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AZ-20

发表于2024年9月6日由上海金畔生物科技有限公司

AZ-20

货号：

IA3560

品牌：

Jinpan

860.00￥/ 2mg 1760.00￥/ 5mg

暂无详情

产品简介

有效期	2年
描述	是一种有效的，选择性的 ATR 抑制剂；同时可抑制 mTOR 活性。
别名	4-[4-[(3R)-3-甲基-4-吗啉基]-6-[1-(甲基磺酰基)环丙基]-2-嘧啶基]-1H-吲哚
CAS	1233339-22-4
分子式	C21H24N4O3S
分子量	412.51
储存条件	-20℃
纯度	≥98%
外观（性状）	White to off-white Solid
单位	瓶
生物活性	AZ20 是一种有效的，选择性的 ATR 抑制剂，IC50 值为 5 nM；同时可抑制 mTOR 活性，IC50 值为 38 nM。[1]
IC50	ATR:5 nM; mTOR:38 nM ; PI3Kα:13000 nM [1]
In Vitro	AZ20抑制ATR从HeLa核提取物中免疫沉淀，IC50为5 nM，ATR介导HT29结直肠腺癌肿瘤细胞中Chk1的磷酸化，IC50为50 nM [1]。
In Vivo	AZ20（25,50mg / kg，口服）具有高渗透性和对大鼠肝细胞的良好稳定性，并且尽管在获得显著更高的溶解度方面缺乏进展，但在低剂量大鼠PK研究中具有可观的生物利用度。 AZ20（25,50 mg / kg，po）在携带LoVo肿瘤的雌性裸鼠中导致显著的肿瘤生长抑制[1]。
激酶实验	用于体外酶测定的ATR通过用以下缓冲液中含有的ATR的氨基酸400-480的兔多克隆抗血清进行免疫沉淀从HeLa核提取物获得：25mM HEPES（pH 7.4），2mM MgCl 2,250mM NaCl，0.5mM EDTA，0.1mM Na 3 VO 4,10％v / v甘油和0.01％v / v吐温20.通过与蛋白A-Sepharose珠孵育1小时然后通过离心从核提取物中分离ATR-抗体复合物。恢复珠子。在96孔板的孔中，将含有10μL含ATR的Sepharose珠与1μg底物谷胱甘肽S-转移酶-p53N66（与谷胱甘肽S-转移酶融合的p53的NH2-末端66个氨基酸）在E.中表达。大肠杆菌在ATR测定缓冲液（50 mM HEPES（pH 7.4），150 mM NaCl，6 mM MgCl 2,4 mM MnCl 2,0.1 mM Na3VO4,0.1 mM DTT和10％（v / v）甘油）中于37°C in是否存在抑制剂。在轻微摇动10分钟后，加入ATP至终浓度为3μM，并使反应在37℃下继续另外1小时。通过加入100μLPBS终止反应，并将反应物转移至涂有白色不透明谷胱甘肽的96孔板中，并在4℃温育过夜。然后将该板用PBS / 0.05％（v / v）吐温20洗涤，印迹干燥，并通过标准ELISA技术用磷酸丝氨酸15p53抗体分析。磷酸化谷胱甘肽S-转移酶-p53N66底物的检测与山羊抗小鼠辣根过氧化物酶偶联的二抗组合进行。增强的化学发光溶液用于产生信号，化学发光检测通过TopCount读板器进行。然后将得到的计算的％酶活性用于测定化合物的IC 50值（IC 50作为抑制50％酶活性的浓度）。
SMILES	O=S(C1(C2=CC(N3[C@H](C)COCC3)=NC(C4=CC=CC5=C4C=CN5)=N2)CC1)(C)=O
靶点	ATR，mTOR
动物实验	雌性Swiss nu / nu小鼠饲养在负压隔离器中。通过在左背侧皮下注射1×107个肿瘤细胞（100μL无血清培养基），在8至12周龄小鼠中建立LoVo肿瘤异种移植物。当肿瘤变得可触知时，将动物随机分入治疗组。 AZ20在10％DMSO / 40％丙二醇/ 50％水中制备并口服给药。用卡尺每周测量肿瘤最多三次。计算肿瘤体积，并使用每组的几何平均值对时间绘制数据。
细胞实验	通过使用Labcyte Echo声学分配仪器在100％DMSO中稀释然后进一步进入测定培养基（EMEM，10％FCS，1％谷氨酰胺）来产生化合物剂量范围。将细胞以9×10 4个细胞/ mL接种于384孔Costar板中，在40μLEMEM，10％FCS，1％谷氨酰胺中培养24小时。加入化合物后，将细胞温育60分钟。然后使用Labcyte Echo添加终浓度为3μM的4NQO（在100％DMSO中制备），并将细胞再温育60分钟。通过添加40μL的3.7％v / v甲醛溶液将细胞固定20分钟。去除固定后，用PBS洗涤细胞并在含有0.1％Triton X-100的40μLPBS中透化。然后洗涤细胞，并加入15μL一抗溶液（pChk1 Ser345）。将板在4℃温育过夜。然后洗去第一抗体，并在室温下加入20μL第二抗体溶液和1μMHoechst33258 90分钟。将板洗涤并留在40μLPBS中。然后在ArrayScan VTI仪器上读取平板以确定染色强度，并获得剂量响应并用于确定化合物的IC 50值。
数据来源文献	[1]. Foote KM, et al. Discovery of 4-{4-[(3R)-3-Methylmorpholin-4-yl]-6-[1-(methylsulfonyl)cyclopropyl]pyrimidin-2-yl}-1H-indole (AZ20): a potent and selective inhibitor of ATR protein kinase with monotherapy in vivo antitumor activity. J Med Chem. 2013 Mar 14
规格	2mg 5mg

VE-821

发表于2024年7月26日由上海金畔生物科技有限公司

VE-821

货号：

IV0680

品牌：

Jinpan

820.00￥/ 5mg 1360.00￥/ 10mg

暂无详情

产品简介

别名	3-氨基-6-[4-(甲基磺酰基)苯基]-N-苯基-2-吡嗪甲酰胺
CAS	1232410-49-9
分子式	C18H16N4O3S
分子量	368.41
储存条件	-20℃
纯度	Purity≥98%
单位	瓶
生物活性	VE-821 是一种有效的 ATP 竞争性的 ATR 抑制剂，Ki/IC50 为 13 nM/26 nM。 VE-821也抑制ATM和DNA-PK，IC50分别>8μM和4.4μM。[1-4]
In Vitro	VE-821对ATR具有出色的选择性，与相关的PIKKs ATM，DNA-PK，mTOR和PI3Kγ（分别为16μM，2.2μM，>1μM和3.9μM的Kis）的交叉反应性最小，并且对大量的不相关的蛋白激酶[1]。在正常氧和缺氧条件下，VE-821显著增强PSN-1，MiaPaCa-2和原发性PancM胰腺癌细胞对辐射和吉西他滨的敏感性。 VE-821的ATR抑制导致癌细胞中辐射诱导的G2/M停滞的抑制。在PSN-1和MiaPaCa-2细胞中，1μMVE-821在照射后2小时用吉西他滨（100nM），放射线（6Gy）或两者处理后抑制Chk1（Ser345）的磷酸化[3]。 。
激酶实验	使用辐射 – 磷酸盐掺入测定法测试化合物（例如，VE-821）抑制ATR，ATM或DNAPK激酶活性的能力。制备由适当的缓冲液，激酶和靶肽组成的储备溶液。向其中加入不同浓度的目标化合物在DMSO中至最终DMSO浓度为7％。通过加入适当的[g-33P] ATP溶液开始测定，并在25℃温育。在所需的时间过程后，通过分别加入磷酸和ATP至终浓度100mM和0.66μM，停止测定。将肽捕获在磷酸纤维素膜上，制备，并用200μL100mM磷酸洗涤六次，然后加入100μL闪烁混合物并在1450 Microbeta液体闪烁计数器上进行闪烁计数。使用GraphPad Prism软件分析剂量 – 反应数据[2]。
SMILES	O=C(NC1=CC=CC=C1)C2=NC(C3=CC=C(C=C3)S(=O)(C)=O)=CN=C2N
靶点	ATM/ATR
细胞实验	将MiaPaCa-2，PSN-1和Panc1细胞（5×104）接种在96孔板中，4小时后用1μL浓度的增加浓度的VE-821处理，然后用4Gy单剂量照射。在照射后72小时更换培养基，此时使用Alamar Blue测定法测量活力。允许细胞增殖，并且在第10天再次分析细胞活力以用于不同的治疗条件。将细胞活力和存活分数标准化为未处理（对照）组[3]。
数据来源文献	[1]. Reaper PM, et al. Selective killing of ATM- or p53-deficient cancer cells through inhibition of ATR. Nat Chem Biol. 2011 Apr 13;7(7):428-30. [2]. Charrier JD, et al. Discovery of potent and selective inhibitors of ataxia telangiectasia mutated and Rad3 related (ATR) protein kinase as potential anticancer agents. J Med Chem. 2011 Apr 14;54(7):2320-30. [3]. Prevo R, et al. The novel ATR inhibitor VE-821 increases sensitivity of pancreatic cancer cells to radiation and chemotherapy. Cancer Biol Ther. 2012 Sep;13(11):1072-81. [4]. Muralidharan SV, et al. BET bromodomain inhibitors synergize with ATR inhibitors to induce DNA damage, apoptosis, senescence-associated secretory pathway and ER stress in Myc-induced lymphoma cells. Oncogene. 2016 Sep 8;35(36):4689-97
规格	5mg 10mg

VE-821是一种有效的，选择性的，ATP竞争性ATR抑制剂。