Glycosylceramides from wheat 小麦糖基 标准品
分子式 | 储存温度:Store in dry and dark place. |
纯度 | HPLC : ≥98% mixture of glycosylceramides |
单位 | 瓶 |
货期 | 4周 |
规格 | 5mg |
Glycosylceramides from wheat 小麦糖基 标准品
分子式 | 储存温度:Store in dry and dark place. |
纯度 | HPLC : ≥98% mixture of glycosylceramides |
单位 | 瓶 |
货期 | 4周 |
规格 | 5mg |
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克隆有 fpg 基因的重组 E. coli 菌株。
8,000 units/ml。
(-)-丁香树脂酚-4-O-β-D-呋喃芹糖基-(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖苷 标准品
英文名称 | (-)-Syringaresnol-4-O-β-D-apiofuranosyl-(1→2)-β-D-glucopyranoside |
CAS | 136997-64-3 |
分子式 | C33H44O17 |
分子量 | 712.7 |
储存条件 | -20℃ |
规格 | 20mg |
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· 热稳定型氧代鸟嘌呤糖基酶
· 该 DNA 糖基酶具有两种酶活:DNA N-糖基酶活性和 AP 裂解酶活性
· N-糖基酶活性释放 8-oxo-7,8-二氢鸟嘌呤 (8-oxoG),生成 AP 位点。AP 裂解酶活性将 3′ 切割到 AP 位点,留下 5′ 磷酸和 3′-磷酸-α,β-不饱和醛。
热稳定 OGG 是一种来源于古细菌的 8-氧代鸟嘌呤(8-oxoG)DNA 糖基酶,具有 N-糖基酶活性和 AP-裂解酶活性。N-糖基酶活性可从双链 DNA 中切割受损的 8-氧代鸟嘌呤,从而产生脱嘌呤 (AP) 位点。AP 裂解酶活性将 3′ 切割到 AP 位点,留下 5′ 磷酸和 3′-磷酸-α,β-不饱和醛。与其它 DNA 糖基酶不同的是,热稳定 8-氧代鸟嘌呤 DNA 糖基酶(OGG)仅特异性识别和切割 8-oxoG,对其它修饰的碱基没有活性。
图 1:与 8-氧代鸟嘌呤 DNA 糖基酶(Fpg)不同,热稳定 8-氧代鸟嘌呤 DNA 糖基酶(OGG)特异性识别和切割 8-氧代鸟嘌呤,对其它修饰的碱基没有活性。
使用热稳定 8-氧代鸟嘌呤 DNA 糖基酶(OGG)和 8-氧代鸟嘌呤 DNA 糖基酶(Fpg)分别切割含有修饰碱基的荧光标记 dsDNA,以检测其切除修饰碱基的活性,修饰碱基类型为:8-氧代腺嘌呤、5-羟基胞嘧啶、胸腺嘧啶乙二醇、5-羟基尿苷或 8-氧代鸟嘌呤。样品孵育后使用毛细管电泳检测,出峰位置体现裂解产物长度。结果显示:热稳定 8-氧代鸟嘌呤 DNA 糖基酶(OGG)仅裂解含 8-氧代鸟嘌呤的底物(上图),而 8-氧代鸟嘌呤 DNA 糖基酶(Fpg)对于含其它修饰碱基的底物也有活性,包括 5-羟基胞嘧啶、胸腺嘧啶乙二醇和 5-羟基尿苷(下图)。
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克隆有 E. coli UDG 基因的重组 E. coli 菌株。
5,000 units/ml。
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尿嘧啶糖基酶抑制剂(UGI),曾被称为:尿嘧啶糖基化酶抑制剂
尿嘧啶糖基化酶抑制剂(UGI),来源于枯草芽孢杆菌噬菌体(Bacillus subtilis bacteriophage PBS1),蛋白分子量较小(9.5 kDa),可抑制大肠杆菌尿嘧啶 – DNA 糖基化酶(UDG)以及来源于其它物种的 UDG。UDG 与 UGI 按 1:1 比例进行可逆蛋白结合,发挥对 UDG 的抑制作用。UGI 可解离 UDG 与 DNA 的复合物。
2,000 units/ml
·尿嘧啶糖基化酶抑制剂(UGI)蛋白分子量较小(9.5 kDa),可抑制大肠杆菌尿嘧啶 – DNA 糖基化酶(UDG)以及来源于其它物种的 UDG。
·95℃ 热处理后该酶仍有部分活性。
·可用于阻止产物 DNA 的后续降解。
由携带有克隆自枯草芽孢杆菌噬菌体(Bacillus subtilis bacteriophage PBS1)UGI 基因的大肠杆菌菌株表达纯化得来。
1 单位 UGI 指在 50 µl 反应体系中,37℃ 条件下,1 小时抑制 1 单位大肠杆菌 UDG 酶所需的酶量。1 单位 UDG 是指每分钟从含尿嘧啶的双链 DNA 上催化解离 60 pmol 的尿嘧啶所需要的酶量。
1X UDG 反应缓冲液,37℃ 温育。
不能热失活。
1、由于 95℃ 热处理后, UDG 酶仍有部分活性,建议加入尿嘧啶糖基化酶抑制剂(UGI)来阻止产物 DNA 的降解。
2、对 NEB 的大肠杆菌 UDG 酶有效(NEB #M0280)。
3、在原始反应中加入与 UDG 等量或者过量的 UGI。
4、在四种 NEBuffer 中都有活性(NEB #B7001, NEB #B7002, NEB #B7003, NEB #B7004)。
5、UGI 的热稳定性极高,煮沸 10 分钟仍具有 95% 以上的活性。
Lindahl,T.et al.(1977).J. Biol.Chem..252,3286-3294.
Wang,Z.,et al.(1991).Gene.99,31-37.
Bennett,S.E.and Mosbaugh,D.W.(1992).J.Biol.Chem..267,22512-22521.
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· 闪烁古生球菌(Archaeoglobus fulgidus)尿嘧啶-DNA 糖基酶
· 该酶为耐热单功能 DNA 糖基酶,从含尿嘧啶的 DNA 上催化释放尿嘧啶,能有效地水解双链和单 DNA 上的尿嘧啶
· WarmStart 技术抑制酶在42°C以下的活性,可用于在等温扩增反应后消除产物污染
· 从双链或单链 DNA 上切下尿嘧啶
WarmStart Afu 尿嘧啶-DNA 糖基酶(UDG)来源于闪烁古生球菌(Archaeoglobus fulgidus),配方中加入了能够可逆结合的适配体,在低于 42℃ 条件下抑制酶活性。在 42℃ 以上具有活性,能有效地水解双链和单链 DNA 上的尿嘧啶。
图1. WarmStart Afu 尿嘧啶-DNA 糖基酶(UDG)在低于 42℃ 的温度下未检测到活性。