过敏性疾病:OVA诱导的哮喘

过敏性疾病:OVA诱导的哮喘

一个典型的小鼠OVA哮喘模型需要数周来制备,因为抗OVA抗体的产生是必须的。为了避开这个限速步骤,可使用anti-OVA IgE monoclonal antibody (mAb)来制备小鼠哮喘模型,只需要1周时间。Chondrex公司可提供anti-OVA IgE mAbs, allergenic E-C1 和 non-allergenic E-G5, anti-OVA IgG mAb L71,以及过敏性疾病研究相关的试剂盒。

Typical Protocols for Inducing Asthma in Mice

卵清蛋白(Ovalbumin From Chick Egg White)

Name Quantity Catalog #
Ovalbumin From Chick Egg White 1g, Lyophilized 3021
Low Endotoxin Ovalbumin From Chick Egg White 10mg, Lyophilized  3022

小鼠抗OVA lgE/lgG 单抗(Mouse Anti-OVA IgE and IgG Monoclonal Antibodies

Name Mast Cell Activation Hyper-Sensitivity Reaction Quantity Catalog #
lgE, Clone E-C1 Yes Yes 1 mg, Lyophilized 3006
lgE, Clone E-G5 No No 1 mg, Lyophilized 3007
lgG1, Clone L71 No No 1 mg, Lyophilized 3008

小鼠抗体检测试剂盒(Mouse Antibody Assay Kits)

Kit Anti-OVA Total Immunoglobulin
IgE Antibody Assay Kit 3004 3005
Serum lgE Antibody Assay Kit 3010
IgG Antibody Assay Kit 3011 3023
IgG1 Antibody Assay Kit 3013 3025
IgG2a Antibody Assay Kit 3015 3026
IgG2b Antibody Assay Kit 3016 3027
lgG2c Antibody Assay Kit 3029
lIgG3 Antibody Assay Kit 3028
lIgM Antibody Assay Kit 3017 3024
IgA Antibody Assay Kit 3018 3019

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胶原蛋白诱导小鼠关节炎实验方案(二)

胶原蛋白诱导小鼠关节炎实验方案(二)

E. Collagen

胶原

因为去糖基化的胶原会影响关节炎的产生(11),同时一些未去除的杂质比如:胃蛋白酶可能会导致T 细胞刺激试验中产生假阳性(12),因此二型胶原应按规定高度纯化。如果按恰当的方法冻干的胶原-20℃避光保存的条件下,是非常稳定的。纯化的胶原溶于0.05M 浓度的醋酸中,终浓度为2-4mg/ml,温和搅拌,4℃过夜。胶原溶液可在4℃保存一周,此后需在-20℃保存。

Chondrex 公司提供较完整的不同免疫级别二型胶原. 比如,DBA/1小鼠对鸡或者牛的二型胶原蛋白有较强的免疫反应,然后C57B/6 小鼠只对鸡的二型胶原蛋白有免疫反应。

Catalog # Description
20011 Chick type II collagen,10mg

鸡II 型胶原蛋白

20012 Chick type II collagen, 5 ml x 2 mg/ml

鸡II 型胶原蛋白

20021 Bovine type II collagen, 10 mg

牛II 型胶原蛋白

20022 Bovine type II collagen, 5 ml x 2 mg/ml

牛II 型胶原蛋白

20031 Porcine type II collagen, 10mg

猪II 型胶原蛋白

20032 Porcine type II collagen, 5 ml x 2 mg/ml

猪II 型胶原蛋白

A. Preparing the Emulsion

乳剂单位制备

乳剂的质量对于诱发关节炎至关重要。乳剂的制备有多种方法。但是不推荐双注射器或超声波处理的方法。这些方法将导致乳剂不能够有效的、稳定的诱发关节炎。此外,超声处理方法,至少将胶原分成 2 个片段,这些小片段在正常体温下,很容易变性。

推荐使用电动的高速搅拌器:

1.用高速搅拌器 (图一)(带直径≤5mm 的刀片,图二a)搅拌完全佐剂CFA (或用于增强剂注射的不完全佐剂(IFA))和胶原溶液 将注射器尖端用三通阀封闭 (图二b)。把注射器夹紧,固定在铁架台上,并冰浴 (图三)。最后一步很重要,因在搅拌过程中会发热,会引起蛋白变性,变性的蛋白不能够诱发关节炎(CIA)。

胶原蛋白诱导小鼠关节炎实验方案(二)

(图一 高速搅拌器)

胶原蛋白诱导小鼠关节炎实验方案(二)

(图二 (a) 搅拌器刀片-直径0.5cm, (b)带三通阀的注射器,(c)玻璃注射器)

胶原蛋白诱导小鼠关节炎实验方案(二)

(图三 带三通阀的注射器固定在支架上,冰浴)

2.加 1 体积(最多不超过注射器的25%)完全佐剂(不完全佐剂在加强免疫时用到)到注射器,再缓慢加入等体积的胶原溶液(0.05M 醋酸溶解的的胶原溶液,终浓度为 2mg/ml),边低速搅拌(1000-3000rpm)边滴入胶原溶液。

注:为保证高质量的免疫乳剂,一次量乳剂体积应不得超过注射器体积的50%。如果需要多量生产,可重复以上步骤。

3.继续高速混合(10,000 – 30,000rpm)2分钟。冷却5分钟,再重复高速混合和冷却步骤2-3次直到产生稳定的乳液。对于大体积乳剂制作(2-5ml)为了是乳液混合均匀,建议在混匀过程中上下移动搅拌刀片。

4.用针头替换三通阀,在装有冰水的烧杯里滴一滴乳剂,检测乳剂的稳定性。如果乳剂是稳定的,如图所示(图四),在水中是成团的,不散开。如果乳剂在水中散开,表明乳剂不稳定,再加几滴佐剂,重新混合再次进行测试。

胶原蛋白诱导小鼠关节炎实验方案(二)

(Figure 4 – 图四 完整稳定的乳剂漂浮在水面)

5.将乳剂转移到1ml的玻璃注射器 (图二C).不建议采用塑料注射器,因为很难做到一个准确的注射剂量。

注:1.通过用力甩注射器将乳剂中的气泡赶出注射器(活塞部向下)。否则很难做到一个精确的注射剂量。

        2.建议在乳剂制备好的一小时内完成注射。乳剂在使用之前存放在4°C。

B. Injection Site

免疫注射部位

在鼠尾根部皮下注射 0.1ml乳剂(100μg胶原每只老鼠(图五)。例如:从尾根部 2cm 处插入针头(25号或者27号针头,长度5/8英尺,针插入皮下,针头沿斜向上与鼠尾方向平行插入,直到针尖插入位置距尾根部0.5cm。每次注射前充分擦拭针头,防止乳液的露出。

如果要加强免疫,注射部位在尾根部 3cm 处,针尖插入皮下距鼠尾根部1.5cm处。加强免疫的注射部位应避开初始注射部位)。

注: Chondrex公司不建议使用背部皮下注射注射或腹腔注射胶原乳剂和佐剂,因为乳剂会引起腹腔和胸腔严重的炎症反应。

(图五 皮下注射乳剂)

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Elesclomol;伊利司莫

Elesclomol;伊利司莫

货号:
IE0680

品牌:
Jinpan

Elesclomol;伊利司莫

暂无详情
产品简介
别名 STA-4783
英文名称 Elesclomol
CAS 488832-69-5
分子式 C19H20N4O2S2
分子量 400.52
纯度 ≥98%
单位
生物活性 Elesclomol是一种氧化应激诱导剂,可诱导癌细胞凋亡[1-4]。
In Vitro Elesclomol显著诱导热休克应激反应基因和金属硫蛋白基因的表达,这是指示Hs294T细胞中氧化应激的标志性转录谱。 Elesclomol(100 nM)迅速诱导Hsp70 RNA水平,在1小时时增加4.8倍,在Ramos Burkitt淋巴瘤B细胞中6小时增加160倍,与细胞内ROS含量一致,早在0.5%时增加20%在6小时时,小时和385%,并且抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)和Tiron预处理可以阻断Hsp70的诱导。 Elesclomol通过诱导氧化应激使早期和晚期凋亡细胞的数量增加3.7倍和11倍,氧化应激可被NAC完全阻断,而对正常细胞几乎没有影响[1]。 Elesclomol显著抑制SK-MEL-5,MCF-7和HL-60的细胞活力,IC50分别为110 nM,24 nM和9 nM [2]。 Elesclomol在酵母中诱导铜依赖性ROS产生和细胞毒性。 elesclomol不是通过特定的细胞蛋白质靶标,而是与电子传递链(ETC)相互作用,这是一种在线粒体中发生的生物学连贯过程,在细胞器内产生高水平的ROS,从而导致细胞死亡[3]。
In Vivo 尽管elesclomol(25-100mg/kg)在人乳腺癌(MDA435,MCF7和ZR-75-1),肺癌(RER)或淋巴瘤(U937)的裸鼠异种移植模型中没有显示出抗肿瘤活性。在肿瘤消退和小鼠延长存活方面,Elesclomol在这些模型中显著增强化学治疗剂如紫杉醇的功效[4]。
SMILES S=C(C1=CC=CC=C1)N(NC(CC(NN(C(C2=CC=CC=C2)=S)C)=O)=O)C
靶点 Apoptosis;HSP70
细胞实验 对于活力测定,将HBL和HBL-ρ0细胞与300nM elesclomol-Cu或Cu孵育24小时。使用碘化丙锭(PBS中5μg/ mL)染色和FACS分析测定细胞死亡。通过在流式细胞术之前立即将细胞(25×104/mL)与40nM DIOC6(3)在37℃温育15分钟来测量内部线粒体跨膜电位。
数据来源文献 [1]. Kirshner JR, et al. Elesclomol induces cancer cell apoptosis through oxidative stress. Mol Cancer Ther. 2008 Aug;7(8):2319-27.
[2]. Bair JS, et al. Chemistry and biology of deoxynyboquinone, a potent inducer of cancer cell death. J Am Chem Soc. 2010 Apr 21;132(15):5469-7
[3]. Blackman RK, et al. Mitochondrial electron transport is the cellular target of the oncology drug elesclomol. PLoS One. 2012;7(1):e29798.
[4]. Gehrmann M. Drug evaluation: STA-4783–enhancing taxane efficacy by induction of Hsp70. Curr Opin Investig Drugs. 2006 Jun;7(6):574-80
规格 2mg 5mg 10mg

是一种氧化应激诱导剂,可诱导癌细胞凋亡。

胶原抗体诱导小鼠关节炎模型之CAIA实验方案

胶原抗体诱导小鼠关节炎模型之CAIA实验方案

PROTOCOL TO INDUCE CAIA

CAIA实验方案

Chondrex公司建议尾静脉注射单克隆抗体合剂。对于易感品系,可采用腹腔注射,但是通过腹腔注射CAIA诱发的炎症严重程度往往较低,关节炎持续时间也较短。请根据实验目的选择合适的实验方案。

Catalog Number Amount
53100 100mg
53040 40mg
53010


A. Inducing CAIA without LPS

胶原抗体诱导的关节炎

在易感品系DBA/1和Balb/c小鼠中采用CAIA建立关节炎模型,根据动物供应商,动物周龄和体积大小的不同,每只小鼠需注射6-10mg单克隆抗体合剂。例如,初次注射免疫5mg抗体合剂后24小时再次注射5mg抗体合剂。关节炎会在二次免疫后的24-48小时后发生。研究员需要根据实验目的调整实验方案。

B. Inducing CAIA with LPS 

胶原抗体联用LPS诱导的关节炎

细菌毒素LPS(B细胞分裂素), MAM(支原体产生的T细胞分裂素)或SEB(金黄色葡萄球菌产生的T 细胞分裂素)和胶原抗体在诱发关节炎中具有协同效应。在这些毒素的存在下,诱导关节炎的抗体合剂的量可降低。例如,每只小鼠初次免疫注射1.5mg抗体合剂后第三天注射25-50µgLPS,对于易感品系小鼠(Balb/c, DBA/1,B10.RIII, and C.B-17 scid/scid mice),关节炎的发生率高达100%。在C57BL/6小鼠尾部静脉注射5mg抗体合剂,关节炎在初次免疫后第7-10天达到最严重, 可维持两周。在初次免疫第10或14天注射25-50µgLPS, 关节炎会持续恶化。尽管三周后炎症反应有所缓解,关节破坏是永久性的,甚至导致关节强直。

EVALUATING ARTHRITIS

关节炎评估

关节炎可通过临床评分来定性评估或用测厚仪来测量爪子厚度来评估。由于小鼠的爪子太小,因此无法像测量大鼠爪子体积那样通过浸没法测定小鼠爪子体积。

Chondrex公司提供以下评分系统(表二)

表二 关节炎炎症程度的临床评分

得分 发病情况
0 Normal 正常
1 Mild, but definite redness and swelling of the ankle or wrist, or apparent redness and swelling limited to individual digits, regardless of the number of affected digits 

轻度的、踝关节、腕关节发红、肿胀

2 Moderate redness and swelling of ankle or wrist 踝关节或腕关节中度发红肿胀
3 Severe redness and swelling of the entire paw

including digits

爪子严重发红、肿胀,包括指端

4 Maximally inflamed limb involving multiple joints 四肢最大程度发炎,包括多关节

表三 成功阻断单克隆抗体诱发的关节炎的药物

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链脲佐菌素—诱导动物糖尿病模型

链脲佐菌素—诱导动物糖尿病模型

 糖尿病是一种慢性病,当胰腺产生不了足够的胰岛素或者人体无法有效地利用所产生的胰岛素时,就会出现糖尿病。全世界有3.47亿人患有糖尿病。2004年,估计有340万人死于空腹高血糖带来的后果。2010年的估计死亡数字与之相似。世卫组织预测,2030年糖尿病将成为第七位主要死因。目前我国的糖尿病的发病率呈升高趋势,但发病机理尚未完全阐明,在预防和治疗方面仍不完善,建立理想的动物模型对进一步研究糖尿病具有重要的意义。


迄今为止,已建立了多种建立糖尿病动物模型的方法,主要有:(1) 手术切除胰腺;(2) 化学药物诱导;(3) 自发性DM;(4) 转基因动物等。其中化合药物诱导法中采用链脲佐菌素注射造模因其对组织毒性较小,动物存活率高,所以是目前国内外使用较多的一种制备糖尿病动物模型的方法。

链脲佐菌素(英语:Streptozotocin或Streptozocin,简称STZ,又名链佐星、链脲霉素)是一种由链球菌产生的,对哺乳动物胰脏中产生胰岛素的胰岛B细胞有着特异毒性的天然化合物。它能破坏胰岛B细胞,大剂量可诱导I型糖尿病,小剂量反复注射可致II型糖尿病。

Enzo Lifesciences目前可提供以下三种规格链脲佐菌素供广大研究者选用。
 

 品牌
 产品编号
 产品名称
 规格
 ENZO
 ALX-380-010-G001
 Streptozotocin
 1 x 1 g
 ENZO
 ALX-380-010-5100
 Streptozotocin
 5 x 100 mg
 ENZO
 ALX-380-010-M100
 Streptozotocin
 1 x 100 mg

 

产品文献引用
1. Streptozotocin induces G2 arrest in skeletal muscle myoblasts and impairs muscle growth in vivo: A.P. Johnston, et al.; Am. J. Physiol. Cell Physiol. 292, C1033 (2007).
2. Genotoxicity of streptozotocin: A.D. Bolzan & M.S. Bianchi; Mutat. Res. 512, 121 (2002), (Review).
3. The mechanism of alloxan and streptozotocin action in B cells of the rat pancreas: T. Szkudelski; Physiol. Res. 50, 537 (2001), (Review).
4. N-monomethyl-arginine and nicotinamide prevent streptozotocin-induced double strand DNA break formation in pancreatic rat islets: F.J. Bedoya, et al.; Experientia 52, 344 (1996).
5. Nitric oxide generation during cellular metabolization of the diabetogenic N-methyl-N-nitroso-urea streptozotozin contributes to islet cell DNA damage: K.-D. Kroncke, et al.; Biol. Chem. Hoppe Seyler 376, 179 (1995).
6. Nitric oxide generation from streptozotocin: N.S. Kwon, et al.; FASEB J. 8, 529 (1994).
7. Biochemical evidence for nitric oxide formation from streptozotocin in isolated pancreatic islets: J. Turk, et al.; BBRC 197, 1458 (1993).
8. NO- and NO2-carrying molecules potentiate photorelaxation in rat trachea and aorta: K.C. Chang, et al.; BBRC 191, 509 (1993).
9. Streptozotocin: a nitric oxide carrying molecule and its effect on vasodilation: G. Thomas & P. Ramwell; Eur. J. Pharmacol. 161, 279 (1989).
10. Mouse models of insulin dependent diabetes: low-dose streptozocin-induced diabetes and nonobese diabetic (NOD) mice: H. Kolb; Diabetes Metab. Rev. 3, 751 (1987).
11. Alkylation of DNA in rat tissues following administration of streptozotocin: R.A. Bennett & A.E. Pegg; Cancer Res. 41, 2786 (1981).
12. The structure of streptozotocin: R.R. Herr, et al.; JACS 89, 4808 (1967).
13. Studies on the diabetogenic action of streptozotocin: N. Rakieten, et al.; Cancer Chemother. Rep. 29, 91 (1963).

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HIF-1αELISA KIT(低氧诱导蛋白) ELISA KIT

HIF-1αELISA KIT(低氧诱导蛋白) ELISA KIT

货号:BQEN-569-96T

规格:96T

品牌:biosharp

ELISA KIT又称为ELISA试剂盒、酶联免疫吸附测定试剂盒,是一种灵敏度高,特异性强,重复性好的实验方法,且因其试剂稳定、易保存,操作简便、结果判断客观等已广泛应用在免疫学检验的各领域中,得到全世界科研工作者的认可和应用。

 

ELISA的基本原理是双抗体夹心法,将样本加入预包被了抗原或抗体的酶标板里,然后再加入酶标记的抗原或抗体,从而固相载体上的抗原或抗体与样品中受检物质的量呈一定的比例。加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与样本中受检物质的量直接相关,故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。

 

Jinpan ELISA KIT覆盖人、小鼠、大鼠、猪、通用等多种物种,产品达1000多种。每一个产品均经过严格的质检,结果稳定,重复性和线性范围好,特异性和灵敏度高,应用广泛,涉及免疫学、神经学、微生物学、细胞生物学、表观遗传学等多个科学领域。


货号 BQEN-569-96T
规格 96T
品牌 biosharp

Cyclovirobuxine;黄杨碱

Cyclovirobuxine;黄杨碱

货号:
IC1230

品牌:
Jinpan

Cyclovirobuxine;黄杨碱

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产品简介
MDL MFCD00468040
别名 黄杨宁;环维黄杨星D
英文名称 Cyclovirobuxine
CAS 860-79-7
分子式 C26H46N2O
分子量 402.66
纯度 HPLC≥98%
单位
生物活性 Cyclovirobuxine D 是中药黄杨 Buxus microphylla 的主要活性成分。Cyclovirobuxine D 诱导自噬并减弱 Akt 和 mTOR 的磷酸化。Cyclovirobuxine D 通过抑制细胞周期进程和诱导线粒体介导的细胞凋亡 apoptosis 抑制癌细胞的增殖。Cyclovirobuxine D 具有治疗心力衰竭的潜力[1-3]。
In Vitro Cyclovirobuxine D(0-240μM; 24-72小时)显示CVB-D处理后细胞活力的浓度和时间依赖性降低,用240μM处理后72小时,只有10%MGC-803细胞和20%MKN28细胞存活[2]。环维布辛D(0-120μM; 48小时)以浓度依赖性方式阻滞胃癌细胞在S期的细胞周期[2]。环维罗布辛D(0-120μM; 48小时)以浓度依赖性方式导致胃癌细胞凋亡,特别是早期凋亡。环维罗布辛D(0-120μM; 48小时)通过上调胃癌细胞中凋亡相关蛋白,切割的Caspase-3和Bax/Bcl-2的比率引起细胞凋亡[2]。细胞活力测定[2]细胞系:MGC-803和MKN28细胞浓度:0,30,60,120和240μM培养时间:24,48,72小时结果:胃癌细胞周期分析的细胞活力和集落形成能力降低[2]细胞系:MGC-803和MKN28细胞浓度:0,30,60和120μM培养时间:48小时结果:MGC-803和MKN28细胞的停滞细胞周期进程。细胞凋亡分析[2]细胞系:MGC-803和MKN28细胞浓度:0,30,60和120μM培养时间:48小时结果:诱导MGC-803和MKN28细胞凋亡。Western Blot分析[2]细胞系:MGC-803和MKN28细胞浓度:0,30,60和120μM培养时间:48小时结果:上调切割的Caspase-3和Bax,降低Bcl-2表达的表达。
SMILES C[C@H](NC)[C@@]1([H])[C@H](O)C[C@@]2(C)[C@]3([H])CC[C@@]4([H])C(C)(C)[C@@H](NC)CC[C@]4(C5)[C@]35CC[C@@]21C
靶点 Others
数据来源文献 [1]. Lu J, et al. Cyclovirobuxine D induces autophagy-associated cell death via the Akt/mTOR pathway in MCF-7 human breast cancer cells. J Pharmacol Sci. 2014;125(1):74-82. Epub 2014 Apr 24.
[2]. Wu J, et al. Cyclovirobuxine D Inhibits Cell Proliferation and Induces Mitochondria-Mediated Apoptosis in Human Gastric Cancer Cells. Molecules. 2015 Nov 19;20(11):20659-68.
[3]. Yu B, et al. Beneficial effect of Cyclovirobuxine D on heart failure rats following myocardial infarction. Fitoterapia. 2011 Sep;82(6):868-77.
规格 10mg 20mg 50mg

是中药黄杨 Buxus microphylla 的主要活性成分。

伐度司他

伐度司他

货号:
IV0640

品牌:
Jinpan

伐度司他

暂无详情
产品简介
别名 AKB-6548, PG-1016548
英文名称 Vadadustat
CAS 1000025-07-9
分子式 C14H11ClN2O4
分子量 306.7
储存条件 -20℃
纯度 Purity≥98%
单位
生物活性 Vadadustat是一种新型的可滴定口服的缺氧诱导因子脯氨酰羟化酶 (HIF-PH) 抑制剂,目前开发用于治疗贫血。[1-2]
In Vitro Vadadustat诱导内源性促红细胞生成素合成并增强铁的动员。 Vadadustat在健康志愿者和患有慢性肾病的患者中具有良好的耐受性,其以剂量依赖性方式增加网织红细胞,血浆EPO和Hb水平。用伏达他汀观察到的血浆EPO水平的增加在数量上与在中等高度的生理学上发生的相当,并且显示正常的昼夜模式,在下一次剂量之前返回到基线水平。 Vadadustat通过降低铁调素和增加转铁蛋白水平来改善铁稳态。每日一次口服vadadustat,滴定以增加和维持Hb在目标范围内,可提供优于传统ESAs的多重优势[1]。观察到Vadadustat的半衰期约为4.5小时。总体而言,患者表现出Hb水平增加,从基线时的9.91 g / dL增加到第29天的10.54 g / dL。到第29天,铁蛋白水平从基线时的334.1 ng / mL降至271.7 ng / mL [2]。
靶点 HIF/HIF Prolyl-Hydroxylase
数据来源文献 [1]. Pergola PE, et al. Vadadustat, a novel oral HIF stabilizer, provides effective anemia treatment in nondialysis-dependent chronic kidney disease. Kidney Int. 2016 Nov;90(5):1115-1122.
[2]. Gupta N, et al. Hypoxia-Inducible Factor Prolyl Hydroxylase Inhibitors: A Potential New Treatment for Anemia in Patients With CKD. Am J Kidney Dis. 2017 Feb 24. pii: S0272-6386(17)30110-5.
规格 2mg 5mg

Vadadustat 是一种新型的HIF-PH抑制剂。

LPS在不同模型的应用和诱导不同疾病模型的protocol

LPS在不同模型的应用和诱导不同疾病模型的protocol

炎症作为机体免疫应答的重要机制之一,一直是生命科学研究的热点方向,LPS(脂多糖)由于易于控制,模型重现性好,影响易于识别和测量等优势,成为建立急性炎症模型的金标准试剂。


LPS由一个多糖区域组成,该区域由被称为脂质A的特定糖脂部分锚定在细菌外膜上。脂质A是一种与羟基脂肪酸相连的葡萄糖胺双糖,羟基脂肪酸进一步被非羟基脂肪酸取代。脂肪酸的数量是内毒素免疫原性的主要决定因素。最活跃的脂质A含有6个脂肪酰基,存在于大肠杆菌和沙门氏菌等致病菌中。含有4或5种脂肪酸的低酰化脂质A,诱导宿主防御反应明显减少,并能以剂量依赖的方式抑制六酰化脂多糖引发的强烈内毒素反应。

LPS作用机制原理图

LPS在不同模型的应用和诱导不同疾病模型的protocol

-Cohen J. The immunopathogenesis of sepsis. Nature. 2002 Dec 19-26;420(6917):885-91. PMID: 12490963.



现总结LPS在不同模型的应用和

诱导不同疾病模型的protocol供研究者参考:



LPS诱导疾病模型

模型
产品
给药方式
PMID
小鼠急性肺损伤模型
LPS-EB (Standard)
气管内给药10 μg
35544597
应用:Reg1-MO抑制LPS诱导的急性肺部炎症。
LPS-EB Ultrapure
气管内给药200μg/kg BW
24007300
应用:NLRP3炎症小体是LPS/机械通气急性肺损伤低氧血症发生发展所必需的
LPS-EB Ultrapure
气管内给药200 μg/kg BW
32117318
应用:自噬通过下调LPS和机械通气诱导的急性肺损伤中的炎症小体活性和IL-1β来防止肺通透性增加和低氧血症。
小鼠炎症小体激活
LPS-EB Ultrapure
腹腔注射20 mg/kg BW
33017103
注:引自“Current Protocols in Immunology”,为非经典NLPR3炎症小体激活提供了详细的实验方案
小鼠脓毒症模型
LPS-EB  (Standard)
腹腔注射18mg/kg BW
31779628
应用:Poldip2 介导 LPS 诱导的脓毒症相关性脑病模型中的血脑屏障破坏。
LPS-EB Ultrapure
腹腔注射6mg/kg BW
30808756
LPS-EB VacciGradeTM
腹腔注射50mg/kg BW
应用:西方饮食调节小鼠免疫状态和对LPS引发的脓毒症的反应。
LPS-EB Ultrapure
腹腔注射5mg/kg BW
36586274
应用:潜在生物标志物TIFA通过调节细胞焦亡影响脓毒症诱导的急性肾损伤。
大鼠脓毒症模型
LPS-EP (Standard)
静脉给药2.5 μg/kg BW
26149990
应用:人参皂苷Rg1和Re通过与TLR4结合来对LPS诱导的脓毒症起预防作用。
大鼠牙周炎模型
LPS-PG (Standard)
牙龈内注射10 μg
30665148
应用: LPS-PG诱导的牙周炎模型的血清中Aβ肽水平升高。
小鼠牙周炎模型
LPS-PG  (Standard)
牙龈内注射0.5mg/kg BW
34342041
应用:Th17/Treg失衡调节牙周炎所致的认知功能障碍
小鼠脑炎模型
LPS-PG (Standard)
腹腔注射5mg/kg BW
36240654
应用:丙咪嗪可以抑制LPS-PG诱导的小胶质神经毒性。


备注:

LPS-EB Ultrapure (Cat. Code: tlrl-3pelps)  LPS-EB VacciGradeTM  (Cat. Code: vac-3pelps)(表中红色标记)是InvivoGen提供的产品。

不同疾病模型的protocol





*LPS诱导急性肺损伤(ALI)模型 PMID: 35544597  LPS-EB (Standard)

✍ 小鼠模型的建立:

1. 每只小鼠气管给药LPS(standard)10μg。

2. 在LPS处理前24h,给小鼠施用MO(包括Reg1-MOs组和control MO组)。

3.  LPS处理6h后,麻醉小鼠并采集样本。

✍ 小鼠模型的应用:

评价Reg1-MOs对LPS诱导的ARDS的体内治疗效果。


*“Two-hit” 模型(LPS和MV诱导的ALI模型) PMID: 24007300  LPS-EB Ultrapure

✍ 小鼠模型的建立:

1LPS-EB Ultrapure经气管给药,浓度为100 μg/ml,剂量为2 μl/g BW。

2. LPS处理90min后,将小鼠麻醉进行机械通气(MV)。小鼠经气管插管并通气共4小时。

3. MV结束后,对小鼠实施安乐死以收集样本。

✍ 小鼠模型的应用:

验证LPS和MV可导致IL-1β分泌和ALI发展的假设,该过程依赖于NLRP3炎性小体的激活。





*LPS诱导败血症模型 PMID: 30808756 LPS-EB Ultrapure  LPS-EB VacciGradeTM

✍ 小鼠模型的建立:

1. 脓毒症模型:腹腔注射LPS-EB Ultrapure 6 mg/kg BW。

2. 无菌(GF) 小鼠脓毒症模型:腹腔注射50 mg/kg BW的LPS-EB VacciGradeTM

✍ 小鼠模型的应用:

1. 脓毒症模型:探讨西方饮食(western diet ,WD)对脓毒症的影响。

2. GF小鼠脓毒症模型:测定WD依赖性脓毒症对菌群的依赖性。





*LPS诱导牙周炎模型 PMID: 30665148 LPS-PG (Standard)

✍ 小鼠模型的建立:

1. 双侧上颌第一、第二磨牙间的腭侧牙龈注射10 μl浓度为1mg /ml的 LPS-PG (Standard)

2. 注射后,每隔48小时再注射两次。

3. 诱导过程持续14 d,每侧共注射 LPS-PG (Standard)6次。

✍ 小鼠模型的应用:

测定牙周炎动物模型中β淀粉样蛋白(Aβ)肽的循环水平。




备注:

标记为红色的产品均来自InvivoGen。这些数据是基于InvivoGen品牌的高品质 LPS生成的,由于已知的TLR2交叉污染的影响或批次间内毒素水平的不准确评估,这些数据可能不适用于来自其他供应商的低质量LPS。


产品信息

产品

货号

规格

LPS-EB (Standard)

tlrl-eblps

5 mg

LPS-EB Ultrapure

tlrl-3pelps

5 x 10e6 EU

LPS-EB VacciGradeTM

vac-3pelps

5 x 10e6 EU

LPS-PG (Standard)

tlrl-pglps

1mg


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