HEK293细胞扩增培养基补料描述应用使用方法储存/保存方法技术指标
| 产品描述 | |||||||||||
| 描述 |
本品是一种优质补料，完全不含任何动物源成分，而是采用了植物源水解物。当它与HEK293细胞扩增培养基（JP9825）结合使用，在瞬时转染HEK293细胞过程中，能够实现更高的转染效率。
培养条件： 温度：36~38℃，湿度80%，5~8%CO2 摇床设置：转速115~125rpm（振幅50mm） |
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| 应用 |
适用于科研和细胞培养的大规模生物制品生产，但不能直接用于人体或作为药物使用。
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| 使用方法 |
补料添加方案：
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| 储存/保存方法 |
2℃~8℃，避光，有效期12个月。
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| 技术指标 |
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HEK-Blue™ Detection——检测SEAP用培养基
HEK-Blue™ Detection 是一种用于方便、快速检测SEAP（分泌型碱性磷酸酶）表达的培养基。HEK-Blue™ Detection包含了所有细胞生长所需的营养成分和一种特异性的SEAP显色底物。在有碱性磷酸酶活性的环境中会变为蓝紫色。使用酶标仪或分光光度计即可方便、快速检测。
操作步骤：
1. 溶解 HEK-Blue™ Detection
2. 加入SEAP表达性细胞
3. 转移到多孔板
4. 37°C, 5% CO2条件下培养6-24h
5. 检测SEAP水平
结果判定方法
1.肉眼观察 (蓝紫色)
2.分光光度计检测(620 – 655 nm)
应用：
实时检测细胞产生的SEAP
适用于高通量筛选
保存：
室温保存可保存12个月
溶解后4°C可保存2周，-20°C可保存2个月。
| 产品名称 | 产品描述 | 规格 | 货号 |
|---|---|---|---|
| HEK-Blue™ Detection | Cell culture medium for SEAP Detection | 5 pouches | hb-det2 |
| 10 pouches | hb-det3 |
Capsaicin 天然辣椒碱
| EC | EINECS 206-969-8 |
| MDL | MFCD00017259 |
| 别名 | 辣椒素; 8-甲基-N-香草基-L-壬烯胺 |
| CAS | 404-86-4 |
| 分子式 | C18H27NO3 |
| 分子量 | 305.42 |
| 纯度 | HPLC≥98% |
| 单位 | 瓶 |
| 生物活性 | Capsaicin是一种 TRPV1 激动剂，在HEK293细胞中的 EC50 为0.29 μM。[1-6] |
| IC50 | EC50: 290 nM (hTRPV1, in HEK293 cell)[1] |
| In Vitro | 辣椒素是瞬时受体电位香草酸亚型1（TRPV1）的激动剂，其在伤害性感觉神经元和一系列分泌性上皮细胞（包括唾液腺）中表达。辣椒素激活TRPV1，其通过以ERK依赖性方式调节推定的细胞间粘附分子的表达和功能来调节紧密连接（TJ）的通透性[2]。发现辣椒素以剂量和时间依赖性方式抑制FaDu细胞的生长和增殖。用50,100,200和300μM辣椒素处理的细胞随着辣椒素剂量的增加显示出细胞生长的增加的减少。此外，随着孵育时间的增加，活细胞的百分比降低。观察到的IC50值约为150μM[3]。 |
| In Vivo | 辣椒素（CAP）处理的动物（组IV）显示增加的DNA片段化，表明与B（a）P-诱导的携带肺癌的动物（组II）相比显示细胞凋亡，其显示DNA片段化减少。与B组（a）P组给予第II组肺癌动物相比，CAP处理的IV组动物显示p53，Bax和caspase-3的表达显著增加，抗凋亡蛋白Bcl-2水平显著降低[ 4]。辣椒素在雌性Wistar/ST大鼠中引起剂量依赖性的泪液分泌减少。在20,50和100mg/kg的剂量下观察到显著效果。此外，辣椒素也会引起角膜病变，在50和100 mg/kg剂量下观察到显著效果[5]。 |
| SMILES | CC(C)/C=C/CCCCC(NCC1=CC=C(O)C(OC)=C1)=O |
| 靶点 | TRP Channel |
| 动物实验 | 小鼠[4]将体重20-25g（8-10周龄）的健康雄性瑞士白化小鼠分成四组，每组六只，每只小鼠如下。第I组：对照动物在整个实验过程中接受橄榄油。第II组：给动物施用苯并（a）芘（B（a）P）（50mg/kg体重，溶于橄榄油中），每周两次口服，连续四周。第III组：动物每周一次腹腔注射辣椒素（10mg/kg体重溶于橄榄油），持续14周，以评估辣椒素诱导的细胞毒性（如果有的话）。第IV组：动物腹膜内接受B（a）P（如第II组）以及辣椒素（10mg/kg b.wt溶于橄榄油中）。辣椒素治疗在第一剂B（a）P给药前一周开始，持续14周。大鼠[5]使用4日龄雌性Wistar/ST大鼠。在出生后第4天，给大鼠单次皮下注射辣椒素，剂量为50mg/kg（剂量反应试验为20和100mg/kg），溶于含10％乙醇和10％吐温80的生理盐水中。载体处理的大鼠单独接受载体溶液。注射的大鼠与其母亲一起饲养，母鸡喂食标准大鼠食物并保持在正常条件下。在4周龄时，将注射的大鼠分开并饲养在笼中，并保持在正常条件下直至实验开始。 |
| 细胞实验 | 将FaDu细胞以1×10 5个细胞/孔的密度接种在24孔板上。过夜生长后，用不同浓度的辣椒素（0μM，50μM，100μM，150μM，200μM，250μM，300μM和350μM）处理细胞24,48和72小时，更换培养基每24小时一次。在处理结束时，添加30μL四唑鎓化合物MTT和270μL新鲜培养基。在37℃下进一步温育4小时后，向每个孔中加入200μL的0.1N HCl的10％SDS溶液以溶解四唑鎓晶体。最后，使用ELISA平板读数器记录540nm波长的吸光度[3]。 |
| 数据来源文献 | [1]. McNamara FN, et al. Effects of piperine, the pungent component of black pepper, at the human vanilloid receptor (TRPV1). Br J Pharmacol. 2005 Mar;144(6):781-90.
[2]. Shin YH, et al. The Effect of Capsaicin on Salivary Gland Dysfunction. Molecules. 2016 Jun 25;21(7). [3]. Le TD, et al. Capsaicin-induced apoptosis of FaDu human pharyngeal squamous carcinoma cells. Yonsei Med J. 2012 Jul 1;53(4):834-41. [4]. Anandakumar P, et al. Capsaicin provokes apoptosis and restricts benzo(a)pyrene induced lung tumorigenesis in Swiss albino mice. Int Immunopharmacol. 2013 Jun 6;17(2):254-259. [5]. Kagawa Y, et al. Investigation of capsaicin-induced superficial punctate keratopathy model due to reduced tear secretion in rats. Curr Eye Res. 2013 Jul;38(7):729-35. [6]. Wang J, et al. Anti-inflammatory and retinal protective effects of capsaicin on ischaemia-induced injuries through the release of endogenous somatostatin. Clin Exp Pharmacol Physiol. 2017 Jul;44(7):803-814. |
| 规格 | 10mg 10mM*1mL (in DMSO) 50mg |
Capsaicin是一种 TRPV1 激动剂。
(重组人TGF-β1)Recombinant Human TGF-β1 (HEK293 derived)
品牌：Peprotech
产品编号：100-21
规格：1mg，500µg，250µg，100µg，50µg，10µg，2µg
产品描述：
TGF-β的有三种亚型，TGF-β1、β2和β3，通过相同的受体发出信号，引起相似的生物学反应。它们是调节细胞增殖、生长、分化和运动以及细胞外基质的合成和沉积的多功能细胞因子。它们参与各种生理过程，包括胚胎发生、组织重塑和伤口愈合，主要以潜伏复合物的形式被分泌，储存在细胞表面和细胞外基质中。TGF-β1最初被鉴定为具有诱导成纤维细胞表型转化的能力，最近有研究者认为它与皮肤肿瘤的形成有关。重组人TGF-β1来源于HEK293细胞，是一个分子量为25.0 kDa的蛋白，每个亚基包含112个氨基酸残基，由单个二硫键连接。
来源：HEK293 cells
别名：Transforming Growth Factor-β1, Differentiation inhibiting factor, Cartilage-inducing factor
氨基酸序列：
ALDTNYCFSS TEKNCCVRQL YIDFRKDLGW KWIHEPKGYH ANFCLGPCPY IWSLDTQYSK VLALYNQHNP GASAAPCCVP QALEPLPIVY YVGRKPKVEQ LSNMIVRSCK CS
纯度：≥ 98%
生物活性：通过TGF-beta1抑制il -4依赖性小鼠HT-2细胞增殖的能力测定ED50≤0.05 ng/ml，对应的比活性≥2 × 107单位/mg。
分子量：25 kDa
Accession Number: P01137
Gene ID:7040
交叉反应种属：鸡，牛，狗，驴，青蛙，人，水貂，猴，小鼠，小鼠+病毒，猪，兔，大鼠
原产地：美国
注：不供人类使用
更多详情请咨询Peprotech代理-上海金畔生物
BalanCD HEK293培养基培养基-Wako富士胶片和光
| 供货周期 | 一个月以上 |
|---|
FUJIFILM Irvine Scientific（富士胶片欧文科技）的BalanCD HEK293可扩展体系提供了生长与生产之间的最佳平衡，从而提高哺乳动物细胞培养的生产力。该多功能系统由化学成分明确的不含动物成分的BalanCD HEK293培养基和BalanCD HEK293 补料体系组成，支持多种应用，包括用于基因治疗的病毒载体的生产，瞬时蛋白表达和重组蛋白的生产。
BalanCD HEK293培养基
FUJIFILM Irvine Scientific（富士胶片欧文科技）的BalanCD HEK293可扩展体系提供了生长与生产之间的最佳平衡，从而提高哺乳动物细胞培养的生产力。该多功能系统由化学成分明确的不含动物成分的BalanCD HEK293培养基和BalanCD HEK293 补料体系组成，支持多种应用，包括用于基因治疗的病毒载体的生产，瞬时蛋白表达和重组蛋白的生产。
● 化学成分明确、不含动物成分
● 快速，可扩展地生产用于生物生产的病毒载体和蛋白
● 支持广泛使用的HEK293细胞系
● 提高瞬时蛋白表达的生产率
● 适用于摇瓶、旋转烧瓶和生物反应器
◆BalanCD HEK293培养基
BalanCD HEK293培养基，是一种多功能、化学成分明确、不含动物成分的培养基，经过优化，可用病毒载体和重组蛋白的转染和生产。
特点
● 使用相同的培养基进行接种、转染和生产，可快速、可扩展地生产病毒载体和蛋白
● 在48小时内达到最佳产量
● 在保持高活率的同时获得更高的细胞密度
● 作为向美国FDA提交的药品主文件（DMF）
应用实例
基因治疗病毒载体生产
2 L生物反应器中，用BalanCD HEK293培养基进行培养，每3-4天传代一次。在细胞接种后3天，以DNA：PEI=1：1.5的比例，用PEI介导转染4个质粒，24，48和72 h 后测定慢病毒滴度。
蛋白瞬时表达 · 重组蛋白生产
30 mL的125 mL摇瓶中。细胞以3×105 cells/mL的密度在BalanCD HEK293培养基中接种。第3天时，进行PEI介导的转染产生生物类似药。转染后1-4天内，向BalanCD HEK293培养基中添加5% v/v的BalanCD HEK293补料，在转染后第7、第9和第11天时测定蛋白表达量。当存活率低于70%时将终止培养（数据未显示）。图中的数据是两份相同培养基样本结果的平均值。
◆BalanCD HEK293补料
可显著提高转染后适应悬浮的HEK293细胞系的蛋白质产量。
● 可增加活细胞密度和培养时间，以使得产量zui大化
● 对各个HEK293细胞系使用同一系统
● 化学成分明确的无动物成分配方
● 有提交给美国 FDA 的药物主文件 (DMF)，满足监管要求
◆抗结团剂
不含动物成分和不含酶的通用试剂，旨在减少悬浮培养中各种细胞类型的细胞聚集。
◆产品列表
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产品编号 |
产品名称 |
状态 |
包装 |
|
91165-1L |
BalanCD HEK293 BalanCD HEK293培养基 |
液态 |
1L |
|
94137-10L |
BalanCD HEK293 BalanCD HEK293培养基 |
粉末 |
10 L |
|
94137-100L |
100 L |
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91166-500ML |
BalanCD HEK293 Feed BalanCD HEK293 补料 |
液态 |
500 mL |
|
91150-50ml |
Anti-clumping Supplement 抗结团剂 |
液态 |
50 mL |
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