链置换酶 Bst DNA Polymerase小分子与天然产物-wako富士胶片和光
Bst DNA Polymerase
链置换酶
◆产品说明
本产品具有5’→ 3’DNA聚合酶活性与链置换活性,是一款自动从模板双链DNA的氢键解离,然后后合成新DNA链的酶。由于其特性,耐热性链置换DNA聚合酶无需DNA的双链解离,即可在恒定温度下合成DNA,且合成不受DNA二级结构的抑制。
Bst DNA Polymerase
链置换酶
◆产品说明
本产品具有5’→ 3’DNA聚合酶活性与链置换活性,是一款自动从模板双链DNA的氢键解离,然后后合成新DNA链的酶。由于其特性,耐热性链置换DNA聚合酶无需DNA的双链解离,即可在恒定温度下合成DNA,且合成不受DNA二级结构的抑制。
特点
● 具有5’→ 3’DNA聚合酶活性与链置换活性
● 可在恒定温度下合成DNA
● 适用于合成GC含量高的DNA链
● 合成不受DNA二级结构抑制
应用
● 利用链置换活性的应用(等温基因扩增法等)
理想反应温度
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60°C~65°C
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失活时间*1
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80°C、5分钟
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*1 将酶原液直接热变性时的失活温度
来源
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嗜热脂肪芽孢杆菌
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活性
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8 units/μL
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单位定义
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1 unit指以小牛胸腺DNA为引物/模板,在65°C,30分钟的条件下将10 nmol的dNTP掺入酸不溶性沉淀物的酶量。
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储存液成分
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10 mmol/L Tris-HCl(pH 7.5), 1 mmol/L DTT, 0.1% Tween 20, 0.1 mmol/L
EDTA, 50% 丙三醇
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酶反应条件
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随酶附带10×的酶反应缓冲液(0.5 mL×1)。如反应总体积为50 μL,添加5 μL的酶反应缓冲液
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◆产品组成
Bst DNA Polymerase(1,600 units)
产品组分
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容量
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保存
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Bst DNA Polymerase(8units/μL)
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200微升×1
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-20°C
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10× Bst Reaction Buffer(80mmol/L Mg2+)
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500微升×1
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-20°C
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◆应用实例
实验案例1 LAMP法中的运用
LAMP法 反应条件
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3.0% Agarose 21
TAE凝胶电泳
EtBr染色
M:Gene Ladder Wide 1
1:A 公司Bst DNA Polymerase
2:本公司Bst DNA Polymerase
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Candidatus Liberibacter asiaticus DNA
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1 × 106copies
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FIP*
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40pmol
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BIP*
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40pmol
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F3 Primer*
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5pmol
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B3 Primer*
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5pmol
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Loop Primer F*
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20pmol
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Loop Primer B*
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20pmol
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dNTPs Mixture
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1.4mM each
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10 × Bst Reaction Buffer
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2.5μL
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Bst DNA Polymerase
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8units
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总计
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25μL
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反应
*引物序列
FIP: 5'-GCATGCCGAGGATCAATGCCTTGCTTAAAGAGCGTGCTACG-3'
BIP: 5'-TATGCCTAATGGCACGGGGGTAAGCTTCATCCGCCTTCGA-3'
F3 Primer: 5'-TGGGTTAAGTGATGCTGTGG-3'
B3 Primer: 5'-CAACAATATCAGCCCCTGCT-3'
Loop Primer F: 5'-TCTCAACTGTTTCATCAAACCTAGC-3'
Loop Primer B: 5'- CGTGGCGGTTTTTGCTACA-3'
实验案例2 RCA法评估Bst DNA Polymerase的耐热性与理想反应温度
RCA法 反应溶液组成
M13mp18 single strand DNA
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40ng
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Universal primer
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50mM
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dNTPs Mixture
|
1.4mM each
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Tris-HCl (pH 8.8 at 25°C)
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20mM
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KCl
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10mM
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(NH4)2SO4
|
10mM
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MgSO4
|
8mM
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Tween 20
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0.10%
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Betaine
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0.8M
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Bst DNA Polymerase
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4units
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总计
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20μL
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反应条件
结果
条带
M:Gene Ladder Wide 1
D:模板 DNA (M13mp8 single strand)
引物序列
5'-GTTTTCCCAGTCACGACGTTGTA-3'
电泳条件
0.7% Agarose S/TAE凝胶电泳
EtBr染色
使用不含SDS的上样缓冲液
备注
本实验为比较两种Bst DNA Polymerase,使用相同的反应液组成进行反应。在RCA法中使用各种酶配套的缓冲液时,须进行预实验探究反应体系。
◆相关信息
备注
● 本产品为实验研究用试剂。不可作为医药品使用。
● 检测柑橘黄龙病菌的LAMP引物组合是国立研究开发法人 农业、食品产业技术综合研究机
● 构九州冲绳农业研究中心灵活运用先进技术,在农林水产研究高度化事业“抑制顽固性疾病柑橘绿化病传播的技
● 术开发”中开发的产品。
许可
● LAMP法由荣研化学株式会社持有专.利权。
◆产品列表
产品编号
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产品名称
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包装
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311-07481
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Bst DNA Polymerase
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1600units
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◆相关产品
产品编号
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产品名称
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包装
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319-07281
|
Csa DNA Polymerase
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1600units
|
319-07301
|
96-7 DNA Polymerase
|
1600units
|
312-07271
|
dNTPs Mixture(25mM each)
|
400微升
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富士胶片和光(广州)贸易有限公司是日本富士胶片和光纯药株式会社(FUJIFILM Wako Pure Chemical Corporation,以下称”富士胶片和光”)在中国的子公司,主营富士胶片和光品牌试剂产品,囊括合成与材料、分析、培养、生命科学、药品生产与品质管理领域。和光纯药工业株式会社(前武田药品工业株式会社)成立于1922年,2017年被富士胶片集团全面收购而成为集团成员之一。富士胶片和光是日本的试剂企业,也是优质的试剂供应商,在美国、欧洲和中国都设有分公司。自成立以来,一直致力于高品质的试剂生产与开发,并获得ISO9001,ISO/IEC17025,ISO14000等(部分)多项认证。
通过对本次收购,富士胶片集团将充分发挥其在胶片领域积累的化学合成、纳米、生产等技术,在医疗健康事业、高性能材料事业两个核心业务中实现协同增效作用。尤其是医疗健康事业,在颇具市场潜力的再生医学、生物制药等领域都将产生巨大的协同增效作用。
富士胶片和光所供应的FUJIFILM Wako品牌试剂产品超过50,000多种,涉及生命科学、分析化学、有机、无机化学、生物工程、高纯度及认证标准品、食品、医药、环境分析、疾病和有效治疗研究、再生医疗研究、天然提取物、中药研究等,从基础研究至关乎人类健康的前沿的生命科学研究都有相关产品。
随着富士胶片集团对生命科学领域的更大重视和投入,今后富士胶片和光将继续为中国客户提供更多前沿、品质可靠的产品。