentrifuge tubes时，42℃放置60秒而不是45秒。
5. L-broth 或φb-broth可替代SOC培养基，转化效率可能会降低。
  ·L-broth：10 g Tryptone, 5 g Yeast extract, 5 g NaCl，用1 N NaOH调整pH到7.5，使体系终体积为1 L，高压灭菌。
  ·φ b-broth：5 g Yeast extract, 20 g Tryptone, 5 g MgSO4·7H2O，用1 N KOH调整pH到7.5，使体系终体积为1 L，高压灭菌。
  ·L-plates： 10 g Tryptone, 5 g Yeast extract, 5 g NaCl，用1 N NaOH调整pH到7.5，添加agar到1.5%，使体系终体积为1 L，高压灭菌。
6. 当使用X-Gal 时，按照以下操作进行：
   将20 mg /ml X-Gal (溶解于二甲基甲酰胺) 按200-300 μl/100 ml 的比例加入到agar media中。
7. 不建议将解冻的感受态细胞再次冷冻保存。但是，如果再次冻结不可避免，将细胞置于干冰/乙醇中迅速冷冻，置于-80℃保存。但是，转化效率可能会降低至少一个数量级。
 
 

页面更新：2024-01-25 15:02:15

感受态细胞E.coli HST04 dam-/dcm- Competent Cells酶试剂盒Takara Clontech

发表于由

上海金畔生物科技有限公司代理Takara酶试剂盒全线产品，欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

感受态细胞E.coli HST04 dam–/dcm– Competent Cells
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Takara 9129 E.coli HST04 dam–/dcm– Competent Cells 100 μl × 10 ￥651 感受态细胞E.coli HST04 dam-/dcm- Competent Cells 感受态细胞E.coli HST04 dam-/dcm- Competent Cells 感受态细胞E.coli HST04 dam-/dcm- Competent Cells
收藏产品 加入购物车
 
■ 制品内容感受态细胞E.coli HST04 dam-/dcm- Competent Cells
E.coli HST04 dam–/dcm– Competent Cells 100 μl × 10
pUC19 plasmid (0.1 ng/μl) 10 μl
SOC Medium* 1 ml × 10
*SOC Medium:      2%   Ttryptone
 0.5%   Yeast extract
 10 mM   NaCl
 2.5 mM   KCl
  10 mM   MgSO4
10 mM   MgCl2
 20 mM   Glucose
 
■ 制品说明
Takara公司在Hanahan’s method基础上进行了改良，制备出E. coli HST04 dam–/dcm– Competent Cells，当用1 ng pUC19转化100 μl细胞时，转化效率＞1×106 cfu/μg。
E.coli HST04 dam–/dcm–是甲基化基因dam、dcm缺失的菌株，使DNA不被甲基化。使用本菌株转化所得到的质粒，可以被对dam、dcm甲基化敏感的限制酶切割。
另外，dam、recA双重突变的菌株是致死的，本菌株为recA+菌株。因此，易与带有同源序列的外源DNA发生重组。本制品只适用于转化已经构筑好的质粒, 而不适用于常规的克隆转化。
 
■ 细胞浓度
1-2×109 bacteria/ml
 
■ Genotype
E. coli HST04 dam–/dcm–： F–, ara, △(lac-proAB) [Φ80dlacZ△M15], rpsL( str), thi, △(mrr-hsdRMS-mcrBC), △mcrA, dam, dcm
 
■ 保存
-80℃。
注意： 如果不在-80℃下保存，转化效率将会降低。此时，在使用前，请使用附带的pUC19 对照质粒来确认细胞的转化效率。不能液氮保存。
 
■ 质量标准
转入1 ng 的pUC19 plasmid，涂于含有ampicillin的L-plate进行筛选。
转化效率 : >1 x 106 colonies/μg pUC19 plasmid
 
■ 注意事项
1. 将感受态细胞从-80℃冷冻取出后请立即置于干冰/乙醇中。使用前保存于干冰/乙醇中。
2. 可使用1.5 ml microcentrifuge tubes代替14 ml 圆底 tubes (CORNING Code No. 352059 或 352057,等)，但效率可能会降低。
3. 当使用100 μl感受态细胞时，加入的高纯度质粒DNA不要超过10 ng。否则转化效率会降低。
4. 当改变感受态细胞使用体积或tube类型时，适当调整反应条件。例如，当使用1.5 ml microcentrifuge tubes时，42℃放置60秒而不是45秒。
5. L-broth 或φb-broth可替代SOC培养基，转化效率可能会降低。
  ·L-broth：10 g Tryptone, 5 g Yeast extract, 5 g NaCl，用1 N NaOH调整pH到7.5，使体系终体积为1 L，高压灭菌。
  ·φ b-broth：5 g Yeast extract, 20 g Tryptone, 5 g MaSO4·7H2O，用1 N KOH调整pH到7.5，使体系终体积为1 L，高压灭菌。
  ·L-plates： 10 g Tryptone，5 g Yeast extract，5 g NaCl/1 L water, 使用1 N NaOH调整pH到7.5，添加agar到1.5%，使体系终体积为1 L，高压灭菌。
6. 不建议将解冻的感受态细胞再次冷冻保存。但是，如果再次冻结不可避免，将细胞置于干冰/乙醇中迅速冷冻，置于-80℃保存。但是，转化效率可能会降低至少一个数量级。
 
 

页面更新：2024-01-31 15:21:01

电转化感受态细胞E.coli HST08 Premium Electro-Cells酶试剂盒Takara Clontech

发表于由

上海金畔生物科技有限公司代理Takara酶试剂盒全线产品，欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

电转化感受态细胞E.coli HST08 Premium Electro-Cells
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Takara 9028 E.coli HST08 Premium Electro-Cells 50 μl × 10 ￥655 电转化感受态细胞E.coli HST08 Premium Electro-Cells 电转化感受态细胞E.coli HST08 Premium Electro-Cells 电转化感受态细胞E.coli HST08 Premium Electro-Cells
收藏产品 加入购物车

无标题文档

 
 
电转化感受态细胞E.coli HST08 Premium Electro-Cells → 电转化感受态细胞E.coli HST08 Premium Electro-Cells → 电转化感受态细胞E.coli HST08 Premium Electro-Cells → 电转化感受态细胞E.coli HST08 Premium Electro-Cells → 电转化感受态细胞E.coli HST08 Premium Electro-Cells
 
电转化感受态细胞E.coli HST08 Premium Electro-Cells
电转化感受态细胞E.coli HST08 Premium Electro-Cells  
电转化感受态细胞E.coli HST08 Premium Electro-Cells
 
 
■ 制品内容
E.coli HST08 Premium Electro-Cells 50 μl × 10
pUC19 plasmid ( 10 pg/μl) 10 μl
SOC Medium* 1 ml × 10
*SOC Medium:       2%   Tryptone
 0.5%   Yeast extract
 10 mM   NaCl
 2.5 mM   KCl
  10 mM   MgSO4
10 mM   MgCl2
 20 mM   Glucose
 
■ 制品说明
E. coli HST08 Premium Electro-Cells是Takara Bio特别制备的适用于电穿孔法的制品。用高电压脉冲电流瞬间击穿细胞的细胞质膜，从而使外源DNA转入宿主细胞内的转化方法称为电穿孔法。通过此种方法制备的感受态细胞转化效率高、产量大，尤其适合在短时间内将少量样品转入大肠杆菌内。 E.coli HST08是mrr, hsdRMS, mcrBC, mcrA缺失的菌株，这使得其可广泛应用于甲基化质粒的制备、基因文库的制作以及BAC文库的构建。即便转化较大的质粒，也可维持较高的转化效率和菌落生长率*。10 kb以上长片段DNA克隆和构建基因文库时，可与Takara DNA Ligation Kit LONG (Code No. : 6024) 一起使用，效果很好。
*：与其他相同基因型的感受态细胞相比较。
对于pUC系列质粒，可通过β-半乳糖苷酶的α-互补性，在培养基中添加X-gal进行蓝白筛选，以筛选阳性克隆。
X-Gal：5-Bromo-4-Chloro-3-Indolyl-β-D-Galactoside
 
■ 细胞浓度
>1×1010 bacteria/ml
 
■ Genotype
E. coli HST08 Premium： F-, endA1 , supE44 , thi -1 , recA1 , relA1, gyrA96 , phoA , Φ80d lacZ ΔM15,Δ(lacZYA - argF)U169 , Δ(mrr - hsdRMS - mcrBC), ΔmcrA , λ-
 
■ 保存
-80℃。
注意： -80℃或更低温度下保存。如果保存温度不能恒定，转化效率将会降低。请使用附带的pUC19 对照质粒来确认保存细胞的转化效率。不能液氮保存。
 
■ 质量标准
[1] 转化效率
转入10 pg 的pUC19，涂于含有ampicillin的L-plate进行筛选。
转化效率 : >1 x 109 colonies/μg pUC19 plasmid
[2] β-半乳糖苷酶的α-互补性
转化pUC19 DNA时，含有100 μg/ml ampicilin 和 60 μg/ml X-Gal的L-agar plate上出现蓝色菌落。
 
■ 注意事项
1. 将Electro-Cells从-80℃取出后请立即置于干冰/乙醇中。使用前保存于干冰/乙醇中。
2. 当使用50 μl Electro-Cells时，高纯度样品DNA添加量不要超过10 ng，否则会降低转化效率。
3. 当使用50 μl Electro-cells时，DNA溶液添加量不要超过5 μl，否则会降低转化效率。
4. 当改变实验规模时，适当改变反应条件。
5. L-broth 或φb-broth可替代SOC培养基，但转化效率会降低。
  ·L-broth：10 g Tryptone, 5 g Yeast extract, 5 g NaCl/1 L water，用1 N NaOH调整pH7.5左右并高压灭菌。
  ·φ b-broth：5 g Yeast extract, 20 g Tryptone, 5 g MgSO4·7H2O/1 L water，用1 N KOH调整pH7.5左右并高压灭菌。
6. 当使用X-Gal时，按照以下操作进行：
  ·将20 mg /ml X-Gal (溶解于二甲基甲酰胺) 按200-300 μl/100 ml的比例加入到agar media中。
7. 不建议将解冻的感受态细胞再次冷冻保存。但是，如果再次冻结不可避免，将细胞置于干冰/乙醇中迅速冷冻，置于-80℃保存。但是，转化效率可能会降低至少一个数量级。
 
 

页面更新：2024-01-25 15:44:42