FuGENE® 4K——四步轻松搞定转染
FuGENE® 4K——四步轻松搞定转染
细胞转染，是将外源基因导入真核细胞，是用来研究基因表达调控的有效手段。常规转染技术可分为两大类：一类是瞬时转染，一类是稳定转染（永久转染）。目前，常用的目的基因导入方法有磷酸钙沉淀法、电穿孔法、病毒介导转染、脂质体转染及显微注射法等。理想细胞转染方法，应该具有转染效率高、细胞毒性小等优点。
几种常见的转染方法对比：
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转染方法 |
原理 |
特点 |
应用 |
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磷酸钙法 |
磷酸钙DNA复合物吸附细胞膜被细胞内吞。 |
不适用于原代细胞，操作简便但重复性差，有些细胞不适用。 |
稳转，瞬转 |
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电穿孔法 |
高脉冲电压破坏细胞膜电位，DNA通过膜上形成的小孔导入。 |
适用性广，但细胞致死率高，DNA和细胞用量大。 |
稳转，瞬转，所有细胞 |
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病毒介导转染 |
通过侵染宿主细胞将外源基因整合到染色体中 |
有安全风险；限定宿主细胞。 |
稳转，特定宿主细胞 |
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阳离子脂质体法 |
带正电的脂质体与核酸带负电的磷酸基团形成复合物被细胞内吞。 |
适用性广，转染效率高，重复性好，但转染时需除去血清。转染效果随细胞类型变化大。 |
稳转，瞬转，所有细胞 |
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阳离子聚合物法 |
带正电的聚合物与核酸带负电的磷酸基团形成带正电的复合物后与细胞表面带负电的蛋白多糖相互作用，并通过内吞作用进入细胞。 |
除了具有阳离子脂质体的转染效率高，操作简单，适用范围广，重复性好等特点外，还具有在体内，转染效率高，细胞毒性低等特点，是新一代的转染试剂。 |
稳转，瞬转，所有细胞 |
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显微注射法 |
用显微操作将DNA直接注入靶细胞核。 |
转染细胞数有限，多用于工程改造或转基因动物的胚胎细胞 |
稳转，瞬转 |
FuGENE® 4K是FuGENE最新研发的最有效的广谱DNA转染试剂，它转染效率高、毒性低、可重复性好，无论是原代细胞、干细胞等难转染细胞系，还是293和CHO等悬浮细胞，FuGENE®4K都展现出非凡的转染性能。FuGENE® 4K是FuGENE® HD试剂的升级版，产品性能优于Lipofectamine®3000。仅需1瓶试剂，4步就可轻松搞定转染实验，无需添加额外试剂，转染步骤简单快速！
STEP 1 转染当天培养细胞至70%-90%的融合度
STEP 2 准备DNA质粒
将2µg质粒DNA（0.2-1µg/µl）添加到预热的培养基中并涡旋。
STEP 3 加入FuGENE®4K
按FuGENE®4K转染试剂：DNA=3:1的比例，将6μl FuGENE®4K试剂直接加入培养基中，立即混合。其他比例，请参考产品说明书。将FuGENE®4K/DNA混合物在室温下孵育5-15min。
STEP 4 转染及分析
将FuGENE®4K /DNA混合物加入细胞中，培养24-48小时。分析转染效率。
产品信息
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名称 |
货号 |
规格 |
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FuGENE® 4K DNA Transfection Reagent |
4K-1000 |
1mL |
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4K-5000 |
5mL (5 x 1ml) |
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4K-10000 |
10mL |
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4K-25000 |
25mL |
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4K-50000 |
50mL |
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4K-250000 |
250mL |
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