DiO(细胞膜绿色荧光探针)
产品货号: D4007
产品规格: 10 mg
目录价(元):400
推荐仪器:荧光显微镜
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产品概述:
产品参数
外观:黄色固体。DiO溶于无水乙醇、无水DMSO和无水DMF,在无水DMSO中的溶解度约为10 mg/mL。较难溶解时,可以适当加热或者超声处理。
Ex/Em (MeOH) = 484/501 nm
CAS号:34215-57-1
分子式:C53H85ClN2O6
分子量:881.7
分子结构图:
储存条件
4℃避光保存,有效期见外包装。
产品介绍
DiO即DiOC18(3),是最常用的细胞膜荧光探针之一,呈现绿色荧光。DiO是一种亲脂性膜染料,进入细胞膜后可以侧向扩散逐渐染色整个细胞的细胞膜。DiO在进入细胞膜之前荧光非常弱,当与细胞膜结合后其荧光强度大大增强,被激发后可以发出绿色荧光,具有很高的淬灭常数和激发态寿命,可以用标准的FITC滤光片检测。
DiO作为示踪剂或长期示踪剂,被广泛用于正向或逆向的,活的或固定的神经等细胞或组织。DiO通常不会显著影响细胞的生存力。DiO除了细胞膜荧光标记外,还可用于检测细胞的融合和粘附,发育或移植过程中的细胞迁移,通过FRAP(光脱色荧光恢复技术)检测脂在细胞膜上的扩散,检测细胞毒性和标记脂蛋白等。
DiO染色后可进行多聚甲醛(不可使用甲醇等其他试剂)的固定,但不建议在染色后进行透化的过程。此外,在固定透化(室温下用0.1% TritonX-100 透化)后,也可以很好地进行质膜染色。DiO染色强度通常低于DiI,有时在固定组织中会完全丧失。
以每次使用100 μL染色工作液,染色工作液浓度10 μM计算,10 mg配置为工作液大概可以用11341次。
注意事项
1. 使用前请将产品瞬时离心至管底,再进行后续实验。
2. DiO染色固定的细胞或组织样品时,通常使用配制在PBS中的4%多聚甲醛进行固定,使用其它不适当的固定液会导致荧光背景较高。
3. 荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。
4. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
说明书:
UE-D4007
MSDS:
MSDS D4007 DiO (Green fluorescence probe for cell membrane)
常见问题解答:
◆用PBS稀释后的DiO工作液染色时出现聚沉现象,怎么处理?
因为这类细胞膜染料在水中的溶解性不好,建议用PBS稀释时稍微加入一点DMSO有机溶剂,来增加其溶解度
◆固定后的细胞,可以用DiO进行染色吗?
该类细胞膜染料可以染色固定后的细胞样本,但如果固定过程中,细胞膜破损,会影响染色的效果
◆DiO也可以染色细胞内的细胞器膜吗?
可以,因为DiO染色细胞膜是非特异性的,所以细胞器的膜也会被染上色,如果不想细胞器染色太明显,可以减少孵育时间或者将染料浓度降低
◆细胞追踪有很多产品,该如何选择?
首先确定追踪细胞的时间,然后考虑染料结合机制。
1.钙黄绿素染料(C4041)标记均匀且对短期细胞迁移示踪效果极佳,但也会被某些类型细胞迅速外排。
2.亲脂性的花青素染料,如DiI(D4010),DIO(D4007),DiA(D4059),DiD(D4019),DiR(D4006)能标记细胞膜而不破坏其功能,并且能持续更长时间,但如果发生膜融合则可能会染上其他细胞。此外,它们还会在透化过程中丢失。
3.CellTracker染料(C4060)更有利于长期标记,其带有温和的氯甲基反应基团使之能够与细胞组分共价结合。
4.CFDA SE(C4070)也能共价地结合于细胞组分。
在所有列出的试剂中,细胞内保留与否取决于细胞分裂的速率和细胞的固有特性(主动外排,膜和蛋白质的周转率等)。其中共价结合试剂比非共价结合的试剂展现出更长的保留时间
使用本产品的文献:
1.Overcoming the Reticuloendothelial System Barrier to Drug Delivery with a “Don’t-Eat-Us” Strategy
Yixuan Tang,Xiaoyou Wang,Jie Li,Yu Nie,Guojian Liao,Yang Yu,Chong Li
ACS NANO
应用方向:细胞膜染色
2.Inducing Endoplasmic Reticulum Stress to Expose Immunogens: A DNA Tetrahedron Nanoregulator for Enhanced Immunotherapy
Yanhua Li,Xia Zhang,Xiuyan Wan,Xiaohan Liu,Wei Pan,Na Li,Bo Tang
Adv. Funct. Mater.
参考文献
1.Optimizing conditions and avoiding pitfalls for prolonged axonal tracing with carbocyanine dyes in fixed rat spinal cords
应用方向:标记示踪
2.Labeling with fluorescent carbocyanine dyes of cultured endothelial and smooth muscle cells by growth in dye-containing medium
应用方向:细胞迁移
3.A versatile flow cytometry-based assay for the determination of short- and long-term natural killer cell activity
应用方向:细胞毒性
4.Neurons secrete miR-132-containing exosomes to regulate brain vascular integrity
应用方向:标记的神经细胞外泌体
5.Microfluidic device (ExoChip) for On-Chip isolation, quantification and characterization of circulating exosomes.
应用方向:用DiO进行外泌体染色,通过荧光的强弱对不同来源样品中的外泌体进行定量分析