DiO Plus(细胞膜绿色荧光探针升级款) 货号: N4021 规格: 5 mg

DiO Plus(细胞膜绿色荧光探针升级款)

产品货号: N4021

产品规格: 5 mg

目录价(元):360

推荐仪器:荧光显微镜

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产品概述:

产品参数
外观:可溶于乙醇、己烷、DMSO或植物油的橙黄色固体
Ex/Em (MeOH) = 484/501 nm
分子式:C67H105ClN2O5S
分子量:1086.0

储存条件
4℃避光保存,有效期见外包装。

产品介绍

DiO Plus效能等同于Neuro-DiO。
DiO Plus是一种代替膜绿色荧光染料DiO的新型染料,DiO由于其溶解度低、易形成聚合物和横向扩散速度缓慢等缺点,很难用于神经元和细胞悬液的研究。DiO Plus和DiO具有几乎相同的吸收光谱和发射光谱,但前者具有更好的膜溶解性,并且不形成非荧光性的聚集体,通常这也会减慢染料在膜上的扩散速率。
DiO Plus染色后可进行多聚甲醛(不可使用甲醇等其他试剂)的固定,但不建议在染色后进行透化的过程。此外,在固定透化(室温下用0.1% TritonX-100 透化)后,也可以很好地进行质膜染色。
以每次使用100 μL染色工作液,染色工作液浓度3 μM计算,10 mg配置为工作液大概可以用15346次。

注意事项
1. 使用前请将产品瞬时离心至管底,再进行后续实验。
2. DiO Plus染色固定的细胞或组织样品时,通常使用配制在PBS中的4%多聚甲醛进行固定,使用其它不适当的固定液会导致荧光背景较高。
3. 荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。
4. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。


说明书:

DiO Plus(细胞膜绿色荧光探针升级款) 货号:               N4021  规格:               5 mg UE-N4021    
常见问题解答:

相较于DiO染料,DiO plus的优势是什么?

DiO plus具有更好的膜溶解性,并且不形成非荧光性的聚集体,在膜上的扩散速度更快。

细胞追踪有很多产品,该如何选择?
首先确定追踪细胞的时间,然后考虑染料结合机制。
1.钙黄绿素染料(C4041)标记均匀且对短期细胞迁移示踪效果极佳,但也会被某些类型细胞迅速外排。
2.亲脂性的花青素染料,如DiI(D4010),DIO(D4007),DiA(D4059),DiD(D4019),DiR(D4006)能标记细胞膜而不破坏其功能,并且能持续更长时间,但如果发生膜融合则可能会染上其他细胞。此外,它们还会在透化过程中丢失。
3.CellTracker染料(C4060)更有利于长期标记,其带有温和的氯甲基反应基团使之能够与细胞组分共价结合。
4.CFDA SE(C4070)也能共价地结合于细胞组分。
在所有列出的试剂中,细胞内保留与否取决于细胞分裂的速率和细胞的固有特性(主动外排,膜和蛋白质的周转率等)。其中共价结合试剂比非共价结合的试剂展现出更长的保留时间。

细胞膜绿色荧光染色试剂盒(DiO)

细胞膜绿色荧光染色试剂盒(DiO)

¥534.00

货号:BL777A

规格:200T-1000T

品牌:Jinpan

产品简介:

DiO 即 DiOC18(3)是最常用的细胞膜荧光探针之一,呈现绿色荧光。DiO 是一种亲脂性羰花青(carbocyanine)染料,进入细胞膜后可以侧向扩散逐渐使整个细胞的细胞膜被染色,染色后非常稳定。DiO 毒性很低,通常不会影响细胞的生存力。DiO 在进入细胞膜之前荧光非常弱,仅当进入到细胞膜后才可以被激发出很强的荧光。DiO 被激发后可以发出绿色的荧光,DiO 和磷酯双层膜结合后最大激发波长为 484nm,最大发射波长为 501nm。
本试剂盒可以直接染色活的细胞或组织,染色时间通常为 5-20 分钟。对于固定的细胞或组织,通常宜使用配制在 PBS 中的 4%多聚甲醛进行固定,使用其它不适当的固定液会导致荧光背景较高。DiO对于细胞膜染色的荧光强度通常要低于 DiI,有时对于某些经过固定的组织的染色效果欠佳。
本试剂盒如果用于流式细胞仪,每个样品的检测体系体积为 0.5ml 时,可以进行 200 次检测,96孔板每孔检测体系的体积为 100ul 时,可以进行 1000 次检测。

  

注意事项:

1、不同细胞的最佳染色浓度略有不同,细胞膜染色工作液的最终浓度建议根据不同细胞系和实验体系进行优化,可在 1:100-1:400 之间进行调整。DiI 的最终浓度提高时,染色增强剂的用量不变。
2、如果染色时间过长或染色后细胞继续培养,探针也可能进入细胞内而染色其它细胞器的膜。
3、染色缓冲液经过过滤除菌处理,在使用时须注意避免微生物污染,否则很可能严重影响染色效果。如果染色缓冲液发生浑浊等明显的微生物污染,就不能继续使用。
4、荧光染料不可避免的都存在一定的淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。
5、本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品。
6、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

保存条件:

-20℃避光保存,一年有效,避免反复冻融。染色增强剂(400X)和染色缓冲液也可保存在 4ºC。

货号 BL777A
规格 200T-1000T
品牌 Jinpan
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DiO (细胞膜绿色荧光探针)

DiO (细胞膜绿色荧光探针)

¥380.00

货号:BL925A

规格:10mg

品牌:Jinpan

产品简介:

DiDDiODiIDiR染料是一族亲脂性的荧光染料,可以用来染细胞膜和其它脂溶性生物结构。当与细胞膜结合后其荧光强度大大增强,这类染料有着很高的淬灭常数和激发态寿命。一旦对细胞染色,这类染料在整个细胞膜上扩散,最佳浓度时可以使整个细胞膜染色。它们的荧光颜色区分明显:DiI色荧光),DiO(绿色荧光),DiD远红外荧光)和 DiR (深红色荧光),这使得他们可以用来对活细胞进行多色成像和流式分析。

DiO在进入细胞膜之前荧光非常弱,仅当进入到细胞膜后才可以被激发出很强的荧光。DiO被激发后可以发出绿色的荧光,最大激发波长为484nm,最大发射波长为501nm。 DiO 被广泛用于正向或逆向的,活的或固定的神经等细胞或组织的示踪剂或长期示踪剂。还用于检测细胞的融合和粘附,检测发育或移植过程中细胞迁移,通过FRAP检测脂在细胞膜上的扩散,检测细胞毒性和标记脂蛋白等。DiO对于细胞膜染色的荧光强度通常要低于DiI,有时对于某些经过固定的组织的染色效果欠佳。

 

产品信息:

CAS134215-571

英文名:3,3′-dioctadecyloxacarbocyanine perchlorate

分子式:C33H85ClN2O6

分子量:881.72

纯度:≥95%

 

使用方法仅供参考

一、DiO细胞膜染色液制备

1.配置DMSOEtOH 储存液:用DMSOEtOH配置浓度1-5 mM的储存液

2.工作液制备:用合适的缓冲液(如无血清培养基,HBSSPBS)稀释储存液,配制浓度为15 µM的工作液。

注:工作液的最终浓度是根据不同细胞和实验的经验来配制,可以从推荐浓度的十倍以上寻找最佳条件。  

二、细胞染色

a.对于悬浮细胞

1.悬浮细胞密度为1×106/mL加入到工作液中。

2.37℃培养细胞520分钟,不同的细胞最佳培养时间不同。

3.10001500rpm离心5分钟。

4.去除上清,再次缓慢加入37℃预温的培养液。

5.重复步骤34,两次以上。

b.对于贴壁细胞

1.去多余的培养液。

2.加入染料工作液,轻轻晃动使染料均匀覆盖所有细胞。

3.37 ℃培养细胞 520分钟,不同的细胞最佳培养时间不同。

4.染料工作液,用培养液清洗23次,每次用预温的培养基覆盖所有细胞,培养510分钟,然后吸干培养基。

结果分析

显微镜下观察或流式细胞仪检测

 

注意事项

1、荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。

2、本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品

3、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

保存条件:

-20℃干燥避光保存,有效期一年。

货号 BL925A
规格 10mg
品牌 Jinpan
说明书下载 点击下载

DiO(细胞膜绿色荧光探针) 货号: D4007 规格: 10 mg

DiO(细胞膜绿色荧光探针)

产品货号: D4007

产品规格: 10 mg

目录价(元):400

推荐仪器:荧光显微镜

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产品概述:

产品参数
外观:黄色固体。DiO溶于无水乙醇、无水DMSO和无水DMF,在无水DMSO中的溶解度约为10 mg/mL。较难溶解时,可以适当加热或者超声处理。
Ex/Em (MeOH) = 484/501 nm
CAS号:34215-57-1
分子式:C53H85ClN2O6
分子量:881.7
分子结构图:

DiO(细胞膜绿色荧光探针) 货号:               D4007  规格:               10 mg


储存条件
4℃避光保存,有效期见外包装。

产品介绍

DiO即DiOC18(3),是最常用的细胞膜荧光探针之一,呈现绿色荧光。DiO是一种亲脂性膜染料,进入细胞膜后可以侧向扩散逐渐染色整个细胞的细胞膜。DiO在进入细胞膜之前荧光非常弱,当与细胞膜结合后其荧光强度大大增强,被激发后可以发出绿色荧光,具有很高的淬灭常数和激发态寿命,可以用标准的FITC滤光片检测。
DiO作为示踪剂或长期示踪剂,被广泛用于正向或逆向的,活的或固定的神经等细胞或组织。DiO通常不会显著影响细胞的生存力。DiO除了细胞膜荧光标记外,还可用于检测细胞的融合和粘附,发育或移植过程中的细胞迁移,通过FRAP(光脱色荧光恢复技术)检测脂在细胞膜上的扩散,检测细胞毒性和标记脂蛋白等。
DiO染色后可进行多聚甲醛(不可使用甲醇等其他试剂)的固定,但不建议在染色后进行透化的过程。此外,在固定透化(室温下用0.1% TritonX-100 透化)后,也可以很好地进行质膜染色。DiO染色强度通常低于DiI,有时在固定组织中会完全丧失。
以每次使用100 μL染色工作液,染色工作液浓度10 μM计算,10 mg配置为工作液大概可以用11341次。

注意事项
1. 使用前请将产品瞬时离心至管底,再进行后续实验。
2. DiO染色固定的细胞或组织样品时,通常使用配制在PBS中的4%多聚甲醛进行固定,使用其它不适当的固定液会导致荧光背景较高。
3. 荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。
4. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。


说明书:

DiO(细胞膜绿色荧光探针) 货号:               D4007  规格:               10 mg UE-D4007    
MSDS:

MSDS D4007 DiO (Green fluorescence probe for cell membrane)
常见问题解答:

用PBS稀释后的DiO工作液染色时出现聚沉现象,怎么处理?

因为这类细胞膜染料在水中的溶解性不好,建议用PBS稀释时稍微加入一点DMSO有机溶剂,来增加其溶解度

固定后的细胞,可以用DiO进行染色吗?
该类细胞膜染料可以染色固定后的细胞样本,但如果固定过程中,细胞膜破损,会影响染色的效果

DiO也可以染色细胞内的细胞器膜吗?
可以,因为DiO染色细胞膜是非特异性的,所以细胞器的膜也会被染上色,如果不想细胞器染色太明显,可以减少孵育时间或者将染料浓度降低

细胞追踪有很多产品,该如何选择?
首先确定追踪细胞的时间,然后考虑染料结合机制。
1.钙黄绿素染料(C4041)标记均匀且对短期细胞迁移示踪效果极佳,但也会被某些类型细胞迅速外排。
2.亲脂性的花青素染料,如DiI(D4010),DIO(D4007),DiA(D4059),DiD(D4019),DiR(D4006)能标记细胞膜而不破坏其功能,并且能持续更长时间,但如果发生膜融合则可能会染上其他细胞。此外,它们还会在透化过程中丢失。
3.CellTracker染料(C4060)更有利于长期标记,其带有温和的氯甲基反应基团使之能够与细胞组分共价结合。
4.CFDA SE(C4070)也能共价地结合于细胞组分。
在所有列出的试剂中,细胞内保留与否取决于细胞分裂的速率和细胞的固有特性(主动外排,膜和蛋白质的周转率等)。其中共价结合试剂比非共价结合的试剂展现出更长的保留时间


使用本产品的文献:

1.Overcoming the Reticuloendothelial System Barrier to Drug Delivery with a “Don’t-Eat-Us” Strategy
Yixuan Tang,Xiaoyou Wang,Jie Li,Yu Nie,Guojian Liao,Yang Yu,Chong Li
ACS NANO
应用方向:细胞膜染色  


2.Inducing Endoplasmic Reticulum Stress to Expose Immunogens: A DNA Tetrahedron Nanoregulator for Enhanced Immunotherapy
Yanhua Li,Xia Zhang,Xiuyan Wan,Xiaohan Liu,Wei Pan,Na Li,Bo Tang
Adv. Funct. Mater.


参考文献
1.Optimizing conditions and avoiding pitfalls for prolonged axonal tracing with carbocyanine dyes in fixed rat spinal cords
应用方向:标记示踪


2.Labeling with fluorescent carbocyanine dyes of cultured endothelial and smooth muscle cells by growth in dye-containing medium
应用方向:细胞迁移


3.A versatile flow cytometry-based assay for the determination of short- and long-term natural killer cell activity
应用方向:细胞毒性


4.Neurons secrete miR-132-containing exosomes to regulate brain vascular integrity
应用方向:标记的神经细胞外泌体


5.Microfluidic device (ExoChip) for On-Chip isolation, quantification and characterization of circulating exosomes.
应用方向:用DiO进行外泌体染色,通过荧光的强弱对不同来源样品中的外泌体进行定量分析