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ProspectEdge200气动密度超速分离系统

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ProspectEdge200气动密度超速分离系统

Prospect Edge 200 气动密度 超速分离系统

产品编号：
市场价：￥0.00元
会员价：￥0.00元
品牌：中文
生产厂家：Prospect

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应用领域：

　　Edge 200 可满足以下实验需要：

　　• 蛋白质的密度梯度粗分离

　　• 低丰度蛋白的分离和富集

　　• 寻找和发现生物标志物

　　• 亚细胞生物学，亚细胞组学，细胞生物学

　　• 亚细胞的生物学信息

　　• 药物靶标的发现与检定

　　• 蛋白结合及蛋白相互作用的研究

　　产品介绍：

美国Prospect Biosystems, Inc.公司专利发明的Edge™200气动密度超速分离系统, 是一种易于操作、压缩空气驱动的台式超离系统。它是专门为实现强化密度离心分离技术特殊设计的机械实体。Edge技术是一种非变性的生物样品分离和分组技术。这一突破性的技术采用分步密度梯度分离的方式，其分离溶液的浓度逐步增加, 提供了一个快速的，以生物学的变化为基本的的，简化组织和细胞复杂成分的分离分组新方法。

Edge 200 可在不到一分钟内达到120000 – 150000 xg 离心力。该系统利用密度上的区别，将成分复杂的组织和细胞样品分离成密度明确的不同组分，同时完好保持每一组分中各种亚结构之间的相互关联，使下游进一步的纯化分析和鉴定成为可能。

　　功能特点：

　　◆可用于分离不同密度的亚细胞内结构组织

　　◆样品的完整性和生物学活性得到最佳保护，对发现疾病早期的细胞水平上的细微变化非常重要

　　◆不但可以发现与其生物学上相关的蛋白分子群体或其他标志物分子全体，而且可以定义它们所在的亚细胞组织空间

　　◆Edge 200与其下游的各种分析手段，蛋白转印、单双向电泳、质谱、蛋白质阵列相互配合补充，使生物学样品分析得到最灵敏和最可靠的结果

　　◆原始生物学样品的复杂程度可简化10~20倍

　　◆所需时间可缩短80~90%

　　◆样品回收率大于90%

人和小鼠表面抗原密度及其测量方法

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人和小鼠表面抗原密度及其测量方法

表面抗原密度

细胞携带的抗原或靶分子的数量与阳性群的强度直接相关, 并将决定与其匹配的最佳荧光素。

将荧光强度低的荧光素与高表达抗原配对, 将荧光强度强高的荧光素与低丰度抗原配对, 可以提高细胞群体的分辨率, 但是如何得知抗原密度呢？

本指南列出了一些常见的人和小鼠细胞表面标记物的抗原密度, 以帮助您选择正确的荧光素。另外提供了如何使用抗体结合珠测量抗原密度的方法。

常见人标记物的抗原密度

新鲜分离的外周血细胞表面发现的常见标记物的抗原密度。

人和小鼠表面抗原密度及其测量方法

图 1.21 种常见人类标记的数据。获得每个表面标记物的几何平均荧光强度，并将其转换为抗原密度, 并以对数刻度绘制。图中结果来自于正常人外周血的 4 次独立实验结果。在 Bio-Rad ZE5 流式细胞分析仪上获取数据并在 FlowJo 中进行结果分析。

荧光素亮度

本示例说明了 CD4 与更亮荧光素（PE）配对可以提高分辨率。

人和小鼠表面抗原密度及其测量方法

图 2. 荧光素的相对亮度。外周血 CD4 染色的示例显示了 3 种荧光团从暗（Pacific Blue）到亮（PE）的相对亮度。显示的数据是在 Bio-Rad ZE5 流式细胞分析仪上获得的。

常见小鼠标记物的抗原密度

C57BL/6 小鼠的新鲜分离的脾脏细胞表面的常见标记物的抗原密度。

人和小鼠表面抗原密度及其测量方法

图 3.16 种常见小鼠标记物的数据。获得每个表面标记物的几何平均荧光强度, 并将其转换为抗原密度, 并以对数刻度绘制。图中数据来自于 C57Bl/6 小鼠的 3 次独立实验的结果。在 Bio-Rad ZE5 流式细胞分析仪上获取数据并在 FlowJo 中进行结果分析。

荧光素配对

为了获得最佳结果, 应将低密度抗原与明亮的荧光素配对, 将高密度抗原与较暗的荧光素配对。

人和小鼠表面抗原密度及其测量方法

图 4. 染色示例。 A, 人外周血单核细胞用 CD14 A700 和 CD163 A488 染色。B, 小鼠骨髓细胞用CD11b PB 和 GR-1 FITC 染色。在 Bio-Rad ZE5 流式细胞分析仪上获取数据。

星光染料分类 已上市和待上市染料
StarBright Blue 

（488 nm）

 SBB510,SBB575,

SBB610,SBB670,

SBB700,SBB750,

SBB780
StarBright Violet 

（405 nm）

 SBV440,SBV475,

SBV515,SBV570,

SBV610,SBV670,

SBV710,SBV760,

SBV790

StarBright UV

（355 nm）

 SBUV400,SBUV445,

SBUV510,SBUV575, 

SBUV605,SBUV665, 

 SBUV750,SBUV795

全新流式染料星光系列：更亮的亮度, 更窄的发射波普, 缓冲液兼容性好, 染色一致性好（具体见上表）。

四个简单步骤测量抗原密度

Quantum 系列校准微球有 FITC 和 PE 两种荧光标记可选根据对应的检测抗体的荧光素来选择, 微球大小近似于人类淋巴细胞, 中级强度的试剂盒可以很好地涵盖典型细胞样品的范围。结合标准曲线, 可以计算待检测抗原的密度。该种方法也可用于确定流式细胞仪线性度。

1、滴定抗体

通过合适的抗体浓度找到最佳的染色指数。

人和小鼠表面抗原密度及其测量方法

2、微球染色

确保微球的量是饱和的。珠子的荧光强度随着抗体结合能力 ( ABC ) 而增强。

人和小鼠表面抗原密度及其测量方法

3、创建标准曲线

使用半高/全宽门测量几何平均值, 创建针对抗体结合能力的荧光标准曲线。

人和小鼠表面抗原密度及其测量方法

4、测量抗原密度

使用阳性群体的几何平均荧光强度, 可以计算感兴趣细胞上任何抗原的密度。

Bio-Rad 于 2013 年 1 月收购了知名抗体公司 AbD Serotec。该公司成立于 1982 年, 总部位于英国牛津。提供上万种抗体和免疫学试剂、单抗制备和多种规模的抗体生产和标记服务。其宗旨为生产高质量的抗体和免疫学试剂。该公司拥有最具特色的大鼠 CD68 单抗（克隆号: ED1）; 抑制素 A 检测试剂盒为专利产品; 将 SpyTag 技术引入 HuCAL 平台, 提供非动物来源的抗体定制服务。

更多信息可咨询Bio-Rad代理商-上海金畔生物