cart细胞治疗及其副作用

cart细胞治疗及其副作用

你的免疫系统通过跟踪你体内正常存在的所有物质来工作。任何免疫系统无法识别的新物质都会发出警报,导致免疫系统攻击它。

嵌合抗原受体(CAR)T细胞疗法是一种让免疫细胞T细胞(一种白血球)在实验室中进行改变,从而发现并摧毁癌细胞的方法。CAR T细胞疗法有时也被称为一种基于细胞的基因疗法,因为它涉及改变T细胞内的基因以帮助它们攻击癌症。

这种类型的治疗对治疗某些类型的癌症非常有帮助,即使其他治疗不再有效。

CAR T细胞疗法的工作原理

免疫受体和外来抗原

免疫系统通过在细胞表面发现称为抗原的蛋白质来识别体内的异物。被称为T细胞的免疫细胞有自己的蛋白质,称为受体,它附着在外来抗原上,并帮助触发免疫系统的其他部分破坏外来物质。

抗原和免疫受体之间的关系就像一把锁和一把钥匙。正如锁只能用正确的钥匙打开一样,每个外来抗原都有一个独特的免疫受体,能够与之结合。

癌细胞也有抗原,但如果你的免疫细胞没有正确的受体,它们就不能附着抗原并帮助破坏癌细胞。

嵌合抗原受体(CARs)

在CAR T细胞疗法中,T细胞取自患者的血液,并在实验室通过添加人造受体(称为嵌合抗原受体或CAR)的基因进行改变。这有助于他们更好地识别特定的癌细胞抗原。然后将CAR T细胞返回给患者。

由于不同的癌症有不同的抗原,每辆车都是针对特定的癌症抗原制造的。例如,在某些类型的白血病或淋巴瘤中,癌细胞有一种称为CD19的抗原。治疗这些癌症的CAR T细胞疗法是为了与CD19抗原结合,对不含CD19抗原的癌症无效。

接受CAR T细胞治疗

CAR T细胞治疗过程可能需要数周时间。

收集T细胞

首先,使用一种称为白细胞分离的方法从患者血液中去除白细胞(包括T细胞)。在此过程中,患者通常躺在床上或坐在躺椅上。需要两条静脉输液管,因为血液通过一条管线排出,白细胞分离出来,然后血液通过另一条管线返回体内。有时会使用一种称为中心静脉导管的特殊类型的静脉输液管,它内置两条静脉输液管。

在手术过程中,患者需要坐着或躺下2至3小时。有时在白细胞去除术中血钙水平会下降,这会导致麻木、刺痛或肌肉痉挛。这可以很容易地通过更换钙来治疗,钙可以通过口服或静脉注射。

制造汽车T细胞

去除白细胞后,分离T细胞,送往实验室,并通过添加特异性嵌合抗原受体(CAR)基因进行改变。这使他们成为汽车T细胞。然后这些细胞在实验室中生长和繁殖。可能需要几周的时间才能制造出这种治疗所需的大量CAR T细胞。

接受CAR T细胞输注

一旦制造出足够的CAR T细胞,它们将被送回患者体内。在CAR T细胞输注前几天,患者可能会接受化疗,以帮助降低其他免疫细胞的数量。这使CAR T细胞有更好的机会被激活以对抗癌症。这种化疗通常不是很强,因为CAR T细胞在有癌细胞攻击时效果最好。一旦CAR T细胞开始与癌细胞结合,它们的数量就会开始增加,并有助于摧毁更多的癌细胞。

认可的CAR T细胞疗法

CAR T细胞疗法被FDA批准用于治疗某些类型的淋巴瘤、白血病以及多发性骨髓瘤。CAR T细胞治疗通常在尝试其他类型的治疗后使用。

目前批准的CAR T细胞疗法包括:

Tisagenlecleucel,也称为tisa cel(Kymriah)

Axicabtagene ciloleucel,也称为axi-cel(叶斯卡塔)

Brexucabtagene autoleucel,也称为brexu cel(Tecartus)

liso-Tagene Maraluel,也称为liso-cel(Breyanzi)

Idecabtagene Vicluel,也称为ide cel(Abecma)

许多其他CAR T细胞疗法(以及类似类型的疗法)正在临床试验中进行研究,希望也能治疗其他类型的癌症。

可能的CAR T细胞治疗副作用

CAR T细胞疗法对某些难以治疗的癌症非常有效,但有时也会导致严重甚至危及生命的副作用。因此,它需要在经过专门培训的医疗中心使用,患者在获得CAR T细胞后需要被密切观察数周。

细胞因子释放综合征(CRS):随着CAR T细胞的增殖,它们可以向血液中释放大量称为细胞因子的化学物质,从而增强免疫系统。此版本的严重副作用可能包括:

高烧寒战

呼吸困难

严重恶心、呕吐和/或腹泻

感到头晕或头晕

头痛

心跳加快

感觉很累

肌肉和/或关节疼痛

随着医生在CAR T细胞治疗方面获得更多经验,他们正在学习如何早期识别CRS,以及如何治疗CRS。

神经系统问题:这种治疗有时会对神经系统产生严重影响,从而导致以下症状:

头痛

意识的变化

混乱或骚动

发作

颤抖或抽搐(震颤)

说话和理解困难

失去平衡

由于存在这些副作用的风险,通常建议成年患者在接受治疗后至少几周内不要驾驶、操作重型机械或进行任何其他潜在危险的活动。

其他严重副作用:CAR T细胞治疗的其他可能严重副作用包括:

输液过程中的过敏反应

血液中矿物质含量异常,如低钾、低钠或低磷

免疫系统减弱,严重感染的风险增加

低血细胞计数会增加感染、疲劳、瘀伤或出血的风险

如果您正在接受CAR T细胞治疗,立即向您的医疗团队报告任何副作用是非常重要的,因为通常有药物可以帮助治疗这些副作用。

原文标题:CAR T-cell Therapy and Its Side Effects,部分内容翻译可能有误,请以原文为准,本篇仅供参考。

ENZO⾃噬相关⾼灵敏抗体和纯化蛋⽩及其它产品

ENZO⾃噬相关⾼灵敏抗体和纯化蛋⽩及其它产品

Enzo Life Sciences⾃噬解决⽅案,⽆需昂贵的设备,冗⻓的实验周期。以下是⾃噬相关⾼灵敏抗体和纯化蛋⽩及其它产品介绍,如需购买,请联系我们的国内代理商-上海金畔生物。

⾃噬相关⾼灵敏抗体和纯化蛋⽩

自噬相关抗体和蛋白
货号 产品名称 中文名 货号 产品名称 中文名
BML-SE491-0005 AMPK (human), (recombinant) (His-tag) 腺苷5′-一磷酸(AMP)蛋白激酶 ADI-905-721-100 Beclin1 polyclonal antibody Beclin 1抗体
ALX-803-080 LC3B monoclonal antibody (5F10) LC3抗体 ADI-APR-100 LC3-I (human) (recombinant) (His-tag) LC3-I重组蛋白
ALX-215-065 mTOR (human FRB Domain) polyclonal antibody mTOR抗体 ADI-905-687 mTOR polyclonal antibody mTOR抗体
BML-PW1125 Nbr1 (human) polyclonal antibody Nbr1抗体 BML-PW9860 p62 (human) polyclonal antibody p62抗体

其他⾃噬相关的产品 

货号 产品名称 规格
ENZ-51034 LYSO-ID® Green Detection Kit 200 test , microscopy
ENZ-51005 LYSO-ID® Red Detection Kit

(GFP-CERTIFIED®)

microscopy
ENZ-51015 LYSO-ID® Red Cytotoxicity Kit (GFP-CERTIFIED®) microplates
ENZ-51035 PROTEOSTAT® Aggresome

Detection Kit

flow cytometry and

fluorescence microscopy

ENZ-52252 MM4-64 Fluorescent Dye for

Autophagy in Yeas

1*1mg

更多详情请咨询Enzo Life Sciences代理商-上海金畔生物

人和小鼠表面抗原密度及其测量方法

人和小鼠表面抗原密度及其测量方法

表面抗原密度

细胞携带的抗原或靶分子的数量与阳性群的强度直接相关, 并将决定与其匹配的最佳荧光素。

将荧光强度低的荧光素与高表达抗原配对, 将荧光强度强高的荧光素与低丰度抗原配对, 可以提高细胞群体的分辨率, 但是如何得知抗原密度呢?

本指南列出了一些常见的人和小鼠细胞表面标记物的抗原密度, 以帮助您选择正确的荧光素。另外提供了如何使用抗体结合珠测量抗原密度的方法。

常见人标记物的抗原密度

新鲜分离的外周血细胞表面发现的常见标记物的抗原密度。

人和小鼠表面抗原密度及其测量方法

图 1.21 种常见人类标记的数据。获得每个表面标记物的几何平均荧光强度,并将其转换为抗原密度, 并以对数刻度绘制。图中结果来自于正常人外周血的 4 次独立实验结果。在 Bio-Rad ZE5 流式细胞分析仪上获取数据并在 FlowJo 中进行结果分析。

荧光素亮度

本示例说明了 CD4 与更亮荧光素(PE)配对可以提高分辨率。

人和小鼠表面抗原密度及其测量方法

图 2. 荧光素的相对亮度。外周血 CD4 染色的示例显示了 3 种荧光团从暗(Pacific Blue)到亮(PE)的相对亮度。显示的数据是在 Bio-Rad ZE5 流式细胞分析仪上获得的。

常见小鼠标记物的抗原密度

C57BL/6 小鼠的新鲜分离的脾脏细胞表面的常见标记物的抗原密度。

人和小鼠表面抗原密度及其测量方法

图 3.16 种常见小鼠标记物的数据。获得每个表面标记物的几何平均荧光强度, 并将其转换为抗原密度, 并以对数刻度绘制。图中数据来自于 C57Bl/6 小鼠的 3 次独立实验的结果。在 Bio-Rad ZE5 流式细胞分析仪上获取数据并在 FlowJo 中进行结果分析。

荧光素配对

为了获得最佳结果, 应将低密度抗原与明亮的荧光素配对, 将高密度抗原与较暗的荧光素配对。

人和小鼠表面抗原密度及其测量方法

图 4. 染色示例。 A, 人外周血单核细胞用 CD14 A700 和 CD163 A488 染色。B, 小鼠骨髓细胞用CD11b PB 和 GR-1 FITC 染色。在 Bio-Rad ZE5 流式细胞分析仪上获取数据。

星光染料分类 已上市和待上市染料
StarBright Blue 

(488 nm)

SBB510,SBB575,

SBB610,SBB670,

SBB700,SBB750,

SBB780

StarBright Violet 

(405 nm)

SBV440,SBV475,

SBV515,SBV570,

SBV610,SBV670,

SBV710,SBV760,

SBV790

StarBright UV

(355 nm)

SBUV400,SBUV445,

SBUV510,SBUV575, 

SBUV605,SBUV665, 

 SBUV750,SBUV795

全新流式染料星光系列:更亮的亮度, 更窄的发射波普, 缓冲液兼容性好, 染色一致性好(具体见上表)。

四个简单步骤测量抗原密度

Quantum 系列校准微球有 FITC 和 PE 两种荧光标记可选根据对应的检测抗体的荧光素来选择, 微球大小近似于人类淋巴细胞, 中级强度的试剂盒可以很好地涵盖典型细胞样品的范围。结合标准曲线, 可以计算待检测抗原的密度。该种方法也可用于确定流式细胞仪线性度。

1、滴定抗体

通过合适的抗体浓度找到最佳的染色指数。

人和小鼠表面抗原密度及其测量方法

2、微球染色

确保微球的量是饱和的。珠子的荧光强度随着抗体结合能力 ( ABC ) 而增强。

人和小鼠表面抗原密度及其测量方法

3、创建标准曲线

使用半高/全宽门测量几何平均值, 创建针对抗体结合能力的荧光标准曲线。

人和小鼠表面抗原密度及其测量方法

4、测量抗原密度

使用阳性群体的几何平均荧光强度, 可以计算感兴趣细胞上任何抗原的密度。

Bio-Rad 于 2013 年 1 月收购了知名抗体公司 AbD Serotec。该公司成立于 1982 年, 总部位于英国牛津。提供上万种抗体和免疫学试剂、单抗制备和多种规模的抗体生产和标记服务。其宗旨为生产高质量的抗体和免疫学试剂。该公司拥有最具特色的大鼠 CD68 单抗(克隆号: ED1); 抑制素 A 检测试剂盒为专利产品; 将 SpyTag 技术引入 HuCAL 平台, 提供非动物来源的抗体定制服务。

更多信息可咨询Bio-Rad代理商-上海金畔生物

神经退行性病变&阿尔茨海默症研究及其产品

神经退行性病变&阿尔茨海默症研究及其产品

神经退行性病变

神经退行性病变是大脑特定区域神经元细胞的缓慢进行性失活,是阿尔茨海默病和帕金森病的主要病理特征,分别导致痴呆(认知功能丧失)或共济失调(运动受损)。神经退行性疾病的潜在病理生理学被认为是由蛋白质错误折叠和聚集、蛋白质清除不足、线粒体功能障碍、能量代谢改变、轴突运输中断、神经炎症或 RNA 介导的毒性引起的氧化应激反应。在疾病的进展过程中,病理内含物和相关的毒性似乎以一种特定的模式通过神经系统传播。

以蛋白质错误折叠为治疗靶向的药物研发独具挑战,主要原因有以下几个:

• 涉及的蛋白质种类的动态特性。

• 不确定是哪种形式的致病蛋白 (单体, 寡聚体,或不溶性聚集体) 主导了细胞毒性。

• 缺乏用于临床试验的经过充分验证过的生物标志物。

StressMarq Biosciences 开发了一系列用于神经退行性疾病研究的单体、原纤维和寡聚体蛋白制剂,包括 α 突触核蛋白、β 突触核蛋白、γ 突触核蛋白、tau、β 淀粉样蛋白、SOD1和 TTR。

阿尔茨海默症

阿尔茨海默症 (AD) 是痴呆症的一种主要形式,占全世界痴呆症病例的 70%。衰老是该病最重要的诱因,呈常染色体显性遗传,几乎完全外显为早发型AD。随着疾病的进展,可观察到与 tau(微管相关蛋白)和β淀粉样蛋白病理学(淀粉样蛋白沉积)相关的突触丧失;神经元丧失发生在受影响最严重的区域,导致认知缺陷,例如语言困难和方向感障碍。

特色产品

TAU / 单体
产品描述 目录号
Tau441 (2N4R) 野生型单体 (人源) SPR-479
Tau441 (2N4R) P301S 突变型

单体 (人源)

SPR-327
Tau441 (2N4R) P301S 突变型

单体 (小鼠源)

SPR-474
Tau441 (2N4R) P301S 突变型

单体 (人源)

SPR-473
Tau 截短片段 (AA297-391) (dGAE) 单体 (

人源)

SPR-444
Tau 截短片段 (AA297-391) (dGAE

C322A) 单体 (人源)

SPR-445
Tau (K18) P301L 突变型单体 (人源) SPR-328
Tau (K18) Delta K280 突变型

单体 (人源)

SPR-476
前体原纤维 (PFFs)
产品描述 目录号
Tau441 (2N4R) 野生型前体原纤维 (人源) SPR-480
Tau441 (2N4R) P301S 突变型

前体原纤维 (人源)

SPR-329
Tau441 (2N4R) P301S 突变型

前体原纤维: ATTO 488 (人源)

SPR-329-A488
Tau441 (2N4R) P301S 突变型

前体原纤维 (人源)

SPR-471
Tau441 (2N4R) P301S 突变型

前体原纤维 (小鼠源)

SPR-475
Tau441 (2N4R) P301S 突变型

纤丝 (人源)

SPR-463
Tau 截短片段 (AA297-391) (dGAE) 前体

原纤维 (人源)

SPR-461
Tau 截短片段 (AA297-391) (dGAE

C322A) 前体原纤维 (人源)

SPR-462
Tau (K18) P301L 突变型前体原纤维 (人源) SPR-330
Tau (K18) Delta K280 突变型

前体原纤维 (人源)

SPR-477

AD 神经病理学的特征包括细胞内和细胞外蛋白质聚集体的沉积。异常磷酸化的tau形成的成对螺旋丝(PHF),在神经元核周体(细胞体,神经元的非突起部分)和营养不良的神经突(异常的神经元突起)中聚集成神经纤维缠结(NFT)。AD的第二个病理学标志是β淀粉样肽的β-折叠集合体在细胞外沉积,形成弥漫性老年斑。淀粉样蛋白前体蛋白(APP)的裂解导致β淀粉样蛋白原纤维的形成。尽管β淀粉样蛋白和 tau 在 AD 病理学中起着关键作用,但靶向β淀粉样蛋白或tau的药物迄今为止取得的成功非常有限。

特色产品

BETA-淀粉样蛋白
单体
产品描述 目录号

Beta-淀粉样蛋白 1-42 肽 (HFIP,

单体) (人源)

SPR-485
寡聚体
产品描述 目录号
Beta-淀粉样蛋白 1-42 寡聚体 (人源) SPR-488
前体原纤维 (PFFs)
产品描述 目录号
Beta-淀粉样蛋白 1-42 前体原纤维 (PFFs)

 (人源)

SPR-487

StressMarq 生产的产品可帮助研究人员发现新的遗传风险因素、研究疾病机制、确定用于早期诊断的候选生物标志物和潜在的药物靶点。 StressMarq 还生产一系列针对各种形式 Tau 的抗体,包括磷酸化 Tau、总 Tau 和 dGAE 截短形式的 Tau。

在 DMSO/dH2O 中重悬后,在TEM、AFM 和使用抗淀粉样蛋白 β 抗体的蛋白质印迹下观察,淀粉样蛋白 β42呈现为不含原纤维的单体肽,淀粉样蛋白 β42 寡聚体呈现为球状寡聚体并具有独特的二聚体/三聚体和寡聚体信号,而淀粉样蛋白 β42 PFF呈现为长链。

如需了解更多详情或咨询相关产品,请联系StressMarq代理商——上海金畔生物

细胞周期及其检测

细胞周期及其检测

细胞周期Cell cycle是指从一次细胞分裂形成子细胞开始到下一次细胞分裂形成子细胞为止所经历的过程,反映细胞增殖的速度。

一个完整的细胞周期包含间期和分裂期(M期)两个阶段。间期又分为DNA合成前期(G1期)、DNA合成期(S期)和DNA合成后期(G2期),处于不同时期的细胞的DNA含量存在差异。一般认为,G1期细胞具有增殖活性,参与细胞周期循环,是二倍体细胞;S期细胞,DNA 含量逐渐增加,从二倍体变成四倍体,随后进入G2期,最终进入M期。研究表明,细胞周期检测分析对人肿瘤的诊断预后具有很高的价值。

检测细胞周期常用的方法是检测DNA含量,可以选择能与DNA结合的荧光染料(如PI等),再根据细胞各个时期DNA含量不同从而荧光强度不同的方法,分析各个阶段的细胞比例。

如需咨询相关产品,可咨询金畔在线客服。

流式细胞术 / 细胞周期检测

当天检测的活细胞样本

( 1 ) 收集2×105 – 1×106个细胞,离心弃上清。用PBS洗涤一次,离心弃上清。

( 2 ) 加入1mL DNA staining solution和10μL Permeabilization solution,涡旋振荡5 – 10秒混匀。室温避光孵育30分钟。

( 3 ) 选择最低上样速度,在流式细胞仪上进行检测。如需在荧光显微镜下观察,则离心细胞,弃上清,加入新鲜缓冲液重悬。滴加1滴细胞悬液至载玻片,盖上盖玻片后使用合适的滤光片进行观察。

当天无法检测的活细胞样本

( 1 ) 按照下述方法固定,或其他合适的方法固定

(a) 收集2×105 – 1×106个细胞,离心弃上清。轻弹管壁,使沉淀重悬在残余的液体中,加入1 mL 室温下的PBS。

(b) 将细胞缓慢加入3 mL无水乙醇(- 20℃预冷)中,边加边高速搅拌。- 20℃固定过夜,可保存数月。

( 2 ) 检测当天,将固定细胞离心,弃去乙醇,轻弹管壁使沉淀松散,加入2 – 5 mL 室温下的PBS,放置15分钟使细胞再次水化。离心,弃上清。

( 3 ) 加入1 mL DNA staining solution,涡旋振荡5 – 10秒混匀。室温避光孵育30分钟。

( 4 ) 选择最低上样速度,在流式细胞仪上进行检测。如需在荧光显微镜下观察,则离心细胞,弃上清,加入新鲜缓冲液重悬。滴加1滴细胞悬液至载玻片,盖上盖玻片后使用合适的滤光片进行观察。

更多详情请咨询上海金畔生物

链亲和素及其它蛋白

链亲和素及其它蛋白

链亲和素及其它蛋白

 

产品系列 产品名称 产品编号 产品描述
Purification Proteins Protein A FC20 与人IgG1,IgG2, IgG4,小鼠IgG2a and IgG2b高亲和性(重链Fc端结合) 
Streptavidins Streptavidin SA10 比活性:≥14.0U/mg
规格:1mg, 100mg, 1000mg
Streptavidin-plus® SA20 比活性:≥14.0U/mg
规格:10mg, 100mg 
Streptavidin-plus® (recombinant) SA26 比活性:>15.0U
规格:10mg,100mg, 1000mg
Streptavidin Enzyme Conjugates Streptavidin-Alkaline Phosphatase Conjugate CJ30A 适用于ELISA, IHC
Streptavidin-Horseradish Peroxidase Conjugate (ELISA) CJ30H 适用于ELISA
Streptavidin-Horseradish Peroxidase Conjugate (IHC) CJ31H 适用于IHC
Immobilized Streptavidin Streptavidin-Agarose CJ30R 生物素结合能力:≥100nmol/ml gel
Conjugate Stabilizers Alkaline Phosphatase Conjugate Stabilizer CJ90 规格:125ml, 500ml, 1L
Horseradish Peroxidase Conjugate Stabilizer CJ95 规格:125ml, 500ml, 1L
Marker Enzymes β-Galactosidase BG13 比活性:>750U/mg
蛋白浓度:>20mg/ml
产品系列 产品名称 产品编号 产品描述
Protein Separation Standards Phosphorylase b (rabbit muscle) MW10 蛋白浓度:>20 mg/ml
β-Galactosidase (Escherichia coli) BG11 蛋白浓度:>20 mg/ml
Phosphorylase b (rabbit muscle), AMP-free in 50% glycerol. MW12 N/A
Myosin (rabbit skeletal muscle) MW20 蛋白浓度:≥20 mg/ml
Lentil Lectin (Lens culinaris) MW30 规格:5mg, 100mg
Protease Standards Factor Xa (lyophilized) CP13 内切蛋白酶,源自牛血浆