抗体联合疗法—Invivogen新冠研究工具推荐

抗体联合疗法—Invivogen新冠研究工具推荐

根据《病毒学报》2月8日发布的一项新的研究显示,新型冠状病毒自2019年底流行至今,已演变出800余个不同亚型或分支。有些病毒株的突变位点还位于病毒刺突蛋白的受体结合域(RBD),这可能意味着突变病毒株会有更强的传播力和抗免疫能力。

已发表的多组数据表明,近期出现的新冠变异毒株由于刺突蛋白发生的多个突变,增强了逃逸抗体中和的能力,这使科学家们需要重新评估现存抗体疗法的有效性。

华盛顿大学医学院的Michael S. Diamond团队近日在Nature发表了相关的研究,作者在体外及体内实验测试了被美国FDA批准紧急使用的抗体,如礼来(Lilly)公司开发的LY-CoV555 和礼来与君实生物联合开发的LY-CoV016、再生元(Regeneron)公司开发的REGN10933 和 REGN10987,以及其他正在进行临床试验的单抗对不同变异株(主要是spike基因产生突变的变异毒株)的效用,当中包括取自英国、南非、巴西、印度、美国纽约和加州等地发现的新冠变异株。

测试材料:

测试病毒株*:

                     WA1/2020 D614G

                     WA1/2020 N501Y/D614G

                     B.1.429(California)

                     B.1.1.7(United Kingdom)

                     Wash-B.1.351(chimeric strain)

                     Wash-B.1.1.28(chimeric strain)

                     B.1.617.1((India clade))

                     B.1.526(New York; S477N or E484K variant)

*SARS-CoV-2 strains with sequence substitutions in the spike gene.

测试抗体:

                     COV2-2196/COV2-2130(AstraZeneca)

                     S309/S2E12(Vir Biotechnology)

                     2B04/ 47D11(AbbVie)

                     REGN10933/ REGN10987(Regeneron)

                     LY-CoV555/LY-CoV016((Lilly)

测试细胞株:

                     Vero-TMPRSS2;

                     Vero-hACE2-TMPRRS2

测试动物:

                     K18-hACE2 C57BL/6J mice (strain: 2B6. Cg-Tg(K18-ACE2)2Prlmn/J)

                     129 mice (strain: 129S2/SvPasCrl)

                     Syrian hamsters

 

结论简要:

1. 体外评估中和作用

研究团队使用Vero-TMPRSS2细胞平台进行中和实验发现,尽管单一使用REGN10933和LY-CoV555等的抗体会丧失部分或全部对携带E484突变变异株(如印度B.1.617.1)的中和能力,但组合使用抗体(如REGN10933/REGN10987)能保持它们的中和效力。

2. 体内评估预防功效

当进一步在小鼠和仓鼠上注射这些单一或组合抗体,研究人员发现组合抗体(如REGN10933/REGN10987)即使剂量较低也可预防多种变异株感染,显着减少体内促炎细胞因子,且没有出现耐药性。

3. 体内评估治疗功效

使用REGN10933/REGN10987等的组合抗体有效降低感染南非B.1.351株小鼠体内的病毒含量。值得留意的是,由于LY-CoV555对多种变异株没有效用,FDA在今年4月取消了单独使用LY-CoV555治疗COVID-19的紧急。此研究也表明单一使用LY-CoV555效用有限,印度B.1.617.1株已对LY-CoV555产生抗性;而LY-CoV555/LY-CoV016的组合抗体对部分变异株(如B.1.351)感染也失去保护作用。

产品推荐:

在新冠变种不断出现的情况下,单一抗体效用减弱,联合抗体疗法将成为趋势。InvivoGen提供可组合使用的REGN、LY-CoV2衍生抗体产品

https://www.invivogen.com/sars2-spike-regn-mab

https://www.invivogen.com/sars2-spike-lycov-mab

另外InvivoGen可提供过表达ACE2/TMPRSS2的A549人肺癌细胞作为体外检测平台,比起Vero cells更具COVID-19的生物学相关性:

https://www.invivogen.com/a549-ace2-tmprss2-cells

更多详情请联系InvivoGen中国代理商上海金畔生物

新冠病毒奥米克戎变异株BF.7/BQ.1/ XBB/XBB.1.5重组蛋白

新冠病毒奥米克戎变异株BF.7/BQ.1/ XBB/XBB.1.5重组蛋白

新冠病毒奥米克戎变异株BF.7/BQ.1/ XBB/XBB.1.5重组蛋白

2019年至今,全体人类深刻地见证了病毒与人类之间的势力消长。

SARS-CoV-2 Omicron变异株

2021年11月,继alpha、beta、gamma、delta之后,世界卫生组织WHO宣布将SARS-CoV-2变异株B.1.1.529指定为第5个高度关注变异株(Variant of Concern, VOC),并正式命名为Omicron。与原始病毒株相比,Omicron变异株谱系的蛋白质有50个以上的突变点,其中至少有15个落在与病毒感染能力相关的棘蛋白(spike protein)受体结合结构域(receptor-binding domain, RBD)上。这些关键突变点大幅增加了Omicron的传播力以及免疫逃脱能力,使得Omicron取代了先前的高度关注变异株。

BA. 5的变异株-BF.7与BQ.1

Omicron的亚谱系包括了BA.1, BA.2, BA.3, BA.4, and BA.5,又以BA.2与BA.4/ BA.5衍生的变异株为流行大宗。至2023年1月4日为止之统计数据显示,BA.5在全球感染病例中约占63.7%,是目前的主流变异株。

BF.7 (BA.5.2.1) 与BQ.1 (BA.5.3.1.1.1.1.1)源于BA.5。相较于BA.5,BF.7在棘蛋白上多了R346T,而BQ.1则是多了K444T 和 N460K两个突变点。近来的研究指出,R346T与N460K正是造成BF.7与BQ.1对于中和抗体效力抗性的关键。由于强大的免疫逃脱力以及对于抗体的抗性,2022下半年BF.7与BQ.1在欧美地区感染比例快速增加,亚洲地区也于10月检出案例。据美国CDC至1/7为止的感染周报统计,目前BQ.1以及其新增了R346T突变点的衍生变异株BQ.1.1在美国境内感染占比超过50%。

BA.2的重组变异株-XBB与XBB.1.5

重组病毒XBB变异株来自于BA.2基因谱系的BJ.1 (BA.2.10.1.1)和BM.1.1.1 (BA.2.75.3.1.1.1)。和主流变异株类似,XBB带有的一系列突变点使其可以透过免疫逃脱变相增加传播力,但与宿主受体ACE2的结合能力较弱,限制了XBB的感染力。

由XBB衍生出的XBB.1.5变异株获得了新的棘蛋白F486P突变点,增强了原先XBB谱系较弱的受体结合能力。因此,XBB.1.5不只具有免疫逃脱与高传播力的基础,也较其他主流的BA.5衍生变异株更容易感染宿主。XBB.1.5于12月初约占了美国总病例的2.3%,感染人数于1/7止已攀升至27.6%,成为美国的主流变异株之一。目前已于29个国家检出,且感染占比持续增加中。

如何应对来自病毒的考验

不同的亚谱系变异株在各地迅速消长,让人应接不暇。如此,全球化统一设计制造疫苗与治疗规划的策略或许将不敷使用,采用更符合当地需求的策略可能会是未来的趋势。在此之前,如何争取足够的时间与资源对SARS-CoV-2以及其突变点有更全面性的了解,将是全人类的一大课题。

在疫情爆发的这几年间,GeneTex不遗余力地开发并精进SARS-CoV-2的抗体、重组蛋白与相关试剂,包括Omicron BF.7与BQ.1的spike RBD protein、trimeric spike ECD (extracellular domain) protein,以及用于检测试剂的Nucleocapsid protein (N protein)等重组蛋白产品。近来因应XBB的崛起,也加快产品研发的速度,迅速上架了XBB Spike RBD以及最新推出的XBB.1.5 Spike RBD的重组蛋白产品。欲了解更多实时信息与相关产品,欢迎咨询代理商上海金畔生物或访问GeneTex官网。

重点产品

新冠病毒奥米克戎变异株BF.7/BQ.1/ XBB/XBB.1.5重组蛋白 新冠病毒奥米克戎变异株BF.7/BQ.1/ XBB/XBB.1.5重组蛋白

SARS-CoV-2 (COVID-19) Spike (ECD) Protein, Omicron / BF.7 variant, His tag (GTX137880-pro)

SARS-CoV-2 (COVID-19) Spike (ECD) Protein, Omicron / BQ.1 variant, His tag (GTX137881-pro)

SARS-CoV-2 (COVID-19) Spike RBD Protein, Omicron / XBB variant, His tag (GTX138115-pro)
新冠病毒奥米克戎变异株BF.7/BQ.1/ XBB/XBB.1.5重组蛋白 新冠病毒奥米克戎变异株BF.7/BQ.1/ XBB/XBB.1.5重组蛋白
SARS-CoV / SARS-CoV-2 (COVID-19) spike antibody [1A9] (GTX632604) SARS-CoV-2 (COVID-19) Spike S2 antibody [HL237] (GTX635693)
新冠病毒奥米克戎变异株BF.7/BQ.1/ XBB/XBB.1.5重组蛋白
SARS-CoV-2 (COVID-19) Spike RBD antibody [HL1014] (GTX635807) SARS-CoV-2 (COVID-19) Spike S1 antibody [HL13402] (GTX635713)

重点产品 

目录号

产品名

应用

GTX637591

SARS-CoV-2 (COVID-19) Spike RBD Omicron antibody [HL1866]

ICC/IF, ELISA, Neutralizing/Inhibition, Sandwich ELISA

GTX637592

SARS-CoV-2 (COVID-19) Spike RBD Omicron antibody [HL1867]

ICC/IF, ELISA, Neutralizing/Inhibition, Sandwich ELISA

GTX635791

SARS-CoV-2 (COVID-19) Spike RBD antibody [HL1002]

ELISA, Lateral Flow, Neutralizing/Inhibition, Sandwich ELISA

GTX635792

SARS-CoV-2 (COVID-19) Spike RBD antibody [HL1003]

ICC/IF, ELISA, Neutralizing/Inhibition, Sandwich ELISA

GTX635793

SARS-CoV-2 (COVID-19) Spike RBD antibody [HL1004]

ICC/IF, ELISA, Neutralizing/Inhibition, Sandwich ELISA

GTX635807

SARS-CoV-2 (COVID-19) Spike RBD antibody [HL1014]

ICC/IF, ELISA, Sandwich ELISA

GTX635708

SARS-CoV-2 (COVID-19) Spike S1 antibody [GT263]

WB, ICC/IF, ELISA, Sandwich ELISA, IHC-P (cell pellet)

GTX635713

SARS-CoV-2 (COVID-19) Spike S1 antibody [HL13402]

WB, ICC/IF, ELISA, Sandwich ELISA

GTX632604

SARS-CoV / SARS-CoV-2 (COVID-19) spike antibody [1A9]

WB, ICC/IF, IHC-P, FACS, IP, ELISA, EM, Neutralizing/Inhibition, Sandwich ELISA, IHC-P (cell pellet)

GTX635693

SARS-CoV-2 (COVID-19) Spike S2 antibody [HL237]

WB, ICC/IF, ELISA, Sandwich ELISA, IHC-P (cell pellet)

GTX137878-pro

SARS-CoV-2 (COVID-19) Spike RBD Protein, Omicron / BF.7 variant, His tag

ELISA, Binding Assay

GTX137879-pro

SARS-CoV-2 (COVID-19) Spike RBD Protein, Omicron / BQ.1 variant, His tag

ELISA, Binding Assay

GTX137880-pro

SARS-CoV-2 (COVID-19) Spike (ECD) Protein, Omicron / BF.7 variant, His tag

ELISA, Binding Assay

GTX137881-pro

SARS-CoV-2 (COVID-19) Spike (ECD) Protein, Omicron / BQ.1 variant, His tag

ELISA, Binding Assay

GTX137882-pro

SARS-CoV-2 (COVID-19) Nucleocapsid protein, Omicron / BF.7 variant, His tag

ELISA

GTX137883-pro

SARS-CoV-2 (COVID-19) Nucleocapsid protein, Omicron / BQ.1 variant, His tag

ELISA

GTX138115-pro

SARS-CoV-2 (COVID-19) Spike RBD Protein, Omicron / XBB variant, His tag

ELISA, Sandwich ELISA

GTX138287-pro

SARS-CoV-2 (COVID-19) Spike RBD Protein, Omicron / XBB.1.5 variant, His tag

ELISA

GTX437396

SARS-CoV-2 (COVID-19) Spike (Omicron BA.4 / BA.5) FFPE 293T Cell Pellet Block

IHC-P (cell pellet)

GTX537233

SARS-CoV-2 Neutralizing Antibody ELISA Kit (Omicron BA.1 / BA.2 / BA.4 / BA.5)

Neutralizing/Inhibition

GTX538288

SARS-CoV-2 Neutralizing Antibody ELISA Kit (Omicron BA.4/5 / BF.7 / BQ.1 / XBB.1.5)

Neutralizing/Inhibition

查看相关内容

(1) 新冠病毒基因组与蛋白综述

(2) 用于Omicron研究的抗体和重组蛋白

(3) SARS-CoV-2 (COVID-19) 抗体和试剂

(4) SARS-CoV-2棘蛋白变体重组蛋白

(5) 单页 – 奥米克戎变种病毒研究用试剂

参考文献

World Health Organization

bioRxiv. 2022 Oct 20;2022.10.19.512891. doi: 10.1101/2022.10.19.512891. Preprint

PANGO Network

Centers for Disease Control and Prevention (USA)

更多详细信息,请咨询GeneTex代理商-上海金畔生物

GeneTex新冠病毒膜蛋白邻位连接分析PLA试剂套组

GeneTex新冠病毒膜蛋白邻位连接分析PLA试剂套组

GeneTex新冠病毒膜蛋白邻位连接分析PLA试剂套组

邻位连接分析(Proximity Ligation Assay, PLA)是近几年建立的一种可以用于研究蛋白质定位、相互作用、修饰以及功能的蛋白质体外分析技术。其作用原理的基础是一对标记了寡核苷酸的抗体:依照实验目标的不同,可以选择共同辨认目标蛋白上不同抗原区、两个可能相互作用的蛋白区块,抑或是目标蛋白的修饰添加物; 而标记在抗体上的寡核苷酸则是选用能与之后加入的连接寡核苷酸(connector oligos)配对的序列。

以GeneTex的新产品SARS-CoV-2 Membrane Protein Proximity Ligation Assay (PLA) Kit (Cy3) (GTX537371-23)为例说明: 当两个抗体对新冠病毒膜蛋白形成双重辨认,且距离足够靠近彼此时(<40nm) (上图步骤A),抗体上的寡核苷酸会与连接寡核苷酸配对并形成环状单链DNA (步骤B与C)。此环状单链DNA通过设计在寡核苷酸上的启动子片段以及试剂中的DNA聚合酶进行滚环扩增 (Rolling Circle Amplification, RCA) (步骤D),在原位不断地制造DNA长链。经过此扩增步骤,即便细胞感染的病毒量极低,病毒膜蛋白的讯号也能增幅千倍以上。优异的灵敏度与专一性使得PLA技术被视为是相当具有价值的研究与诊断工具。

GeneTex的PLA试剂除了可以应用于新冠病毒感染组织的膜蛋白侦测之外,也适用于被感染的细胞或是膜蛋白转染细胞。如上文所述,透过RCA扩增后的DNA长链带有多处特殊序列 (上图中黄色片段),能够被Cy3荧光分子探针标定。因此,使用者可以轻易地使用荧光显微镜观察并撷取所需的视野,可说是相当地便利(步骤E)。

GeneTex有许多经充分验证的抗体与试剂。为推动基础科学与临床研究,近几年来积极投入开发传染性疾病研究领域的抗体、蛋白与试剂。欲了解GeneTex新冠病毒或其他研究领域的相关产品,请联系我们的代理商上海金畔生物或访问我们的网站www.genetex.com以获取更多信息。

重点产品

GeneTex新冠病毒膜蛋白邻位连接分析PLA试剂套组

邻位连接分析优势

侦测内源性蛋白

蛋白与蛋白作用可视化

蛋白质翻译后修饰可视化

高度专一性

单一分子灵敏度

SARS-CoV-2 Membrane Protein Proximity Ligation Assay (PLA) Kit (Cy3)(GTX537371-23)

利用PLA试剂检测转染后的HEK293T 細胞 (SARS-CoV-2 (COVID-19) Membrane FFPE 293T cell pellet Block, GTX435645)。陽性邻位连接分析讯号以黄色荧光呈现,细胞核则以蓝色荧光呈现。

图A: 于病毒膜蛋白转染的HEK293T细胞中测得阳性讯号

图B: 阴性对照组: 模拟测试转染的HEK293T细胞

图C: 阴性对照组: 使用非专一性寡核苷酸标定之抗体检测病毒膜蛋白转染的HEK293T细胞

PLA实验攻略下载

查看相关内容

(1) SARS-CoV-2 (COVID-19) 抗体和试剂

(2) SARS-CoV-2棘蛋白变体重组蛋白

(3) 用于Omicron研究的抗体和重组蛋白

(4) 单页 – 奥米克戎变种病毒研究用试剂

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