Takara慢病毒滴度测定 10分钟快速测定酶试剂盒Takara Clontech

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Takara慢病毒滴度测定 10分钟快速测定
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Clontech 631280 Lenti-X GoStix Plus(20) 20 Tests ¥5,970
¥4179
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Clontech 631281 Lenti-X GoStix Plus(50) 50 Tests ¥12,125
¥8488
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*红字为促销价格,促销时间: 2024年3月1日-2024年4月30日

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10分钟定量慢病毒滴度测试— Lenti-X GoStix Plus
Lenti-X GoStix Plus提供了一种快速、简便、有效的方法,可以在非常短的时间内检测包装细胞上清液中的慢病毒滴度。这种检测方法包括将20 μl上清液添加到GoStix cassette中,等10分钟以等待表明慢病毒p24蛋白质存在的条带出现。我们早期的GoStix提供的是定性检测结果,而升级后的Lenti-X GoStix Plus的检测结果可以使用智能手机免费app进行分析,可以通过该应用程序比较条带强度来量化慢病毒滴度。
 

重要提示:我们将于2020年9月26日(星期六)太平洋夏令时间凌晨3:00,也就是北京时间18:00,发布支持慢病毒滴度测定产品Lenti-X GoStix Plus的新版本移动应用程序。我们强烈建议所有用户在上述发布日期之后,尽快更新为新版本。原因是:新版本GoStix Plus app一经发布,旧版本app将不支持之前没有检测过的新批次Lenti-X GoStix Plus。请注意,app更新将导致原有保存测定结果从移动设备中删除。因此,我们建议用户在安装新版本之前,确保所有测定结果均已保存或记录。了解更多关于GoStix Plus app更新相关FAQ,请点击此页面查阅。

下载iOS版GoStix Plus应用程序,请登录App Store搜索“GoStix Plus”获取;下载安卓版GoStix Plus应用程序,请登录Google Play商店搜索“GoStix Plus”获取,也可以点击此页面下载

 
Lenti-X GoStix app的定量检测结果(称为GoStix值或GV)可用于比较不同包装系统所产生的病毒量,其方式类似于ELISA方法,但比ELISA要更简便和快捷得多,可借助参考病毒计算出实际的IFU/ml。访问我们的FAQs页面,了解如何下载和使用智能手机app的相关信息。通过简便快速的慢病毒定量方式,Lenti-X GoStix Plus可以使您的转导实验方案差异更小化,确保每次实验可以达到更为一致的转导效果。
 
■ Overview
· 使用简单的智能手机app在10分钟内量化慢病毒滴度*
· 确定收集慢病毒上清液的理想时机
· 确保实验达到一致的转导效果
*最初的Lenti-X GoStix(Code No. 631243和631244)不能使用智能手机app进行慢病毒定量,并且该产品在逐步淘汰过程中。库存销售完毕后,将不再销售这些产品。如果需要的话,Lenti-X GoStix Plus可以使用与原始Lenti-X GoStix相同的方式进行定性分析。
 
■ 应用
· 确定慢病毒包装反应是成功的
· 比较不同包装系统所产生的病毒量
 
■ 观看视频
Applying lentiviral supernatants
了解如何将样品正确添加至Lenti-X GoStix Plus cassette。
Takara慢病毒滴度测定 10分钟快速测定
 
■ 实验例
Takara慢病毒滴度测定 10分钟快速测定
图1. 展示了慢病毒载体滴度测定的常用方法及其相关时间表(以小时为单位)。使用Lenti-X GoStix Plus进行滴度测定仅需要十分钟,其测定时间远远短于传统方法。Lenti-X GoStix Plus:一种基于侧向层析技术的检测方法,用于检测上清液中的慢病毒p24衣壳蛋白质。qRT-PCR:通过qRT-PCR方法定量病毒RNA基因组。ELISA:检测p24衣壳蛋白质的量。PCR:通过qPCR测定整合的DNA前病毒。IFU(FACS):通过FACS分析RFP/GFP阳性细胞测定被感染靶细胞的百分比。IFU(筛选):通过检测转导细胞群中抗药细胞克隆的数量来确定感染单位。
 
Takara慢病毒滴度测定 10分钟快速测定
图2. p24的产生,GoStix值和IFU/ml值都取决于收获病毒的时间。使用Lenti-X Single Shot按照制造商操作指导制备ZsGreen1慢病毒一式两份,并在指定时间收集病毒。在每个时间点,使用Lenti-X GoStix Plus分析样品的GV值,使用HT1080细胞测定病毒稀释液确定IFU/ml。检测结果除了表明GV(i.e., p24积累)和IFU/ml取决于收获时间之外,这些数据还表明GV和IFU/ml之间的比率随时间的变化而变化。
 
Takara慢病毒滴度测定 10分钟快速测定
图3. 使用Lenti-X GoStix Plus测定的病毒滴度与不同浓度病毒的转导滴度是有相关性的。使用Lenti-X Packaging Single Shots慢病毒包装系统制备Lenti-X ZsGreen1慢病毒。将制备出的病毒样品进行梯度稀释,添加到Lenti-X GoStix Plus cassettes中,进行密度分析测定滴度。另外,将每个梯度稀释液使用HT1080细胞测定实际的IFU/ml。未知样品的IFU/ml使用GV与IFU/ml的比值进行计算,该比值由使用与未知样品相同的包装系统和在相同的时间收集的参考病毒来确定。然后以使用Lenti-X GoStix Plus测定并计算出的IFU/ml与实际IFU/ml作图。
 
Takara慢病毒滴度测定 10分钟快速测定
图4. Lenti-X GoStix App通过测定测试(T)和对照(C)条带的相对强度来定量病毒滴度。Lenti-X GoStix App使用智能手机相机确定测试(T)和对照(C)条带的相对强度,并使用比率计算滴度。
 
Takara慢病毒滴度测定 10分钟快速测定
图5. 使用Lenti-X GoStix Plus测定的病毒滴度与不同包装系统的转导滴度是有相关性的。使用市面上销售的三种不同的慢病毒载体和包装系统制备ZsGreen1慢病毒。将所有制备样品稀释并添加到Lenti-X GoStix Plus cassettes中并进行分析。另外,将每个梯度稀释液使用HT1080细胞测定实际的IFU/ml。使用与未知样品相同的包装系统和在相同的时间收集的参考病毒所确定的GV与IFU/ml的比值,计算每个未知样品的IFU/ml。
 
Takara慢病毒滴度测定 10分钟快速测定
图6. 比较使用Lenti-X GoStix Plus测定的病毒滴度和基于ELISA方法测定的病毒滴度。Lenti-X GoStix Plus测定的病毒滴度可以与基于ELISA方法测定的病毒滴度以相同的方式使用Lenti-X Packaging Single Shots慢病毒包装系统制备Lenti-X ZsGreen1慢病毒。使用HT1080细胞测定转导细胞的百分比(%转导),然后进行FACS分析。此外,使用Lenti-X p24 Rapid Titer Kit测定病毒p24值,使用Lenti-X GoStix Plus确定GoStix值。以一定范围MOIs的病毒转导HT1080细胞,以其转导效率和等同的ELISA和GoStix值作图。转导后48小时拍摄转导细胞的荧光图像。
 
 
 
产品详情请点击:Takara慢病毒滴度测定 10分钟快速测定
 

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杆状病毒滴度测定酶试剂盒Takara Clontech

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杆状病毒滴度测定
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Clontech 631406 BacPAK Baculovirus Rapid Titer Kit 5 Assays ¥6,254 杆状病毒滴度测定 杆状病毒滴度测定 杆状病毒滴度测定
Clontech 631414 BacPAK qPCR Titration Kit 200 Rxns ¥6,432 杆状病毒滴度测定 杆状病毒滴度测定 杆状病毒滴度测定
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产品介绍
    本试剂盒提供了一种快速简单的方法来确定杆状病毒种群的滴度。使用标准免疫测定法在48小时内即可准确测定杆状病毒滴度,而斑块和终点稀释测定法通常需要5-10天。
    在BacPAK杆状病毒表达系统中,感染细胞在斑块形成前长时间表达病毒抗原。BacPAK快速滴定测定法可以在短暂的潜伏期后用于滴度测定。此外,得到的滴度与通过其它方法获得的滴度相当。该试剂盒适用于滴度大于104 pfu/ml的任何病毒库,并且与所有常用(基于AcMNPV)的杆状病毒表达系统兼容。
    本试剂盒使用的一抗是针对AcMNPV包膜糖蛋白质(gp64)的单克隆抗体,用来准确鉴定病毒感染的细胞。二抗偶联了HRP,可以通过光学显微镜观察感染的细胞,并且确定病毒滴度。最近我们将操作流程进行了升级,为鉴定细胞提供更好的信噪比。
 
BacPAK qPCR Titration Kit
    本试剂盒为测定病毒种群滴度提供了非常快速和简单的方法,在使用qPCR和绿色嵌合染料技术确定病毒基因组的内容之前,可快速进行DNA纯化。实验操作仅需4 h,并且与基于AcMNPV的任意的杆状病毒载体兼容。通过qPCR的方法,实验人员可以在同一天内完成病毒收获和靶细胞感染。因而可以避免因操作时间过长导致的病毒感染性降低,同时可以用已知的多重感染(MOI)影响靶细胞从而获得更一致的结果。
    BacPAK qPCR滴定通过校准的DNA标准曲线确定杆状病毒制剂中的病毒基因组拷贝数。过程比较简单:将病毒DNA和BacPAK对照DNA连续稀释并进行qPCR绘制标准曲线。然后通过将每个病毒的Ct值带入标准曲线中,即可算出病毒DNA的拷贝数。
    BacPAK qPCR滴定试剂盒具有简便,重复性好和处理时间短等特点,是测定杆状病毒DNA滴度的理想选择。
 
为什么要知道滴度?
● 确认包装反应成功,以免浪费时间
● 确保实验的一致性
● 确保足够的MOIs,以实现100%的细胞转导
● 控制拷贝数,进而控制表达水平
 
产品特点
● 节省时间,将杆状病毒表达实验的时间控制在6天以内
● 无需麻烦的斑块测定
● 与任意基于AcMNPV的杆状病毒表达系统兼容
● 快速测定病毒滴度
● 收获、滴定和感染可在一天内完成
● 准确的滴度产生一致的感染结果
 
应用
确定杆状病毒滴度,以优化重组蛋白质表达
 
 

页面更新:2020-10-29 11:58:34

逆转录病毒滴度试剂Retrovirus Titer Set (for Real Time PCR)酶试剂盒Takara Clontech

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逆转录病毒滴度试剂Retrovirus Titer Set (for Real Time PCR)
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara 6166 Retrovirus Titer Set (for Real Time PCR) 100 次 ¥1,031 逆转录病毒滴度试剂Retrovirus Titer Set (for Real Time PCR) 逆转录病毒滴度试剂Retrovirus Titer Set (for Real Time PCR) 逆转录病毒滴度试剂Retrovirus Titer Set (for Real Time PCR)
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■ 制品内容 (100 次量)*1
Forward Titer Primer FRT-1(10 pmol/ μl) 50 μl
Reverse Titer primer RRT-1(10 pmol/ μl) 50 μl
RNA Control Template (5×108 copies/ μl)*2 10 μl
EASY Dilution (for Real Time PCR) 1 ml×2
DNase I (RNase Free) (5 U/μl) 40 μl
10X DNase I Buffer 50 μl
RNase Inhibitor (40 U/μl) 10 μl
 
*1 Real Time RT-PCR 100次反应,DNase I 可以处理 20次。
*2 为了避免RNA Control Template反复冻融降解,请分成小包装-70℃~-80℃保存使用。
 
■ 制品说明
Retrovirus Titer Set (for Real Time PCR) 是利用Real Time RT-PCR法测定基于MLV (murine leukemia virus: 小鼠白血病病毒) 改造的逆转录病毒载体的基因组RNA量,确定逆转录病毒滴定度的制品。本制品与One Step TB Green® PrimeScript RT-PCR Kit* (Perfect Real Time)(Code No. :RR066A/RR086A)一起使用,4小时内即能直接测定病毒上清液中RNA的滴定度。另外,本制品扩增的是MLV病毒包装信号的序列区,可以测定几乎所有的以MLV为基础改造的逆转录病毒载体的RNA滴定度。
逆转录病毒载体感染效率测定时,目的细胞被逆转录病毒载体感染后,通常是利用荧光和抗药性等测定感染效率,然后算出滴定度。这个方法需要数日,而且,如果没有报告基因和抗药性基因,使用此方法不能进行测定。另外,根据生物学滴定度决定感染复数 (MOI) 进行细胞感染时,滴定度测定需要数日,因此病毒上清液需要冷冻保存,冻融容易使病毒滴定度降低,并造成感染复数 (MOI) 不准,同时易造成污染。
本制品是对逆转录病毒载体的基因组RNA量进行测定,对没有报告基因和抗药性基因的逆转录病毒载体也能够测定滴定度。由于在4小时内即可得到测定结果,因此病毒上清液不需要冷冻保存,并可以根据测定的感染复数 (MOI) 进行感染。
配套使用的One Step TB Green PrimeScript RT-PCR Kit (Perfect Real Time) 是采用嵌合荧光染料法进行One Step RT-PCR反应的专用试剂。本制品中使用了适合于Real Time RT-PCR的反转录酶PrimeScript RTase (RTase H free) 和TaKaRa Ex Taq HS,具有高扩增效率和高扩增特异性,能进行稳定的Real Time One Step RT-PCR反应。
 
■ 保存
RNA Control Template: -80℃
其他组份:-20℃
 
 

页面更新:2024-02-29 10:51:53

Retro-X逆转录病毒滴度测定酶试剂盒Takara Clontech

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Retro-X逆转录病毒滴度测定
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Clontech 631453 Retro-X qRT-PCR Titration Kit 200 Rxns ¥6,492 Retro-X逆转录病毒滴度测定 Retro-X逆转录病毒滴度测定 Retro-X逆转录病毒滴度测定
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Code No. 产品名称
631453   Retro-X qRT-PCR Titration Kit
 
产品详情请点击:Retro-X逆转录病毒滴度测定
 
 

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腺病毒滴度测定酶试剂盒Takara Clontech

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腺病毒滴度测定
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Clontech 632270 Adeno-X GoStix 20 Tests ¥5,121 腺病毒滴度测定 腺病毒滴度测定 腺病毒滴度测定
Clontech 632250 Adeno-X Rapid Titer Kit 120 Ttitrations ¥7,023 腺病毒滴度测定 腺病毒滴度测定 腺病毒滴度测定
Clontech 632252 Adeno-X qPCR Titration Kit Each ¥6,249 腺病毒滴度测定 腺病毒滴度测定 腺病毒滴度测定
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· Adeno-X Rapid Titer Kit是一种功能滴度测定方法,基于腺病毒六邻体蛋白质进行测定。
· Adeno-X qPCR Titration Kit是一种使用定量PCR技术测定腺病毒滴度的方法,快速、简单、高效。
· Adeno-X GoStix是一种即时灵敏的腺病毒滴度测定方法,可以在病毒扩增过程中提早检测腺病毒,确定收获病毒的理想时间。
 
Adeno-X Rapid Titer Kit
该试剂盒中包含一种六邻体蛋白质特异性抗体,用于标记感染细胞。六邻体蛋白质由腺病毒基因组编码,是腺病毒衣壳的重要组成部分,为腺病毒复制所需要,但是它的表达需要依赖于E1基因产物。因此,像HEK 293这样的E1基因反式互补细胞类型,可以用来测定腺病毒感染活性,原因是只有细胞被感染才能表达六邻体蛋白质。这种快速测定方法需要先花费1-2小时建立体系,两天后再花费大约3小时对细胞进行标记、染色和计数。每个染色细胞对应一个感染单位。这种检测方法可与1型、2型、5型和6型人腺病毒相兼容。我们已经对基于5型人腺病毒的Adeno-X病毒进行了验证,Adeno-X病毒由Takara Adeno-X腺病毒载体系统所制备。
 
腺病毒滴度测定
 
Adeno-X qPCR Titration Kit
这种测定方法可以用于检测所有Ad5-based腺病毒载体,当然也可以检测使用Takara Adeno-X腺病毒载体系统所制备的重组腺病毒。结合使用了qPCR和TB Green,这样就可以依据校准的DNA标准曲线来确定腺病毒制剂(如粗裂解液或纯化病毒粒子)中的病毒基因组拷贝数。这种测定方法只需要大约4小时就可得出检测结果,而由于qPCR滴定花费时间短,所以实验人员在收获病毒的同一天,就可以使用经过准确滴定的病毒去感染目标细胞。
 
腺病毒滴度测定
 
Adeno-X GoStix
这是一种即时灵敏 (10 min)的腺病毒滴度测定方法,让您可以对腺病毒是否制备完毕迅速做出判断以做好使用准备,也是确定扩增后收获病毒最佳时间的理想选择。只需要将20 μl培养液上清添加至GoStix检测板上样孔中,随后滴加4滴缓冲液,等待2-20分钟,检测板上的检测窗口会出现一条带。在上清液中检测到的腺病毒数量与细胞内产生的腺病毒是密切相关的。每次测试都可以保证足够高的灵敏度,使用少量病毒上清液就可以进行检测,也可以用于确保在腺病毒扩增过程中获得尽可能大的病毒收量(我们使用这些检测板来确定从感染细胞中收获病毒的最佳时间)。感染HEK293细胞后,每天只需要取20 μl上清液进行检测。检测窗口出现一条颜色很深的Test条带,可以确保在产毒高峰时期收获高滴度的腺病毒。
 
腺病毒滴度测定
 
Overview
· 使用Adeno-X Rapid Titer Kit (六邻体检测) 可在3小时内获得功能滴度
· 与空斑形成试验或者终点稀释法相比,Adeno-X Rapid Titer Kit (六邻体检测)更准确、更省时
· 使用Adeno-X qPCR Titration Kit (基因组检测)可4小时完成滴度检测
· 使用Adeno-X GoStix可在10分钟内定性测定腺病毒滴度,快速确定收获病毒最佳时间
 
TECH NOTE
Simplify adenovirus production with a simple and rapid titer test
 
Adenoviral titration by quantitative PCR
 
FAQs
Questions about adenoviral vector systems, purification and titration
 
 
 
产品详情请点击:腺病毒滴度测定
 
 

页面更新:2023-12-29 10:56:36

慢病毒滴度测定 qRT-PCR酶试剂盒Takara Clontech

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慢病毒滴度测定 qRT-PCR
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Clontech 631235 Lenti-X qRT-PCR Titration Kit 200 Rxns ¥6,492 慢病毒滴度测定 qRT-PCR 慢病毒滴度测定 qRT-PCR 慢病毒滴度测定 qRT-PCR
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慢病毒滴度测定 qRT-PCR 慢病毒滴度测定 qRT-PCR 慢病毒滴度测定 qRT-PCR 慢病毒滴度测定 qRT-PCR 慢病毒滴度测定 qRT-PCR 慢病毒滴度测定 qRT-PCR 慢病毒滴度测定 qRT-PCR
 
 
qRT-PCR法快速测定慢病毒滴度
 
· 采用qRT-PCR和TB Green技术测定病毒滴度
· 只需4 h即可完成慢病毒滴度测定
· 适用于大多数HIV-1慢病毒
 
    Lenti-X qRT-PCR Titration Kit从收获病毒上清液到采用qRT-PCR方法完成病毒滴度的测定仅仅需要4 h,缩短了病毒收获和感染靶细胞的时间间隔,可在一天内完成收获病毒和感染靶细胞的实验过程。准确、快速地测定病毒滴度,可以确保在短时间内采用高质量的病毒感染靶细胞,并且获得可靠稳定的实验结果。利用Lenti-X qRT-PCR Titration Kit测定慢病毒滴度需要先将样品和标准品RNA (试剂盒中提供) 进行梯度稀释,然后分别进行qRT-PCR反应后绘制曲线。通过与标准曲线的Ct值比较,就可以获得样品所包含的病毒拷贝数。
慢病毒滴度测定 qRT-PCR
*本试剂盒提供的引物用于扩增HIV-1基因组毗邻包装信号的保守区域序列,因此可以与Clontech销售的所有慢病毒载体和大多数常用慢病毒载体相兼容。
 
产品详情请点击:慢病毒滴度测定 qRT-PCR
 
 

页面更新:2022-06-20 09:02:52

慢病毒滴度测定 p24 ELISA酶试剂盒Takara Clontech

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慢病毒滴度测定 p24 ELISA
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Clontech 632200 Lenti-X p24 Rapid Titer Kit 96 Rxns ¥7,268
¥5451
慢病毒滴度测定 p24 ELISA 慢病毒滴度测定 p24 ELISA 慢病毒滴度测定 p24 ELISA

*红字为促销价格,促销时间: 2024年3月1日-2024年4月30日

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慢病毒滴度测定 p24 ELISA 慢病毒滴度测定 p24 ELISA 慢病毒滴度测定 p24 ELISA 慢病毒滴度测定 p24 ELISA 慢病毒滴度测定 p24 ELISA 慢病毒滴度测定 p24 ELISA 慢病毒滴度测定 p24 ELISA
 
 
p24 ELISA法测定慢病毒滴度
 
· ELISA法快速简便测定病毒滴度
· 收集上清、裂解、结合、洗涤、测定
· p24衣壳蛋白质含量关联病毒滴度
 
■ Lenti-X p24 Rapid Titer Kit通过ELISA法检测p24蛋白质快速测定慢病毒滴度。
    目前用于研究的重组慢病毒均包含主要的结构蛋白质,包括包膜蛋白质、基质蛋白质、病毒核心蛋白质。Gag基因编码病毒衣壳蛋白质(p24)、核衣壳蛋白质(p6和p7)和基质蛋白质(p17)。Clontech Lenti-X p24 Rapid Titer Kit特异性检测p24衣壳蛋白质,p24蛋白质含量与病毒滴度相关联。
慢病毒滴度测定 p24 ELISA
 
    Lenti-X p24 Rapid Titer Kit的操作流程是首先裂解培养基上清液中的慢病毒粒子释放p24蛋白质,然后将裂解样品添加至预包被鼠源p24抗体的检测平板中,洗涤移除未结合的裂解液,采用生物素标记的二抗、辣根过氧化物酶标记链霉亲和素及显色剂检测特异结合的p24蛋白质。本试剂盒包含p24对照用于制定标准曲线。
慢病毒滴度测定 p24 ELISA
 
产品详情请点击:慢病毒滴度测定 p24 ELISA
 
 

页面更新:2019-12-23 16:11:50

慢病毒滴度测定 p24 ELISA酶试剂盒Takara Clontech

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慢病毒滴度测定 p24 ELISA
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Clontech 632200 Lenti-X™ p24 Rapid Titer Kit 96 Rxns ¥7,268
¥5451
慢病毒滴度测定 p24 ELISA 慢病毒滴度测定 p24 ELISA 慢病毒滴度测定 p24 ELISA
Clontech 631476 Lenti-X™ p24 Rapid Titer Kit (Single Wash) 96 Rxns ¥7,268
¥5088
慢病毒滴度测定 p24 ELISA 慢病毒滴度测定 p24 ELISA 慢病毒滴度测定 p24 ELISA

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慢病毒滴度测定 p24 ELISA 慢病毒滴度测定 p24 ELISA 慢病毒滴度测定 p24 ELISA 慢病毒滴度测定 p24 ELISA 慢病毒滴度测定 p24 ELISA 慢病毒滴度测定 p24 ELISA 慢病毒滴度测定 p24 ELISA
 
■ 制品说明
· 测定培养上清液中的慢病毒滴度
· 简便的ELISA法、HRP-显色试剂测定
· Single Wash版本只需一次洗涤步骤,可更快获得检测结果(1.5小时)
 
慢病毒p24蛋白
 
目前第三代或第四代重组慢病毒已被广泛用于研究用途,它们都保留了编码病毒衣壳蛋白(p24)、核衣壳蛋白(p6和p7)和基质蛋白(p17)的gag基因。Lenti-X p24 Rapid Titer Kit可以特异性测定病毒上清液中的p24衣壳蛋白含量,p24蛋白含量(图1)与慢病毒滴度直接相关。
慢病毒滴度测定 p24 ELISA
图1. 慢病毒粒子
p24蛋白是HIV-1 gag基因编码的四种蛋白的其中一种,存在于慢病毒衣壳中。包装细胞上清液中的p24的含量可被用于测定慢病毒滴度。
 
使用方法
用裂解缓冲液裂解培养上清中的重组慢病毒释放p24蛋白,制备含有p24蛋白的样品。将样品添加至96孔板(可分割的8连孔×12、已预包被抗HIV-1 p24捕获抗体)的样品孔中,使p24蛋白与抗体相结合。
洗涤移除未结合的样品,使用生物素标记的二抗、辣根过氧化物酶标记链霉亲和素及显色剂测定特异结合的p24蛋白(图2)。本试剂盒提供p24蛋白作为阳性对照,用于制定标准曲线、测定样品中的病毒含量。
 
Lenti-X p24 Rapid Titer Kit (Single Wash)与Lenti-X p24 Rapid Titer Kit比较
  Lenti-X p24 Rapid Titer Kit (Single Wash) Lenti-X p24 Rapid Titer Kit
二抗 HRP标记 生物素标记
操作时间 1.5 小时 3小时
所有操作步骤 4步 8步
洗涤次数 1次 3次
P24测定范围 100~1,600 pg/ml 12.5~200 pg/ml
 
慢病毒滴度测定 p24 ELISA
图2.两款试剂盒操作流程比较
 
慢病毒滴度测定 p24 ELISA
图3. Lenti-X p24 Rapid Titer Kit (Single Wash)操作流程
制备含有培养上清液、裂解缓冲液、HRP标记二抗的混合样品,将混合样品添加至预包被了抗p24小鼠一抗的检测孔中并孵育。洗涤后,加入显色试剂检测p24蛋白。
 
慢病毒滴度测定 p24 ELISA
图4. Lenti-X p24 Rapid Titer Kit操作流程
将培养上清液和裂解缓冲液添加至预包被抗p24小鼠一抗的检测孔中并孵育。洗涤后,顺序加入生物素标记的二抗、链霉亲和素标记的HRP反应后,加入显色试剂检测p24蛋白。
 
慢病毒滴度测定 p24 ELISA
图5. Lenti-X p24 Rapid Titer Kit (Single Wash) 标准曲线
按照用户手册指导制备p24标准品稀释液并进行测定。上述左侧表格显示了p24标准品稀释液的测定结果,右侧标准曲线图由表中的数值生成。
 
■ 制品内容
Lenti-X p24 Rapid Titer Kit (Single Wash)(Code No. 631476)
· Anti-p24 Coated Plate (12×8-well microtiter strips)  1 plate
· p24 Control 500 ng
· p24 Reconstitution Buffer 1.5 ml
· Diluent Buffer 20 ml
· Lysis Buffer 4 ml
· Anti-p24 (HRP Conjugate) 12 ml
· Washing Buffer (20X) 50 ml
· TMB Substrate 12 ml
· Stop Solution 12 ml
 
Lenti-X p24 Rapid Titer Kit(Code No. 632200)
· Anti-p24 Coated Plate (96 wells×1)
· p24 Control (10 ng/ml) 100 μl
· Lysis Buffer 6 ml
· Anti-p24 (Biotin Conjugate) 12 ml
· Streptavidin HRP 12 ml
· Washing Buffer (20X) 120 ml
· TMB Substrate 12 ml
· Stop Solution 12 ml
 
■ 保存
Code No. 631476 4℃(Washing Buffer (20X)开封后室温保存)
Code No. 632200 4℃
 
慢病毒滴度测定 p24 ELISA
慢病毒p24滴度测定试剂盒(Single Wash)

 
产品详情请点击:慢病毒滴度测定 p24 ELISA
 
 

页面更新:2023-10-25 15:24:20

Takara慢病毒滴度测定 10分钟快速测定酶试剂盒Takara Clontech

上海金畔生物科技有限公司代理Takara酶试剂盒全线产品,欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

Takara慢病毒滴度测定 10分钟快速测定
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Clontech 631280 Lenti-X GoStix Plus(20) 20 Tests ¥5,970
¥4179
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Clontech 631281 Lenti-X GoStix Plus(50) 50 Tests ¥12,125
¥8488
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*红字为促销价格,促销时间: 2024年3月1日-2024年4月30日

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10分钟定量慢病毒滴度测试— Lenti-X GoStix Plus
Lenti-X GoStix Plus提供了一种快速、简便、有效的方法,可以在非常短的时间内检测包装细胞上清液中的慢病毒滴度。这种检测方法包括将20 μl上清液添加到GoStix cassette中,等10分钟以等待表明慢病毒p24蛋白质存在的条带出现。我们早期的GoStix提供的是定性检测结果,而升级后的Lenti-X GoStix Plus的检测结果可以使用智能手机免费app进行分析,可以通过该应用程序比较条带强度来量化慢病毒滴度。
 

重要提示:我们将于2020年9月26日(星期六)太平洋夏令时间凌晨3:00,也就是北京时间18:00,发布支持慢病毒滴度测定产品Lenti-X GoStix Plus的新版本移动应用程序。我们强烈建议所有用户在上述发布日期之后,尽快更新为新版本。原因是:新版本GoStix Plus app一经发布,旧版本app将不支持之前没有检测过的新批次Lenti-X GoStix Plus。请注意,app更新将导致原有保存测定结果从移动设备中删除。因此,我们建议用户在安装新版本之前,确保所有测定结果均已保存或记录。了解更多关于GoStix Plus app更新相关FAQ,请点击此页面查阅。

下载iOS版GoStix Plus应用程序,请登录App Store搜索“GoStix Plus”获取;下载安卓版GoStix Plus应用程序,请登录Google Play商店搜索“GoStix Plus”获取,也可以点击此页面下载

 
Lenti-X GoStix app的定量检测结果(称为GoStix值或GV)可用于比较不同包装系统所产生的病毒量,其方式类似于ELISA方法,但比ELISA要更简便和快捷得多,可借助参考病毒计算出实际的IFU/ml。访问我们的FAQs页面,了解如何下载和使用智能手机app的相关信息。通过简便快速的慢病毒定量方式,Lenti-X GoStix Plus可以使您的转导实验方案差异更小化,确保每次实验可以达到更为一致的转导效果。
 
■ Overview
· 使用简单的智能手机app在10分钟内量化慢病毒滴度*
· 确定收集慢病毒上清液的理想时机
· 确保实验达到一致的转导效果
*最初的Lenti-X GoStix(Code No. 631243和631244)不能使用智能手机app进行慢病毒定量,并且该产品在逐步淘汰过程中。库存销售完毕后,将不再销售这些产品。如果需要的话,Lenti-X GoStix Plus可以使用与原始Lenti-X GoStix相同的方式进行定性分析。
 
■ 应用
· 确定慢病毒包装反应是成功的
· 比较不同包装系统所产生的病毒量
 
■ 观看视频
Applying lentiviral supernatants
了解如何将样品正确添加至Lenti-X GoStix Plus cassette。
Takara慢病毒滴度测定 10分钟快速测定
 
■ 实验例
Takara慢病毒滴度测定 10分钟快速测定
图1. 展示了慢病毒载体滴度测定的常用方法及其相关时间表(以小时为单位)。使用Lenti-X GoStix Plus进行滴度测定仅需要十分钟,其测定时间远远短于传统方法。Lenti-X GoStix Plus:一种基于侧向层析技术的检测方法,用于检测上清液中的慢病毒p24衣壳蛋白质。qRT-PCR:通过qRT-PCR方法定量病毒RNA基因组。ELISA:检测p24衣壳蛋白质的量。PCR:通过qPCR测定整合的DNA前病毒。IFU(FACS):通过FACS分析RFP/GFP阳性细胞测定被感染靶细胞的百分比。IFU(筛选):通过检测转导细胞群中抗药细胞克隆的数量来确定感染单位。
 
Takara慢病毒滴度测定 10分钟快速测定
图2. p24的产生,GoStix值和IFU/ml值都取决于收获病毒的时间。使用Lenti-X Single Shot按照制造商操作指导制备ZsGreen1慢病毒一式两份,并在指定时间收集病毒。在每个时间点,使用Lenti-X GoStix Plus分析样品的GV值,使用HT1080细胞测定病毒稀释液确定IFU/ml。检测结果除了表明GV(i.e., p24积累)和IFU/ml取决于收获时间之外,这些数据还表明GV和IFU/ml之间的比率随时间的变化而变化。
 
Takara慢病毒滴度测定 10分钟快速测定
图3. 使用Lenti-X GoStix Plus测定的病毒滴度与不同浓度病毒的转导滴度是有相关性的。使用Lenti-X Packaging Single Shots慢病毒包装系统制备Lenti-X ZsGreen1慢病毒。将制备出的病毒样品进行梯度稀释,添加到Lenti-X GoStix Plus cassettes中,进行密度分析测定滴度。另外,将每个梯度稀释液使用HT1080细胞测定实际的IFU/ml。未知样品的IFU/ml使用GV与IFU/ml的比值进行计算,该比值由使用与未知样品相同的包装系统和在相同的时间收集的参考病毒来确定。然后以使用Lenti-X GoStix Plus测定并计算出的IFU/ml与实际IFU/ml作图。
 
Takara慢病毒滴度测定 10分钟快速测定
图4. Lenti-X GoStix App通过测定测试(T)和对照(C)条带的相对强度来定量病毒滴度。Lenti-X GoStix App使用智能手机相机确定测试(T)和对照(C)条带的相对强度,并使用比率计算滴度。
 
Takara慢病毒滴度测定 10分钟快速测定
图5. 使用Lenti-X GoStix Plus测定的病毒滴度与不同包装系统的转导滴度是有相关性的。使用市面上销售的三种不同的慢病毒载体和包装系统制备ZsGreen1慢病毒。将所有制备样品稀释并添加到Lenti-X GoStix Plus cassettes中并进行分析。另外,将每个梯度稀释液使用HT1080细胞测定实际的IFU/ml。使用与未知样品相同的包装系统和在相同的时间收集的参考病毒所确定的GV与IFU/ml的比值,计算每个未知样品的IFU/ml。
 
Takara慢病毒滴度测定 10分钟快速测定
图6. 比较使用Lenti-X GoStix Plus测定的病毒滴度和基于ELISA方法测定的病毒滴度。Lenti-X GoStix Plus测定的病毒滴度可以与基于ELISA方法测定的病毒滴度以相同的方式使用Lenti-X Packaging Single Shots慢病毒包装系统制备Lenti-X ZsGreen1慢病毒。使用HT1080细胞测定转导细胞的百分比(%转导),然后进行FACS分析。此外,使用Lenti-X p24 Rapid Titer Kit测定病毒p24值,使用Lenti-X GoStix Plus确定GoStix值。以一定范围MOIs的病毒转导HT1080细胞,以其转导效率和等同的ELISA和GoStix值作图。转导后48小时拍摄转导细胞的荧光图像。
 
 
 
产品详情请点击:Takara慢病毒滴度测定 10分钟快速测定
 

页面更新:2023-07-26 15:27:49

慢病毒滴度测定 qRT-PCR酶试剂盒Takara Clontech

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慢病毒滴度测定 qRT-PCR
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Clontech 631235 Lenti-X qRT-PCR Titration Kit 200 Rxns ¥6,492 慢病毒滴度测定 qRT-PCR 慢病毒滴度测定 qRT-PCR 慢病毒滴度测定 qRT-PCR
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qRT-PCR法快速测定慢病毒滴度
 
· 采用qRT-PCR和TB Green技术测定病毒滴度
· 只需4 h即可完成慢病毒滴度测定
· 适用于大多数HIV-1慢病毒
 
    Lenti-X qRT-PCR Titration Kit从收获病毒上清液到采用qRT-PCR方法完成病毒滴度的测定仅仅需要4 h,缩短了病毒收获和感染靶细胞的时间间隔,可在一天内完成收获病毒和感染靶细胞的实验过程。准确、快速地测定病毒滴度,可以确保在短时间内采用高质量的病毒感染靶细胞,并且获得可靠稳定的实验结果。利用Lenti-X qRT-PCR Titration Kit测定慢病毒滴度需要先将样品和标准品RNA (试剂盒中提供) 进行梯度稀释,然后分别进行qRT-PCR反应后绘制曲线。通过与标准曲线的Ct值比较,就可以获得样品所包含的病毒拷贝数。
慢病毒滴度测定 qRT-PCR
*本试剂盒提供的引物用于扩增HIV-1基因组毗邻包装信号的保守区域序列,因此可以与Clontech销售的所有慢病毒载体和大多数常用慢病毒载体相兼容。
 
产品详情请点击:慢病毒滴度测定 qRT-PCR
 
 

页面更新:2019-12-23 16:13:51