Β淀粉样蛋白-β淀粉样蛋白 1-42 寡聚体

Β淀粉样蛋白-β淀粉样蛋白 1-42 寡聚体

Stressmarq公司研发的β淀粉样蛋白,该产品有3种规格,产品货号为SPR-488,如需购买Stressmarq公司产品,请联系国内代理商-上海金畔生物,本文是对该产品的详细介绍。

Β淀粉样蛋白-β淀粉样蛋白 1-42 寡聚体 从左至右分别为Aβ单体 (SPR-485),寡聚体 (SPR-488) 和原纤维 (SPR-487) 的电镜图。负染色透射电子显微镜图像在 80 Kv 下在碳涂层的 400 目铜网格上使用磷钨酸和乙酸双氧铀染色获得。比例尺 = 100 nm。
Β淀粉样蛋白-β淀粉样蛋白 1-42 寡聚体 从左至右分别为Aβ单体 (SPR-485),寡聚体 (SPR-488) 和原纤维 (SPR-487) 的原子力显微镜图。将1.0 mg/mL样品在 dH2O 中稀释至 0.1 mg/mL 置于新鲜切割的云母上,清洗、干燥并以轻敲模式进行原子力显微镜分析。左图为 2.5 x 2.5 µm x-y,z 范围为 10 nm。
Β淀粉样蛋白-β淀粉样蛋白 1-42 寡聚体 从左至右分别是Aβ单体 (SPR-485),寡聚体 (SPR-488) 和原纤维 (SPR-487) 的WB,抗体是抗Aβ6E10抗体。三种Aβ蛋白 (160 pmol) 在 4-12% Bis-Tris SDS-PAGE 上跑胶后,在 0.02% v/v Tween-20 存在下转移到硝酸纤维素上,并用 1:1000 小鼠 6E10 一抗做WB。在 TEM/AFM 下观察到的寡聚体显示出明显的二聚体/三聚体条带以及来自 ~37-75 kDa 的信号(中)。在 TEM/AFM 下观察到的原纤维显示出大于 100 kDa 的信号,并且在浓缩胶(右)中有明显的信号。
Aβ 1-42 寡聚体 (SPR-488) 和原纤维 (SPR-487) 对原代大鼠皮层神经元显示出剂量依赖性毒性,但单体 (SPR-485) 没有毒性。大鼠原代皮层神经元用不同浓度的 (A) 单体、(B) 寡聚体或 (C) 原纤维处理 14 天后的存活率,由 MAP2 阳性神经元量化并表示为对照的百分比(空白对照设为100%)。原纤维和相应的载体对照先在 Bioruptor 超声破碎仪中进行超声处理。测试条件在与未处理的对照和载体对照相同的板中运行,由不含Aβ 1-42 蛋白的缓冲液组成。数据表示为平均值 +/- s.e.m. (n = 6)。使用单向方差分析和 Dunnett 检验对数据进行全局分析; ** p<0.01 统计数据相比于对照; ## p<0.01, #### p<0.0001 统计数据相比于载体对照。 § 代表未经处理的对照条件。


产品概述

产品名称:β淀粉样蛋白

产品描述:β淀粉样蛋白 1-42 寡聚体

应用范围:WB, In vivo Assay, In vitro Assay

浓度:各批次不同,请详见说明书

标记物:无标签

性质:合成的 (TFA 制备)

来源物种:人

表达系统:N/A

氨基酸序列:DAEFRHDSGYEVHHQKLVFFAEDVGSNKGAIIGLMVGGVVIA

纯度:>95%

蛋白长度:42 个氨基酸

产品特性

储存缓冲液:Phosphate buffer (PB) pH 7.4 and 20 mM NaCl

储存温度:-80ºC

运输温度:干冰. 运输: 该产品会与其他同订单产品分开发货.

纯化方式:N/A

Protein Size:4.5 kDa

引用该产品:Human Synthetic Amyloid Beta Oligomers (StressMarq Biosciences Inc., Victoria BC CANADA, Catalog # SPR-488)

分析证书:该蛋白已经通过质谱仪和HPLC检测证明纯度大于95%.

生物学特性

别名:Abeta Oligomers, Abeta peptide, Amyloid beta peptide oligomers, Beta amyloid peptide oligomers, amyloid beta precursor protein peptide oligomers, APP

研究领域:淀粉样蛋白, 神经生物学, 神经衰退疾病, 阿尔茨海默病

细胞定位:细胞膜

GeneID:351

Swiss Prot:P05067

科研背景:

Our Amyloid Beta 1-42 (Aβ42) Oligomers are generated from Amyloid Beta Peptide 1-42 pre-treated with 1,1,1,3,3,3-Hexafluoro-2-propanol (HFIP) as previously published (1,2). Our Aβ42 oligomers present as globular oligomers when observed under TEM and AFM, and have a unique dimer/trimer and oligomer signal on a Western Blot with an anti-amyloid beta antibody. Our Aβ42 oligomers were also demonstrated to be toxic to primary rat cortical neurons in a dose-dependent manner. In the brain, amyloid beta peptide (Aβ) is generated by protease cleavage of amyloid precursor protein (APP), which aggregates into oligomers, protofibrils, fibrils and ultimately plaques in neurodegenerative diseases. The accumulation of Aβ plaques in the brain is considered a hallmark of Alzheimer’s disease (AD), and most of the drugs tested for AD in the past 20 years have targeted amyloid beta accumulation (3). Soluble Aβ oligomers isolated from the brains of AD patients or those generated in vitro potently impaired synapse structure and function (4). Aβ oligomers generated in vitro were toxic to PC12 cells (5) and SH-SY5Y cells (6). Aβ was demonstrated to interact with tauopathies to affect neurodegeneration in AD patients (7) and accumulations of Aβ were shown to be associated with lower survival rates in Parkinson’s disease patients with dementia (8).

参考资料:

1. Stine et al. 2003. JBC. 278(13):11612-22. doi: 10.1074/jbc.M210207200

2. Ahmed et al. 2010. Nature Structural & Molecular Biology. 17(5):561-7. doi: 10.1038/nsmb.1799

3. Panza et al. 2019. Nat Rev Neurol. 15:73-88 https://doi.org/10.1038/s41582-018-0116-6

4. Shankar et al. 2008. Nat Med. 14(8):837-842. doi: 10.1038/nm1782

5. Chromy et al. 2003. Biochemistry. 42:12749-12760. doi: 10.1021/bi030029q

6. Kayed et al. 2003. Science. 300(5618): 486-489. doi: 10.1126/science.1079469

7. Want et al. 2016. JAMA Neurol. 73(9):1070-7. doi: 10.1001/jamaneurol.2016.2078

8.,Kotzbauer et al. 2012. Arch Neurol. 69(10): 1326-1331. doi: 10.1001/archneurol.2012.1608

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神经衰退疾病研究新工具—α-突触核蛋白寡聚体(SPR-484)

神经衰退疾病研究新工具—α-突触核蛋白寡聚体(SPR-484)

 StressMarq商业投产α-突触核蛋白寡聚体具有如下优点:

高含量α-突触核蛋白寡聚体

动态学稳定 (kinetically stable/trapped)

不含任何诱导剂或抑制剂 (多巴胺,EGCG)

可用于活性电泳 (Native PAGE),体内体外检测及疾病建模

stressmarq能够量产α-突触核蛋白寡聚体


神经衰退疾病研究新工具---α-突触核蛋白寡聚体(SPR-484) 

上图为动态学稳定(kinetically stable) α-突触核蛋白寡聚体(SPR-484) 电镜图。该寡聚体没有使用任何诱导剂或抑制剂来锁定寡聚体状态,并且寡聚体含量能达到90%

 

StressmarqSPR-484 的负染色透射电子显微镜图像在 80 Kv 下使用磷钨酸和醋酸铀染色在碳涂层的 400 目铜网格上获得。可以清晰的看到寡聚体结构,并且具有很高的均匀性。 

神经衰退疾病研究新工具---α-突触核蛋白寡聚体(SPR-484) 

动态学稳定的α突触核蛋白寡聚体(SPR-484) 可在冻融后37℃下孵育两周仍然稳定 

(A)冻融一次后的动态学稳定寡聚体的Native PAGE 

(B)(C)分别是冻融一次后的和37℃孵育两周后的尺寸排阻色谱(SEC)

 

在峰值处,90%SPR-484在冻融后37℃下孵育两周仍然稳定于寡聚体状态

神经衰退疾病研究新工具---α-突触核蛋白寡聚体(SPR-484) 

动态学稳定的α突触核蛋白寡聚体(SPR-484) 对多巴胺能神经元有毒性并且可以诱发帕金森病理现象(pSer129) 

(A) 经寡聚体处理后 11 天,大鼠原代多巴胺能神经元的存活率由抗 MAP2 抗体量化并表示为对照的百分比

(B) 经寡聚体处理后 11 天,大鼠原代多巴胺能神经元中存在的 α-突触核蛋白 pSer129 水平通过抗 α-突触核蛋白 pSer129 抗体与抗 MAP2 抗体的比率量化,表示为对照的百分比

 

所有数据经过统计学验证,而非偶然性结果 

动态学稳定的α突触核蛋白寡聚体(SPR-484) 在大鼠原代多巴胺能神经元中诱导帕金森相关的pSer129病理现象 

(A)用对照PBS缓冲液处理后11天的大鼠原代多巴胺能神经元

(B) 10 µg/mL SPR-484处理后11天的大鼠原代多巴胺能神经元

 

细胞核染色蓝色(Hoechst),多巴胺能神经元显示红色(MAP2),病理现象为绿色(α-syn pSer129)

 

注:SPR-484E.coli 表达的,在加入神经元之前没有磷酸化

 

更多建模问题请见链接:https://www.jove.com/v/59758/generation-alpha-synuclein-preformed-fibrils-from-monomers-use

 

 

 

更多详情请咨询Stressmarq优势代理商-上海金畔生物

Stressmarq推出新产品-β-淀粉样蛋白原纤维和寡聚体抗体

Stressmarq推出新产品-β-淀粉样蛋白原纤维和寡聚体抗体

Stressmarq能够提供特异性的β-淀粉样肽1-42原纤维抗体和β-淀粉样肽1-42寡聚体抗体。两支抗体均可用于WB,IHC,ICC/IF/IP,ELISA,DB实验。 

Stressmarq推出新产品-β-淀粉样蛋白原纤维和寡聚体抗体 


Stressmarq推出新产品-β-淀粉样蛋白原纤维和寡聚体抗体 


Stressmarq推出新产品-β-淀粉样蛋白原纤维和寡聚体抗体 

 

β淀粉样蛋白原纤维(OC)抗体(SPC-507D)人阿尔茨海默疾病脑组织

Stressmarq推出新产品-β-淀粉样蛋白原纤维和寡聚体抗体 

阿尔茨海默病样本中β-淀粉样蛋白原纤维抗体(SPC-507D)标记海马(A)、下丘(B)和额叶皮层(C)部位,可见淀粉样纤维原纤维(OC)。高倍镜显示细纤维物质组成(D)淀粉样纤维阳性沉积物密集。

 

β淀粉样蛋白寡聚体(A11)β淀粉样蛋白纤维(OC) 抗体

Stressmarq推出新产品-β-淀粉样蛋白原纤维和寡聚体抗体 

用斑点杂交实验分析β-淀粉样蛋白1-42polyQ36原纤维寡聚体和原纤维。β-淀粉样蛋白1-42polyQ原纤维仅可以用β-淀粉样蛋白原纤维抗体(SPC-507D)检测,β-淀粉样蛋白1-42polyQ前原纤维寡聚体只能用β-淀粉样蛋白蛋白寡聚体检测(SPC-506D)。

 

 

Western blot分析β-淀粉样蛋白1-42原纤维和前原纤维寡聚体。SDS聚丙酰胺胶分析β-淀粉样蛋白1-42原纤维(F)和前原纤维寡聚体(O),转移到硝酸纤维膜上,用 Anti-Amyloid beta fibril抗体 (SPC- 507D)Anti-Amyloid beta oligomer抗体(SPC-506D)检测。

 

 

品牌

产品货号

产品名称

克隆类型

宿主

应用

反应物种

Stressmarq

SPC-507D

Amyloid Fibrils (OC) Antibody

多克隆

WB,IHC,ICC/IF/IP,ELISA,DB

人,小鼠,大鼠,真核生物

Stressmarq

SPC-506D

Amyloid Oligomers (A11) Antibody

多克隆

WB,IHC,ICC/IF/IP,ELISA,DB

 

详情请咨询StressMarq全国代理-上海金畔生物科技 

帕金森造模用动态学稳定的α突触核蛋白寡聚体(SPR-484)促销活动

帕金森造模用动态学稳定的α突触核蛋白寡聚体(SPR-484)促销活动

帕金森造模用动态学稳定的α突触核蛋白寡聚体(SPR-484)促销活动

帕金森造模用动态学稳定的α突触核蛋白寡聚体(SPR-484)促销活动

折扣力度:55折

促销时间:2022年2月21日-2022年3月25日

促销代码:strssmarq20220201


阿尔兹海默,帕金森和ALS为常见的神经退行性疾病。在我国65岁以上人群发病率为5.56%,85岁以上老龄人口中有三分之一患有阿尔兹海默症(AD)。然而该病目前没有可靠的治愈方案,三种疾病的病人脑中都蛋白聚集现象,包括α-突触核蛋白, tau, β淀粉样肽 (Aβ) 和SOD1。α-突触核蛋白, Tau, Aβ和SOD有相似的病变聚集机制。

 

α-突触核蛋白, Tau, 和 Aβ 寡聚体被认为是毒性更强的结构。更有利于造模,stressmarq能够提供商业投产α-突触核蛋白寡聚体。加速帕金森模型的造模。


该产品有如下特点:

● 高含量α-突触核蛋白寡聚体

● 动态学稳定 (kinetically stable/trapped)

● 不含任何诱导剂或抑制剂 (多巴胺,EGCG)

● 可用于活性电泳 (Native PAGE),体内体外检测及疾病建模

● 全球量产


帕金森造模用动态学稳定的α突触核蛋白寡聚体(SPR-484)促销活动

图中为动态学稳定(kinetically stable) 的α-突触核蛋白寡聚体(SPR-484) 电镜图。该寡聚体没有使用任何诱导剂或抑制剂来锁定寡聚体状态,并且寡聚体含量能达到90%。

 

SPR-484 的负染色透射电子显微镜图像在 80 Kv 下使用磷钨酸和醋酸铀染色在碳涂层的 400 目铜网格上获得。可以清晰的看到寡聚体结构,并且具有很高的均匀性。

帕金森造模用动态学稳定的α突触核蛋白寡聚体(SPR-484)促销活动

动态学稳定的α突触核蛋白寡聚体(SPR-484) 在大鼠原代多巴胺能神经元中诱导帕金森相关的pSer129病理现象


(A)用对照PBS缓冲液处理后11天的大鼠原代多巴胺能神经元

(B) 用10 µg/mL SPR-484处理后11天的大鼠原代多巴胺能神经元


细胞核染色蓝色(Hoechst),多巴胺能神经元显示红色(MAP2),病理现象为绿色(α-syn pSer129)

注:SPR-484为E.coli 表达的,在加入神经元之前没有磷酸化 


 

动态学稳定的α突触核蛋白寡聚体(SPR-484) 对多巴胺能神经元有毒性并且可以诱发帕金森病理现象(pSer129)

 

(A) 经寡聚体处理后 11 天,大鼠原代多巴胺能神经元的存活率由抗 MAP2 抗体量化并表示为对照的百分比

(B) 经寡聚体处理后 11 天,大鼠原代多巴胺能神经元中存在的 α-突触核蛋白 pSer129 水平通过抗 α-突触核蛋白 pSer129 抗体与抗 MAP2 抗体的比率量化,表示为对照的百分比

 

所有数据经过统计学验证,而非偶然性结果 


● StressMarq 活性ASYN蛋白模型的优点

由活性单体在特定环境下聚集形成PFFs,路易小体的主要成分

可以显现出两种病理特征

使内源性ASYN S129位点超磷酸化,导致突触功能障碍,甚至细胞死亡

运动缺陷出现没那么快,有早期病理进程

虽然ASYN含量也有增高但是更接近人类PD病理状况

相比其它模型,活性ASYN注射更接近实际PD病因进程

Micheal J Fox 科研机构

Polinski, Nicole K et al. “Best Practices for Generating and Using Alpha-Synuclein Pre-Formed Fibrils to Model Parkinson’s Disease in Rodents.” Journal of Parkinson’s disease vol. 8,2 (2018): 303-322. doi:10.3233/JPD-171248

 

帕金森造模用动态学稳定的α突触核蛋白寡聚体(SPR-484)55折促销,详情请咨询上海金畔生物!

 

 


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首批商业投产α-突触核蛋白寡聚体

首批商业投产α-突触核蛋白寡聚体

Stressmarq首批商业投产α-突触核蛋白寡聚体优势:

  • 高含量α-突触核蛋白寡聚体

  • 动态学稳定 (kinetically stable/trapped)

  • 不含任何诱导剂或抑制剂 (多巴胺,EGCG)

  • 可用于活性电泳 (Native PAGE),体内体外检测及疾病建模

  • 全球量产

首批商业投产α-突触核蛋白寡聚体

左图为动态学稳定(kinetically stable) 的α-突触核蛋白寡聚体(SPR-484) 电镜图。该寡聚体没有使用任何诱导剂或抑制剂来锁定寡聚体状态,并且寡聚体含量能达到90%。

SPR-484 的负染色透射电子显微镜图像在 80 Kv 下使用磷钨酸和醋酸铀染色在碳涂层的 400 目铜网格上获得。可以清晰的看到寡聚体结构,并且具有很高的均匀性。

首批商业投产α-突触核蛋白寡聚体

动态学稳定的α突触核蛋白寡聚体(SPR-484) 可在冻融后37℃下孵育两周仍然稳定

(A)冻融一次后的动态学稳定寡聚体的Native PAGE

(B)和(C)分别是冻融一次后的和37℃孵育两周后的尺寸排阻色谱(SEC)

在峰值处,90%SPR-484在冻融后37℃下孵育两周仍然稳定于寡聚体状态

首批商业投产α-突触核蛋白寡聚体

动态学稳定的α突触核蛋白寡聚体(SPR-484) 对多巴胺能神经元有毒性并且可以诱发帕金森病理现象(pSer129)

(A) 经寡聚体处理后 11 天,大鼠原代多巴胺能神经元的存活率由抗 MAP2 抗体量化并表示为对照的百分比

(B) 经寡聚体处理后 11 天,大鼠原代多巴胺能神经元中存在的 α-突触核蛋白 pSer129 水平通过抗 α-突触核蛋白 pSer129 抗体与抗 MAP2 抗体的比率量化,表示为对照的百分比

所有数据经过统计学验证,而非偶然性结果

首批商业投产α-突触核蛋白寡聚体

动态学稳定的α突触核蛋白寡聚体(SPR-484) 在大鼠原代多巴胺能神经元中诱导帕金森相关的pSer129病理现象

(A)用对照PBS缓冲液处理后11天的大鼠原代多巴胺能神经元

(B) 用10 µg/mL SPR-484处理后11天的大鼠原代多巴胺能神经元

细胞核染色蓝色(Hoechst),多巴胺能神经元显示红色(MAP2),病理现象为绿色(α-syn pSer129)

注:SPR-484为E.coli 表达的,在加入神经元之前没有磷酸化

其他类型的α-突触核蛋白:

电镜图来自维多利亚大学 (1型, 纤丝) 和英属哥伦比亚大学 (2型, A53T).


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Stressmarq新产品—α 突触核蛋白寡聚体

Stressmarq新产品—α 突触核蛋白寡聚体

帕金森病属于神经衰退类疾病,对老年人生活质量的影响不容忽视。由于神经衰退疾病发病机制复杂,涉及到的一些错误折叠蛋白无法被深入研究,导致目前帕金森病病因仍不明确,尚没有根治办法。

 

在错误折叠蛋白中,一个不能忽视的蛋白就是 α 突触核蛋白。近些年来有关该蛋白的研究不在少数,但是由于α突触核蛋白的多样性和复杂性,科研学者们很难确定到底是蛋白折叠的哪个环节出现了问题。

α突触核蛋白总的来说分为可溶性单体、寡聚体以及不溶性原纤维,目前的共识是寡聚体是所有 α 突触核蛋白类型中毒性最高的,而且可能是导致蛋白聚集和病理现象扩散的关键。

 

但是由于α突触核蛋白寡聚体大小各异,处于动态平衡状态,很容易聚集形成聚集体或分离成单体,所以目前很难分离出高纯度的寡聚体。虽然目前全球有一些实验室分离出了少量的α突触核蛋白寡聚体,但是却没有达到可以量产并能够提供给其他学者来分析其结构功能的程度。

 

StressMarq 今年全新推出动态学稳定(kinetically stable/trapped)的 α 突触核蛋白寡聚体(SPR-484),该α突触核蛋白寡聚体不含任何诱导剂或抑制剂,可用于活性电泳(native PAGE)、体内体外检测以及疾病建模。由于不含任何诱导剂或抑制剂(多巴胺、茶多酚 EGCG 等),科研学者们可以更直接地研究其结构及其在细胞和活体中的反应,不需要担心其他成分的影响。

 

● StressMarq 实验室 SPR-484 的产品数据,见图1~图4


 Stressmarq新产品---α 突触核蛋白寡聚体

图 1. 动态学稳定的 α 突触核蛋白寡聚体(SPR-484)和 α 突触核蛋白原纤维(SPR-322)电镜图

注:A 为 SPR-484 电镜图;B 为 SPR-322 电镜图。负染色透射电子显微镜图像在 80 Kv 下使用磷钨酸和醋酸铀染色,在碳涂层的 400 目铜网格上获得。

 

 由图1   可以清晰地看到, SPR-484 α突触核蛋白寡聚体呈现圆球 / 短圆柱形状,并且具有很高的均匀性,而 α 突触核蛋白原纤维(SPR-322)则为长条纤维状。SPR-484 α突触核蛋白寡聚体没有使用任何诱导剂或抑制剂来锁定寡聚体状态,并且寡聚体含量能达到 90%。

Stressmarq新产品---α 突触核蛋白寡聚体

图 2. SPR-484 的活性电泳和尺寸排阻色谱(SEC) 

注:A 为冻融一次后的动态学稳定寡聚体的活性电泳。

60 kDa 处出现条带是因为 SPR-484 中含有少量单体,α 突触核蛋白单体是一个内在无序的 14 kDa 的蛋白,由于它在溶液中的伸展结构,游离的 α 突触核蛋白单体在活性电泳和 SEC 中的迁移和球状的 60 kDa 寡聚体类似。而大于 250 kDa 的条带是动态学稳定的 α 突触核蛋白寡聚体。B 和 C 分别是冻融一次后和 37℃ 孵育两周后的 SPR-484 尺寸排阻色谱(SEC)。

 

 由图2  可以看出,即使是在冻融和 37℃ 处理 14 天后,在峰值区域大概仍有 90% 的 SPR-484α突触核蛋白寡聚体稳定于寡聚体状态。

Stressmarq新产品---α 突触核蛋白寡聚体 

图 3. SPR-484 对多巴胺能神经元毒性检测

注:A为经寡聚体处理后 11 天,大鼠原代多巴胺能神经元的存活率由抗 MAP2 抗体量化(对照组设定为 100%);B 为经寡聚体处理后 11 天,大鼠原代多巴胺能神经元中存在的 α 突触核蛋白 pSer129 水平可通过抗 α-突触核蛋白 pSer129 抗体与抗 MAP2 抗体的比率量化(对照组设定为 100%)。

 

 由图3  可以看出,SPR-484 α突触核蛋白寡聚体对多巴胺能神经元有毒性并且可以诱发帕金森病理现象(pSer129)。所有数据经过统计学验证,而非偶然性结果。

 

图 4. SPR-484 处理的大鼠原代多巴胺能神经元(IHC)

注:A 为用对照 PBS 缓冲液处理后 11 天的大鼠原代多巴胺能神经元,B 为用 10 µg/mL SPR-484 处理后 11 天的大鼠原代多巴胺能神经元。

细胞核染色蓝色(Hoechst),多巴胺能神经元显示红色(MAP2),病理现象为绿色(α-syn pSer129)。两个培养基都使用鸡抗-MAP-2 多克隆抗体,小鼠抗-αsyn pSer129-特异的单克隆抗体,Alexa Fluor 488 羊抗小鼠 IgG,Alexa Fluor 647 羊抗鸡 IgG,和荧光标记物 Hoechst 溶于相同的溶液。白色箭头指的是 pSer129 病理现象较强的区域,比例尺代表 100 μm。

注:SPR-484 为 E.coli 表达的,并且蛋白在加入神经元之前没有磷酸化。

 

 由图4  可以看出,动态学稳定的SPR-484α突触核蛋白寡聚体和原纤维一样可以诱发病理现象。

 

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