Vector Laboratories热销产品——ChromaLink® Biotin Antibody Labeling Reagent (Water Soluble)

ChromaLink Biotin通过水溶性琥珀酰亚胺基活化酯将紫外线可追踪生物素结合到含有赖氨酸残基(胺基)的蛋白质上。ChromaLink Biotin已经被设计成包含许多新的特征标记试剂。如图1所示，分子结构包含一个双芳基腙发色团(a)，由PEG3连接臂(b)连接到生物素(c)。这种试剂允许结合生物素的直接光谱定量。延伸的PEG3接头保持生物素/链霉亲和素亲和力，并在修饰后保持蛋白质溶解性，而琥珀酰亚胺酯官能团(d)有效地修饰水性缓冲液中的赖氨酸。

图1. ChromaLink^® Biotin的结构

用ChromaLink^® Biotin标记蛋白质消除了通常用于定量生物素掺入的繁琐费时的HABA测定的需要。相反，生物素的掺入通过简单的分光光度测量在两个波长下定量(A280 / A354)。典型的标记结果在图2中通过四个样品的光谱重叠扫描来说明。如图所示，牛IgG (100微升@ 5mg/ml)用ChromaLink^® Biotin标记为0、5、10和15mol。光谱分析说明了生物素掺入的可视化和定量是多么容易。

图2. 用ChromaLink^® Biotin标记的牛IgG重叠光谱。使用了各种生物素-蛋白质摩尔质量(5X，10X和15X)。注意354nm处的紫外信号表明生物素的掺入。所有光谱都在分子动力学光谱仪上扫描(220-420nm)。

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Vector Laboratories热销产品——ChromaLink® Biotin Antibody Labeling Kit

ChromaLinkTM Biotin Antibody Labeling Kit具有标记抗体所有必需的试剂，用于任何含赖氨酸蛋白质的生物素化标记。该试剂盒提供了足够的材料在大约2小时内给5种抗体标记生物素化和纯化。每个蛋白质标记反应的规模由研究者选择，每个反应可以从少至25ug到多至1mg蛋白质。

The ChromaLinkTM Biotin labeling过程是基于一种被称为色素连接蛋白生物素的可追踪紫外线的专利接头(图1)。该方法基于一种先进的蛋白质生物素化试剂，该试剂含有芳香族的N-羟基琥珀酰亚胺酯官能团(a)，该官能团有效地修饰磷酸盐缓冲体系中的蛋白质赖氨酸残基。接头具有嵌入的双芳基腙结构(b)，其形成化合物的紫外线可追踪发色团。这种独特发色团的可追踪性质使得附着在蛋白质上的生物素(c)能够无损定量。这三种不同的化学元素通过长链PEG3间隔物(d)连接在一起，这种间隔物保持链霉亲和素/生物素的亲和力，同时保持抗体的溶解性。

图1. ChromaLink™ Biotin C38H50N8O10S（MW: 810.92）的结构

ChromaLinkTM Biotin Antibody Labeling Kit为蛋白质的定量生物素化提供了一个更简单的解决方案，分子量在20-200 kDa范围内的蛋白质很容易用ChromaLinkTM Biotin进行生物素化。使用ChromaLinkTM Biotin消除了进行繁琐和间接生物素结合测定的需要，例如耗时的HABA或荧光报告蛋白测定法，用于测定生物素的掺入程度。相反，在标记后，生物素摩尔取代比直接通过简单的紫外分光光度扫描(220-420nm)或两种波长的单点测量(A280/A354)来测量简便。

图2. ChromaLinkTM Biotin Antibody Labeling Kit标记的过程。

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