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电转化感受态细胞E.coli JM109 Electro-Cells酶试剂盒Takara Clontech

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电转化感受态细胞E.coli JM109 Electro-Cells
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Takara 9022 E.coli JM109 Electro-Cells 50 μl × 10 ￥1,043 电转化感受态细胞E.coli JM109 Electro-Cells 电转化感受态细胞E.coli JM109 Electro-Cells 电转化感受态细胞E.coli JM109 Electro-Cells
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电转化感受态细胞E.coli JM109 Electro-Cells
电转化感受态细胞E.coli JM109 Electro-Cells  
电转化感受态细胞E.coli JM109 Electro-Cells
 
 
■ 制品内容
E.coli JM109 Electro-Cells 50 μl × 10
pUC19 plasmid ( 10 pg/μl) 10 μl
SOC Medium* 1 ml × 10
*SOC Medium:      2%   Tryptone
 0.5%   Yeast extract
 10 mM   NaCl
 2.5 mM   KCl
  10 mM   MgSO4
10 mM   MgCl2
 20 mM   Glucose
 
■ 制品说明
Electro-Cells是Takara Bio特别制备的适用于电穿孔法的制品。用高电压脉冲电流瞬间击穿细胞的细胞质膜，从而使外源DNA转入宿主细胞内的转化方法称为电穿孔法。通过此种方法制备的感受态细胞转化效率高、产量大，尤其适合在短时间内将少量样品转入大肠杆菌内。
由于E. coli JM109 Electro-Cells含有F' 质粒，可以作为M13噬菌体载体的宿主细胞，也可用于制作DNA文库或进行亚克隆。当转化pUC载体或转染M13噬菌体载体DNA时，重组体可以利用电转化细胞的β-半乳糖苷酶的α-互补性，通过添加X-Gal和IPTG很容易地筛选出来。
X-Gal : 5-Bromo-4-Chloro-3-Indolyl-β-D-Galactoside
IPTG : Isopropyl-β-D-thiogalactopyranoside
 
■ 细胞浓度
>1×1010 bacteria/ml
 
■ Genotype
E. coli JM109： recA1 , endA1 , gyrA96 , thi -1 , hsdR17 (rk-mk+), e14-(mcrA- ) supE44 , relA1 , Δ (lac-proAB )/F'[traD36 , proAB+, lacIq, lacZ ΔM15]
 
■ 保存
-80℃。
注意： -80℃或更低温度下保存。如果保存温度不能恒定，转化降低将会降低。请使用附带的pUC19 对照质粒来确认保存细胞的转化效率。不能液氮保存。
 
■ 质量标准
转入10 pg 的pUC19，涂于含有Amp+ 的选择培养基进行筛选。
转化效率 : >1 x 109 cfu/μg pUC19
 
■ 注意事项
1. 将Electro-Cells从-80℃取出后请立即置于干冰/乙醇中。使用前保存于干冰/乙醇中。
2. 当使用50 μl Electro-Cells时，添加不多于10 ng的高纯度样品DNA。否则会降低转化效率。
3. 导入分子量较大的DNA (＞7 kb) 时，转化效率降低。
4. 当改变实验规模时，适当改变反应条件。
5. L-broth 或φb-broth可替代SOC培养基。此时，转化效率可能会降低。
    ·L-broth : Ingredient per liter water  
  Tryptone 10 g  
  Yeast extract 5 g  
  NaCl 5 g  
    用1 N NaOH调整pH7.5并高压灭菌。
    ·φ b-broth: Ingredient per liter water  
  Tryptone 20 g  
  Yeast extract 5 g  
  MgSO4·7H2O 5 g  
    用1 N KOH调整pH7.5并高压灭菌。
6. 稀释时，使用“使用方法4”中加入的SOC培养基。
7. YT soft agar: Ingredient per 100 ml water  
  Tryptone 0.8 g  
  Yeast extract 0.5 g  
  NaCl 0.5 g  
    用1 N NaOH调整pH7.6，添加agar至浓度为0.6%，高压灭菌。
8. 制备感受态细胞。当DNA插入M13噬菌体载体克隆位点时，重组体可通过在YT-soft agar添加X-Gal 和IPTG进行筛选，因为非重组体存在于蓝斑中。
9. YT-plate: Ingredient per liter water  
  Tryptone 8 g  
  Yeast extract 5 g  
  NaCl 5 g  
    用1 N NaOH调整pH7.6，添加agar至浓度为1.5%，高压灭菌。
10. 当加入X-Gal或IPTG时，按照以下方法操作：
   ·加入100 mM IPTG，100 μl-300μl IPTG/100 ml agar medium 和 25 μl IPTG /3 ml soft agar。
   ·加入20 mg/ml X-Gal（溶解于二甲基甲酰胺）到agar medium中，比例为200 μl-300 μl /100 ml。若使用 soft agar，比例为50 μl/3 ml。
11. 不建议将解冻的感受态细胞再次冷冻保存。但是，如果再次冻结不可避免，将细胞置于干冰/乙醇中快速冷冻，置于-80℃保存。但是，转化效率可能会降低至少一个数量级。
 
 

页面更新：2024-01-31 15:40:13

感受态细胞E.coli CJ236 Competent Cells酶试剂盒Takara Clontech

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感受态细胞E.coli CJ236 Competent Cells
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Takara 9053 E.coli CJ236 Competent Cells 100 μl × 10 ￥517 感受态细胞E.coli CJ236 Competent Cells 感受态细胞E.coli CJ236 Competent Cells 感受态细胞E.coli CJ236 Competent Cells
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■ 制品内容感受态细胞E.coli CJ236 Competent Cells
E.coli CJ236 Competent Cells 100 μl × 10
pUC119 plasmid ( 0.1 ng/μl) 10 μl × 1
SOC Medium* 1 ml × 10
*SOC Medium:      2%   Tryptone
 0.5%   Yeast extract
 10 mM   NaCl
 2.5 mM   KCl
 10 mM   MgSO4
10 mM   MgCl2
 20 mM   Glucose
 
■ 制品说明
Takara公司在Hanahan’s method基础上进行了改良，制备出E.coli CJ236 Competent Cells，当1 ng pUC119转化100 μl 细胞时，转化效率可达1×107 cfu/μg。
E. coli CJ236 Competent Cells适用于制备含有dU的ssDNA。通过CJ236转化后富集的ssDNA，可用于Kunkel法进行定点突变。
 
■ 细胞浓度
1 – 2×109 Bacteria/ml
 
■ Genotype
E. coli CJ236 : dut1, ung1, thi-1, recA1 / pCJ105 (F’ camr)
 
■ 保存
-80℃。
注意：如果不在-80℃下保存，转化效率将会降低。此时，在使用前，请使用附带的pUC119对照质粒来验证细胞的转化效率。不能液氮保存。
 
■ 转化效率
转入1 ng 的pUC119，涂于含有Amp+ 的选择培养基进行筛选。
转化效率 : >1 x 107 cfu/μg pUC119
 
■ 注意事项
1. 将感受态细胞从-80℃冷冻取出后请立即置于干冰/乙醇中。使用前保存于干冰/乙醇中。
2. 可使用microcentrifuge tubes代替Falcon tubes (CORNING #352059或352057)，但效率可能会降低。
3. 当使用100 μl感受态细胞时，加入不超过10 ng的高纯度DNA样品。否则转化效率会降低。
4. 当改变感受态细胞数量或tubes类型时，适当调整反应条件。例如，当使用microcentrifuge tubes时，42℃放置60秒。
5. L-broth 或φb-broth可替代SOC培养基。此时，转化效率可能会降低。
   ·L-broth : Ingredient per liter water  
  Tryptone 10 g  
  Yeast extract 5 g  
  NaCl 5 g  
    用1 N NaOH调整pH到7.5并高压灭菌。
   ·φ b-broth: Ingredient per liter water  
  Tryptone 20 g  
  Yeast extract 5 g  
  MgSO4·7H2O 5 g  
    用1 N KOH调整pH到7.5并高压灭菌。
6. 稀释时使用SOC培养基。
7. 建议在选择培养基中加入 Chloramphenicol (30 μg/ml) 以保证F’ 质粒稳定。
8. YT soft agar: Ingredient per 100 ml water  
  Tryptone 0.8 g  
  Yeast extract 0.5 g  
  NaCl 0.5 g  
    用1 N NaOH调整pH到7.6，加入agar至浓度为0.6%，并高压灭菌。
9. YT-plate: Ingredient per liter water  
  Tryptone 8 g  
  Yeast extract 5 g  
  NaCl 5 g  
    用1 N NaOH调整pH到7.5，加入agar至浓度为1.5%，并高压灭菌。
10. 制备感受态细胞。
11. 不建议将解冻的感受态细胞再次冷冻保存。但是，如果再次冻结不可避免，将细胞置于干冰/乙醇中迅速冷冻，置于-80℃保存。但是，转化效率可能会降低至少一个数量级。
 
 

页面更新：2024-01-31 15:19:49

NEB 10-beta E. coli 感受态细胞 （高效级） #C3019H 20 x 0.05 ml-NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品资料 – 感受态细胞 – 克隆菌株

NEB 10-beta E. coli 感受态细胞 （高效级）                              收藏

货 号
规 格
价 格(元)
北京库存
上海库存
广州库存
成都库存
苏州库存
武汉库存

#C3019H
20 x 0.05 ml
4,149.00
无
无
无
无
无
无

#C3019I
6 x 0.2 ml
3,189.00
无
无
无
无
无
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NEB 10-beta E. coli 电转级感受态细胞

单独出售的组份

SOC Outgrowth 培养基
#B9020S 100 ml . . . . . . ¥939

优点

 可克隆大质粒和 BACs
 DH10B 衍生物
 无动物来源产品

概述

该 E. coli 感受态细胞为 DH10B 衍生物，广泛应用于多种高效级转化，包括克隆大质粒与BAC。

基因型

Δ(ara-leu) 7697 araD139 fhuA ΔlacX74 galK16 galE15 e14- f80dlacZΔM15 recA1 relA1 endA1 nupG
rpsL (StrR) rph spoT1 Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC)

特性

• 可高效转化真核来源的甲基化 DNA 或来自 PCR、cDNA 或其它来源的未甲基化 DNA
• 无需 IPTG，可进行蓝/白斑筛选
• 缺失非特异性核酸内切酶 I（endA1）活性，可用 于制备高质量质粒
• 可减少克隆 DNA 的重组反应（recA1）

转化效率

高效级：1–3 x 109 cfu/μg pUC19 DNA
电转级：> 2 x 1010 cfu/μg pUC19 DNA

抗性

T1 噬菌体（fhuA2）、链霉素

敏感性

氨苄青霉素、氯霉素、卡那霉素、呋喃妥因、壮观霉素、四环素

随产品提供

SOC Outgrowth 培养基
pUC19 对照 DNA
 
NEB 10-beta E. coli 感受态细胞 （高效级） #C3019H 20 x 0.05 ml
 
质粒大小对转化效率的影响：化学法制备的 NEB 10-beta 感受态细胞比 NEB 5-alpha 更适合于大质粒的转化。如上图所示，质粒越大，两种感受态细胞转化效率的差值就越大。

感受态细胞E.coli DH5α Electro-Cells酶试剂盒Takara Clontech

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感受态细胞E.coli DH5α Electro-Cells
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Takara 9027 E.coli DH5α Electro-Cells 50 μl × 10 ￥446 感受态细胞E.coli DH5α Electro-Cells 感受态细胞E.coli DH5α Electro-Cells 感受态细胞E.coli DH5α Electro-Cells
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感受态细胞E.coli DH5α Electro-Cells
感受态细胞E.coli DH5α Electro-Cells  
感受态细胞E.coli DH5α Electro-Cells
 
 
■ 制品内容
E.coli DH5α Electro-Cells 50 μl × 10
pUC19 plasmid ( 10 pg/μl) 10 μl
SOC Medium* 1 ml × 10
*SOC Medium:      2%   Tryptone
 0.5%   Yeast extract
 10 mM   NaCl
 2.5 mM   KCl
  10 mM   MgSO4
10 mM   MgCl2
 20 mM   Glucose
 
■ 制品说明
E. coli DH5α Electro-Cells是Takara Bio特别制备的适用于电穿孔法的制品。用高电压脉冲电流瞬间击穿细胞的细胞质膜，从而使外源DNA转入宿主细胞的转化方法称为电穿孔法。通过此种方法制备的感受态细胞转化效率高、产量大，尤其适合在短时间内将少量样品转入大肠杆菌内。
E.coli DH5α在使用pUC系列质粒载体进行DNA转化时，利用β-半乳糖苷酶活性 (α-互补性) ，应用蓝白斑方法可以很容易鉴别重组体菌株。由于菌株无lacl q，故不需要IPTG。因此，当制作基因文库或进行亚克隆时，可以使用X-Gal筛选重组DNA或重组质粒。
X-Gal : 5-Bromo-4-Chloro-3-Indolyl-β-D-Galactoside
 
■ 细胞浓度
>1×1010 bacteria/ml
 
■ Genotype
E. coli DH5α：F-, φ80dlacZ Δ M15, Δ ( lacZYA -argF )U169, deoR , recA1 , endA1 , hsdR17 (rK-, mK+), phoA , supE44 , λ-, thi -1 , gyrA96 , relA1
 
■ 保存
-80℃。
注意： -80℃或更低温度下保存。如果保存温度不能恒定，转化降低将会降低。请使用附带的pUC19 对照质粒来确认保存细胞的转化效率。不能液氮保存。
 
■ 质量标准
1. 转化效率
转入10 pg 的pUC19，涂于含有A+ 的选择培养基进行筛选。
转化效率 : >1 x 109 transformants /μg pUC19
2. β-半乳糖苷酶的α-互补性
转化pUC19 DNA时，含有100 μg/ml ampicilin 和 60 μg/ml X-Gal的L-琼脂平板上出现蓝色菌落。
 
■ 注意事项
1. 将Electro-Cells从-80℃取出后请立即置于干冰/乙醇中。使用前保存于干冰/乙醇中。
2. 当使用50 μl Electro-Cells时，添加不多于10 ng的高纯度样品DNA。否则会降低转化效率。
3. 导入分子量较大的DNA (＞7 kb) 时，转化效率降低。
4. 当改变实验规模时，适当改变反应条件。
5. L-broth 或φb-broth可替代SOC培养基。此时，转化效率可能会降低。
·L-broth:      Ingredient   per liter water
 Tryptone   10 g
 Yeast extract   5 g
 NaCl   5 g
用1 N NaOH调整pH到7.5并高压灭菌。
·φb-broth:      Ingredient   per liter water
 Tryptone   20 g
 Yeast extract   5 g
 MgSO4·7H2O   5 g
用1 N KOH调整pH7.5左右并高压灭菌。
6. 稀释时，使用“使用方法4”中加入的SOC培养基。
7. 当使用X-Gal时：
   ·将20 mg/ml X-Gal (溶解于二甲基甲酰胺) 按200～300 μl/100 ml的比例加入到agar medium中。
8. DH5α可作为M13mp载体的复制。但由于不携带F因子，因而不能形成菌斑。
9. 不建议将解冻的感受态细胞再次冷冻保存。但是，如果再次冻结不可避免，将细胞置于干冰/乙醇中迅速冷冻，置于-80℃保存。但是，转化效率可能会降低至少一个数量级。
 

页面更新：2024-01-25 14:30:36

T7 表达 lysY E. coli 感受态细胞 ( 高效级 ) #C3010I 6 x 0.2 ml-NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品资料 – 感受态细胞 – 蛋白表达菌株

T7 表达 lysY E. coli 感受态细胞 ( 高效级 )                              收藏

货 号
规 格
价 格(元)
北京库存
上海库存
广州库存
成都库存
苏州库存
武汉库存

#C3010I
6 x 0.2 ml
3,199.00
无
无
无
无
无
无

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T7 表达 lysY E. coli 感受态细胞 ( 高效级 )

 

单独出售的组份

SOC Outgrowth 培养基
#B9020S 4 x 25 ml . . . . . . . . ¥939

优点

 BL21 源增强型菌株
 以溶菌酶进行表达控制
 克隆毒性基因
 菌落快速培养
 无动物来源产品

概述

用于 T7 表达的 BL21 源增强型菌株，本底表达水平显著降低。

基因型

MiniF lysY (CamR) / fhuA2 lacZ::T7 gene1 [lon] ompT gal sulA11 R(mcr-73::miniTn10–TetS)2 [dcm] R(zgb-210::Tn10–TetS) endA1 D(mcrC-mrr)114::IS10

特性

• 在 lac 操纵子上有 T7 RNA 聚合酶，无 λ 前噬菌体
• 通过溶菌酶对 T7 RNA 聚合酶进行调控，从而允许克隆潜在的毒性基因
• LysY 作为特殊的 T7 溶菌酶，因缺少酰胺酶活性，从而降低细胞在诱导过程中的溶菌现象
• Lon 和 OmpT 蛋白酶缺失
• 不受限于 DNA 是否甲基化
• 无需氯霉素

转化效率

高效级： 0.6–1 x 109 cfu/μg pUC19 DNA

抗性

T1 噬菌体（fhuA2）、氯霉素、呋喃妥因

敏感性

氨苄青霉素、卡那霉素、壮观霉素、链霉素、四环素

E.coli蛋白质表达感受态细胞TaKaRa Competent Cells BL21酶试剂盒Takara Clontech

发表于由

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E.coli蛋白质表达感受态细胞TaKaRa Competent Cells BL21
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Takara 9126 TaKaRa Competent Cell BL21 100 μl x 10 ￥357 E.coli蛋白质表达感受态细胞TaKaRa Competent Cells BL21 E.coli蛋白质表达感受态细胞TaKaRa Competent Cells BL21 E.coli蛋白质表达感受态细胞TaKaRa Competent Cells BL21
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■ 制品内容E.coli蛋白质表达感受态细胞TaKaRa Competent Cells BL21
TaKaRa Competent Cells BL21 10 × 100 μl
pUC19 DNA (0.1 ng/μl) 10 μl
SOC Medium* 10 × 1 ml
*SOC Medium:          2%
   Tryptone
 0.5%   Yeast extract
 10 mM   NaCl
 2.5 mM   KCl
 10 mM   MgSO4
 10 mM   MgCl2
 20 mM   Glucose
 
■ 制品说明
E.coli BL21来源于B株，为lon蛋白水解酶、ompT外膜蛋白水解酶缺陷型，因此表达的外源蛋白质在该体系中具有更高的稳定性。本制品有利于外源蛋白质的稳定表达。
本制品可用于pCold I-IV DNA 和pCold TF DNA的蛋白质表达，但不适合于启动子为T7的蛋白质表达体系，如pET系列，因为BL21宿主不表达T7 RNA聚合酶。另外，不建议使用此菌株构建或制备质粒，因为它不是recA基因缺失型菌株。
注意：本制品不可用于电击法转化。
 
■ 保存
-80℃。
注意：如果不是-80℃保存，转化效率将会降低。可使用附带的pUC19 DNA确认保存细胞的转化效率。不能液氮保存。
 
■ 质量控制
转入1 ng 的pUC19 DNA，涂于含有Amp+的选择培养基进行筛选。
转化效率 : ≥1×106 colonies /μg pUC19 DNA
 
■ Genotype
E.coli BL21: F–, ompT, hsdSB (rB–mB–), gal, dcm
 
■ 注意事项
1. 将感受态细胞从-80℃冷冻取出后请立即置于干冰/乙醇中。使用前保存于干冰/乙醇中。
2. 当使用100 μl感受态细胞时，加入不超过10 ng的高纯度质粒DNA。否则转化效率会降低。
3. 当改变感受态细胞数量或tubes类型时，适当调整反应条件。
4. 使用TE buffer溶解纯化的质粒DNA。DNA溶液如果盐浓度高，可能会降低转化效率。
5. L-broth 或φb-broth可替代SOC培养基。此时，转化效率可能会降低。
  ·L-broth : Ingredient per liter water  
  Tryptone 10 g  
  Yeast extract 5 g  
  NaCl 5 g  
  用1 N NaOH调整pH到7.5并高压灭菌。
  ·φb-broth: Ingredient per liter water  
  Tryptone 20 g  
  Yeast extract 5 g  
  MgSO4·7H2O 5 g  
    用1 N KOH调整pH到7.5并高压灭菌。
6. 稀释时，使用SOC培养基。
7. 不建议将解冻的感受态细胞再次冷冻保存。但是，如果再次冻结不可避免，将细胞置于干冰/乙醇中迅速冷冻，置于-80℃保存。但是，转化效率可能会降低至少一个数量级。
 
 

页面更新：2023-12-21 14:55:12

T7 表达 E. coli 感受态细胞 ( 高效级 ) #C2566H 20 x 0.05 ml-NEB酶试剂 New England Biolabs

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上海金畔生物科技有限公司代理New England Biolabs（NEB）酶试剂全线产品，欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

产品资料 – 感受态细胞 – 蛋白表达菌株

T7 表达 E. coli 感受态细胞 ( 高效级 )                              收藏

货 号
规 格
价 格(元)
北京库存
上海库存
广州库存
成都库存
苏州库存
武汉库存

#C2566H
20 x 0.05 ml
3,779.00
无
无
无
无
无
无

#C2566I
6 x 0.2 ml
2,869.00
无
无
无
无
无
无

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T7 表达 E. coli 感受态细胞 ( 高效级 )

 

单独出售的组分

SOC Outgrowth 培养基
#B9020S 4 x 25 ml . . . . . . . . ¥939

优点

 BL21 源增强型菌株
 最常用的 T7 表达菌株
 菌落快速培养
 无动物来源产品

概述

为 BL21 源增强型菌株，用于 T7 表达。

基因型

fhuA2 lacZ::T7 gene1 [lon] ompT gal sulA11 R(mcr-73::miniTn10–TetS)2 [dcm] R(zgb-210::Tn10– TetS)endA1 Δ(mcrC-mrr)114::IS10

特性

• 在 lac 操纵子上有 T7 RNA 聚合酶，无 λ 前噬菌体
• Lon 和 OmpT 蛋白酶缺失
• 不受限于 DNA 是否甲基化

转化效率

高效级：0.6–1 x 109 cfu/μg pUC19 DNA

抗性

T1 噬菌体（fhuA2）、呋喃妥因

敏感性

氨苄青霉素、氯霉素、卡那霉素、壮观霉素、链霉素、四环素

随产品提供

SOC Outgrowth 培养基
pUC19 对照 DNA

Stellar化学转化感受态细胞酶试剂盒Takara Clontech

发表于由

上海金畔生物科技有限公司代理Takara酶试剂盒全线产品，欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

Stellar化学转化感受态细胞
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Clontech 636763 Stellar Competent Cells 10 x 100 μl ￥2,467 Stellar化学转化感受态细胞 Stellar化学转化感受态细胞 Stellar化学转化感受态细胞
Clontech 636766 Stellar Competent Cells 50 x 100 μl ￥8,728 Stellar化学转化感受态细胞 Stellar化学转化感受态细胞 Stellar化学转化感受态细胞
Clontech 636767 Stellar Competent Cells (96-well plate) 96 x 20 μl ￥5,893 Stellar化学转化感受态细胞 Stellar化学转化感受态细胞 Stellar化学转化感受态细胞
Clontech 636764 Stellar Competent Cells (dam-/dcm-) 10 transformations ￥2,709 Stellar化学转化感受态细胞 Stellar化学转化感受态细胞 Stellar化学转化感受态细胞
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Stellar化学转化感受态细胞
Stellar化学转化感受态细胞  
Stellar化学转化感受态细胞
 
 
Stellar Competent Cells属于E. coli HST08细胞系，具有很高的转化效率，可用于多种应用：cDNA或基因组DNA文库的制备，长片段基因组文库的构建，亚克隆，甚至甲基化DNA的克隆。Stellar Competent Cells缺失切断外源甲基化DNA的基因簇(mrr-hsdRMS-mcrBC and mcrA)，所以可用于克隆甲基化DNA。 转化包含lacZ alpha基因的载体时，也可以使用Stellar Competent Cells进行蓝白筛选，例如alpha互补。 Stellar Competent Cells是Clontech's In-Fusion Cloning Kits配套使用的理想选择。
 
Stellar Competent Cells (dam–/dcm–)
Stellar Competent Cells (dam–/dcm–)属于E. coli HST04细胞系，缺失了甲基化DNA所必须的遗传因子(dam 和 dcm)。通常被dam或dcm甲基化而抑制的限制酶可以切断由该产品制备的质粒。
 
产品详情请点击：Stellar化学转化感受态细胞
 
 

页面更新：2019-11-05 09:50:57

伴侣蛋白感受态细胞套系Chaperone Competent Cell BL21 Series酶试剂盒Takara Clontech

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上海金畔生物科技有限公司代理Takara酶试剂盒全线产品，欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

伴侣蛋白感受态细胞套系Chaperone Competent Cell BL21 Series
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Takara 9120 Chaperone Competent Cells BL21 Set 1 Set ￥2,691 伴侣蛋白感受态细胞套系Chaperone Competent Cell BL21 Series 伴侣蛋白感受态细胞套系Chaperone Competent Cell BL21 Series 伴侣蛋白感受态细胞套系Chaperone Competent Cell BL21 Series
Takara 9121 Chaperone Competent Cell pG-KJE8/BL21 100 μl × 10 ￥787 伴侣蛋白感受态细胞套系Chaperone Competent Cell BL21 Series 伴侣蛋白感受态细胞套系Chaperone Competent Cell BL21 Series 伴侣蛋白感受态细胞套系Chaperone Competent Cell BL21 Series
Takara 9122 Chaperone Competent Cell pGro7/BL21 100 μl × 10 ￥551 伴侣蛋白感受态细胞套系Chaperone Competent Cell BL21 Series 伴侣蛋白感受态细胞套系Chaperone Competent Cell BL21 Series 伴侣蛋白感受态细胞套系Chaperone Competent Cell BL21 Series
Takara 9124 Chaperone Competent Cell pG-Tf2/BL21 100 μl × 10 ￥1,139 伴侣蛋白感受态细胞套系Chaperone Competent Cell BL21 Series 伴侣蛋白感受态细胞套系Chaperone Competent Cell BL21 Series 伴侣蛋白感受态细胞套系Chaperone Competent Cell BL21 Series
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■ 制品内容伴侣蛋白感受态细胞套系Chaperone Competent Cell BL21 Series（Code No.: 9120：100 μl × 3 × 6 种）
● Chaperone Competent Cells BL21 Set (Code No.: 9120)
1. Chaperone Competent Cells pG-KJE8/BL21 3 × 100 μl
2. Chaperone Competent Cells pGro7/BL21 3 × 100 μl
3. Chaperone Competent Cells pKJE7/BL21 3 × 100 μl
4. Chaperone Competent Cells pG-Tf2/BL21 3 × 100 μl
5. Chaperone Competent Cells pTf16/BL21 3 × 100 μl
6. TaKaRa Competent Cell BL21 3 × 100 μl
7. pUC19 DNA (0.1 ng/μl) 1× 10 μl
8. SOC medium* 18 × 1 ml
   
● Chaperone Competent Cells pG-KJE8/BL21 (Code No.: 9121)
● Chaperone Competent Cells pGro7/BL21 (Code No.: 9122)
● Chaperone Competent Cells pG-Tf2/BL21 (Code No.: 9124)
1. Competent Cell 10 × 100 μl
2. pUC19 DNA (0.1 ng/μl) 1× 10 μl
3. SOC medium* 10 × 1 ml
*SOC medium:       2%   Tryptone
 0.5%   Yeast extract
 10 mM   NaCl
 2.5 mM   KCl
 10 mM   MgSO4
 10 mM   MgCl2
 20 mM   Glucose
     
 
■ 制品说明
Chaperone Competent Cell BL21 Series是由五种分别转化一种伴侣蛋白质粒 (Chaperone Plasmid Set (Code No.: 3340)) 的Escerichia coli BL21制成的感受态细胞。
众所周知，分子伴侣参与蛋白质折叠过程，且人们已经通过大量的实验研究来表明体内蛋白折叠机理。 本制品中含有五种类型的质粒(pG-KJE8、pGro7、pKJE7、pG-Tf2、pTf16)，每一种质粒都是能有效表达一组协同作用、共同参与蛋白折叠的被称作“Chaperone team”的分子伴侣。靶蛋白与其中一种“Chaperone team”共同表达，便可增加可溶性蛋白质的回收比率，而用通常方法，由于包涵体的形成，这些表达蛋白质常常是不可回收的。
E.coli BL21来源于B株，为Lon蛋白水解酶、ompT外膜蛋白水解酶缺陷型。因此，表达的外源蛋白质在该体系中有更高的稳定性。
当进行靶蛋白与“Chaperone team”共表达实验时，通常需要三步：
1. 用伴侣蛋白质粒转化宿主E.coli； 2. 用转化体制备感受态细胞；3. 用质粒转化感受态细胞并表达靶蛋白。如果使用本产品，只需一步转化就可构建靶蛋白与“Chaperone team”的共表达体系，因为使用的E.coli BL21感受态细胞已转化有一种伴侣蛋白质粒。另外，此感受态细胞有五种质粒，不含有伴侣蛋白质粒的TaKaRa Competent BL21也可作为对照。
每种E.coli BL21感受态细胞包括一种伴侣蛋白质粒，非常适合pCold DNA系列的表达。但该产品不适合于启动子为T7的蛋白质表达体系，如pET系列，因为，宿主E.coli BL21菌株不表达T7 RNA聚合酶。
注意：本产品不可用于电击法转化。
 
■ DNA序列
  pG-KJE8 DNA (Fasta形式的txt文件)
  pGRO7 DNA (Fasta形式的txt文件)
  pG-TF2 DNA (Fasta形式的txt文件)
  pKJE7 DNA (Fasta形式的txt文件)
  pTf16 DNA (Fasta形式的txt文件)
 
■ 保存
-80℃。
注意：如果不是-80℃保存，转化效率将会降低。此时，可在使用前用附带的pUC19做转化实验，确认转化效率。不能保存在液氮中。
 
■ 转化效率
Chaperone competent cells：转化1 ng pUC19，涂于Cm+和Amp+平板上进行筛选。
TaKaRa competent cell BL21：转化1 ng pUC19，涂于Amp+平板上进行筛选。
转化效率≥1×106 cfu/μg pUC19
 
■ Genotype
E.coli BL21 : F–, ompT, hsdSB (rB–mB–), gal, dcm
 
■ 注意事项
1. 从-80℃中只取出实验所用的感受态细胞，然后立即放入干冰/EtOH bath。开始实验前不要取出。
2. 可使用1.5 ml microtube替代FALCON tube，但可能会降低效率。
3. 使用100 μl感受态细胞转化时，高纯度DNA使用量不要超过10 ng，否则转化效率会降低。
4. 转化体系改变 (如感受态细胞使用量发生改变) ,或换用了其它tube等，需研讨转化条件 (如使用一般的1.5 ml tube时，请于42℃保温60秒)。
5. 除SOC培养基外，L-broth及φb-broth也可使用，但转化效率会有所下降。
6. 稀释时，使用SOC培养基。
7. L-broth plate : 成份 per liter  
  Tryptone 10 g  
  Yeast extract 5 g  
  NaCl 5 g  
    用1N NaOH调整到pH7.5，添加agar到1.5%，高压灭菌。
8. 不建议将解冻的感受态细胞再次冷冻保存。如果再次冻结不可避免，将细胞置于干冰/乙醇中迅速冷冻，置于-80℃保存。但是，转化效率可能会降低至少一个数量级。
9. 本制品中含有的伴侣蛋白质粒带有来源于pACYC的复制起点和氯霉素抗性基因 (Cmr)，E.coli表达系统中可以使用常用的ColE1型、具氨苄抗性 (Ampr)筛选标记的表达载体，但不可与含有氯霉素抗性基因的表达质粒共同使用。
 

页面更新：2023-12-01 16:19:25

T7pLysY感受态细胞

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T7pLysY感受态细胞

货号：
C1360

品牌：
Jinpan

产品简介
储存条件 -70℃
单位 包
规格 10*100ul

T7pLysY菌株为大肠杆菌BL21增强型菌株，为Lon和OmpT蛋白酶缺陷型，用于毒性或非毒性蛋白的表达。该菌株区别于BL21(DE3)pLysS和BL21(DE3)pLysE菌株的优势在于T7 RNA聚合酶基因整合在细菌染色体上的lac操纵子区域，基因组中无λ前噬菌体序列，LysY表达的T7溶菌酶保留了对T7 RNA聚合酶的抑制作用但缺失了水解细胞壁的酰胺酶活性，有利于降低基因的背景表达和避免诱导过程中细菌的裂解，菌株具有抗T1噬菌体感染等特点。T7pLysY表达感受态细胞经特殊工艺制作，pUC19质粒检测转化效率大于108 cfu/μg。