LAMBDA DNA (DAM-,DCM-)
货号：
SD0021
品牌：
MBI
产品简介
| 单位 | 支 |
| 规格 | 500ug |
应用：DNA&基因组测序分析、PCR
标签归档：dam
dam 甲基转移酶 #M0222L 2,500 units-NEB酶试剂 New England Biolabs
上海金畔生物科技有限公司代理New England Biolabs（NEB）酶试剂全线产品，欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。
产品资料 – DNA修饰酶与克隆技术 – DNA 甲基转移酶
dam 甲基转移酶 收藏
货 号
规 格
价 格(元)
北京库存
上海库存
广州库存
成都库存
苏州库存
武汉库存
#M0222L
2,500 units
3,929.00
无
无
无
无
无
无
#M0222S
500 units
969.00
有
有
有
无
有
无
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识别位点
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概述
dam 甲基转移酶能对左侧序列中的腺嘌呤残基（N6）进行甲基化修饰。
来源
重组 E. coli 菌株，携带有 pTP166 载体，该载体含有从 E. coli（M. Marinus）克隆的 dam 修饰基因。
反应条件
1X dam 甲基转移酶缓冲液 + SAM
[50 mM Tris-HCl（pH 7.5 @ 25℃），10 mM EDTA，5mM 2-巯基乙醇]。加入 80 μM SAM（随酶提供），37℃ 温育。
热失活：65℃ 加热 20 分钟。
热失活：65℃ 加热 20 分钟。
单位定义
1 单位指在 10 μl 反应体系中，37℃ 条件下，1 小时能保护 1 μg λDNA 不被 MboI 限制性内切酶切割所需要的酶量。
浓度
8,000 units/ml。
dam-/dcm-感受态细胞
dam-/dcm-感受态细胞
货号：
C1320
品牌：
Jinpan
产品简介
| 储存条件 | -70℃ |
| 单位 | 包 |
| 规格 | 20*100ul |
本公司生产的dam-/dcm-感受态细胞是采用大肠杆菌dam-/dcm-菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞。dam-/dcm-菌株来源于大肠杆菌K12菌株，该菌株为dam和dcm甲基化酶失活突变型菌株，常用于质粒DNA的去dam和dcm甲基化处理，消除dam和dcm甲基化对酶切的影响。核酸内切酶 (endA1)基因的缺失有利于提高质粒DNA的产量和质量。甲基化酶的失活突变可能会导致质粒DNA在该菌株中会出现突变，不建议连接产物的转化实验，仅用于质粒转化。菌株还具有抗T1噬菌体感染的特点。pUC19质粒检测转化效率>×106 cfu/μg DNA。
λ DNA (dam-, dcm-)酶试剂盒Takara Clontech
上海金畔生物科技有限公司代理Takara酶试剂盒全线产品，欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。
| λ DNA (dam–, dcm–) | ||||||
| 品牌 | Code No. | 产品名称 | 包装量 | 价格（元） | 说明书 | 数量 |
| Takara | 3019 | λ DNA (dam–, dcm–) | 400 μg | ￥330 |  |
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| ■ 保存 | ||||
| -20℃。 | ||||
| ■ 起源 | ||||
| Bacteriophage λcI857 Sam7 (from a heat-inducible E. coli (dam–, dcm–) lambda lysogen) | ||||
| ■ 链长 | ||||
| 48,502 bp | ||||
| ■ 纯 度 | ||||
| 1) OD260 nm/OD280 nm＞1.8。 2) 琼脂糖凝胶电泳出现清晰单一条带。 3) 1 μg的λ-DNA (dam–, dcm–) 在Mbo I 酶切Buffer中37℃保温16小时后，琼脂糖凝胶电泳时出现清晰单一条带。 4) 1 μg的λ-DNA (dam–, dcm–) 用Mbo I 酶切(37℃，2小时)后，在琼脂糖凝胶电泳时出现十余条清晰的DNA电泳带。 |
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| ■ 使用注意事项 | ||||
| λDNA的末端之间经常由COS末端结合在一起，使用限制酶酶切后电泳时，在电泳前需要进行热处理 (60℃，5分钟) 。此时，如果没有盐离子存在，DNA的Tm (melting temperature) 值降低，某些经过酶切后的DNA片段可能因为Tm值降低而发生变性。热处理前请使用含盐离子的TE或TEN（TE+NaCl） buffer。 | ||||
页面更新：2023-01-16 10:37:36
dam–/dcm– E. coli 感受态细胞 #C2925H 20 x 0.05 ml-NEB酶试剂 New England Biolabs
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产品资料 – 感受态细胞 – 克隆菌株
dam–/dcm– E. coli 感受态细胞 收藏
货 号
规 格
价 格(元)
北京库存
上海库存
广州库存
成都库存
苏州库存
武汉库存
#C2925H
20 x 0.05 ml
4,469.00
无
无
无
无
无
无
#C2925I
6 x 0.2 ml
3,429.00
无
无
无
无
无
无
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相关产品
dam–/dcm– E. coli 感受态细胞
单独出售的组份
SOC Outgrowth 培养基
#B9020S 4 x 25 ml . . . . . . ¥939
优点
适用于培养无 Dam 和 Dcm 甲基化的质粒
无动物来源产品
概述
甲基转移酶缺失的 E. coli 感受态细胞，适用于无 Dam 和 Dcm 甲基化质粒的生长。
基因型
ara-14 leuB6 fhuA31 lacY1 tsx78 glnV44 galK2 galT22 mcrA dcm-6 hisG4 rfbD1 R(zgb210::Tn10) Tet S endA1 rspL136 (Str R) dam13::Tn9 (CamR) xylA-5 mtl-1 thi-1 mcrB1 hsdR2
特性
• 适用于无 Dam 和 Dcm 甲基化质粒的培养
• 缺失非特异性核酸内切酶 I（endA1）活性，可用于制备高质量质粒
转化效率
1–3 x 106 cfu/µg pUC19 DNA
抗性
T1 噬菌体（fhuA31）、氯霉素、呋喃妥因、链霉素
敏感性
氨苄青霉素、卡那霉素、壮观霉素、四环素
随产品提供
SOC Outgrowth 培养基
pUC19 对照 DNA
感受态细胞E.coli HST04 dam-/dcm- Competent Cells酶试剂盒Takara Clontech
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| 感受态细胞E.coli HST04 dam–/dcm– Competent Cells | ||||||
| 品牌 | Code No. | 产品名称 | 包装量 | 价格（元） | 说明书 | 数量 |
| Takara | 9129 | E.coli HST04 dam–/dcm– Competent Cells | 100 μl × 10 | ￥651 | |
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| ■ 制品说明 | |||||||||||||||||||||
| Takara公司在Hanahan’s method基础上进行了改良，制备出E. coli HST04 dam–/dcm– Competent Cells，当用1 ng pUC19转化100 μl细胞时，转化效率＞1×106 cfu/μg。 E.coli HST04 dam–/dcm–是甲基化基因dam、dcm缺失的菌株，使DNA不被甲基化。使用本菌株转化所得到的质粒，可以被对dam、dcm甲基化敏感的限制酶切割。 另外，dam、recA双重突变的菌株是致死的，本菌株为recA+菌株。因此，易与带有同源序列的外源DNA发生重组。本制品只适用于转化已经构筑好的质粒, 而不适用于常规的克隆转化。 |
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| ■ 细胞浓度 | |||||||||||||||||||||
| 1-2×109 bacteria/ml | |||||||||||||||||||||
| ■ Genotype | |||||||||||||||||||||
| E. coli HST04 dam–/dcm–： F–, ara, △(lac-proAB) [Φ80dlacZ△M15], rpsL( str), thi, △(mrr-hsdRMS-mcrBC), △mcrA, dam, dcm | |||||||||||||||||||||
| ■ 保存 | |||||||||||||||||||||
| -80℃。 注意： 如果不在-80℃下保存，转化效率将会降低。此时，在使用前，请使用附带的pUC19 对照质粒来确认细胞的转化效率。不能液氮保存。 |
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| ■ 质量标准 | |||||||||||||||||||||
| 转入1 ng 的pUC19 plasmid，涂于含有ampicillin的L-plate进行筛选。 转化效率 : >1 x 106 colonies/μg pUC19 plasmid |
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| ■ 注意事项 | |||||||||||||||||||||
| 1. 将感受态细胞从-80℃冷冻取出后请立即置于干冰/乙醇中。使用前保存于干冰/乙醇中。 |
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| 2. 可使用1.5 ml microcentrifuge tubes代替14 ml 圆底 tubes (CORNING Code No. 352059 或 352057,等)，但效率可能会降低。 | |||||||||||||||||||||
| 3. 当使用100 μl感受态细胞时，加入的高纯度质粒DNA不要超过10 ng。否则转化效率会降低。 | |||||||||||||||||||||
| 4. 当改变感受态细胞使用体积或tube类型时，适当调整反应条件。例如，当使用1.5 ml microcentrifuge tubes时，42℃放置60秒而不是45秒。 | |||||||||||||||||||||
| 5. L-broth 或φb-broth可替代SOC培养基，转化效率可能会降低。 | |||||||||||||||||||||
| ·L-broth：10 g Tryptone, 5 g Yeast extract, 5 g NaCl，用1 N NaOH调整pH到7.5，使体系终体积为1 L，高压灭菌。 | |||||||||||||||||||||
| ·φ b-broth：5 g Yeast extract, 20 g Tryptone, 5 g MaSO4·7H2O，用1 N KOH调整pH到7.5，使体系终体积为1 L，高压灭菌。 | |||||||||||||||||||||
| ·L-plates： 10 g Tryptone，5 g Yeast extract，5 g NaCl/1 L water, 使用1 N NaOH调整pH到7.5，添加agar到1.5%，使体系终体积为1 L，高压灭菌。 | |||||||||||||||||||||
| 6. 不建议将解冻的感受态细胞再次冷冻保存。但是，如果再次冻结不可避免，将细胞置于干冰/乙醇中迅速冷冻，置于-80℃保存。但是，转化效率可能会降低至少一个数量级。 | |||||||||||||||||||||
页面更新：2024-01-31 15:21:01