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分享细胞周期检测五个小知识点

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分享细胞周期检测五个小知识点

细胞周期检测五个小知识点汇总整理：

1、流式细胞术分析细胞周期的原理

在细胞周期的不同时期，DNA含量存在差异，用DNA染料进行染色（如应用最广泛的染料PI），DNA含量多，荧光强度高，DNA含量少，荧光强度低，因此可以根据DNA荧光强度的变化，来判断细胞处于哪个时期。

分享细胞周期检测五个小知识点

2、利用PI分析细胞周期，需要加入RNase消除RNA的影响

PI是通过插入双螺旋结构中叠加在一起的碱基对核酸进行染色的，并且它可以插入所有DNA和RNA的双链区，PI不是DNA特异性的，所以需要加入RNase消除RNA的影响。

3、细胞周期检测时，一定不要洗涤

不同于蛋白染料和细胞之间的牢固结合，DNA与染料的结合是一种结合态和游离态之间松散的平衡，不是很牢固，所以洗涤步骤会造成染料丢失，降低核酸的特异性荧光，造成测量值变小，因此，DNA染色时一定不要洗涤。

4、 固定细胞和活细胞的细胞周期检测

PI、7-AAD、TOTO-3和YOYO-1等染料不能透过完整的细胞膜，在染色时，一般需要用70%乙醇固定、通透细胞膜，从而使这些染料进入细胞核内与DNA结合，所以市面上很多的细胞周期检测试剂盒都是需要固定细胞的；如果想要检测活细胞样本，可以咨询我们在线客服人员。

5、其他应该注意的问题

• 仪器：定期清洗喷嘴，激光预热时间充分，低流速进样等。

• 样本：消化要充分，但不能过度，保证细胞不粘连、不破裂，染色要充分等。

如需了解相关的检测细胞周期的产品，请联系金畔在线客服

Bio-rad热销细胞活性检测产品介绍

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Bio-rad热销细胞活性检测产品介绍

在做细胞健康的研究实验中，对于细胞活性的检测，是必不可少的。本文就Bio-rad公司研发的几款检测细胞活性的热销产品，进行介绍。如大家想尝试使用这些产品，可与我们金畔联系。

VivaFix Fixable Viability Dyes

原理： VivaFix细胞活性染料与活细胞中存在于细胞表面的游离伯胺共价结合。当膜受损时，染料渗透细胞并与胞内伯胺反应。由于死细胞中游离胺含量增加，因此具有更大的荧光，使其易于与活细胞区分。

Bio-rad热销细胞活性检测产品介绍

主要优点：

可用于未固定样本和固定样本

可用于流式细胞仪分析或活细胞分选和显微镜

易于区分活细胞和死细胞群-荧光强度至少相差100倍

具有一系列激发和发射光，可方便的添加到多色流式方案中

Bio-rad热销细胞活性检测产品介绍

Figure 2. Jurkat cells were stained with VivaFix Cell Viability Assay, fixed with 3.7% formaldehyde (A) or not fixed (B) and analyzed with the S3™ Cell Sorter. SSC, side scatter

Bio-rad热销细胞活性检测产品介绍


DAPI（4’，6-二氨基-2-苯基吲哚）

原理：一种特性良好的蓝色荧光化合物，广泛用于核染色。它与DNA小沟槽结合，可渗透细胞膜，优先染色细胞核。

Bio-rad热销细胞活性检测产品介绍

特点：

可在流式细胞仪、细胞成像仪和荧光显微镜使用

只需一个稀释步骤即可获得可随时使用的溶液

Bio-rad热销细胞活性检测产品介绍

荧光特征

最大激发波长：359nm

最大发射波长：461nm

适用激光器：355nm

Hela cell,formaldehyde fixed and permeabilized, stained with rat anti alpha tubulin (red) (MCA78G), mouse anti human CD49a, green (MCA1133) and PureBlu DAPI, blue (1351303).

Hoechst 33342

原理：同DAPI

与DAPI的区别：非固定样品的首选Hoechst 33342，它能对固定和未固定细胞都进行染色。与DAPI相比，它增加了对完整细胞膜的渗透性，因此在使用未固定样品时，它是首选。

Bio-rad热销细胞活性检测产品介绍

荧光特征

最大激发波长：350 nm

最大发射波长：461 nm

适用激光器：355nm

alamarBlue

原理：一种氧化还原反应的指示剂，可根据细胞生长发出荧光并改变颜色。可用于测量人和动物细胞、细菌和真菌的细胞增殖和细胞毒性。 适用检测仪器：分光光度计和酶标仪等。

特点： alamarBlue是一种快速、无毒、简便、可靠的细胞增殖活性试剂，提供了快速、灵敏和经济的方法。是其他细胞增殖检测（例如MTT、XTT、3H胸苷或中性红）的首选替代品。

优点：

安全：产物水溶且无毒，不会杀死细胞，对用户和环境安全

简单：无需清洗/固定和提取步骤，样品可以在1-3天内冷藏和读取

高灵敏度：50个细胞即可检测

灵活：比色和荧光检测，适用于培养的哺乳动物细胞、细菌、酵母、真菌和原生动物

可扩展：96孔板以实现高通量分析

稳定：专有缓冲剂确保用于时间进程研究，可连续跟踪细胞增殖的动态改变

经济：无细胞裂解允许细胞培养用于后续分析

可靠：高度参考细胞毒性和活力测定

易用：全面的使用方案、步骤指导和参考案例

产品名称 产品货号 规格
alamarBlue® BUF012A 25 ml
alamarBlue® BUF012B 100 ml

如需订购相关产品，请联系Bio-rad中国优势代理商-上海金畔生物

支原体检测新风尚—Invivogen支原体检测试剂MycoStrip™

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支原体检测新风尚—Invivogen支原体检测试剂MycoStrip™

支原体污染是细胞培养中一个主要的污染问题，能够严重影响实验结果的重现性和有效性。InvivoGen的MycoStrip™使用等温PCR的技术检测支原体污染，在5分钟内就能于免疫层析试纸条上快速显示结果。

 

MycoStrip™基于等温PCR的技术检测污染细胞培养物的支原体。只需准备您的样品并添加我们专有的反应混合物，即可靶向和扩增细胞培养中最常见的支原体物种的16SrRNA基因。重要的是，MycoStrip™与测试的细菌、真菌或哺乳动物DNA没有任何交叉反应。

 

MycoStrip™的主要特点  

• 简单：只需要一个加热块

• 快速：2 – 5分钟内显示结果

• 轻松解读：试纸条上出现一或两条条带

• 最少的操作时间：<15分钟

• 总检测时长：<1小时

• 灵敏度高：检测限低至1 x 102 CFU/ml

• 特异性高：无交叉反应

• 稳定：试剂盒可在-20°C下保存1年

 

如果测试结果为阳性怎么办？

不用紧张！

InvivoGen的抗支原体试剂可以轻松拯救您的培养物。

使用Plasmocin™或Plasmocure™处理并消除您的培养物污染。治疗完成后（约2周），可以使用MycoStrip™重新测试，比对处理前后的样本结果。 


视频链接：

CgAG0mFvjg2AMSq4AIBoVI6GCRU471.mp4

更多详情请联系InvivoGen中国代理商上海金畔生物

小鼠IFN-γ酶联免疫斑点检测试剂盒

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小鼠IFN-γ酶联免疫斑点检测试剂盒

品牌：Mabtech 

货号：3321-4AST

应用：ELISpot

反应种属：小鼠

组分：Biotinylated detection mAb (R4-6A2)

Streptavidin-ALP

Substrate (BCIP/NBT-plus)

2 Pre-coated strip clear plates (mAb AN18)

规格：2 plates，10 plates

IFN-γ：干扰素-γ (IFN-γ, 也称 IFN-gamma, IFN-g和Interferon-gamma)主要由活化的T细胞和NK细胞产生。它是一种激活巨噬细胞和内皮细胞的促炎细胞因子，也通过影响APC、T和B细胞来调节免疫反应。辅助T细胞和细胞毒性T细胞产生IF ELISpot N-γ是th1型表型的标志，因此，大量IFN-γ的产生通常与宿主对胞内病原体的有效防御有关。

References（参考文献）：

Nemattalab, M., et al. (2019). Co-expression of Interleukin-17A molecular adjuvant and prophylactic Helicobacter pylori genetic vaccine could cause sterile immunity in Treg suppressed mice. Cytokine.

Noguera-Ortega, E., et al. (2016). Mycobacteria emulsified in olive oil-in-water trigger a robust immune response in bladder cancer treatment. Sci Rep.

Obermajer, N., et al. (2018). Promoting the accumulation of tumor-specific T cells in tumor tissues by dendritic cell vaccines and chemokine-modulating agents. Nat Protoc.

详情请咨询Mabtech代理上海金畔生物科技有限公司

台盼蓝染色细胞存活率检测试剂盒

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台盼蓝染色细胞存活率检测试剂盒

货号：BL152A

规格：100T

品牌：Jinpan

台盼蓝染色细胞存活率检测试剂盒

产品编号

产品名称

规格

BL152A

台盼蓝染色细胞存活率检测试剂盒

100T

 

产品简介：

台盼蓝（Trypan Blue）是一种偶氮、亲水性酸性染料，可透过死亡细胞和垂死细胞的细胞膜，将其染成蓝色，而活细胞由于其细胞膜的完整性，可将台盼蓝排斥在外，无法染色。 

台盼蓝染色细胞存活率检测试剂盒(Trypan Blue Staining Cell Viability Assay Kit）就是根据此原理研制而成。严格来说，台盼蓝染色检测的是细胞膜的完整性，通常认为细胞膜丧失完整性，即可认为细胞已经死亡，台盼蓝染色后通过显微镜下直接计数或显微镜下拍照后计数，就可以对细胞存活率进行比较精确的计算。

 

产品组成：

组分

名称

规格

保存

BL152A-1

2×台盼蓝染色液

10ml

4℃

BL152A-2

细胞重悬液

100ml

4℃

 

使用方法（仅供参考）：

1. 收集细胞：

收集贴壁细胞时应采用胰蛋白酶消化细胞，收集细胞。如果收集悬浮细胞，则可以直接收集细胞。把收集的细胞在1000～2000g离心1min，弃上清，用1ml或适当量的细胞重悬液重新悬浮起细胞沉淀。

2. 台盼蓝染色：

吸取100μl重悬的细胞到常规1.5ml或0.5ml离心管内，加入100μl 2×台盼蓝染色液轻轻混匀，染色3min(染色时间可适当延长，但不宜超过10min)。

3. 计数：

吸取少量经过染色后的细胞，用血细胞计数板计数，通常如果要比较精确地进行定量，每个细胞样品至需要500个细胞，数出蓝色细胞和细胞总数。

细胞存活率计算公式如下：

细胞存活率＝(细胞总数－蓝色细胞数)/细胞总数×100%

 

注意事项：

1、 最好在超净台内进行无菌操作，避免细菌污染。

2、 台盼蓝对人体有害，请注意小心操作。

3、 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

有效期：

4℃保存一年。

货号 BL152A
规格 100T
品牌 Jinpan
说明书下载 点击下载

脂质氧化（MDA）检测试剂盒

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脂质氧化（MDA）检测试剂盒

￥980.00

货号：BL904B

规格：500T

品牌：Jinpan

Lipid Peroxidation MDA Assay Kit

脂质氧化（MDA）检测试剂盒

产品编号

产品名称

规格

BL904A

脂质氧化（MDA）检测试剂盒

100T

BL904B

脂质氧化（MDA）检测试剂盒

500T

 

产品简介：

脂质氧化(MDA)检测试剂盒采用一种基于丙二醛（Malondialdehyde，MDA）和硫代巴比妥酸（thiobarbituric acid，TBA）反应产生红色产物的显色反应，随后通过比色法用于对血浆、血清、尿液、动植物组织或细胞裂解液中MDA进行定量检测，广泛用于脂质氧化（lipid peroxidation）水平检测的试剂盒。

MDA是一种生物体脂质氧化的天然产物。动物或植物细胞发生氧化应激（oxidative stress）时，会发生脂质氧化。一些脂肪酸氧化后逐渐分解为一系列复杂的化合物，其中包括MDA。此时通过检测MDA的水平即可检测脂质氧化的水平，因此MDA的测定被广泛用作脂质氧化的指标。生物体内的一些其它生化反应也会产生MDA，例如血栓素合成酶（thromboxane synthase）也可以催化产生，但只要在测定时设置适当对照即可观察到脂质氧化水平的变化。

丙二醛在较高温度及酸性环境中可与TBA发生反应，形成红色的MDA-TBA加合物，反应原理如下：

 

 

 

MDA-TBA加合物在535nm处有最大吸收，据此可以通过比色法进行检测。另外，MDA-TBA加合物也可以在535nm被激发产生最大发射波长553nm，据此也可以进行荧光检测。

本试剂盒中采用了特殊的抗氧化剂，可以有效地抑制样品在检测过程中产生新的MDA，并且可以把部分MDA天然形成的聚丙二醛分解成MDA使检测更加准确。

本试剂盒可以检测低达1μM的MDA，也可检测高达200μM的MDA （参考图1）。血浆、血清样品中的MDA含量通常在约2-4μM，尿液中的MDA含量通常在约5-30μM，在本试剂盒的检测范围内，可以直接用本试剂盒检测血浆、血清、尿液样品等。

 

 

 

 

图1. 不同浓度标准品使用本试剂盒的检测效果图。实测数据会因检测仪器等的不同而存在差异，图中数据仅供参考。

 

产品组成：

组分

BL904A

BL904B

TBA

25 mg

125 mg

TBA配制液

6.76 ml

40 ml

TBA稀释液

15 ml

100 ml

抗氧化剂

0.3 ml

1.5 ml

标准品（1mM）

0.2 ml

1 ml

 

使用方法：参考说明书

 

注意事项：

1、如果没有检测到MDA，可能样品中MDA浓度过低，在检测组织或细胞的MDA时，请使用更多的组织或细胞，不要稀释样品。

2、醛以及较高浓度的可溶性糖（例如250mM蔗糖/葡萄糖）对反应有干扰，可溶性糖与TBA显色反应的产物在532nm也有吸收（最大吸收在450nm）。如果可溶性糖对测定有干扰，可以通过测定450nm作为参考波长进行双波长测定，消除其干扰。

3、本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品。

4、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

保存条件：

-20℃避光保存，有效期一年。

货号 BL904B
规格 500T
品牌 Jinpan
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BioLux Cypridina 荧光素酶检测试剂盒(已停产且无替代品) #E3309L 1,000 次检测-NEB酶试剂 New England Biolabs

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上海金畔生物科技有限公司代理New England Biolabs（NEB）酶试剂全线产品，欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

产品资料 – 细胞分析 – Gaussia & Cypridina荧光素酶报告基因

BioLux Cypridina 荧光素酶检测试剂盒(已停产且无替代品)                              收藏

货 号
规 格
价 格(元)
北京库存
上海库存
广州库存
成都库存
苏州库存
武汉库存

#E3309L
1,000 次检测
.00
无
无
无
无
无
无

#E3309S
100 次检测
.00
无
无
无
无
无
无

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特性

 启动子/增强子分析
 高通量分析
 转染条件优化
 与其它报告系统一起进行多重分析
 分泌途径分析
 siRNA 筛选
 时间曲线研究
 单细胞分析，包括干细胞和原代细胞
 活细胞分析
 
BioLux 检测试剂盒可以单独使用，也可以作为双系统与其它试剂盒联合使用。
 

NEB 为研究者提供可以检测细胞培养物上清或裂解物中 Gaussia 荧光素酶（GLuc）或 Cypridina 荧光素酶（CLuc）活性的试剂盒。因为 GLuc 和 CLuc 使用不同的底物，并且无交叉反应，因此，当一种荧光素酶存在时，并不影响另一种荧光素酶的活性测定，这使得这些荧光素酶可作为双重报告系统使用。

概述

BioLux Gaussia 荧光素酶检测试剂盒含有检测 GLuc 活性所必需的试剂。该试剂盒最常用于直接检测细胞上清液，也可用于检测细胞裂解液。通过精心设计，该试剂盒具有最大的光信号输出。
 
该检测试剂盒还可以灵活选择较强的荧光信号或较长的信号半衰期。该试剂盒包含稳定剂，加入后可以增加信号半衰期。该试剂盒是高通量筛选的理想工具（见图）。
 
BioLux Gaussia 荧光素酶检测试剂盒也可用来检测海肾荧光素酶的活性，因为 GLuc 和海肾荧光素酶都可以氧化腔肠素（coelenterazine）。
 
BioLux Cypridina 荧光素酶检测试剂盒含有检测 CLuc 活性所必需的试剂。该系统可用于检测细胞培养物上清或细胞裂解物。该系统使用 vargulin 荧光素作为底物。
 
BioLux Cypridina 荧光素酶检测试剂盒(已停产且无替代品) #E3309L 1,000 次检测

BioLux 试剂盒组成

BioLux Cypridina 荧光素酶检测试剂盒(已停产且无替代品) #E3309L 1,000 次检测

支原体检测试剂盒（PCR法）

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支原体检测试剂盒（PCR法）货号： JP9588

产品描述
描述

        支原体污染会对细胞各个方面都造成不良影响，已经成为细胞培养中高度重视的问题，因此，定期进行支原体污染检测是十分必要的。本支原体检测试剂盒是采用PCR方法，特异性的检测各种培养细胞生物材料（如细胞培养物、实验动物分泌物、动物血清等）中支原体的污染。
        试剂盒使用的混合引物是针对支原体16s rRNA序列的保守区域设计的特异性引物，可直接使用细胞培养液作为PCR模板，特异性扩增支原体DNA，搭配配套的Mycoplasma PCR Mix（2×）一小时内即可完成，本试剂盒检测灵敏度高，可检测低至20个拷贝的支原体。
产品组分：

组分 名称 规格
A Mycoplasma PCR Mix（2×） 1ml
B Mycoplasma Primer Mix 200ul
C Positive Control 50ul
D Mycoplasma Free Water 1ml
使用方法
1、样品准备：取适量待检细胞培养上清于洁净的PCR管中，利用PCR仪95℃热处理5 min后作为模板。血清样本可利用Mycoplasma Free Water稀释后，取适量样本于洁净的PCR管中，利用PCR仪95℃热处理5 min后作为模板；
2、PCR体系配制：每次实验需设置阴性对照（将1 μL待检样品换成等量的Mycoplasma Free Water）与阳性对照（在1 μL待检样品中加入0.5 μL Positive Control后一起作为Template），实验时戴一次性口罩与手套，谨慎操作，防止操作不当引入外源支原体污染；

组分 体积
Template 1ul
Mycoplasma Primer Mix 2ul
Mycoplasma PCR Mix（2×） 10ul
Mycoplasma Free Water To 20ul

3、PCR程序设置：

Step Temperature Time Cycles
Initial Denaturation 98℃ 2 min 1
Denaturation 98℃ 20 S 30
Annealing 56℃ 25 S
Extension 72℃ 10 S
Final extension 72℃ 5 min 1
Hold 4-16℃ Forever  

4、凝胶电泳：取10 μL PCR产物，使用1%琼脂糖凝胶进行电泳检测；
5、结果分析：每次实验通过与阴性对照、阳性对照检测结果比较确认样品支原体污染情况，阳性条带大小500 bp左右。如阴性对照检测结果中有条带很有可能是PCR体系中出现污染，建议重新实验确认结果。如有必要，也可对PCR产物进行常规测序，以确定具体的支原体种属。
注意事项
1、本试剂盒可以检测M.orale，M.arginini，M.bovis，M.fermentans，M.gallisepticum，M.hominis，M.pirum，Ureaplasma spp，M.hyorhinis，M.pneumoniae，A.laidlawii等至少11种以上支原体污染。
2、所有试剂在使用前于冰上彻底解冻、混匀，使用完毕后于-20℃保存。
3、每次实验必须设置阴性对照、阳性对照，实验组建议设置样品模板梯度。
4、操作时必须佩戴口罩，严格按照PCR操作标准，防止引入外源污染影响实验结果。
5、为了确保细胞实验的可靠性及稳定性，建议定期进行支原体污染检测。
6、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
基本信息
储存/保存方法
-20℃保存，有效期12个月。

ROS活性氧检测试剂盒

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ROS活性氧检测试剂盒

货号：BL714A

规格：1000T

品牌：Jinpan

Reactive Oxygen Species Assay Kit

活性氧检测试剂盒

产品简介：

活性氧检测试剂盒是一种利用荧光探针H2DCFDA进行活性氧检测的试剂盒。H2DCFDA本身没有荧光，可以自由穿过细胞膜，进入细胞内后，可以被细胞内的酯酶水解生成DCFH，而DCFH不能通透细胞膜，从而使探针很容易被装载到细胞内。细胞内的活性氧可以氧化无荧光的DCFH生成有荧光的DCF。检测DCF的荧光就可以知道细胞内活性氧的水平。根据活细胞中荧光的产生，可以判断细胞活性氧的含量和变化。用流式细胞仪或荧光显微镜可直接观察，是一种经典的活细胞中活性氧检测方法。

本试剂盒提供了活性氧阳性对照试剂Rosup，以便于活性氧的检测。Rosup是一种活性氧阳性诱导药物，浓度为50mg/mL，根据其荧光信号强度，可分析活性氧的实际水平。

本试剂盒本底低，灵敏度高，线性范围宽，使用方便。

       本试剂盒可以测定1000个样品（以96孔板为标准）。

 

产品组成：

组分

规格

H2DCFH-DA（10mM）

100μl

活性氧阳性对照（Rosup,   50mg/mL）

1ml

    

图例：使用活性氧检测试剂盒来显示CHO细胞内活性氧荧光。左图为CHO细胞用试剂盒配备的活性氧阳性对照处理；右图为正常CHO细胞。绿色荧光表明细胞活性氧急剧增加，并能显示其定位。

     

注意事项：

1、  探针装载后，一定要洗净残余的未进入细胞内的探针，否则会导致背景较高。

2、  阳性对照Rosup 一般使用浓度为100μM（推荐浓度100-400μM，具体依细胞类型而定）。通常刺激后0.5-4h可观察到显著的活性氧水平升高。对于不同的细胞，活性氧阳性对照的效果可能有较大的差别。如果在刺激后30 min内观察不到活性氧的升高，可延长诱导时间或适当提高活性氧阳性对照的浓度。如果活性氧升高得过快，可缩短诱导时间或适当降低活性氧阳性对照的浓度。

3、  对于某些特别的细胞，实验过程中如果发现没有刺激的阴性对照细胞荧光也比较强， 可以按照1:2000-1:5000稀释DCFH-DA，使DCFH-DA的终浓度为2-5μM，浓度过高容易出现非特异性染色。探针装载的时间也可以根据情况在15-60 min内适当进行调整。

4、  活性氧阳性对照（Rosup）仅仅用于作为阳性对照的样品，其他正常实验样品无需加入。

5、  探针装载完毕并洗净残余探针后，可以进行激发波长的扫描和发射波长的扫描，以确认探针的装载情况是否良好。DCF的激发光谱和发射光谱请参考上图。

6、  尽量缩短探针装载后到测定所用的时间（刺激时间除外），因为探针容易氧化，导致本底荧光值升高，所以建议工作液现用现配，以减少各种可能的误差。

7、  如果定量的话需要制作标准曲线。先做一个不同浓度H2O2氧化DCFA荧光值，做一条标准曲线，X轴为H2O2浓度，y轴是荧光值，得出一个方程，再看样品的荧光值即Y值是多少，对应的X值即对应的H2O2浓度。

8、  实验组荧光值不高可能是因为有的细胞在装载探针后细胞容易漂起来，洗细胞时实验组会吸走一部分细胞。所以在种细胞时可以把细胞量增加一倍，这样细胞紧密连接，贴壁比较牢，实验组的荧光值就高了。

9、  为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

保存条件：

-20℃避光保存，有效期一年。

货号 BL714A
规格 1000T
品牌 Jinpan
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细胞凋亡早期检测的四种方法

发表于由

细胞凋亡早期检测的四种方法

细胞凋亡早期检测的四种方法，请查看本文具体内容介绍：

1、PS（磷脂酰丝氨酸）在胞外膜分布的检测

PS从胞膜内侧转移到外侧现象是在细胞凋亡的早期即可发生标志。AnnexinV是一种钙依赖性的磷脂结合蛋白，能专一性的结合暴露在胞膜外侧的PS，使用荧光素标记的AnnexinV 蛋白（如Annexin V-FITC）即可检测细胞凋亡。由于这是一种凋亡早期的活细胞检测（悬浮细胞和贴壁细胞都适用），可与DNA染料或别的晚期检测方法相结合来标记凋亡的发展阶段。操作简便快速，10分钟就可完成检测。灵敏度高，可作为流式方法分析凋亡细胞的基础。

2、细胞内氧化还原状态改变的检测

正常状态下,谷胱甘肽（GSH）作为细胞内的一种重要的氧化还原缓冲剂。细胞内有毒的氧化物通过被GSH还原而清除，氧化型的GSH又可被GSH还原酶迅速还原。这一反应在线粒体中尤为重要，许多呼吸作用中副产物的氧化损伤将由此被消化除。在细胞膜中有可被凋亡信号启动的ATP依赖的GSH转移系统。当细胞内GSH的排除非常活跃时，细胞液就由还原环境转为氧化环境，这可能导致了凋亡早期细胞线粒体膜电位的降低，从而使细胞色素C（三羧酸循环中的重要组分）从线粒体内转移到细胞液中，启动凋亡效应器caspase的级联反应。

3、细胞色素C的检测

细胞色素C作为一种信号物质，在细胞凋亡中发挥着重要的作用。正常情况下，它存在于线粒体内膜和外膜之间的腔中，而不存在于胞浆内。凋亡信号刺激后可使其从线粒体释放到胞浆中，结合Apaf-1后而启动caspase级联活化反应，首先可激活caspase-9，后者再激活caspase-3和下游的其它caspase分子。凋亡发生的早期，细胞色素C泄漏到胞浆中，检测胞浆中细胞色素c的含量可反映细胞的早期凋亡。

4、线粒体膜电位变化的检测

在细胞凋亡的早期，线粒体在形态学上没有明显变化。但线粒体可发生很多生理生化的改变。例如在受到凋亡诱导后，线粒体的转膜电位发生变化，导致膜穿透性改变。MitoSensorTM是一种阳离子染色剂，对此膜电位改变非常敏感，可呈现出不同的荧光染色。正常细胞中，它在线粒体中形成聚集体，发出强烈的红色荧光。凋亡细胞中，因线粒体跨膜电位改变，它则以单体形式停留于胞浆中，发出绿色荧光。用荧光显微镜或流式细胞仪可清楚地分辨这两种不同的荧光信号。

如需更多详细资料，或咨询相关产品，请联系上海金畔生物