流式细胞仪分析基因表达

流式细胞仪分析基因表达

 

当细胞随时间或刺激而改变时,PrimeFlowTM RNA Assay 可揭示单个细胞内RNA和蛋白表达的动力学关系,实现了前所未有的相关性分析。这种新颖的分析仅需标准流式细胞仪,利用荧光原位杂交(FISH)实现了单个细胞内多达三种RNA转录本的同时检测。PrimeFlow RNA Assay 兼容传统荧光染料对细胞表面及胞内抗体进行染色。此技术是基于成熟且有大量文献支持的ViewRNA分析技术,它利用显微镜分析细胞和组织中RNA表达位置,结合成对寡核苷酸探针以及分支DNAbDNA)信号放大,实现单细胞水平检测基因表达。


在流式细胞仪上同时检测蛋白和RNA,能获得不同细胞群的多参数数据,并在单细胞水平上提供深入而高内涵的细节。相比之下,芯片和测序只能提供细胞群体基因表达的平均水平;然而平均化的结果往往会掩盖独特细胞亚群的个体影响。利用PrimeFlow RNA Assay,我们可分析特定细胞群的转录本表达水平,或在一段时间内评估细胞亚群,以便同时测定转录调控和蛋白表达。独特的视角可以回答过去无法回答的问题,并推动生物学多个领域的研究有广泛的影响。

观察几百万个单细胞中基因表达的不均一性。

关联同一细胞中的RNA和蛋白表达

检测细胞亚群中的非编码RNA

评估感染细胞中病毒RNA的表达

在没有蛋白相应抗体时,分析mRNA表达水平

 

PrimeFlowTM RNA Assay 的技术

      荧光原位杂交(FISH)是一种强大的创新技术,实现了固定细胞中核糖核酸目标的特异性定位。应用的基本前提依赖于通过核酸探针的依次杂交,从而提供了单细胞水平的基因表达信息。由于非特异性结合及低效的信号放大,传统的FISH技术往往受到背景值高和灵敏度低的限制而无法广泛应用。

       PrimeFlow RNA Assay融合了专利的探针组设计和bDNA信号放大技术,通过流式细胞仪来分析RNA转录本。bDNA技术通过放大信号而不是扩增目标序列,为RNA检测提供了一种独特的方法,能解决PCR分析数据重复性不高的问题,提供一致性的结果。

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详细信息请联系上海金畔生物

 

杆状病毒表达系统酶试剂盒Takara Clontech

上海金畔生物科技有限公司代理Takara酶试剂盒全线产品,欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

杆状病毒表达系统
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Clontech 631401 BacPAK6 DNA (Bsu36 I digest) 5 Transfections ¥7,261 杆状病毒表达系统 杆状病毒表达系统
Clontech 631721 X-GLUC 100 mg ¥5,728 杆状病毒表达系统 杆状病毒表达系统
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Code No. 产品名称
631401   BacPAK6 DNA (Bsu36 I digest)
631721   X-GLUC
 
产品介绍
    与细菌表达系统相比,在昆虫细胞中产生的重组蛋白质的翻译后加工和折叠更类似于哺乳动物过程,有功能的目的蛋白质的产量通常要大得多。因此,为了生产大量的重组蛋白质,许多研究者已经转向杆状病毒表达系统。
 
BacPAK法
    BacPAK系统采用苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒(AcMNPV)在昆虫细胞中表达目标蛋白质。首先把目的基因插入到穿梭载体中,然后与线性化的BacPAK6病毒DNA共转染至昆虫宿主细胞。这个特殊设计的BacPAK6病毒DNA能够迫使病毒和载体之间发生重组,实现高的重组效率。重组之后挑选并纯化几个噬菌斑,验证重组表型。新分离得到的重组病毒就可以扩增并且感染昆虫细胞产生大量的目的蛋白质。
    如有需要,可以使用产品附带的pBacPAK8-GUS作为共转染步骤的阳性对照。该载体具有大肠杆菌β-葡糖醛酸糖苷酶(GUS),克隆在多角体蛋白质启动子的下游。pBacPAK8-GUS与BacPAK6病毒DNA重组后能够表达β-葡糖苷酸酶,该酶可催化底物X-GLUC显现蓝色。
 
产品特点
    ● 每L培养基表达的蛋白质量最高可达500 mg
    ● 重组效率>90%
    ● 蛋白质折叠正确
    ● 可以有效表达具有生物活性的蛋白质
    ● 真核蛋白质的翻译后修饰
 
产品应用
在昆虫细胞中表达重组蛋白质
 
BacPAK6 Viral DNA 图谱
杆状病毒表达系统
 
操作流程示意图
杆状病毒表达系统
In-Fusion Ready BacPAK载体和杆状病毒表达系统。将含有目的基因的PCR片段直接克隆到In-Fusion Ready BacPAK载体以构建N末端或C末端蛋白质的表达载体。将验证过的克隆与BacPAK6病毒DNA共转染至昆虫细胞中,通过AcMNPV序列二者进行重组,被感染的昆虫细胞就会随着病毒的扩增而产生重组蛋白质,最后使用TALON技术对其进行纯化。
 
实验例1
杆状病毒表达系统
使用表达水母绿色荧光蛋白质(AcGFP1)的重组杆状病毒载体感染昆虫细胞。使用In-Fusion Ready BacPAK载体构建重组杆状病毒,用以表达带有N末端标签的AcGFP1。被感染的Sf9细胞能够表达高水平的AcGFP1并发出强烈的荧光,流式细胞术的检测结果显示,被感染细胞的平均荧光强度是未感染对照组的约440倍。
 
实验例2
杆状病毒表达系统
使用BacPAK杆状病毒表达系统生产重组病毒制备蛋白质。通过共转染载体和BacPAK6病毒DNA (Bsu36 I消化)产生重组病毒,然后在Sf21细胞中进行扩增。感染48 hr后裂解细胞进行SDS PAGE检测。
泳道1:未被感染的Sf21细胞
泳道2:野生型AcMNPV病毒感染的Sf21细胞
泳道3:未重组BacPAK6病毒感染的Sf21细胞
泳道4:BacPAK8-GUS重组病毒感染的Sf21细胞
泳道5:纯化的CAT蛋白质
泳道6:BacPAK8-CAT重组病毒感染的Sf21细胞
泳道M:分子量marker
 
产品详情请点击:杆状病毒表达系统
 
 

页面更新:2019-11-11 14:55:28

Schaftoside;夏佛塔苷

Schaftoside;夏佛塔苷

货号:
IS1000

品牌:
Jinpan

Schaftoside;夏佛塔苷

暂无详情
产品简介
别名 Shaftoside;APIGENIN-6-GLUCOSIDE-8-ARABINOSIDE
英文名称 Schaftoside
CAS 51938-32-0
分子式 C26H28O14
分子量 564.49
纯度 HPLC≥98%
单位
生物活性 Schaftoside 是在多种中草药(如 Eleusine indica)中发现的黄酮类化合物。Schaftoside 抑制 TLR4 和 Myd88 表达。 Schaftoside 还降低 Drp1 表达和磷酸化,并减少线粒体分裂。[1]
In Vitro Schaftoside抑制三种促炎酶活性:分泌型磷脂酶A2(sPLA2),脂氧合酶(LOX)和环氧合酶2(COX-2)。 Schaftoside还抑制促炎细胞因子(IL-1β,TNF-α和IL-6)的mRNA和蛋白表达[1]。
SMILES OC1=C([C@@H]([C@@H]([C@@H](O)[C@@H]2O)O)O[C@@H]2CO)C(O)=C3C(OC(C4=CC=C(O)C=C4)=CC3=O)=C1[C@H](OC[C@H](O)[C@@H]5O)[C@@H]5O
靶点 Toll-like Receptor (TLR)
数据来源文献 [1]. Zhou K, et al. Schaftoside ameliorates oxygen glucose deprivation-induced inflammation associated with the TLR4/Myd88/Drp1-related mitochondrial fission in BV2 microglia cells. J Pharmacol Sci. 2019 Jan;139(1):15-22.
规格 5mg 10mg 20mg

Schaftoside 是在多种中草药中发现的黄酮类化合物。Schaftoside 抑制 TLR4 和 Myd88 表达。 S

腺病毒表达系统3酶试剂盒Takara Clontech

上海金畔生物科技有限公司代理Takara酶试剂盒全线产品,欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

腺病毒表达系统3
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Clontech 632269 Adeno-X Adenoviral System 3 (CMV) 10 Rxns ¥15,503 腺病毒表达系统3 腺病毒表达系统3 腺病毒表达系统3
Clontech 632267 Adeno-X Adenoviral System 3 (CMV, Green) 10 Rxns ¥17,089 腺病毒表达系统3 腺病毒表达系统3 腺病毒表达系统3
Clontech 632268 Adeno-X Adenoviral System 3 (CMV, Red) 10 Rxns ¥17,464 腺病毒表达系统3 腺病毒表达系统3 腺病毒表达系统3
Clontech 632266 Adeno-X Adenoviral System 3 (Universal) 10 Rxns ¥15,503 腺病毒表达系统3 腺病毒表达系统3 腺病毒表达系统3
Clontech 632264 Adeno-X Adenoviral System 3 (Universal, Green) 10 Rxns ¥17,089 腺病毒表达系统3 腺病毒表达系统3 腺病毒表达系统3
Clontech 632265 Adeno-X Adenoviral System 3 (Universal, Red) 10 Rxns ¥17,464 腺病毒表达系统3 腺病毒表达系统3 腺病毒表达系统3
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由于产品升级,从即日起,您订购的以上产品中的组分In-Fusion HD Cloning Kit (Code No. 639648)将陆续替换为性能更高的In-Fusion® Snap Assembly Master Mix (Code No. 638947),该组分数量保持不变,请以实际收到的产品为准。如需含HD组分的旧版说明书或产品组分列表文件,请邮件联络sales@jinpanbio.com
 
 
注意:购买632267、632268、632264、632265时,需要填写专利确认书
 
Adeno-X adenoviral system 3是非常出色的腺病毒基因导入系统,为重组腺病毒载体构建提供了更简单、更快速、更有效的方法。有7种不同的系统形式可供选择,包括先进的四环素诱导表达系统、荧光标记可选择的组成型表达系统、允许克隆和表达您选择的任何完整表达框的无启动子系统。
 
更为简便的腺病毒表达系统
该系统依赖于In-Fusion克隆技术进行载体克隆,使用这项技术能够正确识别和融合两个线性DNA分子之间的15 bp同源序列。要产生与预线性化pAdeno-X载体同源的短区域,只需要在扩增目标基因的PCR引物上添加15 bp的附加序列即可。然后,添加线性化载体DNA和目标基因DNA建立In-Fusion克隆反应,克隆反应时间仅需要15 分钟,反应结束后转化Stellar感受态细胞。In-Fusion克隆技术是一种定向克隆技术,并且90%的克隆包含正确的插入片段。
 
四环素诱导表达系统
当您将目的基因克隆到pAdenoX-Tet3G中时,您正在创建一个对基因表达控制更为严紧,更为敏感的诱导表达系统。由于Tet-On-3G转录激活蛋白质和启动子PTRE3G调控的目标基因包含在同一个腺病毒载体上,因此严紧的强力霉素诱导的调控表达和组成性表达一样容易实现。使用这个系统可以实现高达3,000倍的诱导表达。
 
可将任何表达框克隆到通用载体中
除了CMV表达系统,我们还创建了通用的腺病毒系统,其载体的克隆位点没有启动子和polyA信号。只需要从预先存在的构建体中扩增整个表达框(从启动子到polyA),然后使用In-Fusion克隆技术将其克隆至腺病毒载体中即可。通用系统适用于使用更适合您的目标细胞类型的启动子来进行表达,如EF1α或组织特异性启动子。
 
Overview
· 腺病毒载体克隆,就像其它任何质粒克隆一样简单快速
· 直接克隆到pAdenoX vector,无需穿梭载体
· 只需2-3天就可获得90%以上的克隆效率(其他系统至少需要8天时间)
· 形式高度灵活——使用现有表达框,或者自行创建一个新表达框而无需亚克隆
· 转导分裂细胞和非分裂细胞
· 高滴度,高表达,广泛的宿主范围
· 还可提供四环素诱导表达腺病毒系统
 
TECH NOTE
Fastest,easiest adenoviral system ever
 
Tetracycline-inducible expression using an all-in-one adenovirus vector
 
FAQs
Questions about adenoviral vector systems, purification and titration
 
 
产品详情请点击:腺病毒表达系统3
 
 

页面更新:2021-11-30 16:45:49

细菌表达酶试剂盒Takara Clontech

上海金畔生物科技有限公司代理Takara酶试剂盒全线产品,欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

细菌表达
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Clontech 630050 Reef Coral Fluorescent Protein Vector Set Each ¥71,451 细菌表达 细菌表达 细菌表达
Clontech 632468 Living Colors pAcGFP1 Vector 20 μg ¥7,730 细菌表达 细菌表达 细菌表达
Clontech 632440 pAmCyan Vector 20 μg ¥7,730 细菌表达 细菌表达 细菌表达
Clontech 632451 pAsRed2 Vector 20 μg ¥7,730 细菌表达 细菌表达 细菌表达
Clontech 632412 pDsRed-Express Vector 20 μg ¥7,730 细菌表达 细菌表达
Clontech 632535 pDsRed-Express2 Vector 20 μg ¥7,494 细菌表达 细菌表达 细菌表达
Clontech 632467 pDsRed-Monomer Vector 20 μg ¥7,730 细菌表达 细菌表达 细菌表达
Clontech 632404 pDsRed2 Vector 20 μg ¥7,730 细菌表达 细菌表达 细菌表达
Clontech 632553 pE2-Crimson Vector 20 μg ¥7,730 细菌表达 细菌表达 细菌表达
Clontech 632370 pGFP Vector 20 μg ¥6,943 细菌表达 细菌表达 细菌表达
Clontech 632312 pGFPuv Vector 20 μg ¥6,943 细菌表达 细菌表达 细菌表达
Clontech 632410 pHcRed1 Vector 20 μg ¥7,730 细菌表达 细菌表达 细菌表达
Clontech 632446 pZsGreen Vector 20 μg ¥7,730 细菌表达 细菌表达 细菌表达
Clontech 632443 pZsYellow Vector 20 μg ¥7,730 细菌表达 细菌表达 细菌表达
Clontech 632528 pmBanana Vector 20 μg ¥6,943 细菌表达 细菌表达 细菌表达
Clontech 632522 pmCherry Vector 20 μg ¥6,943 细菌表达 细菌表达 细菌表达
Clontech 632548 pmOrange2 Vector 20 μg ¥7,730 细菌表达 细菌表达 细菌表达
Clontech 632527 pmPlum Vector 20 μg ¥6,943 细菌表达 细菌表达 细菌表达
Clontech 632526 pmRaspberry Vector 20 μg ¥6,943 细菌表达 细菌表达 细菌表达
Clontech 632530 pmStrawberry Vector 20 μg ¥6,943 细菌表达 细菌表达 细菌表达
Clontech 632531 ptdTomato Vector 20 μg ¥6,943 细菌表达 细菌表达 细菌表达
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注意:购买以上产品(除632370、632312外),需要填写专利确认书
 
产品详情请点击:细菌表达
 
 

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