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life diagnostics生物标志物检测试剂盒一一免疫毒性

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life diagnostics生物标志物检测试剂盒一一免疫毒性

Life Diagnostics公司专注于研发和生产临床前研究以及动物医学诊断相关的ELISA试剂盒、纯化的生物标志物和抗体等产品。产品覆盖心血管疾病、急性期反应、免疫毒性和免疫学标志物等研究领域，主要应用于小鼠、大鼠、兔、猫、狗、猪、猴和鸡等物种。

 

免疫毒性

在临床前研究中，常用抗原例如钥孔虫戚血蓝蛋白（KLH）免疫动物，同时给予候选药物。7天或者21天后检测动物血清内的抗钥孔血蓝蛋白免疫球蛋白G和免疫球蛋白M水平，与未给药的对照组作比较。实验组抗KLH抗体水平的降低说明存在免疫抑制。Life Diagnostics可提供几种主要的免疫毒性生物标志物检测试剂盒。

 

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上海金畔生物科技有限公司

MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒

发表于由

MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒

货号：BL132A

规格：500T

品牌：Jinpan

MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒

产品编号

产品名称

规格

BL132A

MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒

500 T

BL132B

MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒

1000 T

 

产品简介：

MTT分析法以代谢还原噻唑蓝3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl tetrazolium bromide (MTT)为基础。活细胞的线粒体中存在与NADP相关的脱氢酶，可将黄色的MTT还原为不溶性的蓝紫色的甲臜（Formazan），死细胞此酶消失，MTT不被还原。用DMSO溶解Formazan 后可用酶标仪在490nm波长处检测光密度。

 

产品组成:

组分

名称

规格

保存

500T

1000T

试剂一

5×MTT

5 mL

10 mL

-20℃避光干燥

试剂二

Dilution Buffer

25 mL

50 mL

2-8℃避光干燥

注：5×MTT溶液收到后建议分装保存到-20℃，避光保存，一年有效。

 

使用方法：

见说明书

 

注意事项：

1、 悬浮细胞用此法时必须经离心后才能吸出上清再加DMSO。

2、 Formazan的生成不仅与活细胞数成比例，也受作用时间的影响，因此当样品较多时测定的OD值可能随时间而变。

3、 用不同试剂溶解Formazan时，测定的OD值不同：DMSO溶解时，建议在490nm波长下检测；若用含SDS的相关溶剂溶解，建议在570nm下检测。

4、 本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品。

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

保存条件：

-20℃避光保存一年。

货号 BL132A
规格 500T
品牌 Jinpan
说明书下载 点击下载

MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒

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MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒

货号：BL132B

规格：1000T

品牌：Jinpan

MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒

产品编号

产品名称

规格

BL132A

MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒

500 T

BL132B

MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒

1000 T

 

产品简介：

MTT分析法以代谢还原噻唑蓝3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl tetrazolium bromide (MTT)为基础。活细胞的线粒体中存在与NADP相关的脱氢酶，可将黄色的MTT还原为不溶性的蓝紫色的甲臜（Formazan），死细胞此酶消失，MTT不被还原。用DMSO溶解Formazan 后可用酶标仪在490nm波长处检测光密度。

 

产品组成:

组分

名称

规格

保存

500T

1000T

试剂一

5×MTT

5 mL

10 mL

-20℃避光干燥

试剂二

Dilution Buffer

25 mL

50 mL

2-8℃避光干燥

注：5×MTT溶液收到后建议分装保存到-20℃，避光保存，一年有效。

 

使用方法：

见说明书

 

注意事项：

1、 悬浮细胞用此法时必须经离心后才能吸出上清再加DMSO。

2、 Formazan的生成不仅与活细胞数成比例，也受作用时间的影响，因此当样品较多时测定的OD值可能随时间而变。

3、 用不同试剂溶解Formazan时，测定的OD值不同：DMSO溶解时，建议在490nm波长下检测；若用含SDS的相关溶剂溶解，建议在570nm下检测。

4、 本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品。

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

保存条件：

-20℃避光保存一年。

货号 BL132B
规格 1000T
品牌 Jinpan
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MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒

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MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒货号： JP50010

产品描述
描述

MTT 法又称 MTT 比色法，是一种检测细胞存活和生长的方法。其检测原理为活细胞线粒体中的琥珀 酸脱氢酶能使外源性 MTT 还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲瓒(Formazan)并沉积在细胞中，而死细胞无此功能。在一定细胞数范围内，MTT 结晶形成的量与细胞数成正比，吸光度越大，表示细胞活性越强，说明药物毒性越小。该方法已广泛用于一些生物活性因子 的活性检测、大规模的抗肿瘤药物筛选、细胞毒性试验以及肿瘤放射敏感性测定等。它的特点是灵敏度 高、经济。

组分：MTT（25mg）、MTT 溶剂（5ml）、Formazan 溶解液（55ml）
使用方法
1、将细胞板放置于无菌操作台中。 2、在细胞板中每孔加入10%体积的 MTT溶溶剂。 【MTT溶液的配制：用5ml MTT溶剂溶解25mg MTT，配制成5mg/ml的MTT溶液。配制后即可使用，或直接-20℃避光保存，也可以根据需要适当分装后-20℃避光保存。】 3、将细胞板放回培养箱中继续孵育3 – 4小时。做对比试验时，孵育时间需一致。 4、孵育后将细胞板从培养箱中拿出，按照下面的方法溶解产生MTT甲臜结晶物。 （1）如果是贴壁细胞，则弃去培养基。加入与初始体积等量的Formazan Solvent。每孔的溶解液体积可能不同，但为了方便比较，总体积须保持一致。 （2）如是非贴壁细胞或培养基的去除会造成MTT甲臜丢失，则直接在培养基中加入与初始体积等量的溶解 液。 （3）加入 Formazan Solvent 后，须在 1 小时内完成读数。 5、在摇床中温和地振荡可增强溶解。某些情况下，尤其是细胞密度较高时，需要反复吹打使 MTT 甲臜结 晶物完全溶解。 6、分光光度计测定 OD570 和参考波长 OD690。 7、96 孔板可以在配备合适滤光片的酶标仪上进行检测。 8、其他类型的多孔板则需用合适大小的比色皿或读板器进行分光光度检测。
注意事项
1、由于使用96孔板进行检测，如果细胞培养时间较长，一定要注意蒸发的问题。一方面，由于96孔板周围一圈最容易蒸发，可以采取弃用周围一圈的办法，改加PBS，水或培养液；另一方面，可以把96孔板置于靠近培养箱内水源的地方，以缓解蒸发。 2、若所用受试化合物与MTT能够反应，可先离心后弃去培养液，小心用PBS冲2~3遍后，再加入含MTT的培养液。 3、Formazan的生成不仅与活细胞数成正比，也受作用时间的影响，因此样品较多时测定的结果可能随时间而变。 4、本品含有致癌物质，避免与皮肤和眼睛接触，请小心操作。为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 5、本产品只用于科研，不可应用于临床或诊断。
基本信息
别名
MTT Cell Proliferation and Cytotoxicity Assay Kit,MTT kit
储存/保存方法
2~8℃，避光保存，有效期12个月。

三维培养细胞活性及毒性检测

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三维培养细胞活性及毒性检测

细胞培养于悬滴(hanging drop), 自组装形成球状细胞簇。 Cayman采用3D Biomatrix公司的3D细胞培养平台，开发出了两款全新的试剂盒用于研究Perfecta3D®培养板上的球状体(spheroid)细胞。即Perfecta3D®细胞活力检测试剂盒及Perfecta3D®细胞毒性检测试剂盒，可快速精准的检测球状体的一些基本细胞过程。
 
研究复杂的细胞和组织，及其信号传导与调控可不是件容易事。而模拟细胞或组织环境，建立最接近体内天然条件的实验系统同样困难。这就是3D细胞培养所面临的挑战，3D培养系统旨在更好的模拟细胞的体内生长环境。近来越来越多的证据表明，3D细胞培养系统比传统2D培养系统更贴近体内的生理条件。美国3DBiomatrix公司生产的Perfecta3D®悬滴板是一个新的三维细胞培养平台，能够在多孔板模式中形成大小均匀的球状体悬滴；这种悬滴是细胞自组装形成的球状细胞簇，是三维（3D）细胞培养和筛选中研究的最有利的模型之一。同其他类型的3D支架和水凝胶等方法相比，这种球状体具有简单性，可重复性以及生理组织的相似性，能模拟组织肿瘤固有的代谢（氧气、二氧化碳、养分、废物）和增殖梯度变化。作为优良的生理肿瘤模型可以提供比2D细胞培养更可靠的结果。
 三维培养细胞活性及毒性检测

图1. Perfecta3D®悬滴培养板促进细胞球体在悬滴中的培养。用移液器将细胞悬液加入每个孔，细胞自组装形成的球状细胞簇。

应用一. 细胞活性检测

 在细胞研究中，对细胞活性及细胞毒理的检测是一项基本的细胞学技术，通常采用WST-1法。WST-1是一种类似于MTT的化合物，在电子耦合试剂存在的情况下，可以被线粒体内的一些脱氢酶还原生成橙黄色的可溶性formazan盐。Formazan产物的吸光度与活细胞的数量及活性成正比。
 
Cayman开发的Perfecta3D®细胞活力检测试剂盒（产品编号：600990）, 提供3D细胞培养板、WST-1试剂、电子媒介体溶液（Electron Mediator Solution）以及分析用的圆底板。如图2所示，HEK293细胞以不同细胞密度培养于悬滴中，设置Vehicle对照以及逐渐增加Triton X-100浓度的实验组（处理1小时）。然后转移细胞至圆底板，与WST-1溶液孵育，最后在450nm读数。OD值随细胞数升高，随Triton X-100浓度的升高而降低。

 三维培养细胞活性及毒性检测

图2. 起始细胞数量对450nm吸光度的影响。HEK293细胞以不同起始细胞密度加入3D培养板，将培养板移入37度CO2孵育箱中。4天后，细胞经Vehicle, 0.001%或0.01% Triton X-100处理1小时，然后转移至圆底板，每孔加入WST-1试剂。细胞于37度孵育3.5小时后，于450nm测定吸光度。

应用二. 细胞毒性检测 

细胞膜完整性的丧失是细胞毒性的表现形式之一，导致细胞的渗漏。LDH是一个可溶性的胞浆酶，可从受损细胞释放到培养基中，因此被用作细胞溶解、细胞毒性以及细胞活性等的标志分子。Cayman开发的Perfecta3D®细胞毒性检测试剂盒（产品编号：601050）提供3D细胞培养板以及检测LDH的必需试剂。细胞培养于悬滴中，通常含40-50ul的培养基，如要处理细胞，可移出10ul培养基，加入含有测试化合物的替换培养基。进行细胞毒性检测时，可移出10ul培养基，然后将细胞转移至标准的96孔板，用LDH试剂进行检测。490nm读数，吸光度与LDH浓度线性相关（图3）。
 

图3. LDH标准曲线。LDH标准品溶于不含FBS的RPMI 1640中，然后每孔加入100ul的反应液，室温孵育30分钟。