细胞培养基质 层粘连蛋白511细胞培养-wako富士胶片和光

细胞培养基质 层粘连蛋白511细胞培养-wako富士胶片和光

供货周期 一个月以上 应用领域 生物产业

细胞培养基质 层粘连蛋白511
◆什么是层粘连蛋白511?
层粘连蛋白是存在于动物基底膜的一种细胞外基质,已知其与细胞粘附和增殖息息相关。本产品是与层粘连蛋白511-E8片段有同一序列的重组蛋白,是可以促进各种细胞粘附和伸展的培养基质。
大阪大学和京都大学共同研究开发,本产品已证明在操作难度非常大的人iPS细胞和人ES细胞培养中,也可以安全且高效地进行细胞培养。

细胞培养基质 层粘连蛋白511细胞培养-wako富士胶片和光细胞培养基质 层粘连蛋白511

iMatrix-511

 

 

细胞培养基质 层粘连蛋白511细胞培养-wako富士胶片和光

 

细胞培养基质 层粘连蛋白511细胞培养-wako富士胶片和光

 

 

◆什么是层粘连蛋白511?

 

细胞培养基质 层粘连蛋白511细胞培养-wako富士胶片和光

  层粘连蛋白是存在于动物基底膜的一种细胞外基质,已知其与细胞粘附和增殖息息相关。本产品是与层粘连蛋白511-E8片段有同一序列的重组蛋白,是可以促进各种细胞粘附和伸展的培养基质。

  大阪大学和京都大学共同研究开发,本产品已证明在操作难度非常大的人iPS细胞和人ES细胞培养中,也可以安全且高效地进行细胞培养。

 

 

● 细胞培养的准备非常简单!

● 可用于多种类型的细胞培养!

● 无论分离细胞的状态如何,可实现细胞的高生存率和细胞增殖的高效性!

● 重组蛋白(CHO-S细胞来源),所以混入杂质的危险性低!

● 溶液型试剂,无需溶解,稀释后可直接使用

 

细胞培养基质 层粘连蛋白511细胞培养-wako富士胶片和光

 

  层粘连蛋白511是由α5链、β1链和γ1链组成的层粘连蛋白。层粘连蛋白511-E8是层粘连蛋白片段,但其具有与层粘连蛋白全长分子相同的α6β1整合蛋白连接功能。

  本产品是Nippi根据大阪大学和京都大学的*技术生产商品化的。

 

 

使用方法

 

  用PBS(-)稀释本产品,按照0.1~0.5 μg/cm2加入细胞培养器皿中。

  ※由于细胞种类和细胞株的不同、使用的培养基种类不同,添加的最适剂量会有差异,

     初次使用时,按照0.5 μg/cm2添加培养容器中,逐渐调整至最.佳使用浓度。

         

  室温下孵育3小时,然后去掉溶液。

         

  添加细胞和培养液,进行细胞培养。

● 培养ES/iPS细胞时,可进行无饲养层和单细胞继代培养

 

 

使用案例

 

细胞培养基质 层粘连蛋白511细胞培养-wako富士胶片和光

 

  使用本产品对表皮细胞培养0.5小时,对血管内皮细胞培养1小时。

  (a) 表皮细胞,培养0.5小时
          左(无涂层):大部分细胞未贴壁。
          右(iMatrix):多数细胞贴壁并成伸展状态。

  (b) 血管内皮细胞,培养1小时
          左(无涂层):有贴壁的细胞,但大部分多为圆形。
          右(iMatrix):较少观察到圆形细胞,几乎所有的细胞表现出了很好的伸展性。

          实验人员: (株)Nippi BioMatrix研究所 藤崎

 

 

iMatrix-511与iMatrix-511 silk的区别

 

 

iMatrix-511

iMatrix-511 silk

生产系统

转基因CHO-S细胞

转基因蚕生产系统

提纯材料

CHO-S细胞培养上清

蚕蛹蛋白

产品等级

实验研究用* *有临床用级别

实验研究用

导入基因

人层粘连蛋白511-E8片段

纯度

95%以上

浓度

0.5 mg/mL

解离常数

10 nM以下

使用期限

生产后2年内

iPS细胞培养能力

添加0.5 μg/cm2到培养容器中,可用于iPS细胞的维持培养

 

 

产品列表

 

产品编号

生产商编号

产品名称

包装

385-07361

892011

层粘连蛋白511-E8片段,

溶液(0.5 mg/mL)

175 µg×2(350 µL×2)

381-07363

892012

175 µg×6(350 µL×6)

 

 

需要计算实验中iMatrix-511使用量,请点击:iMatrix 计算器

产品的相关技术文章,请点击:使用层粘连蛋白的非包被法对人hPSC进行有效的贴壁培养

 

细胞培养的基本条件及让细胞活泼的六大小诀窍

细胞培养的基本条件及让细胞活泼的六大小诀窍

细胞培养的基本条件:

1、合适的细胞培养基

合适的细胞培养基是体外细胞生长增殖的重要的条件之一,培养基不仅提供细胞营养和促使细胞生长增殖的基础物质,而且还提供培养细胞生长和繁殖的生存环境。

2、血清

目前,大多数合成培养基都需要添加血清。血清是细胞培养液中重要的成分之一,含有细胞生长所需的多种生长因子及其它营养成分。

3、无菌无毒细胞培养环境

无菌无毒的操作环境和培养环境是保证细胞在体外培养成功的首要条件。

在体外培养的细胞由于缺乏对微生物和有毒物的防御能力,一旦被微生物或有毒物质污染,或者自身代谢物质积累,可导致细胞中毒死亡。因此,在体外培养细胞时,必须保持细胞生存环境无菌无毒,及时清除细胞代谢产物。

4、恒定的细胞生长温度

维持培养细胞旺盛生长,必须有恒定而适宜的温度。不同种类的细胞对培养温度要求也不同,人体细胞培养的标准温度为36。5℃±0。5℃,偏离这一温度范围,细胞的正常代谢会受到影响,甚至死亡。

培养细胞对低温的耐受力较对高温强,温度上升不超过39℃时,细胞代谢与温度成正比;人体细胞在39-40℃1小时,即能受到一定损伤,但仍有可能恢复;在40-41℃1小时,细胞会普遍受到损伤,仅小半数有可能恢复;41-42℃1小时,细胞受到严重损伤,大部分细胞死亡,个别细胞仍有恢复可能;当温度在43℃以上1小时,细胞全部死亡。

相反,温度不低于0℃时,对细胞代谢虽有影响,但并无伤害作用;把细胞放入25-35℃时,细胞仍能生存和生长,但速度减慢;放在4℃数小时后,再回到37℃培养,细胞仍能继续生长。细胞代谢随温度降低而减慢。当温度降至冰点以下时,细胞可因胞质结冰受损而死亡。

但是,如果向培养液中加入一定量的冷冻保护剂(二甲亚砜或甘油),可在深低温下如-80℃或-196℃(液氮)长期保存。

5、合适的气体环境

气体是哺乳动物细胞培养生存必需条件之一,所需气体主要有氧气和二氧化碳。

让细胞活泼的六大小诀窍:

1. 保证所有实验室材料都无菌

穿插污染是细胞培育的大敌。即使是轻微的污染,也或许毁了几个星期的效果,因培育箱内温暖湿润,真菌极易成长,因而有必要注意定时清洁。

此外,在将培育瓶、移液管及其他的相关物品放入超净台之前,运用酒精擦拭干净,以防止污染。

2. 选择上佳的培育基开发策略

在细胞培育进程中,培育基是操控产品质量、产量和本钱的重要要素。有必要针对每种培育物来定制培育基,以优化实验成果,在决定以哪种方法来开发您的培育基时,您需要考虑时间和本钱等要素。

3. 在传代之前不要让细胞彻底集合

集合度是指贴壁细胞占有培育瓶表面积的份额。彻底集合意味着100%的表面都被贴壁细胞覆盖,一定要防止这种状况,由于它意味着细胞不能继续成长。不过,燃眉之急是运用活泼成长的细胞。

4. 运用对数成长期的细胞

细胞培育进程共有3个阶段:停滞期、对数期和平台期,分别代表了低细胞成长、高细胞成长和无细胞成长,有生机的细胞是健康的,快速分裂的,在对数期以70-80%的集合度存在。

5. 在运用前正确解冻细胞

尽管解冻看起来是个简略的步骤,但有必要操作得当,防止损伤细胞。长期暴露在高温条件下会使细胞无法铺板,因而,冻存管应当在37°C水浴中放置2分钟,然后用条件培育基稀释,以防止DMSO造成直接损伤。

6. 小心处理您的培育物

细胞培育的脆弱性怎样强调也不为过。剧烈摇晃,或接连的温度波动或许会对成长发生不利的影响。保证培育箱是水平的,温度均一,且远离电动仪器。

此外,尽量防止一次处理多个细胞系,由于它或许会影响细胞的基因型和表型。

如需购买相关的产品,请联系上海金畔生物

重组胰蛋白酶(RTrypsin)细胞培养-Wako富士胶片和光

重组胰蛋白酶(RTrypsin)细胞培养-Wako富士胶片和光

供货周期 一个月以上 应用领域 生物产业

重组胰蛋白酶(RTrypsin)
◆概述
胰蛋白酶(Trypsin; EC 3.4.21.4)是一种丝氨酸蛋白酶,酶解赖氨酸及精氨酸C末端形成的肽键。重组猪胰蛋白酶是由毕赤酵母重组表达并采用层析色谱法纯化获得。氨基酸序列与猪胰腺来源的阳离子型胰蛋白酶*一致,分子量为24 kDa,适pH为7.0-9.0。

重组胰蛋白酶(RTrypsin)重组胰蛋白酶(RTrypsin)细胞培养-Wako富士胶片和光

 

 

 

重组胰蛋白酶(RTrypsin)细胞培养-Wako富士胶片和光

 

 

◆概述

 

胰蛋白酶(Trypsin; EC 3.4.21.4)是一种丝氨酸蛋白酶,酶解赖氨酸及精氨酸C末端形成的肽键。重组猪胰蛋白酶是由毕赤酵母重组表达并采用层析色谱法纯化获得。氨基酸序列与猪胰腺来源的阳离子型胰蛋白酶*一致,分子量为24 kDa,适pH为7.0-9.0。可替代猪胰腺来源胰蛋白酶应用于各种生物技术过程中,如:重组胰岛素生产;细胞培养、细胞发酵;蛋白质的酶解、测序;各种组织的细胞分离等。活性受丝氨酸蛋白酶抑制剂如TLCK、PMSF等的抑制,金属离子螯合剂如EDTA等抑制酶活。

 

 

◆优势

 

● 批量生产规模大,批间小

● 高纯度,高比活性

● 重组表达生产,无外源性病毒污染,生产过程不使用动物来源原料

 

 

◆纯度

 

SDS-PAGE显示纯度>95%。

 

 

◆来源

 

重组毕赤酵母菌株,其克隆有来自猪的胰腺来源阳离子型胰蛋白酶基因。

 

 

◆使用方法

 

保存:10 mmol/L HCl,20 mmol/L CaCl2;溶解后分装-15 ℃以下保存。

酶切体系:25 mmol/L Tris-HCl , pH 7.6~8.0。

推荐使用量:蛋白酶:融合蛋白质量比1:20~1:100(肽图或蛋白组学研究),

推荐使用量:1:200~1:2000(多肽/蛋白生产工艺)。

 

 

◆保存条件

 

储存稳定性:冻干粉存于-15 ℃以下,24个月稳定;10 mmol/L HCl,20 mmol/L CaCl2溶解后分装储存于

储存稳定性:-15 ℃以下,反复冻融5次,未能观察到活性损失;溶解后2~8 ℃保存建议不超过7 d。

运输稳定性:冰袋保温运输,活性稳定

 

 

◆应用实例

 

RTrypsin特异性酶切合成短肽

合成多肽序列YGKRLWK,理论酶切位点酶切产物YGKR、LWK、YGK、R、RLWK,蛋白酶:合成多肽质量比1:100,37 ℃酶切反应10 min,LC-MS验证酶切反应特异性。

 

重组胰蛋白酶(RTrypsin)细胞培养-Wako富士胶片和光

 

Peak#

R.T.

M.W.

Sequence

Peak 1

6.70 min

366.42

YGK

Peak 2

7.61 min

552.6

YGKR

Peak 3

17.67 min

445.56

LWK

Peak 4

19.53 min

601.75

RLWK

Peak 5

19.97 min

950.15

YGKRLWK

 

 

◆产品信息

 

产品编号

产品名称

规格

比活

RTP0102

RTrypsin

10 mg

3800 USP/mg

RTP0103

RTrypsin

1 mg

3800 USP/mg

RTP0104

RTrypsin

10 μg

3800 USP/mg

 

 

◆相关产品

 

产品编号

产品名称

规格

储存温度

其他信息

MDRK0101 

重组胰蛋白酶检测试剂盒

96 孔

2~8 ℃

检测范围
4.0~250 ng/mL

IRTP0101 

固定化重组胰蛋白酶

1.0 mL

-15 ℃以下

1.0 mL含1.0 mg

 

重组羧肽酶B(RCPB)细胞培养-Wako富士胶片和光

重组羧肽酶B(RCPB)细胞培养-Wako富士胶片和光

供货周期 一个月以上 应用领域 生物产业

重组羧肽酶B(RCPB)
◆概述
羧肽酶B(E.C 3.4.17.2)属金属羧肽酶A和羧肽酶B(CPA/CPB)家族,可选择性水解蛋白或多肽羧基端的Arg和Lys。不同于切割芳香族或脂肪类氨基酸残基的羧肽酶A,羧肽酶B优先切割碱性氨基酸※,同时也能切割一些非碱性氨基酸。重组CPB的活性受到典型的金属螯合剂如EDTA,及Cu2+,Hg2+抑制;而Zn2+,Mn2+等金属离子则能够不同程度提高酶活。

重组羧肽酶B(RCPB)重组羧肽酶B(RCPB)细胞培养-Wako富士胶片和光

 

 

重组羧肽酶B(RCPB)细胞培养-Wako富士胶片和光

 

 

◆概述

 

羧肽酶B(E.C 3.4.17.2)属金属羧肽酶A和羧肽酶B(CPA/CPB)家族,可选择性水解蛋白或多肽羧基端的Arg和Lys。不同于切割芳香族或脂肪类氨基酸残基的羧肽酶A,羧肽酶B优先切割碱性氨基酸,同时也能切割一些非碱性氨基酸。重组CPB的活性受到典型的金属螯合剂如EDTA,及Cu2+,Hg2+抑制;而Zn2+,Mn2+等金属离子则能够不同程度提高酶活。CPB的适pH为8.0,偏酸或偏碱均会造成活性下降,pH接近5.0时活性接近零,pH>12.0时活性*丧失。CPB在一定温度内(<60 ℃)活性随温度升高而上升。

 

※碱性氨基酸:水解生成的氢氧根负离子多于氢正离子的氨基酸,其特点是侧链常含有可质子化的碱性化学基团。包括以下三种:

 

中文名

英文名

缩写

符号

等电点

精氨酸

Arginine

Arg

R

10.76

赖氨酸

Lysine

Lys

K

9.74

组氨酸

Histidine

His

H

7.59

 

 

◆优势

 

 

● 单批次产量大,批间差小

● 高纯度,高比活性

● 无外源性病毒污染,无动物源生产原料

 

 

◆应用范围

 

生产工艺:重组胰岛素及其类似物的生产制备工艺,重组多肽类药物的生产制备工艺等。

质控与科研:单克隆抗体的质量检测,蛋白质C-末端氨基酸测定等。

 

 

◆纯度

 

SDS-PAGE显示纯度>90%。

 

 

◆使用方法

 

保存:25 mmol/L Tris-HCl, pH 7.6或无菌水;溶解后分装-15 ℃以下保存。

酶切体系:pH 7.5~9.0;

推荐使用量:蛋白酶:融合蛋白质量比1:50~1:1000

 

 

◆保存条件

 

储存稳定性:冻干粉存于-15 ℃以下,24个月稳定;25 mmol/L Tris-HCl,pH 7.6溶解后分装储存于-15 ℃以下,

储存稳定性:反复冻融5次,活性无损失;溶解后2~8 ℃保存建议不超过3 d。

运输稳定性:冰袋保温运输,活性稳定。

 

 

◆应用实例

 

RCPB特异性酶切合成短肽

合成多肽序列YGKRLWK,理论酶切位点酶切产物YGKRLW及K,蛋白酶:合成多肽质量比1:5000,37 ℃酶切反应10 min,LC-MS验证酶切反应特异性。

 

重组羧肽酶B(RCPB)细胞培养-Wako富士胶片和光

 

Peak#

R.T.

M.W.

Sequence

Peak 1

7.06 min

950.15

YGKRLWK

Peak 2

8.27 min

821.98

YGKRLW

 

 

 

◆产品信息

 

产品编号

产品名称

规格

比活

RCPB0302

RCPB

10 mg

150 U/mg

RCPB0304

RCPB

10 μg

150 U/mg

 

 

◆相关产品

 

产品编号

产品名称

规格

储存条件

其他信息

MDRK0301

重组羧肽酶B检测试剂盒

96 孔

2~8 ℃

检测范围:
15.6~1000 ng/mL

 

96孔细胞培养板 独立包装 (白底透明盖)

96孔细胞培养板 独立包装 (白底透明盖)

货号:BS-MP-96W-CL

规格:96孔/块

品牌:biosharp

商品详情:

 

产品描述:

96孔细胞培养板,又称酶标板、发光板,主要是用于化学发光仪、酶标仪等仪器来进行荧光分析及化学分析等。

 

产品特性:

-尺寸:127.4×85.1×16.mm

-材料为高品质聚苯乙烯材料,超精密模具及全自动化生产工艺生产

-颜色有黑色/白色两款,黑色板具有低荧光背景,光散射降到了最低,最大限度的减少孔之间的干扰;白色板能够增强荧光信号,同时保证了低荧光背景

-底部为平底非透明,单孔体积为360ul,推荐工作体积为75-200ul,培养面积约0.34cm2

-透明板盖单方向盖合设计,并带有凝聚环,减少污染;盖子结合松紧适中,有助透气防止培养基污染耗损。

-表面经过TC处理,细胞贴壁效果更好

-孔缘具有突出设计,有效防止交叉污染;左侧和上侧标有字母和数字,方便定位

-层叠设计,占用空间更少,便于批量实验

-伽马射线灭菌,无DNA酶,无RNA酶,纸塑独立包装

 

规格:1块/包,50包/箱

货号 BS-MP-96W-CL
规格 96孔/块
品牌 biosharp

Cellstor S • Cellstor W细胞培养-Wako富士胶片和光

Cellstor S • Cellstor W细胞培养-Wako富士胶片和光

供货周期 一个月以上    

株式会社大塚制药工厂的Cellstor S 和 Cellstor W均为用于冷藏和常温保存的细胞悬浮保存液和细胞清洗保存液。
不含人或动物来源的成分,按照GMP标准进行生产管理和品质管理。

室温/冷藏条件下进行细胞的运输和短期保存!Cellstor S • Cellstor W细胞培养-Wako富士胶片和光

Cellstor S · Cellstor WCellstor S • Cellstor W

株式会社大塚制药工厂的Cellstor S 和 Cellstor W均为用于冷藏和常温保存的细胞悬浮保存液细胞清洗保存液

不含人或动物来源的成分,按照GMP标准进行生产管理和品质管理。


※本产品为研究用试剂,不作为人或动物的医疗用途。

Cellstor S • Cellstor W细胞培养-Wako富士胶片和光


◆特点


● 常温/冷藏条件下保存细胞

 按照GMP标准进行生产管理

 不含人或动物来源的成分

◆Cellstor S 和 Cellstor W各自的使用方法


Cellstore S 含有葡聚糖40(Dextran 40),不适用于离心操作下的细胞清洗。

如果需要离心,推荐使用不含葡聚糖40的Cellstore W。

Cellstor S • Cellstor W细胞培养-Wako富士胶片和光

◆成分及含量


■ 每袋(250 mL)

成分

Cellstore S

Cellstore W

葡聚糖 40

12.5 g(5%)

海藻糖水合物

8.29 g(3%)

氯化钙水合物

0.05 g(0.02%)

氯化 jiǎ

0.075 g(0.03%)

氯化钠

1.5 g(0.6%)

L-乳酸钠

0.775 g(0.3%)

pH调节剂

适量

注射用水

适量

◆应用案例1


观察经时细胞存活率的变化


将人脂肪来源的间充质干细胞悬浮于 Cellstore S、Cellstore W、乳酸林格溶液或其他保存溶液中,测定随时间变化的细胞存活率。

Cellstor S • Cellstor W细胞培养-Wako富士胶片和光

■ 经时变化的细胞存活率(保存在25°C) 常 温


Cellstor S • Cellstor W细胞培养-Wako富士胶片和光

● 细胞类型:人脂肪来源的间充质干细胞

● 细胞浓度:5 x 105 cells/mL

● 保存温度:25°C

24小时后的细胞存活率

● Cellstore S:98.1%

● Cellstore W:95.6%


■ 经时变化的细胞存活率(保存在5°C) 冷藏

Cellstor S • Cellstor W细胞培养-Wako富士胶片和光

● 细胞类型:人脂肪来源的间充质干细胞

● 细胞浓度:5 x 105 cells/mL

● 保存温度:5°C

24小时后的细胞存活率

● Cellstore S:95.1%

● Cellstore W:93.5%

在以上温度条件下,至少可保持24小时的高存活率

◆应用案例2


细胞集落形成率


将人脂肪来源的间充质干细胞悬浮于 Cellstore S 或 Cellstore W 中,在 5°C 或 25°C 下保存 6 h或 24 h后进行再接种,并评估集落形成率。

Cellstor S • Cellstor W细胞培养-Wako富士胶片和光

Cellstor S • Cellstor W细胞培养-Wako富士胶片和光

Cellstor S • Cellstor W细胞培养-Wako富士胶片和光

在以上温度条件下,至少可维持24小时的集落形成率

◆应用案例3


确认脂肪分化能力


将人脂肪来源的间充质干细胞悬浮于Cellstore S或Cellstore W中,在5°C或25°C下保存24 h后诱导分化为脂肪细胞,通过油滴被油红染成红色来确认脂肪分化能力。

Cellstor S • Cellstor W细胞培养-Wako富士胶片和光

◆应用案例4


确认骨分化能力


将人脂肪来源的间充质干细胞悬浮于Cellstore S或Cellstore W中,在5°C或25°C下保存24 h后诱导分化为成骨细胞,通过碱性磷酸酶染色(蓝色)或茜素红S(红色)所显示的钙化,来确认骨分化能力。

Cellstor S • Cellstor W细胞培养-Wako富士胶片和光

◆应用案例5



确认细胞悬浮性能


将人脂肪来源的间充质干细胞悬浮于Cellstore S、生理盐水或乳酸林格溶液中,静置1 h后的计算悬浮细胞率(以100%计算悬浮后不久的悬浮细胞数)。

Cellstor S • Cellstor W细胞培养-Wako富士胶片和光

Cellstore S至少可维持细胞1小时的悬浮状态

◆应用数据     ~与STEMFULL配合使用,提高细胞回收率~


使用住友电木的“STEMFULL”作为保存容器,提高了人脂肪来源间充质干细胞(hAD-MSCs)的细胞回收率(保存温度:25°C或5°C)。

Cellstor S • Cellstor W细胞培养-Wako富士胶片和光

  STEMFULL(产品编号:637-28691)为15 mL 锥形管,其PET 树脂经过低吸附处理,用于细胞回收。


  【特点】

  ● 尤其抑制干细胞等吸附性高的细胞对试管的吸附,回收率UP

  ● 化学共价结合基材表面和聚合物,减少表面处理来源的析出物

  ● 透明性优异


  可使用的温度:-80°C~40°C

  离心强度:4,640 g(离心10 min,使用摆动转子、橡胶垫)

25°C下的使用案例


将人脂肪来源的间充质干细胞(hAD-MSCs)悬浮于 Cellstore W 或 Cellstore S 中,并保存在 25°C 的普通离心管或 Stemfull 中,评估随时间变化的细胞回收率和细胞存活率。

细胞类型:hAD-MSCs

细胞浓度:5×105 cells/mL

保存温度:25℃


Cellstor S • Cellstor W细胞培养-Wako富士胶片和光

平均值±标准偏差(0, 3, 6 h;n=4, 24 h; n=3)、*:p<0.05,***:p<0.001 Student的t鉴定
†:p<0.05、 ††:p<0.01、 Dunnett的多重比较鉴定 保存0 h后 vs 其他时间


Cellstor S • Cellstor W细胞培养-Wako富士胶片和光


平均值±标准偏差(n=4)、 **:p<0.01, ***:p<0.001 Student的t鉴定

†:p<0.05、††:p<0.01、 †††:p<0.001 、Dunnett的多重比较鉴定 保存0 h后 vs 其他时间

将悬浮于Cellstore W或Cellstore S的hAD-MSCs保存在25°C的Stemfull中,细胞存活率可维持在高水平,在

Cellstore W中至少24小时,在Cellstore S中至少6小时。比保存于普通离心管中的细胞回收率更高。

5°C下的使用案例


将悬浮于Cellstore W或Cellstore S的人脂肪来源的间充质干细胞(hAD-MSCs)保存在5°C的普通离心管或 Stemfull中,并评估细胞回收率和细胞存活率随着时间的变化。

细胞类型:hAD-MSCs

细胞浓度:5×105 cells/mL

保存温度:5℃

Cellstor S • Cellstor W细胞培养-Wako富士胶片和光

平均值±标准偏差(n=6)、*:p<0.05,**:p<0.01 Student的t鉴定

不认可在各容器中保存0 h后与其他时间的有意差(Dunnett的多重比较鉴定)

Cellstor S • Cellstor W细胞培养-Wako富士胶片和光

平均值±标准偏差(n=4)、*:p<0.05,**:p<0.01 Student的t鉴定

不认可在各容器中保存0 h后与其他时间的有意差(Dunnett的多重比较鉴定)

将悬浮于Cellstore W或Cellstore S的hAD-MSCs保存在5°C 的Stemful中,可保持至少24小时的高细胞存活率,比保存于普通离心管中的细胞回收率更高。

产品编号 产品名称 产品规格
637-46391 Cellstor-S 250 mL
630-46401 Cellstor-W 250 mL

T淋巴细胞无血清培养基 iMediam for T细胞培养-Wako富士胶片和光

T淋巴细胞无血清培养基 iMediam for T细胞培养-Wako富士胶片和光

供货周期 一个月 应用领域 医疗卫生,生物产业,制药

iMediam for T是人T淋巴细胞培养用的无血清培养基。通过抗CD3抗体/IL-2激活,与单独使用抗CD3抗体相比,本产品可以更有效地增殖T细胞。

T淋巴细胞无血清培养基T淋巴细胞无血清培养基 iMediam for T细胞培养-Wako富士胶片和光

iMediam for T

T淋巴细胞无血清培养基 iMediam for T细胞培养-Wako富士胶片和光

iMediam for T是人T淋巴细胞培养用的无血清培养基。通过抗CD3抗体/IL-2激活,与单独使用抗CD3抗体相比,本产品可以更有效地增殖T细胞。

◆特点

● 可无血清培养T细胞

● Xeno-free(Chemically-defined medium

● 已向日本厚生劳动省申请材料合格认证:再生医疗等制品材料适格性确认书

● 适   用:T淋巴细胞

● 保存条件:冷藏、避光场所(2-10°C)

● 无菌测试:内毒素(显色法)、支原体(培养法)、真菌/细菌(琼脂平板表面涂抹法)

◆应用实例


含血清培养基与iMediam for T的性能比较(培养14天)

T淋巴细胞无血清培养基 iMediam for T细胞培养-Wako富士胶片和光

在知情同意的情况下,从9名健康人的血液中分离外周血单核细胞(PMBC),然后使用含血清的培养基和iMediam for T无血清培养基培养进行比较。在OKT3抗体固相化的培养瓶中培养5天,然后转移到透气性培养袋中培养,共计培养14天。最终培养基量为2000 mL。

■ 操作方案


容器: OKT3抗体固相化培养瓶225

细胞:健康个体PMBC 2×107 cells/培养瓶

(50 mL IL-2:700 U/mL)

Day 5

细胞转移到透气性培养袋中  共计1000 mL

Day 8

透气性细胞培养袋加液  共计2000 mL

Day 14

检测细胞数 分析表面抗原

◆表面抗原分析

T淋巴细胞无血清培养基 iMediam for T细胞培养-Wako富士胶片和光

在知情同意的情况下,将 3名健康个体PMBC在iMediam for T无血清培养基中培养14天后,使用流式细胞仪检测T淋巴细胞指标的CD3阳性细胞的比例。3份样品中CD3的比例都在98%以上,由此可见,T淋巴细胞是选择性增殖的。

◆电子显微镜/吉姆萨染色

T淋巴细胞无血清培养基 iMediam for T细胞培养-Wako富士胶片和光

规格

应用:人T淋巴细胞  

保存条件:冷藏、避光(2-10°C)

无菌检测: ◯内毒素:显色法 ◯支原体:培养法 ◯真菌、细菌:琼脂平板表面涂片法

操作步骤:

❶ 准备OKT3抗体固相化烧瓶225。使用PBS稀释OKT3抗体至5-10 μg/mL,涂抹于培养瓶底部(使用225 cm2 培养瓶时浓度为10 μg/mL)。

❷ 将3-5×107 个PBMC悬浮于30-50 mL的iMediam for T中。

❸ 根据细胞增殖状态适量添加iMediam for T。

❹ 培养5-7日后,将细胞悬浮液转移到透气性细胞培养袋中,添加适量iMediam for T,再培养2-3周。根据培养状况适当增加培养袋数量。

注意事项:◯ 请勿用于人体; ◯ 对于因使用本产品导致的任何事故或损坏,本公司概不负责; ◯ 关于产品使用方面如有疑问,可联系本公司

注意事项:咨询。

◆产品列表

产品编号

产品名称

包装

387-13811

iMediam for T

1000 mL

相关产品


产品编号

产品名称

包装

302-14681

BAMBANKE

RBAMBANKER冻存液

120 mL

306-14684

20 mL×5

306-95921

BAMBANKER Direct

BAMBANKER直接冻存液

20 mL

下载产品宣传页:http://labchem.fujifilm-wako.com.cn/product/show/1476.html

人iPS细胞培养系统酶试剂盒Takara Clontech

上海金畔生物科技有限公司代理Takara酶试剂盒全线产品,欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

人iPS细胞培养系统
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Cellartis Y30010 DEF-CS 500 1 Kit ¥6,546 人iPS细胞培养系统 人iPS细胞培养系统 人iPS细胞培养系统
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Human iPS和Human ES增殖用培养基
(DEF-CS Culture System, all-in-one format)
作为一款高端创新型的产品,Cellartis DEF-CS培养系统使得单细胞干细胞操作成为常规的操作。该产品是专门针对人类诱导干细胞(hiPS)和人类胚胎干细胞(hES)研发的高效率增殖用培养基产品体系。该产品系统为all-in-one型,包括了所有组分,客户不需要另外求购组分。该产品是成分确定的培养基产品,而且不需要饲养层。DEF-CS既可以实现单细胞培养,也可以用于传统的iPS培养模式以及大规模干细胞增殖。在使用DEF-CS培养基增殖干细胞时,几乎没有背景分化的问题,这使得细胞筛选不再必需。作为一款创新产品,利用DEF-CS培养干细胞时,可以使用酶消化法(enzymatic passaging)实现需要单细胞操作,这一特点十分有利于高通量细胞鉴别筛选(high-throughput screening)、转染(transfection)、框架接种(scaffold seeding)等。
 
■ 产品特点
· Feeder-free and chemically defined culture system for efficient expansion of human iPS cells
· Ideal system for culturing iPS cells; cells maintain pluripotency and long-term potential for self-renewal and differentiation
· Complete kit includes 500 ml basal medium, additives, and coating compound
· Robust system provides high reproducibility and stable growth
· Maintains cells in an undifferentiated state with virtually no background differentiation
 
■ 产品应用
· Scale-up and mass production of human iPS cells
· Single-cell culture of human iPS cells
· Transfection and reprogramming
· High-throughput screening
· Tissue engineering (seeding cells on a scaffold)
 
■ 产品详情请点击:人iPS细胞培养系统
 
人iPS细胞培养系统
Robust growth of human induced pluripotent stem (iPS) cells in the Cellartis DEF-CS Culture System. The number of iPS cells was quantified after being cultured for three weeks using either the Cellartis DEF-CS Culture System, a reference feeder system, or four other stem cell culture systems.
 
参考文献:
1. Sivertsson, Louise, et al. "Hepatic differentiation and maturation of human embryonic stem cells cultured in a perfused three-dimensional bioreactor." Stem cells and development 22.4 (2012): 581-594.
2. Hanson, Charles, et al. "Transplantation of human embryonic stem cells onto a partially wounded human cornea in vitro." Acta ophthalmologica 91.2 (2013): 127-130.
3. Norrman, Karin, et al. "Distinct gene expression signatures in human embryonic stem cells differentiated towards definitive endoderm at single-cell level." Methods 59.1 (2013): 59-70.
4. Ulvestad, Maria, et al. "Drug metabolizing enzyme and transporter protein profiles of hepatocytes derived from human embryonic and induced pluripotent stem cells." Biochemical pharmacology 86.5 (2013): 691-702.
5. Ramirez JM, et al. Side scatter intensity is highly heterogeneous in undifferentiated pluripotent stem cells and predicts clonogenic self-renewal. Stem Cells Dev.2013 Jun 15;22(12):1851-1860.
6. Borestrom, Cecilia, et al. “Footprint-free human induced pluripotent stem cells from articular cartilage with redifferentiation capacity: A first step toward a clinical-grade cell source.” Stem Cells Trans. Med. (2014) 3, 433-447.
7. Kia, Richard, et al. "MicroRNA-122: a novel hepatocyte-enriched in vitro marker of drug-induced cellular toxicity." Toxicological Sciences (2014): kfu269.
8. Valton, Julien, et al. "Efficient strategies for TALEN-mediated genome editing in mammalian cell lines."  Methods 69.2 (2014): 151-170.
9. Zandén, Carl, et al. "Stem cell responses to plasma surface modified electrospun polyurethane scaffolds." Nanomedicine: Nanotechnology, Biology and Medicine 10.5 (2014): 949-958.
10. Asplund, Annika, et al. “One Standardized Differentiation Procedure Robustly Generates Homogenous Hepatocyte Cultures Displaying? Metabolic Diversity from a Large Panel of Human Pluripotent Stem Cells” Stem Cell Rev and Rep (2015)
 
 

页面更新:2019-12-25 09:50:44

Plasmocin™ Prophylactic 用于预防细胞培养过程中的支原体污染

Plasmocin™ Prophylactic 用于预防细胞培养过程中的支原体污染

–产品信息

– 产品货号:ant-mpp

– 产品形态:无菌、黄色溶液

– 浓度:2.5 mg/ml

– 规格:10 x 1 ml (25 mg)

– 用途:可作为液体培养基的常规添加物,预防哺乳动物细胞培养过程中的支原体污染及常见细菌的污染。对多种支原体有活性,如M. arginini, M. fermentans, M. laidlawii和M. hyorhinis。在低浓度下对常见的革兰氏阳性菌(如葡萄球菌)和革兰氏阴性菌(如大肠杆菌、肠杆菌、假单胞菌和产碱杆菌)有活性。1 ml Plasmocin™ Prophylactic可用于配置500mL细胞培养液。

– 成分

含有两种抗菌成分,一种成分通过干扰核糖体翻译阻碍蛋白质合成,另一种成分干扰DNA复制。在支原体和许多细菌中发现了这两个特异的、独立的靶点,但在真核细胞中却不存在,不影响真核细胞。

质量控制

每一批次都经过完整的检测,以确保批次间的稳定性。

– 内毒素含量 < 2 EU/mg

– 理化特性(pH值、外观)

– 使用参考细菌进行细胞培养验证产品性能

运输及保存

– 室温运输

– 到货后,可在4℃保存1个月,也可以放于-20℃长期保存。 

– 避免反复冻融

– 有效期标注于产品标签上

注意:产品在室温可稳定保存2周

使用方法

Plasmocin™ Prophylactic用于预防支原体及相关的无细胞壁的细菌污染,可与青霉素和链霉素联合使用。

1. Plasmocin™ Prophylactic的推荐工作浓度为5µg/ml,参考下表加入不同体积的Plasmocin™ Prophylactic。

2. 每3-4天使用含有Plasmocin™ Prophylactic的新鲜培养基传代细胞和/或更换细胞培养液。

3. 定期使用支原体检测试剂盒如PlasmoTest™,一种基于细胞的比色分析试剂;或MycoStrip™,一种基因组检测分析试剂,来检测是否存在支原体污染。

注意:如果检测发现细胞中存在支原体污染,建议使用Plasmocin™ Treatment 来清除支原体。

更多详情请联系InvivoGen中国代理商-上海金畔生物

10×多聚赖氨酸

10×多聚赖氨酸

货号:
P2100

品牌:
Jinpan

产品简介
英文名称 Poly-L-lysine Solution,10×
储存条件 -20℃,有效期2年
纯度 1mg/ml
单位
规格 10ml

   产品非无菌

原理:

多聚赖氨酸溶液是广泛应用的组织切片与玻片黏合剂,该多聚阳离子分子与组织切片上的阴离子相互作用会产生较强的黏合力。培养瓶表面的性质对于细胞培养至关重要,细胞表面的糖蛋白(阴性)易于吸附在亲水性的表面上,因而细胞培养表面如果有相当含量的阳性电荷更能促进细胞吸附,这正是运用多聚赖氨酸优化细胞培养表面的重要所在。
应用:
适用组织学,免疫组织化学,冰冻切片,细胞涂片,原位杂交等使用的玻片的防脱片处理,以防实验操作过程中组织掉片。也可用于细胞培养,增加细胞贴壁能力。
玻片处理:
1. 灭菌水稀释聚赖氨酸溶液,一般的使用浓度为0.01%。
2.  将玻片浸在稀释的多聚赖氨酸溶液5分钟。注意增加时间不会提高包被效果。
3.  在60℃烘箱1小时干燥,或室温18-26℃过夜干燥待用。
注意:
1. 每100mL已稀释的多聚赖氨酸溶液要包被的玻片40-90张, 超过90张片子将影响其黏合力。
2.  用之前的玻片必须保持清洁。必要时用含1% HCl的70%乙醇溶液来清洗。
3.  释过的多聚赖氨酸溶液要放在2-8℃,至少在3个月内是稳定的。
4.  用过的稀释液要过滤,若出现浑浊或长菌要丢弃
5. 多聚赖氨酸浓度可以高一些,吸出来的可以重复利用至少20次。
培养瓶处理:
1.  包被培养板或者是培养瓶,一般多聚赖氨酸浓度为0.01%,
2.  准备100ml三蒸水,经高压灭菌处理。
3. 0.01%的多聚赖氨酸以50微升每平方厘米的量均匀涂于培养底物的表面,室温下静置5min,吸除多余液体。
4.  加入灭菌水,反复冲洗三次,无菌操作。
5.  处理后无菌晾干备用。
6.  回收后保持无菌的多聚赖氨酸可反复利用。

常用的配合物质可分为五类:

1、酒精,使用量为30~70%,主要应用于各种蛋制品。

2、有机酸,常常使用的有机酸一般有:醋酸、苹果酸、马来酸、柠檬酸、琥珀酸等,使用量在0.5~50%之间,主要应用于米饭、饮料、色拉、酱类等食品;

3、甘油酯,甘油酯多为低级脂肪酸酯,用量在0.01~5%之间,主要用于动物性蛋白,乳蛋白较多的食品。

4、甘氨酸,用量为0.01~10%;主要应用于牛奶防腐。

5、其它天然抑菌剂,如:鱼精蛋白、茶多酚等。