细胞膜远红外荧光染色试剂盒(DiD)

￥400.00

货号：BL927A

规格：200T-1000T

品牌：biosharp

商品详情：

产品简介：

细胞膜远红外荧光染色试剂盒(DiD)是一种以DiD为荧光探针，并提供了染色增强剂，能快速灵敏地对细胞膜进行远红外荧光染色标记的试剂盒。DiD是DiI的类似物，具有更长的激发和发射波长，为远红外荧光，特别适合用于进行多种荧光的同时染色。DiD是一种亲脂性羰花青(carbocyanine)染料，具有很长的亲脂性烃链，进入细胞膜后可以侧向扩散逐渐使整个细胞的细胞膜被染色，染色后非常稳定。DiD在进入细胞膜之前荧光非常弱，仅当进入到细胞膜后才可以被激发出很强的荧光。DiD被激发后可以发出远红外的荧光，DiD和磷酯双层膜结合后，最大激发波长为644nm，最大发射波长为665nm。DiD毒性很低，通常不会影响细胞的生存力(viability)。本试剂盒还可以用于检测细胞的融合和粘附，检测发育或移植过程中细胞迁移，通过FRAP检测脂在细胞膜上的扩散，检测细胞毒性和标记脂蛋白等。

本试剂盒可以直接染色活的细胞或组织，染色时间通常为5-20分钟。对于固定的细胞或组织，通常宜使用配制在PBS中的4%多聚甲醛进行固定，使用其它不适当的固定液会导致荧光背景较高。

如果用于流式细胞仪，每个样品的检测体系体积为0.5ml时，可以进行200次检测；96孔板每孔检测体系的体积为100μl时可以进行1000次检测。

产品组份：

使用方法（仅供参考）：详见说明书

注意事项：

1、荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。

2、染色缓冲液经过过滤除菌处理，在使用时须注意避免微生物污染，否则很可能严重影响染色效果。如果染色缓冲液发生浑浊等明显的微生物污染，就不能继续使用。

3、如果染色时间过长或染色后细胞继续培养，探针也可能进入细胞内而染色其它细胞器的膜。

4、如果需要封片，建议直接用PBS进行封片。请避免使用含有甘油或其它有机物的封片剂，否则会影响染色并增加荧光背景。

5、本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品。

6、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

保存条件：

-20℃避光保存，一年有效。染色增强剂(400X)和染色缓冲液也可保存在4℃。

DiD (细胞膜远红外荧光探针)

￥380.00

货号：BL926A

规格：10mg

品牌：Jinpan

产品简介：

DiD，DiO，DiI和DiR染料是一族亲脂性的荧光染料，可以用来染细胞膜和其它脂溶性生物结构。当与细胞膜结合后其荧光强度大大增强，这类染料有着很高的淬灭常数和激发态寿命。一旦对细胞染色，这类染料在整个细胞膜上扩散，最佳浓度时可以使整个细胞膜染色。它们的荧光颜色区分明显：DiI（红色荧光），DiO（绿色荧光），DiD（远红外荧光）和 DiR （深红色荧光），这使得他们可以用来对活细胞进行多色成像和流式分析。

DiD是DiI的类似物，但具有更长的激发和发射波长，为远红外荧光，在一些细胞和组织染色中更有优势，特别适合用于进行多种荧光的同时染色。DiD可被633nm的氦–氖激光所激发，DiD在进入细胞膜之前荧光非常弱，仅当进入到细胞膜后才可以被激发出很强的荧光。DiD被激发后可以发出远红外的荧光，最大激发波长为644nm，最大发射波长为663nm。

DiD被广泛用于正向或逆向的，活的或固定的神经等细胞或组织的示踪剂或长期示踪剂。还用于检测细胞的融合和粘附，检测发育或移植过程中细胞迁移，通过FRAP检测脂在细胞膜上的扩散，检测细胞毒性和标记脂蛋白等。

DiD染色后可以兼容免疫荧光实验。建议使用免疫染色通透液(Saponin)或使用洋地黄皂苷配制的不会溶解细胞膜的通透液进行通透，其它去垢剂配制的通透液可能会溶解细胞膜上的脂类物质，造成DiD失去结合位置，最终导致DiD的染色失效。但通透也可能会影响DiD在细胞膜上的定位并会增加细胞内的染色，具体实验中需根据实验的需求选择合适的细胞通透液。

产品信息：

英文名：DiIC18(5); 1,1′-Dioctadecyl-3,3,3′,3′-Tetramethylindodicarbocyanine Perchlorate

分子式：C₆₁H₉₉ClN₂O₄

分子量：959.91

纯度：≥95%

使用方法（仅供参考）：

一、DiD细胞膜染色液制备

1．配置DMSO或EtOH 储存液：用DMSO或EtOH配置浓度1-5 mM的储存液。

2．工作液制备：用合适的缓冲液（如无血清培养基，HBSS或PBS）稀释储存液，配制浓度为1–5 µM的工作液。

注：工作液的最终浓度是根据不同细胞和实验的经验来配制，可以从推荐浓度的十倍以上寻找最佳条件。  

二、细胞染色

a.对于悬浮细胞

1．悬浮细胞密度为1×10⁶/mL加入到工作液中。

2．在37℃培养细胞5～20分钟，不同的细胞最佳培养时间不同。

3．1000–1500rpm离心5分钟。

4．去除上清，再次缓慢加入37℃预温的培养液。

5．重复步骤3和4，两次以上。

b.对于贴壁细胞

1．吸去多余的培养液。

2．加入染料工作液，轻轻晃动使染料均匀覆盖所有细胞。

3．在37 ℃培养细胞 5～20分钟，不同的细胞最佳培养时间不同。

4．吸去染料工作液，用培养液清洗2～3次，每次用预温的培养基覆盖所有细胞，培养5～10分钟，然后吸干培养基。

三、结果分析

显微镜下观察或流式细胞仪检测

注意事项：

1、荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。

2、本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品。

3、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

保存条件：

-20℃干燥避光保存，有效期一年。