带您了解免疫检查点靶点之CTLA-4

带您了解免疫检查点靶点之CTLA-4

在全球范围内,癌症仍然是死亡和发病的主要原因。早期诊断和癌症治疗的进步提高了癌症患者的存活率,但在这些患者中有相当一部分表现出耐药性、转移和复发。在癌症治疗的困境和挑战中,一个有希望的治疗方式就是免疫疗法,利用T细胞群直接杀死恶性肿瘤细胞,其中一个热门靶点就是CTLA-4。


CTLA-4名称为细胞毒性T淋巴细胞抗原4 ,在Treg细胞群上表达的一组免疫调节受体。多篇文献研究表明CTLA-4的免疫检查点阻断提高了肾细胞癌、黑色素瘤、非小细胞肺癌(NSCLC)和头颈部鳞状细胞癌的存活率。CTLA-4是T细胞共刺激配体CD80/86的第二个受体,其功能对下调免疫反应至关重要。与抗原依赖性的第一受体(CD28)相反,CTLA-4是抗原非依赖性的。2011年,Ipilimumab是第一个获得FDA批准用于治疗晚期黑色素瘤的针对CTLA-4的免疫治疗药物,与标准疗法相比,该抗体药物提高了患者的存活率。


T细胞受体(TCR)与通过主要组织相容性复合体(MHC)呈递的抗原的结合需要通过CD28传递的共刺激第二信号来激活。CTLA-4是一种竞争性CD28同源物,结合CD28配体CD80/86,阻止T细胞活化。CTLA-4也介导CD28配体CD80/86的胞吞作用。PD-1与其配体PD-L1结合,负调节T细胞活化。CD28也是PD-1的第二靶位,也是两条通路的交汇点。TCR激活后,CTLA-4和PD-1表达均上调。这两种途径的细胞内信号是通过抑制PI3K下游信号的含有蛋白酪氨酸磷酸酶(SHP-2)的磷酸酶Src同源区-2介导的。此外,CTLA-4与丝氨酸/苏氨酸磷酸酶PP2A相互作用,使AKT去磷酸化,进一步抑制该途径。


 

图1. CTLA-4作用通路


BioXcell有超过十五年单克隆抗体生产经验,能够提供以下几种CTLA-4抗体用于该靶点的研究:

抗体克隆号

9H10

9D9

UC10-4F10-11

InVivoPlus系列货号

BE0131

BE0164

BE0032

InVivoMAb系列货号

BP0131

BP0164

BP0032

Isotype

Syrian hamster IgG

Mouse IgG2b

Armenian hamster IgG

实验应用

in vivo CTLA-4 neutralization

in vitro CTLA-4 neutralization Western blot

in vivo CTLA-4 neutralization Western blot

in vivo CTLA-4 neutralization

in vitro CTLA-4 neutralization

Flow cytometry Western blot

免疫原

Mouse CTLA-4-human IgG1 fusion protein

Not available or unknown

Mouse CTLA-4 IgG2a fusion protein

纯度

>95% Determined by SDS-PAGE

>95% Determined by SDS-PAGE

>95% Determined by SDS-PAGE

同型对照

InVivoMAb polyclonal Syrian hamster IgG

InVivoMAb mouse IgG2b isotype control, 

unknown specificity

InVivoMAb  polyclonal Armenian hamster IgG

推荐稀释液

InVivoPure pH 7.0 Dilution Buffer

InVivoPure pH 7.0 Dilution Buffer

InVivoPure pH 6.5 Dilution Buffer

 

以上内容引用于以下文献:

Sobhani N, Tardiel-Cyril D R, Davtyan A, et al. CTLA-4 in regulatory T cells for cancer immunotherapy[J]. Cancers, 2021, 13(6): 1440.

Willsmore Z N, Coumbe B G T, Crescioli S, et al. Combined anti‐PD‐1 and anti‐CTLA‐4 checkpoint blockade: Treatment of melanoma and immune mechanisms of action[J]. European Journal of Immunology, 2021, 51(3): 544-556.

 

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表观遗传修饰阅读器”reader”蛋白结构域靶点的发现

表观遗传修饰阅读器”reader”蛋白结构域靶点的发现

*注解: 将能识别特异性表观修饰并与其结合的蛋白喻为“读者或阅读器(readers)”

众所周知,小分子物质很难抑制蛋白质相互作用(Protein-Protein Interactions, PPI)。但由于PPI广泛存在及其生理重要性,因此发现和确认PPI药理学靶点就非常具有吸引力。目前虽有一些文献报道了PPI小分子抑制剂的例子,但仅有少数具有临床意义。不能有效鉴别这类靶点主要归因于PPI相互作用界面的本质特点。蛋白-小分子作用的接触面大约为300~1000Å2左右,而蛋白-蛋白相互作用的接触面则为1500~3000Å2之间。而且, 蛋白-蛋白相互接触的表面往往是平坦的,不会存在很多沟槽或者口袋, 使得小分子化合物找不到适合的结合位点。尽管如此,但成功鉴别这些相互作用的药物靶点对于人类健康事业极其重要。因此,近年来关于蛋白-蛋白相互作用小分子抑制剂的研究已经成为全球药物化学家关注的热点。

表观遗传及组蛋白密码

基因转录调控依赖于适当的转录因子结合到靶基因启动子区域。尽管调控基因表达的信号复杂多样,但其中一个主要的调控机制是通过DNA及组蛋白修饰来介导完成的。这些修饰标记以及参与修饰和去除修饰的相关蛋白(酶),形成了转录调控的重要基础。近年采用质谱法鉴定出了上百种组蛋白翻译后修饰(Posttranslational modifications, PTMs),其中最主要的PTMs存在于组蛋白的N-末端。虽然大多数修饰标记的生理学意义还未知,但一些关键的翻译后修饰已定义了明确的生物学活性。

可以说,到目前研究最深入的组蛋白翻译后修饰就是赖氨酸乙酰化。组蛋白赖氨酸乙酰化可弱化DNA-组蛋白相互作用,募集相关转录因子。该修饰是基因进行转录活化的标志。乙酰赖氨酸(Acetyllysine)可被称为溴结构域的蛋白基序(motif)选择性识别。目前在人类基因组中至少已鉴定出43种含溴结构域的蛋白质(如图1),其中大多数为重要的转录调控因子。溴结构域一般由60-120个氨基酸残基组成。二级结构为双性α-螺旋,三级结构为左手上下四螺旋束状结构,含一个疏水穴(Hydrophobic pocket)。已发现人类某些疾病与溴结构域突变相关。

 

表观遗传修饰阅读器”reader”蛋白结构域靶点的发现

  图1.含溴结构域蛋白聚类分析

尽管溴结构域在生物医学研究上获得重大关注,但其他阅读器”Reader”蛋白结构域异常也具有显著的生理学效应。基因转座使得甲基赖氨酸阅读器”reader”结构域从JARID1A或PHF23与Nucleoporin-98融合,导致维持细胞多能性的基因过量表达,而引起肿瘤发生。甲基赖氨酸阅读器蛋白结构域家族至少含有200个成员,分布于不同的亚家族。该大家族蛋白成员结构域各异,与甲基化赖氨酸的位置和甲基化状态具有高度特异性。与赖氨酸乙酰化相比,组蛋白甲基化的发生具有位点特异性。同样,许多甲基赖氨酸阅读器“Reader”也是与被修饰残基周围的氨基酸残基反应(其提供了序列特异性结构域)。这与赖氨酸甲基化在募集转录因子和其他染色质修饰酶等方面的作用密切相关。此外,其他的组蛋白翻译后修饰识别结构域也被广泛研究,包括结合磷酸化丝氨酸的BRCT家族、甲基化DNA结合蛋白(如MBD结构域)、甲基精氨酸结合蛋白(如ADD结构域)。一些阅读器“reader”结构域突变与某些疾病相关联,比如甲基CpG结合蛋白2(MeCP2)突变会破坏DNA结合基序(motif),会导致一种称为Rett综合症的X染色体连锁精神和生理发育迟滞症。BRCT结构域,识别磷酸化的组蛋白尾(histone tails),参与到DNA损伤应答元件的募集,BRCA1蛋白的BRCT结构域发生突变,会增加家族性患乳腺癌和卵巢癌的风险。

 表观遗传修饰阅读器”reader”蛋白结构域靶点的发现

  图2. 甲基赖氨酸阅读器结构域具结构多样性

表观遗传与药物发现

 

由于表观遗传修饰阅读器结构域的生理重要性,那么药理操纵这些蛋白相互作用(PPI)也为疾病管理提供了新的途径。最先进的一类以表观遗传阅读器结构域为靶点的抑制剂,来源于鉴定可提高肝细胞产生载脂蛋白A-1的分子表型筛选(phenotypic screens)。机理研究从筛选中鉴定出了先导化合物以及相关的化合物(+)-JQ1, 作为BET家族溴结构域的抑制剂。尽管ApoA-1水平升高对于心血管的好处仍存争议,但是BET溴结构域抑制已被证明能有效减缓NUT midline carubinas肿瘤(是一种罕见又致命的恶性皮肤癌,通常NMC患者的存活时间不足1年)生长。这一初始工作也有助于开发一种抗Midline carcinomas(NCT01587703)肿瘤的新型化疗药物,目前已经进入临床I期。另外一种BET溴结构域抑制剂,RVX-208,也作为糖尿病前期葡萄糖代谢药物进入临床II期。

由于BET家族溴结构域抑制剂的偶然发现,众多学术及企业界研究团体备受鼓舞,积极投身其他溴结构域靶点的发现。一个结构基因组学联盟项目就已经结晶解析出了很多溴结构域,并针对不同溴结构域筛选了选择性的小分子抑制剂(www.thesgc.org) [注:Cayman公司可提供很多此类小分子化合物]。其他阅读器结构域的小分子抑制剂也被鉴定出来,如以L3MBTL和L3MBTL3的甲基赖氨酸结合结构域为靶点小分子(如 UNC1215, Cayman货号# 13968)。

鉴于表观遗传修饰阅读器结构域在基因表达调控方面的重要性,那么这些蛋白基序家族则为药物研发提供了新的有前景的领域。实际上,目前研究发现BET溴结构域抑制剂不仅具有抗增值作用,还包括抗体病毒和抗炎症的作用。为了帮助全球从事该领域的科研人员更好的解析决读器蛋白结构域,Cayman公司可提供多种纯化的阅读器结构域、抑制剂筛选试剂盒以及化合物探针。随着该领域的深入研究,也希望有更多新型的表观修饰阅读器结构域抑制剂被鉴定出来,以此推动药物早期筛选的进程。

————————————————————————- 文: 金畔市场部 Harry 编译 ————————————————————————-

研究工具推荐
蛋白甲基化修饰阅读器(Readers)Tudor结构域及PHD锌指结构域– 通常与ditri甲基化赖氨酸反应,当成对存在时也称为“tandem Tudors”, 也可识别对称性甲基化精氨酸

 

 编号
 产品名称
 识别位点
 纯度
 14134
 JMJD2A tudor domains(humna recombinant)
 Histone H3K4me,H3K9me3,and H3K20me2/3
 ≥90%
 14136
 SMN tudor domain(human recombinant) 
 Methylated Sm proteins,Which bind small nuclear RNA
 ≥90%
 14073
 TP53BP1 tudor-like region(human recombinant)
 Dimethylated lysine 382 on p53 and histone H4K20me2
 ≥90%
 14777
 UHRF1 PHD domain(human recombinant)
 Histone H3R2me0(unmetylated)
 ≥95%
 14778
 UHRF1 tudor-like region(human recombinant,GST-tagged)
 Histone H3K9me3
 ≥95%
 14779
 UHRF1 tudor-like region(human recombinant,His-tagged)
 Histone H3K9me3
 ≥95%
克罗莫结构域及异染色质蛋白(chromodomains and heterochromatin proteins) — 结合mono, di-tri-methyl H3K4/9/27

 编号  产品名称   识别位点  纯度
 14768  CBX1(human recombinant)  Chromodomain recognizes histones 
 H3K9me2 and H3K9me3,with a pref-
 erence for H3K9me3,While the  chro-
 moshadow domain is responsible  
 for homodimerization and interaction 
 with a nuclear of non-histone chrom-
 atin-associated proteins
 ≥95%
 14769  CBX2 chromodomain(human recombinant)  Histone H3K9me3 or H3K27me3  ≥90%
 11235  CBX5(human recombinant)  Chromodomain recognizes histones 
 H3K9me2 and H3K9me3,with a pre-
 ference for H3K9me3,While the chro-
 moshadow domain facilitates 
 protein-proteins interactions
 ≥95%
 14772  CHD1 chromodomains(human recombinant)  Histone H3K4me2/3  ≥90%
 14773  CHD2 chromodomains(human recombinant)  Histone H3K4me  ≥90%
MBT(恶性脑瘤The malignant brain tumor)域–主要结合mono- di-甲基化赖氨酸,通常以多个MBT-重复序列(2,3或4)存在,其仅结合甲基化赖氨酸
 编号
 产品名称
 识别位点
 纯度
 14775
 L3MBTL1 MBT domains(human r ecombinant;GST-tagged)
 Histones H3K4me1 and H4K20me2
 ≥90%

 

WD40重复蛋白(WD40 Repeat-containing Proteins)
 编号  产品名称  识别位点  纯度
 10628  EED(human recombinant)  Forms part of the Polycomb repressive com-
 plex2; transcriptional repression by PRC2-
 mediated H3K27me3 is dependent on EED 
 binding to repressive histone marks
 ≥95%
 10947  RbBP5(human recombinant)  Binds directly to with underphosphorylated 
 tumor suppressor retinoblastoma protein; 
 interacts directly with WDR5 contribution to the 
 activation of the MLL1 core proteins complex
 ≥90%
 10944  WDR5(human recombinant)  Contains seven WD40 repeats and binds 
 histone H3 by recognizing the first three amino 
 acids of the N-terminal tail; binding to a 
 conserved arginine-containing motif in MLL-1 
 promotes the assembly and activity of MLL core 
 complex.
 ≥95%

                  

组蛋白乙酰化修饰阅读器(Readers):溴结构域(Bromodomains)
 编号  产品名称  功能  纯度
 14489  ASH1L bromodomain (humanre 
 combinant)
 ASH1L is a histone methyltransferase that 
 regulates mammalian Hox gene expression, 
 which plays an important role in haemato-
 poietic development in mammals.
 ≥90%
 14490  ATAD2 bromodomain (human 
 recombinant)
 ATAD2 is an AAA+ ATPase-containing nuclear 
 transcriptional coactivator for estrogen and 
 androgen receptors. Its bromodomain 
 associates with acetylated lysine 14 on histone 
 H3 to regulate the genes required  for cell cycle 
 progression.
 ≥90%
 11917  BAZ2B bromodomain (human 
 recombinant)
 A rare allele of BAZ2B has been identified to be 
 a predictor of Sudden Cardiac Death.
 ≥80%
 11918  BPTF bromodomain (human 
 recombinant)
 BPTF is the largest component of the NURF 
 chromation remodeling complex.Its 
 bromodomain recognizes acetylation of lysines 
 in histone 4.
 ≥80%
 11507  BRD1 bromodomain (human 
 recombinant)
 BRD1 has been identified as a susceptibility 
 gene in neurological disorders, such as 
 schizophrenia and bipolar affective disorder.
 ≥95%
 11071  BRD2 bromodomain1 (human 
 recombinant; GST-tagged)
 A member of the BET protein family, which 
 plays a key role in many processes. The 
 bromodomains of BRD2 bind acetylated 
 histone tails, coupling histone acetylation 
 marks to the transcriptional regulation of target 
 promoters.
 ≥95%
 11070  BRD2 bromodomain 2 (human 
 recombinant;GST-tagged)
 See Item No. 11071 for details.  ≥95%
 11069  BRD2 bromodomains 1 and 2 (human 
 recombinant;GST-tagged)
 See Item No. 11071 for details.  ≥90%
 11285  BRD3 bromodomain 1 (human 
 recombinant)
 The BET proteins play a key role in many 
 cellular processes, including inflammatory 
 gene expression, mitosis, and viral/host 
 interactions.The bromodomains of BRD3 bind 
 acetylated histone tails, coupling histone 
 acetylation marks to the transcriptional 
 regulation of target promoters.
 ≥95%
 14658  BRD3 bromodomain 2 (human 
 recombinant)
 See Item No. 11285 for details.  ≥95%
 14864  BRD3 bromodomain 1 and 2 (human 
 recombinant)
 See Item No. 11285 for details.  ≥95%
 11068  BRD4 bromodomain 1 (human 
 recombinant; GST-tagged)
 The BET proteins play a key role in many 
 cellular processes, including inflammatory 
 gene expression, mitosis, and viral/host 
 interactions.The bromodomains of BRD4 bind 
 acetylated histone tails, serving to couple 
 histone acetylation marks to the transcriptional 
 regulation of target promoters.
 ≥60%
 11720  BRD4 bromodomain 1 (human 
 recombinant; His-tagged)
 See Item No. 11068 for details.  ≥95%
 11066  BRD4 bromodomain 2 (human  
 recombinant; GST-tagged)
 See Item No. 11068 for details.  ≥95%
 11721  BRD4 bromodomain 2 (human 
 recombinant; His-tagged)
 See Item No. 11068 for details.  ≥95%
 14822  BRD4 bromodomains 1 and 2 (human 
 recombinant; aa2-477)
 See Item No. 11068 for details.  ≥70%
 11052  BRD4 bromodomains 1 and 2 (human 
 recombinant; aa49-460)
 See Item No. 11068 for details.  ≥90%
 14491  BRD7 bromodomain (human 
 recombinant)
 BRD7 is subunit of the polybromo-associated 
 BRG1-associated factor(PBAF)-specific 
 component of the switch/sucrose nonfermen-
 table chromation-remodeling complex.It has a 
 tumor suppressor role by acting as a cofactor 
 for p53 and regulating breast cancer tumori-
 genicity.
 ≥90%
 11509  BRD9 bromodomain (human 
 recombinant)
 Human BRD9 contains a single bromodomain 
 and has five isoforms that are produced by 
 alternative splicing.
 ≥95%
 11548  BRDT bromodomain 1 (human 
 recombinant)
 BRDT shares homology with RING3 protein. 
 The two bromodomains of BRDT recognize 
 acetylated histone H4, Loss of BRDT leads to 
 defects in spermatogenesis.
 ≥95%
 11649  BRDT bromodomain 2 (human 
 recombinant)
 See Item No. 11548 for details.  ≥95%
 14492  BRDT bromodomains 1 and 2 (human 
 recombinant)
 See Item No. 11548 for details.  ≥95%
 11284  BRG1 bromodomain (human 
 recombinant)
 BRG1 is a member of the SWI/SNF proteins 
 family, which forms part of the large ATP-
 dependent chromatin remodeling complex that 
 is requires for transciptional activation of genes 
 normally repressed by chromatin.
 ≥95%
 11289  BRM bromodomain (human 
 recombinant)
 BRM is a member of the SWI/SNF proteins 
 family, which forms part of the large ATP-
 dependent chromatin remodeling complex that 
 is requires for transciptional activation of genes 
 normally repressed by chromatin.
 ≥95%
 11650  BRPF3 bromodomain 1 (human 
 recombinant)
 BRPF3 is a component of the MOZ/MORF 
 histone acetytransferase(HAT) complex.The 
 addition of BRPF proteins to MOZ/MORF 
 increases its HAT activity.This product contains 
 the first bromodomain of BRPF3.
 ≥95%
 14133  CECR2 bromodomain (human 
 recombinant)
 CECR2 is a transcription factor that forms a 
 heterodimeric complex with the ATP-dependent 
 chromation remodeler SNF2L forming the 
 CERF, which plays a critical role in neurula-
 tion. The bromodomain of CECR2 has strong 
 γ-H2AX inhibition activity suggesting that CEC-
 R2 may play a role in DNA damage response.
 ≥95%
11288  CREB-binding protein bromodomain (human 
 recombinant)
 The CREBBP bromodomain has been shown 
 to modulate the stability and function of the 
 tumor suppressor protein p53. CREBBP brom-
 odomain recognizes the acetylated lysine 
 residue 382 on p53.
 ≥95%
11920  PCAF bromodomain (human recombinant)  p300/CBP-associated factor(PCAF) is a tran-
 scriptional coactivator that works both as a 
 histone lysine acetytransferase, through its 
 HAT domain, and as an acety-lysine reader 
 throung its conserved bromodomain located 
 directly C-terminal to the HAT domain.The 
 PCAF bromodomain binds acetylated histone 
 H3 and H4 as well as non-histone targets.
 ≥95%
11652  Polybromo-1D bromodomain 1 (human 
 recombinant)
 PBRM1 contains six bromodomains and is a 
 component of the SWI/SNF complex, PBAF. 
 PBAF is target to acetylated sites in chromatin 
 by the PBRM1 bromodomains, where it plays a 
 role in cell cycle regulation and tumor 
 suppression.
 ≥95%
14659  SP140 PHD and bromodomain (human 
 recombinant)
 The C-terminal PHD and bromodomain 
 regions of SP140 work in concert to bind to 
 chromatin and regulate gene transcription. 
 Nuclear bodies, which are involved in the 
 pathogenesis of acute promyelocytic leukemia 
 and viral infection, consist of several 
 components,such as Sp100, NDP52,PML, and 
 SP140.
 ≥95%
11922  TAF1 bromodomain 1 (human recombinant)  TAF1 is a component of transcription factor IID, 
 and binds to core promoter sequences at the 
 transcription start site. TAF1 helps control 
 transcription by both its kinase and histone 
 acetyltranferase enzymatic activities. This 
 protein product contains the first bromodomain 
 of TAF1.
 ≥95%
14495  TAF1 bromodomain 2 (human recombinant)  Contains the second bromodomain of TAF1  ≥95%
14494  TAF1 bromodomains 1 and 2 (human 
 recombinant)
 Contains the first and second bromodomains 
 of TAF1
 ≥90%
11653  TRIM24 bromodomain (human recombinant)   TRIM24 is a transcriptional confactor whose 
 inactivation leads to hepatocellular carcinoma 
 in mice. The N-terminal TRIM domain of TRIM-
 24 binds ligand-bound nuclear receptors, while 
 its tandem C-terminal plant homeo-domain 
 and bromodomain target TRIM24 to acetylated 
 histones in chromatin.
 ≥95%
14660  TRIM28 PHD and bromodomain (human 
 recombinant) 
 TRIM28, a  KRAB associated protein, in-
 teracts with SETD1 and other methyltrans-
 ferases for gene silencing of endogenous 
 retroviruses during embryogenesis.The PHD 
 finger of TRIM28 plays an important role in  
 gene silencing.The PHD domain and bromo-
 domain of TRIM28 work together to facilitate 
 lysine SUMOylation, which is a requirement 
 for TRIM28 activity in gene silencing.
 ≥85%
14661  TRIM33 PHD and bromodomain (human 
 recombinant) 
 TRIM33 is a multi-domain regulator of 
 transcription that is necessary for emb-
 ryogenesis. TRIM33 is targeted to DNA by 
 its tandem PHD and bromodomain, which 
 bind histone 3 at H3K9me3 and 
 H3K18ac,respectively.
 ≥80%
11549  WDR9 bromodomain 2 (human recombinant)  WDR9 pessesses two bromodomain 
 motifs and eight WD repeats.It is also 
 known to interact with BRG1 (SMARCA4).
 ≥85%

                                                                                                                                                                                                               

DNA甲基修饰阅读器 (Readers)
 编号  产品名称  识别位点  纯度
 11286  MBD2 (human recombinant; methyl binding 
 domain aa 150-220
 5-Methylcytosine in promoters on 
 CpG islands
 ≥95%
 11287  MeCP2 (human recombinant; 
 methyl binding domain aa 77-166
 5-Methylcytosine in promoters on 
 CpG islands; high affinity binding 
 is facilit-ated by DNA fragments 
 containing A/T bases[A/T]≥4) adj-
 acent to the methyl-CpG.
 ≥95%
溴结构域TR-FRET分析试剂盒/Bromodomain TR-FRET Assay Kits
— 可用于高通量快速鉴定溴结构域/乙酰化肽相互作用的抑制剂

 

图. 溴结构域TR-FRET(时间分辨率荧光共振能量转移)分析试剂盒原理示意图。该检测利用铕螯合物标记的重组溴结构域作为供体,乙酰化的组蛋白肽与链亲和素-APC偶联作为受体。铕螯合物受激发后释放光子或传递给APC分子

  

 编号
 产品名称
 600710
 BAZ2B bromodomain TR-FRET Assay Kit
 600500
 BRD2 bromodomain 1 TR-FRET Assay Kit
 600510
 BRD2 bromodomain 2 TR-FRET Assay Kit
 600810
 BRD2 bromodomains 1 and 2 TR-FRET Assay Kit
 600630
 BRD3 bromodomain 1 TR-FRET Assay Kit
 600820
 BRD3 bromodomains 1 and 2 TR-FRET Assay Kit
 600640
 BRD3 bromodomain 2 TR-FRET Assay Kit
 600520
 BRD4 bromodomain 1 TR-FRET Assay Kit
 600530
 BRD4 bromodomain 2 TR-FRET Assay Kit
 600830
 BRD4 bromodomains 1 and 2 TR-FRET Assay Kit
 600650
 BRDT bromodomain 1 TR-FRET Assay Kit
 600720
 BRG1 bromodomain TR-FRET Assay Kit
 600730
 BRM bromodomain TR-FRET Assay Kit
 600850
 CBP bromodomain TR-FRET Assay Kit
 600870
 TAF-1 bromodomain 1 TR-FRET Assay Kit
 600930
 TAF-1 bromodomains 1 and 2 TR-FRET Assay Kit

    肿瘤靶点蛋白

    肿瘤靶点蛋白

    美国BioVision公司可提供一系列CAR-T细胞治疗靶点蛋白,Human CellExp™系列重组蛋白包含人类蛋白质中所有会影响活性、功能和半衰期的翻译后修饰,在亚单位组装、折叠、分泌和其他过程方面也模拟了天然人蛋白,Human CellExp™系列重组蛋白具有以下特性:

    来源:在HEK293细胞中表达,在无血清培养基中生产,无病原体

    高纯度:经SDS-PAGE检测纯度> 95% 

    低内毒素:<1eu>

    高活性:经ELISA和其他生物学试验检测

    多种属:可提供多个种属的蛋白(Human, Mouse, Rat)

    可提供的蛋白指标:

    BCMA/ TNFRSF17 CAIX/CA9 CD19 CD22 CD30
    CD33 CD38 CD70 CD138 EGFR / ErbB1
    EGFRvIII EpCAM / Cd326 FOLR1 GPC3 ErbB2 / HER2 / CD340
    HGFR / c-MET IL13RA2 / Cd213 MSLN MUC-1 ROR1

    更多详情请咨询上海金畔生物

    Tau单体:潜在的治疗靶点

    Tau单体:潜在的治疗靶点

    由 MAPT 基因编码的微管相关蛋白 tau 主要在神经元中表达,在许多生理进程中发挥重要作用。神经元细胞内tau蛋白的异常过度磷酸化和 tau 聚集是阿尔茨海默病、帕金森病和许多其他所谓的 tau 蛋白病的典型标志,突出了理解和预防或逆转这一过程的必要性。通过针对 tau 进行治疗干预,研究人员希望改善患者的治疗效果,并为目前无法治愈的神经退行性疾病开发有效的治疗方法。

    为什么要研究tau单体?

    在正常情况下,tau 蛋白以单体的形式存在,在成人大脑中有六种不同的异构体(长度从 352 – 441 个氨基酸不等)1。它们参与调节微管组装和稳定性,这对于轴突生长和突触小泡的运输至关重要。然而,在病理条件下,过度磷酸化的 tau 单体与带负电的微管分离,首先聚集成寡聚体,然后聚集成神经原纤维缠结 (NFT),随后导致神经元变性 2,3。

    尽管tau 蛋白病理学还没有被完全了解,但目前有几种假设。其中一个是,从野生型 tau 衍生出的具有聚集能力的 tau 单体通过结构转变可能可以诱发聚集,而阻止这种转化的就具有治疗潜力4。另一个假说是溶酶体应激可能会刺激具有聚集能力的单体 tau 释放到细胞外空间,促使研究人员考虑抑制溶酶体胞吐作用的治疗效用 5。众所周知,疾病相关的突变会破坏 tau 中易于聚集的 VQIVYK 基序的稳定性,因此这被证明可能是一个有价值的治疗靶点6。

    Tau 单体如何用于聚集实验?

    各种模型已经被开发用来研究 tau 蛋白聚集过程,其中许多模型依赖重组 tau 单体在体外复制聚集体组装。有一种常用的方法是使用聚集诱导剂,例如聚阴离子(例如肝素)、脂肪酸(例如花生四烯酸)或预先形成的 tau 细丝,使用荧光探针硫黄素 T(结合富β折叠的结构)以实时监测聚集体的形成;利用这种方法可以比较不同 tau 异构体、截短的 tau 结构域或蛋白质突变形式的聚集情况3。其他类型的检测旨在研究在各种细胞系中过度表达 tau 单体的影响,也会使用硫磺素 T 等辅助方法来跟踪聚合的产生。

    高品质  tau 蛋白单体用于聚集实验

    StressMarq提供各种形态和种类的tau蛋白用于神经衰退研究。这些蛋白包括活性重组人Tau441 (2N4R), P301S 突变蛋白单体,有 E. coli 表达的(SPR-327) 和杆状病毒表达的 (SPR-473), 活性重组人Tau441 (2N4R) 野生型蛋白单体 (SPR-479), 活性重组人 Tau (K18), P301L 突变蛋白单体 (SPR-328), 以及活性重组人 Tau (K18) K280 缺失突变单体 (SPR-476). 另外还有活性重组人截短 Tau 片段(AA297-391) 蛋白单体 dGAE (SPR-444) 和 dGAE C322A 突变单体(SPR-445), 以及活性重组小鼠Tau441 (2N4R), P301S 突变蛋白单体 (SPR-474). 大部分蛋白都经过了硫磺素 T 检测来验证聚集性。

    Thioflavin T is a fluorescent dye that binds to beta sheet-rich structures, such as those in tau fibrils. Upon binding, the emission spectrum of the dye experiences a red-shift and increased fluorescence intensity. Thioflavin T emission curves show increased fluorescence (correlated to tau aggregation) over time when truncated tau fragment (AA297-391) (dGAE C322A) monomer is combined with truncated tau fragment (AA297-391) (dGAE C322A) preformed fibrils (Type 1).


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