标签归档：感受态

SHuffle T7 表达 E. coli 感受态细胞 #C3029J 12 x 0.05 ml-NEB酶试剂 New England Biolabs

发表于由

上海金畔生物科技有限公司代理New England Biolabs（NEB）酶试剂全线产品，欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

产品资料 – 感受态细胞 – 蛋白表达菌株

SHuffle T7 表达 E. coli 感受态细胞                              收藏

货 号
规 格
价 格(元)
北京库存
上海库存
广州库存
成都库存
苏州库存
武汉库存

#C3029J
12 x 0.05 ml
4,229.00
无
无
无
无
无
无

Download:       

  • isoschizomers     |
  • compatible ends     | 
  • single letter code

相关产品

SHuffle T7 表达 E. coli 感受态细胞

优点

 有助于细胞质中蛋白质二硫键的折叠
 T7 表达
 蛋白酶缺失的 B 菌株
 BL21 源增强型菌株
 无动物来源产品

概述

T7 表达菌株，在细胞质中正确折叠含有多个二硫键的重组蛋白的能力更强。

基因型

fhuA2 lacZ::T7 gene1 [Ion] ompT ahpC galλatt::pNEB3-r1-cDsbC (SpecR, laclq) ΔtrxB sulA11 R(mcr-73-::miniTn10–TetS)2 [dcm] R(zgb-210::Tn10–TetS)endA1 Δgor Δ(mcrC-mrr)114::IS10

转化效率

1 x 107 cfu/μg pUC19 DNA

抗性

T1 噬菌体（fhuA2）、呋喃妥因、链霉素*、壮观霉素

敏感性

氨苄青霉素、氯霉素、卡那霉素、四环素
*可能观察到对低水平的链霉素存在抗性。

伴侣蛋白感受态细胞套系Chaperone Competent Cell BL21 Series酶试剂盒Takara Clontech

发表于由

上海金畔生物科技有限公司代理Takara酶试剂盒全线产品，欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

伴侣蛋白感受态细胞套系Chaperone Competent Cell BL21 Series
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Takara 9120 Chaperone Competent Cells BL21 Set 1 Set ￥2,691 伴侣蛋白感受态细胞套系Chaperone Competent Cell BL21 Series 伴侣蛋白感受态细胞套系Chaperone Competent Cell BL21 Series 伴侣蛋白感受态细胞套系Chaperone Competent Cell BL21 Series
Takara 9121 Chaperone Competent Cell pG-KJE8/BL21 100 μl × 10 ￥787 伴侣蛋白感受态细胞套系Chaperone Competent Cell BL21 Series 伴侣蛋白感受态细胞套系Chaperone Competent Cell BL21 Series 伴侣蛋白感受态细胞套系Chaperone Competent Cell BL21 Series
Takara 9122 Chaperone Competent Cell pGro7/BL21 100 μl × 10 ￥551 伴侣蛋白感受态细胞套系Chaperone Competent Cell BL21 Series 伴侣蛋白感受态细胞套系Chaperone Competent Cell BL21 Series 伴侣蛋白感受态细胞套系Chaperone Competent Cell BL21 Series
Takara 9124 Chaperone Competent Cell pG-Tf2/BL21 100 μl × 10 ￥1,139 伴侣蛋白感受态细胞套系Chaperone Competent Cell BL21 Series 伴侣蛋白感受态细胞套系Chaperone Competent Cell BL21 Series 伴侣蛋白感受态细胞套系Chaperone Competent Cell BL21 Series
收藏产品 加入购物车

无标题文档

 

 
■ 制品内容伴侣蛋白感受态细胞套系Chaperone Competent Cell BL21 Series（Code No.: 9120：100 μl × 3 × 6 种）
● Chaperone Competent Cells BL21 Set (Code No.: 9120)
1. Chaperone Competent Cells pG-KJE8/BL21 3 × 100 μl
2. Chaperone Competent Cells pGro7/BL21 3 × 100 μl
3. Chaperone Competent Cells pKJE7/BL21 3 × 100 μl
4. Chaperone Competent Cells pG-Tf2/BL21 3 × 100 μl
5. Chaperone Competent Cells pTf16/BL21 3 × 100 μl
6. TaKaRa Competent Cell BL21 3 × 100 μl
7. pUC19 DNA (0.1 ng/μl) 1× 10 μl
8. SOC medium* 18 × 1 ml
   
● Chaperone Competent Cells pG-KJE8/BL21 (Code No.: 9121)
● Chaperone Competent Cells pGro7/BL21 (Code No.: 9122)
● Chaperone Competent Cells pG-Tf2/BL21 (Code No.: 9124)
1. Competent Cell 10 × 100 μl
2. pUC19 DNA (0.1 ng/μl) 1× 10 μl
3. SOC medium* 10 × 1 ml
*SOC medium:       2%   Tryptone
 0.5%   Yeast extract
 10 mM   NaCl
 2.5 mM   KCl
 10 mM   MgSO4
 10 mM   MgCl2
 20 mM   Glucose
     
 
■ 制品说明
Chaperone Competent Cell BL21 Series是由五种分别转化一种伴侣蛋白质粒 (Chaperone Plasmid Set (Code No.: 3340)) 的Escerichia coli BL21制成的感受态细胞。
众所周知，分子伴侣参与蛋白质折叠过程，且人们已经通过大量的实验研究来表明体内蛋白折叠机理。 本制品中含有五种类型的质粒(pG-KJE8、pGro7、pKJE7、pG-Tf2、pTf16)，每一种质粒都是能有效表达一组协同作用、共同参与蛋白折叠的被称作“Chaperone team”的分子伴侣。靶蛋白与其中一种“Chaperone team”共同表达，便可增加可溶性蛋白质的回收比率，而用通常方法，由于包涵体的形成，这些表达蛋白质常常是不可回收的。
E.coli BL21来源于B株，为Lon蛋白水解酶、ompT外膜蛋白水解酶缺陷型。因此，表达的外源蛋白质在该体系中有更高的稳定性。
当进行靶蛋白与“Chaperone team”共表达实验时，通常需要三步：
1. 用伴侣蛋白质粒转化宿主E.coli； 2. 用转化体制备感受态细胞；3. 用质粒转化感受态细胞并表达靶蛋白。如果使用本产品，只需一步转化就可构建靶蛋白与“Chaperone team”的共表达体系，因为使用的E.coli BL21感受态细胞已转化有一种伴侣蛋白质粒。另外，此感受态细胞有五种质粒，不含有伴侣蛋白质粒的TaKaRa Competent BL21也可作为对照。
每种E.coli BL21感受态细胞包括一种伴侣蛋白质粒，非常适合pCold DNA系列的表达。但该产品不适合于启动子为T7的蛋白质表达体系，如pET系列，因为，宿主E.coli BL21菌株不表达T7 RNA聚合酶。
注意：本产品不可用于电击法转化。
 
■ DNA序列
  pG-KJE8 DNA (Fasta形式的txt文件)
  pGRO7 DNA (Fasta形式的txt文件)
  pG-TF2 DNA (Fasta形式的txt文件)
  pKJE7 DNA (Fasta形式的txt文件)
  pTf16 DNA (Fasta形式的txt文件)
 
■ 保存
-80℃。
注意：如果不是-80℃保存，转化效率将会降低。此时，可在使用前用附带的pUC19做转化实验，确认转化效率。不能保存在液氮中。
 
■ 转化效率
Chaperone competent cells：转化1 ng pUC19，涂于Cm+和Amp+平板上进行筛选。
TaKaRa competent cell BL21：转化1 ng pUC19，涂于Amp+平板上进行筛选。
转化效率≥1×106 cfu/μg pUC19
 
■ Genotype
E.coli BL21 : F–, ompT, hsdSB (rB–mB–), gal, dcm
 
■ 注意事项
1. 从-80℃中只取出实验所用的感受态细胞，然后立即放入干冰/EtOH bath。开始实验前不要取出。
2. 可使用1.5 ml microtube替代FALCON tube，但可能会降低效率。
3. 使用100 μl感受态细胞转化时，高纯度DNA使用量不要超过10 ng，否则转化效率会降低。
4. 转化体系改变 (如感受态细胞使用量发生改变) ,或换用了其它tube等，需研讨转化条件 (如使用一般的1.5 ml tube时，请于42℃保温60秒)。
5. 除SOC培养基外，L-broth及φb-broth也可使用，但转化效率会有所下降。
6. 稀释时，使用SOC培养基。
7. L-broth plate : 成份 per liter  
  Tryptone 10 g  
  Yeast extract 5 g  
  NaCl 5 g  
    用1N NaOH调整到pH7.5，添加agar到1.5%，高压灭菌。
8. 不建议将解冻的感受态细胞再次冷冻保存。如果再次冻结不可避免，将细胞置于干冰/乙醇中迅速冷冻，置于-80℃保存。但是，转化效率可能会降低至少一个数量级。
9. 本制品中含有的伴侣蛋白质粒带有来源于pACYC的复制起点和氯霉素抗性基因 (Cmr)，E.coli表达系统中可以使用常用的ColE1型、具氨苄抗性 (Ampr)筛选标记的表达载体，但不可与含有氯霉素抗性基因的表达质粒共同使用。
 

页面更新：2023-12-01 16:19:25

JM110 感受态细胞

发表于由

JM110 感受态细胞

货号：
C1460

品牌：
Jinpan

产品简介
储存条件 -70℃
单位 包
规格 20*100ul

本公司生产的JM110感受态细胞是采用大肠杆菌JM110菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞，可用于DNA的化学转化。使用pUC19质粒检测，转化效率可达106 cfu/μg。pEGFP-N1转化JM110后XbaⅠ位点去甲基化，提取的质粒可被XbaⅠ酶切开，线性化质粒大小为4733bp。JM110感受态细胞-70℃保存6个月转化效率不发生改变。每支感受态可以酌情分装使用，降低了实验的成本。质量稳定，使用方便，质优价廉。

DH5α感受态细胞

发表于由

DH5α感受态细胞

货号：
C1100

品牌：
Jinpan

产品简介
英文名称 E.coli DH5α Competent Cells
储存条件 -70℃保存，液氮保存至少一年，-70℃保存至少6个月
外观（性状） 干冰运输，单加10kg干冰费
单位 袋
规格 10*100ul 20*100ul

本公司生产的DH5α感受态细胞是采用大肠杆菌DH5α菌株经特殊工艺制备得到，可用于DNA的化学转化。使用pUC19质粒检测，转化效率可达108，-70℃保存3-5个月转化效率不发生改变。

基因型: supE44△lacU169（φ80 lacZ△M15）hsdR17 recA1 end A1 gyrA96 thi-1 relA1

特   点: 一种用于铺制与培养质粒平板和粘粒平板的重组缺陷的抑制型菌株。其φ80 lacZ△M15基因的产物可与pUC载体编码的 β-半乳糖苷酶氨基端实现β互补，可用于蓝白斑筛选。

操作方法：（以下操作均按无菌条件的标准进行）

1、将感受态细胞置于冰上融化，以下实验以100ul感受态细胞为例。

2、向感受态细胞悬液中加入需转化的目的DNA，注意目的DNA的体积不要超过感受态细胞悬液体积的十分之一，轻轻旋转离心管以混匀内容物，冰浴放置30分钟。

3、将离心管置于42℃水浴中60-90秒，然后快速转移到冰浴中放置2-3分钟，注意不要摇动离心管。

4、向离心管中加入500ul无菌无抗的SOC或LB培养基，37℃ 180rpm振荡培养1小时。目的是使质粒上相关的抗性标记基因表达，使菌体复苏。

5、取适量已转化的感受态细胞涂布含相应抗生素的SOC或LB平板，37℃倒置培养12-16小时。涂布用量可根据具体实验来调整，如转化的DNA总量较多，可取100ul左右的转化产物涂板；反之，如转化的DNA总量较少，可取200-300ul的转化产物涂板。过多菌液可以抑制细菌生长。如果预计的克隆较少，可通过离心后吸除部分培养液，悬浮菌体后将其涂布于一个平板中。涂布剩余的菌液可4℃保存，如果次日的转化菌落数过少，可以将剩下的菌液再涂布新的平板。

注意事项：

      1、感受态细胞应保存在-70℃，不可反复冻融，否则其转化效率将会降低。

      2、实验过程中应严格无菌操作，防止其它DNA或杂菌的污染，避免为以后的筛选、鉴定带来影响。

      3、转化时，转化效率与外源DNA的浓度在一定范围内成正比，但当加入的外源DNA量过多或体积过大反而会降低转化效率。转化时DNA体积要小于感受态细胞体积的十分之一。

     4、转化率的计算：转化率＝产生菌落的总数/铺板DNA总量。

     5、为防止转化实验不成功，可以保留部分连接产物，以重新转化，将损失降到最低。

JM109感受态细胞

发表于由

JM109感受态细胞

货号：
C1300

品牌：
Jinpan

产品简介
英文名称 E.coli JM109 Competent Cells
储存条件 -70℃保存，液氮保存至少一年，-70℃保存至少6个月
外观（性状） 干冰运输，单加10kg干冰费
单位 袋
规格 10*100ul 20*100ul

本公司生产的JM109感受态细胞是采用大肠杆菌JM109菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞，可用于DNA的化学转化。使用pUC19质粒检测，转化效率可达108，-70℃保存几个月转化效率不发生改变。
基因型：recA supE44 endA1 hsdR17 gyrA96relA1 thi Δ(lac-proAB)  F’[traD36 proAB+ lacIq lacZΔM15]
特  点：一种琥珀抑制型F’重组缺陷菌株。支持M13噬菌体载体的生长，对转染的DNA有修饰作用，但无限制作用。该菌株中的F’带有lacZΔM15，后者使得与在λZAP中编码的β-半乳糖 苷酶氨基端进行α-互补，可用于蓝白斑筛选。
操作方法：（以下各步骤均为无菌操作）
1、将感受态细胞置于冰上融化，以下实验以100ul感受态细胞为例。
2、向感受态细胞悬液中加入需转化的目的DNA，注意目的DNA的体积不要超过感受态细胞悬液体积的十分之一，轻轻旋转离心管以混匀内容物，冰浴放置30分钟。
3、将离心管置于42℃水浴中放置60-90秒，然后快速转移到冰浴中放置2-3分钟，注意不要摇动离心管。
4、向离心管中加入500ul无菌无抗的SOC或LB培养基，37℃ 180rpm振荡培养1小时。目的是使质粒上相关的抗性标记基因表达，使菌体复苏。
5、取适量已转化的感受态细胞涂布含相应抗生素的SOC或LB平板，37℃倒置培养12-16小时。涂布用量可根据具体实验来调整，如转化的DNA总量较多，可取100ul左右转化产物涂板；反之，如果转化的DNA总量较少，可取200-300ul的转化产物涂板。过多菌液可以抑制细菌生长。如果预计的克隆较少，可通过离心后吸除部分培养液，悬浮菌体后将其涂布于一个平板中。涂布剩余的菌液可4℃保存，如果次日的转化菌落数过少可以将剩下的菌液再涂布新的平板。
注意事项：
1、收到感受态细胞应保存在-70℃，不可反复冻融，否则其转化效率将会降低。
2、实验过程中应严格无菌操作，防止其它DNA的污染，避免为以后的筛选、鉴定带来影响。
3、转化时，转化效率与外源DNA的浓度在一定范围内成正比，但当加入的外源DNA量过多或体积过大反而会降低转化效率。转化时DNA体积要小于感受态细胞体积的十分之一。
4、转化率的计算：转化率＝产生菌落的总数/铺板DNA总量
5、为防止转化实验不成功，可以保留部分连接产物，以重新转化，将损失将到最低。

dam–/dcm– E. coli 感受态细胞 #C2925H 20 x 0.05 ml-NEB酶试剂 New England Biolabs

发表于由

上海金畔生物科技有限公司代理New England Biolabs（NEB）酶试剂全线产品，欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

产品资料 – 感受态细胞 – 克隆菌株

dam–/dcm– E. coli 感受态细胞                              收藏

货 号
规 格
价 格(元)
北京库存
上海库存
广州库存
成都库存
苏州库存
武汉库存

#C2925H
20 x 0.05 ml
4,469.00
无
无
无
无
无
无

#C2925I
6 x 0.2 ml
3,429.00
无
无
无
无
无
无

Download:       

  • isoschizomers     |
  • compatible ends     | 
  • single letter code

相关产品

 
 

dam–/dcm– E. coli 感受态细胞

单独出售的组份

SOC Outgrowth 培养基
#B9020S 4 x 25 ml . . . . . . ¥939

优点

 适用于培养无 Dam 和 Dcm 甲基化的质粒
 无动物来源产品

概述

甲基转移酶缺失的 E. coli 感受态细胞，适用于无 Dam 和 Dcm 甲基化质粒的生长。

基因型

ara-14 leuB6 fhuA31 lacY1 tsx78 glnV44 galK2 galT22 mcrA dcm-6 hisG4 rfbD1 R(zgb210::Tn10) Tet S  endA1 rspL136 (Str R) dam13::Tn9 (CamR) xylA-5 mtl-1 thi-1 mcrB1 hsdR2

特性

• 适用于无 Dam 和 Dcm 甲基化质粒的培养
• 缺失非特异性核酸内切酶 I（endA1）活性，可用于制备高质量质粒

转化效率

1–3 x 106 cfu/µg pUC19 DNA

抗性

T1 噬菌体（fhuA31）、氯霉素、呋喃妥因、链霉素

敏感性

氨苄青霉素、卡那霉素、壮观霉素、四环素

随产品提供

SOC Outgrowth 培养基
pUC19 对照 DNA

BL21(DE3)感受态细胞

发表于由

BL21(DE3)感受态细胞

货号：
C1400

品牌：
Jinpan

产品简介
英文名称 E.coli BL21(DE3) Competent Cells
储存条件 -70℃保存，液氮保存至少一年，-70℃保存至少6个月
外观（性状） 干冰运输，单加10kg干冰费
单位 包
规格 10*100ul 20*100ul

本公司生产的BL21（DE3）感受态细胞是采用大肠杆菌BL21（DE3）菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞，可用于DNA的化学转化。使用pUC19质粒检测，转化效率可达107，-70℃保存6个月转化效率不改变。

基因型：F_ ompT hsdSB（rB_mB_）dcm gal（DE3）

特 点：该菌株用于高效表达克隆于含有噬菌体T7启动子的表达载体（如pET系列）的基因。T7噬菌体RNA聚合酶位于λ 噬菌体DE3区，该区整合于BL21的染色体上。该菌适合表达非毒性蛋白。

操作方法：（以下各步骤均为无菌操作）

1、将感受态细胞置于冰上融化，以下实验以100ul感受态细胞为例。

2、向感受态细胞悬液中加入需转化的目的DNA，注意目的DNA的体积不要超过感受态细胞悬液体积的十分之一，轻轻旋转离心管以混匀内容物，冰浴放置30分钟。

3、将离心管置于42℃水浴中放置60-90秒，然后快速转移到冰浴中放置2-3分钟，注意不要摇动离心管。

4、向离心管中加入500ul无菌无抗的SOC或LB培养基，37℃ 180rpm振荡培养1小时。目的是使质粒上相关的抗性标记基因表达，使菌体复苏。

5、取适量已转化的感受态细胞涂布含相应抗生素的SOC或LB平板，37℃倒置培养12-16小时。涂布用量可根据具体实验来调整，如转化的DNA总量较多，可取100ul左右的转化产物涂板；反之，如转化的DNA总量较少，可取200-300ul的转化产物涂板。过多菌液可以抑制细菌生长。如果预计的克隆较少，可通过离心后吸除部分培养液，悬浮菌体后将其涂布于一个平板中。涂布剩余的菌液可4℃保存，如果次日的转化菌落数过少可以将剩下的菌液再涂布新的平板。

注意事项：

1、感受态细胞应保存在-70℃，不可反复冻融，否则其转化效率将会降低。

2、实验过程中应严格无菌操作，防止其它DNA或杂菌的污染，避免为以后的筛选、鉴定带来影响。

3、转化时，转化效率与外源DNA的浓度在一定范围内成正比，但当加入的外源DNA量过多或体积过大反而会降低转化效率。转化时DNA体积要小于感受态细胞体积的十分之一。

4、转化率的计算：转化率＝产生菌落的总数/铺板DNA总量。5、为防止转化实验不成功，可以保留部分连接产物，以重新转化，将损失降到最低。

XL10-Gold 感受态细胞

发表于由

XL10-Gold 感受态细胞

货号：
C1450

品牌：
Jinpan

产品简介
储存条件 -70℃
单位 包
规格 20*100ul

本公司生产的XL10-Gold感受态细胞是采用大肠杆菌XL10菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞，可用于DNA的化学转化。使用pUC19质粒检测，转化效率可达108 cfu/μg，-70℃保存几个月转化效率不发生改变。每支感受态可以酌情分装使用，降低了实验的成本。质量稳定，使用方便，质优价廉。

NEB10-beta感受态细胞

发表于由

NEB10-beta感受态细胞

货号：
C1550

品牌：
Jinpan

产品简介
储存条件 -70℃
单位 包
规格 20*100ul

本公司生产的NEB 10-beta感受态细胞是采用大肠杆菌NEB 10-beta菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞，可用于DNA的化学转化。使用pUC19质粒检测，转化效率可达108 cfu/μg，-70℃保存6个月转化效率不发生改变。

感受态细胞E.coli DH5α Competent Cells酶试剂盒Takara Clontech

发表于由

上海金畔生物科技有限公司代理Takara酶试剂盒全线产品，欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

感受态细胞E.coli DH5α Competent Cells
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Takara 9057 E.coli DH5α Competent Cells 100 μl × 10 ￥309 感受态细胞E.coli DH5α Competent Cells 感受态细胞E.coli DH5α Competent Cells 感受态细胞E.coli DH5α Competent Cells
收藏产品 加入购物车

无标题文档

 
 
感受态细胞E.coli DH5α Competent Cells → 感受态细胞E.coli DH5α Competent Cells → 感受态细胞E.coli DH5α Competent Cells → 感受态细胞E.coli DH5α Competent Cells → 感受态细胞E.coli DH5α Competent Cells
 
感受态细胞E.coli DH5α Competent Cells
感受态细胞E.coli DH5α Competent Cells  
感受态细胞E.coli DH5α Competent Cells
 
 
■ 制品内容感受态细胞E.coli DH5α Competent Cells
E.coli DH5α Competent Cells 100 μl × 10
pUC19 plasmid ( 0.1 ng/μl) 10 μl
SOC Medium* 1 ml × 10
*SOC Medium:       2%   Tryptone
 0.5%   Yeast extract
 10 mM   NaCl
 2.5 mM   KCl
  10 mM   MgSO4
10 mM   MgCl2
 20 mM   Glucose
 
■ 制品说明
Takara在Hanahan's method基础上进行了改良，制备出E.coli DH5α Competent Cells。 E.coli DH5α Competent Cells在使用pUC系列质粒载体进行DNA转化时，利用β-半乳糖苷酶活性 (α-互补性)，通过蓝白斑方法可以很容易地鉴别重组体菌株。由于菌株无lac lq，故不需要IPTG。因此，当制作基因文库或进行亚克隆时，可以使用X-Gal筛选重组DNA或重组质粒。
X-Gal : 5-Bromo-4-Chloro-3-Indolyl-β-D-Galactoside
 
■ 细胞浓度
1 - 2×109 bacteria/ml
 
■ Genotype
E.coli DH5α : F-, φ 80dlacZ ΔM15, Δ(lacZYA -argF )U169, deoR , recA1 , endA1 , hsdR17 (rK-, mK+), phoA, supE44 , λ-, thi -1, gyrA96 , relA1
 
■ 保存
-80℃。
注意： -80℃或更低温度下保存。如果保存温度不能恒定，转化效率将会降低。请使用附带的pUC19 对照质粒来确认保存细胞的转化效率。不能液氮保存。
 
■ 质量控制
1. 转化效率
转入1 ng 的pUC19，涂于含有Amp+ 的选择培养基进行筛选。
转化效率 : >1 x 108 transformants/μg pUC19
 
2. β-半乳糖苷酶的α-互补性
当使用pUC19 plasmid进行转化时，含有100 μg/ml Ampicillin和60 μg/ml X-Gal的L-agar plate出现蓝色菌落。
 
■ 注意事项
1. 将感受态细胞从-80℃冷冻取出后请立即置于干冰/乙醇中。使用前保存于干冰/乙醇中。
2. 可使用1.5 ml microcentrifuge tubes代替14 ml 圆底 tubes (BD company Code: 352059 或 352057,等)，但效率可能会降低。
3. 当使用100 μl感受态细胞时，加入的高纯度DNA样品不要超过10 ng。否则转化效率会降低。
4. 当改变感受态细胞数量或tubes类型时，适当调整反应条件。例如，当使用1.5 ml microcentrifuge tubes时，42℃放置60秒而不是45秒。
5. L-broth 或φb-broth可替代SOC培养基。此时，转化效率可能会降低。
    ·L-broth : Ingredient per liter water  
  Tryptone 10 g  
  Yeast extract 5 g  
  NaCl 5 g  
    用1 N NaOH调整pH到7.5并高压灭菌。
    ·φ b-broth: Ingredient per liter water  
  Tryptone 20 g  
  Yeast extract 5 g  
  MgSO4·7H2O 5 g  
    用1 N KOH调整pH到7.5并高压灭菌。
6. 当加入X-Gal时，按照以下操作进行：
    ·将 20 mg/ml X-Gal (溶解于二甲基甲酰胺) 按200-300 μl/100 ml的比例加入到 agar培养基中。
7. DH5α可用于M13mp载体的复制。但由于其不携带F因子，因而不能形成菌斑。
8. 不建议将解冻的感受态细胞再次冷冻保存。但是，如果再次冻结不可避免，将细胞置于干冰/乙醇中迅速冷冻，置于-80℃保存。但是，转化效率可能会降低至少一个数量级。
 
 

页面更新：2023-12-01 15:06:22