糖蛋白富集 & 检测酶试剂盒Takara Clontech

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糖蛋白富集 & 检测
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Clontech 635647 Glycoprotein Enrichment Resin 10 ml ¥3,380 糖蛋白富集 & 检测 糖蛋白富集 & 检测 糖蛋白富集 & 检测
Clontech 635648 Glycoprotein Western Detection Kit 20 Rxns ¥2,614 糖蛋白富集 & 检测 糖蛋白富集 & 检测 糖蛋白富集 & 检测
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Code No. 产品名称
635647   Glycoprotein Enrichment Resin
635648   Glycoprotein Western Detection Kit
 
■ 产品描述
Glycoprotein Enrichment Resin用于从血清当中富集糖基化蛋白质,在蛋白质组学研究中能够显著降低样品的复杂性。这种苯基硼酸类的树脂,可以在90 min内富集糖基化蛋白质,产品包装形式灵活,可用于重力流或FPLC纯化。
 
Glycoprotein Western Detection Kit是Glycoprotein Enrichment Resin的辅助产品,用于在Western Blotting实验中对糖基化蛋白质选择性染色。试剂盒使用的是一种改良的过碘酸希夫法,对糖基化蛋白质的碳水化合物部分进行染色,产生有色条带。过碘酸希夫试剂针对的是存在于糖和唾液酸中相邻的二醇基,通常用作一般的糖蛋白染色剂。因此,本试剂盒的检测不依赖抗体,可以快速、灵敏地检测富集的糖蛋白。
 
■ 原理
 
糖蛋白富集 & 检测
Glycoprotein Enrichment Resin是一种硼酸基树脂,能够从复杂样品(例如人血清)中快速、有效、特异性地富集糖基化蛋白质,可以使用简单的重力流方法或中等压力的方法(例如FPLC)进行操作。树脂是偶联了间氨基苯硼酸配体的琼脂糖珠,该配体能够结合存在于糖蛋白分子糖部分内的残基如甘露糖、半乳糖或葡萄糖,与这些糖残基的顺式二醇基团形成可逆的五元环络合物。这种复合物可通过降低pH,或使用含Tris或山梨糖醇的洗脱buffer使其分离。
 
■ 产品特点
灵活、有效、特异性的富集和检测糖基化蛋白质。
· 灵活——使用本树脂可以应用重力流法或FPLC法
· 性能出色——本树脂特异性结合糖蛋白能力更强,而非特异性结合很弱
· 特异性——本树脂对血清中的高、低丰度糖蛋白均能够有效富集
· 快速——90 min内即可完成糖蛋白的富集
· Western Detection Kit可提供快速(1 hr)、灵敏、特异性的不依赖抗体的检测
 
■ 应用
糖蛋白的富集和检测
 
■ 实验例
 
糖蛋白富集 & 检测
通过Western Blotting对Glycoprotein Enrichment Resin纯化产物进行分析,结果显示,该树脂特异性地富集了高丰度和低丰度的血清糖蛋白。图A.使用IgG抗体检测到特异性富集的高丰度血清糖蛋白IgG,lane 1是人血清,lane 2是流穿液,lane 3是洗脱液(糖蛋白)。图B和C是通过Western Blotting对纯化得到的两种特异性的低丰度血清糖蛋白α-1酸性糖蛋白(图B)和α-1抗胰蛋白酶(图C)进行检测的结果,lane 1是人血清,lane 2是洗脱组分,lane 3是洗脱组分。
 
 
 
产品详情请点击:糖蛋白富集 & 检测
 
 

页面更新:2019-11-12 10:52:12

磷蛋白富集试剂盒酶试剂盒Takara Clontech

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磷蛋白富集试剂盒
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Clontech 635624 Phosphoprotein Enrichment Kit 6 Preps ¥4,559 磷蛋白富集试剂盒 磷蛋白富集试剂盒 磷蛋白富集试剂盒
Clontech 635666 Phosphoprotein Enrichment Starter Kit 1 Purification ¥1,023 磷蛋白富集试剂盒 磷蛋白富集试剂盒 磷蛋白富集试剂盒
Clontech 635626 Phosphoprotein Kit-Buffer A 500 ml ¥2,323 磷蛋白富集试剂盒 磷蛋白富集试剂盒
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Code No. 产品名称
635624   Phosphoprotein Enrichment Kit
635666   Phosphoprotein Enrichment Starter Kit
635626   Phosphoprotein Kit – Buffer A
 
■ 产品描述
本制品基于亲和原理,为从哺乳动物细胞和组织中提取磷酸化蛋白质提供了有效方法。富集试剂盒中包含了一整套的buffer和6个高结合力的柱子,用于富集胞质中和膜结合的磷酸化蛋白质,无需考虑例如丝氨酸、酪氨酸或苏氨酸等的氨基酸修饰。
 
这种富集方法的优势:
· 实验操作快速,从细胞到样品纯化的平均时间少于2 h。
· 操作简单直接,包括4步,将提取/上样buffer加到细胞或组织沉淀中来提取细胞总蛋白质,
   然后将提取产物加到亲和纯化柱上,洗涤,最后使用不含清洁剂的Elution Buffer将结合的磷酸化
   蛋白质洗脱下来。
 
磷蛋白富集试剂盒
 
· 一种Buffer多个用途,Extraction/Loading Buffer可以用于蛋白质提取和纯化步骤,
   而不需要更换缓冲液,这样便节省了时间也防止样品丢失。
· 实验过程是非变性的,所以整个过程中磷酸化蛋白质是保持折叠构象的,包括提取和洗脱的步骤。
 
每个纯化柱的最大结合能力约为4 mg磷酸化蛋白质。
 
高选择性富集磷酸化蛋白质
本富集试剂盒可以用于任何类型的哺乳动物细胞。已做过测试的细胞系包括NIH 3T3,HEK 293,HeLa,Cos-7和Jurkat细胞。富集效率很高,已经过Western Blotting分析证实。通过使用磷酸盐比色检测法,可以发现大部分的磷酸化蛋白质都在洗脱液中,在洗涤步骤的组分中只检测到痕量,可以忽略。
使用本试剂盒得到的磷酸化蛋白质是浓缩液,可以使用多种不同的方法进行分析,包括质谱、二维聚丙烯酰胺凝胶电泳(2D-PAGE)等。
 
■ 特点
· 非变性条件下操作,可保持蛋白质的构象和溶解性
· 适用于质谱和2D-PAGE等多种下游应用
· 提高磷酸化检测实验的灵敏度
 
■ 应用
· 质谱样品制备
· 磷酸化分析
· 2D-PAGE样品制备
 
■ 实验例
磷蛋白富集试剂盒
使用本制品可以高效富集磷酸化蛋白质。提取HEK 293细胞的总蛋白质,取大约3 mg加入到本制品提供的磷酸化蛋白质亲和纯化柱上。Lane1是提取产物,Lane2是流穿液,Lane3是洗涤组分,Lane4是洗脱组分,然后分别使用特异性结合磷酸化AKT、PTEN和GSK3β蛋白质的抗体经Western Blotting检测,结果分别如图A、B、C所示,可以看出在洗脱液部分清晰地检测到了磷酸化蛋白质。请注意,样品在凝胶上样之前没有被稀释或浓缩。
 
 
产品详情请点击:磷蛋白富集试剂盒
 
 

页面更新:2019-11-12 10:55:07