透明室-用于组织透明化样品的成像室透明组织化-wako富士胶片和光

透明室-用于组织透明化样品的成像室
透明室是在使用显微镜观察组织透明化样品时使用的观察容器。透明室由10套硅橡胶板、盖玻片和载玻片组成，它能让您轻松地观察组织透明化后的样品。其中有五种厚度的硅橡胶可供作垫片，分别为0.3 mm、0.5 mm、1.0 mm、2.0 mm和3.0 mm，可根据您的样品选择所需尺寸。

用于组织透明化样品的成像室

透明室

透明室是在使用显微镜观察组织透明化样品时使用的观察容器。透明室由10套硅橡胶板、盖玻片和载玻片组成，它能让您轻松地观察组织透明化后的样品。其中有五种厚度的硅橡胶可供作垫片，分别为0.3 mm、0.5 mm、1.0 mm、2.0 mm和3.0 mm，可根据您的样品选择所需尺寸。

硅橡胶板的两侧贴有保护膜，可在使用时剥离，从而使载玻片与盖玻片紧密接触。

◆透明化工序（使用SeeDB时）

1. 在4°C下用4％多聚甲醛/ PBS固定小鼠大脑，过夜。

2. 用PBS清洗3次样品（各10 min）。

3. 将样品放入装有20 mL SeeDB:20 w/v% Fructose Solution的50 mL锥形管中。在室温下，用旋转器旋转试管

3. 4~8 h（月4 rpm）。易损的样品和切片可使用跷跷板振荡摇床。（约17 rpm）。

4. 将样品转移至装有SeeDB：40 w/v% Fructose Solution的50 mL锥形管中，室温下旋转4~8 h。

5. 将样品转移至装有SeeDB：60 w/v% Fructose Solution的50 mL锥形管中，室温下旋转4~8 h。

6. 将样品转移至装有SeeDB：80 w/v% Fructose Solution的50 mL锥形管中，室温下旋转12 h。

7. 将样品转移至装有SeeDB：100 w/v% Fructose Solution的50 mL锥形管中，室温下旋转12 h。

8. 将样品转移至装有SeeDB的50 mL锥形管中，室温下旋转24 h。

图1. 使用SeeDB的生物体样品的透明化

从左至右分别为使用SeeDB透明化处理的小鼠胎儿（胎儿12天），新生小鼠（生后3天）的全脑，成年小鼠大脑切片（8周龄，厚度2 mm）的案例。

◆安装方法

1. 使用与样品尺寸相匹配的透明室

2. 使用SeeDB时，请使用SeeDB液安装样品。

*若样品较小，观察时会移动的话可使用琼脂糖凝胶等固定样品。

◆观察

1. 使用激光共聚焦显微镜或双光子激发显微镜观察SeeDB处理的大脑样品。

*使用SeeDB透明化处理的样品的折射率较高，为1.49。因此虽然适用于甘油浸没透镜，油浸透镜以及透明化用透镜，但是水浸透镜的

*使用深度只达约2 mm。浸泡液请使用各厂商推荐的浸泡液。请不要使用SeeDB液作为浸泡液。使用空气物镜（折射率1.0）或水浸物

*镜（折射率1.33）获得图像时，深度的数值需进行校正。（校正公式请参阅参考文献）。

◆观察实例

图2. 使用双光子激发显微镜获得的Thy1-YFP-H 小鼠（10周龄）大脑荧光图像

图3. 使用共焦距显微镜获得的Thy1-YFP-H 小鼠（10周龄）大脑荧光图像

◆产品列表

◆相关产品

组织透明化,组织透明化原理-Wako富士胶片和光

CUBIC组织透明化试剂
具有单细胞分辨率的全脑/全身成像
Hiroki R. Ueda博士等人开发了一种简单、高效、可扩展的脑/体透明化方法和成像/计算分析方法，CUBIC（clear, unobstructed brain/body imaging cocktails and computational analysis）。

CUBIC组织透明化试剂

具有单细胞分辨率的全脑/全身成像

◆CUBIC的优点

●　易于使用

●　无需特殊设备

●　支持后续的2D H＆E染色

●　高透明度

●　适用于多种器官

●　兼容IF（免疫荧光），FP（荧光蛋白）和其他荧光标记

◆CUBIC的应用

**一般情况下，可使用比例为7:3的固定溶液1和2（RI~1.49）混合溶液。

图1．使用Scale CUBIC Solution透明化前后小鼠整体器官的透射图像

图2．使用Scale CUBIC Solution透明化前后小鼠2mm切片的透射图像

◆ CUBIC应用于荧光蛋白表达

图3．CAG-EGFP Tg小鼠（8w雄性）的全脑，全心脏和解剖肝脏的LSFM成像

◆CUBIC应用于病理学方法中

　　数据来源于S. Nojima.et al. : Scientific Reports ,7,9269 (2017)/已被收录

图4．使用CUBIC透明化各种人体器官

使用CUBIC的石蜡样品的组织透明化和3D成像

图5．使用CUBIC的病理标本的组织透明化和3D成像

◆CUBIC 鱼类透明化案例

数据提供：东京海洋大学 海洋生物资源学院 二见邦彦老师

图6．使用CUBIC的鱼类透明化案例

实验步骤参见参考文献5）

图7．使用CUBIC处理后的鱼类内脏切片案例

-CUBIC处理后，切片5 μm，可用Mayer’s Hematoxylin染色-

图8．用抗体观察CUBIC处理后斑马鱼鳃的内脏片

◆CUBIC 甲壳类（螃蟹·鼠妇）透明化案例

数据提供：浜松医科大学 医学分光应用寄附研究生 绀野在老师，冈崎茂俊老师

图9．使用CUBIC的甲壳类透明化案例（上：螃蟹，下：鼠妇）

实验步骤参见参考文献6）

图10．观察CUBIC处理后（PI染色）甲壳类的全身（左：螃蟹，右：鼠妇）

实验步骤参见参考文献6）

注意：

　　列出的产品仅供实验室研究使用，不得用于药物、食品或人体。

◆产品列表

透明室-用于组织透明化样品的成像室透明组织化-Wako富士胶片和光

透明室-用于组织透明化样品的成像室
透明室是在使用显微镜观察组织透明化样品时使用的观察容器。透明室由10套硅橡胶板、盖玻片和载玻片组成，它能让您轻松地观察组织透明化后的样品。其中有五种厚度的硅橡胶可供作垫片，分别为0.3 mm、0.5 mm、1.0 mm、2.0 mm和3.0 mm，可根据您的样品选择所需尺寸。

用于组织透明化样品的成像室

透明室

透明室是在使用显微镜观察组织透明化样品时使用的观察容器。透明室由10套硅橡胶板、盖玻片和载玻片组成，它能让您轻松地观察组织透明化后的样品。其中有五种厚度的硅橡胶可供作垫片，分别为0.3 mm、0.5 mm、1.0 mm、2.0 mm和3.0 mm，可根据您的样品选择所需尺寸。

硅橡胶板的两侧贴有保护膜，可在使用时剥离，从而使载玻片与盖玻片紧密接触。

◆透明化工序（使用SeeDB时）

1. 在4°C下用4％多聚甲醛/ PBS固定小鼠大脑，过夜。

2. 用PBS清洗3次样品（各10 min）。

3. 将样品放入装有20 mL SeeDB:20 w/v% Fructose Solution的50 mL锥形管中。在室温下，用旋转器旋转试管

3. 4~8 h（月4 rpm）。易损的样品和切片可使用跷跷板振荡摇床。（约17 rpm）。

4. 将样品转移至装有SeeDB：40 w/v% Fructose Solution的50 mL锥形管中，室温下旋转4~8 h。

5. 将样品转移至装有SeeDB：60 w/v% Fructose Solution的50 mL锥形管中，室温下旋转4~8 h。

6. 将样品转移至装有SeeDB：80 w/v% Fructose Solution的50 mL锥形管中，室温下旋转12 h。

7. 将样品转移至装有SeeDB：100 w/v% Fructose Solution的50 mL锥形管中，室温下旋转12 h。

8. 将样品转移至装有SeeDB的50 mL锥形管中，室温下旋转24 h。

图1. 使用SeeDB的生物体样品的透明化

从左至右分别为使用SeeDB透明化处理的小鼠胎儿（胎儿12天），新生小鼠（生后3天）的全脑，成年小鼠大脑切片（8周龄，厚度2 mm）的案例。

◆安装方法

1. 使用与样品尺寸相匹配的透明室

2. 使用SeeDB时，请使用SeeDB液安装样品。

*若样品较小，观察时会移动的话可使用琼脂糖凝胶等固定样品。

◆观察

1. 使用激光共聚焦显微镜或双光子激发显微镜观察SeeDB处理的大脑样品。

*使用SeeDB透明化处理的样品的折射率较高，为1.49。因此虽然适用于甘油浸没透镜，油浸透镜以及透明化用透镜，但是水浸透镜的

*使用深度只达约2 mm。浸泡液请使用各厂商推荐的浸泡液。请不要使用SeeDB液作为浸泡液。使用空气物镜（折射率1.0）或水浸物

*镜（折射率1.33）获得图像时，深度的数值需进行校正。（校正公式请参阅参考文献）。

◆观察实例

图2. 使用双光子激发显微镜获得的Thy1-YFP-H 小鼠（10周龄）大脑荧光图像

图3. 使用共焦距显微镜获得的Thy1-YFP-H 小鼠（10周龄）大脑荧光图像

◆产品列表

◆相关产品