单克隆抗体与多克隆抗体的区别

单克隆抗体与多克隆抗体的区别

单克隆抗体和多克隆抗体,虽然只有一字之差,但是两者的区别,还是比较大的,本篇欣欣就为各位科研的老师们整理单克隆抗体与多克隆抗体的区别,供大家参考使用。

单克隆抗体

特点:

不易产生批次间差异。

仅由一种抗体亚型组成(例如 IgG1、IgG2、IgG3)。如需使用二抗进行检测,应针对正确的亚类选择抗体。

抗体制备:

技术要求较高。

应用技术之前需接受专门培训。

需要花费较长时间制备杂交瘤细胞。

优点:

制得的杂交瘤细胞为持续且可再生产的单克隆抗体来源,而且所有批次均相同,有助于提升实验过程和实验结果的一致性和标准化水平。

单克隆抗体只检测每个抗原上的一个表位,因此具有以下优点:

切片和细胞染色产生的背景信号更少。特异性地检测一个靶表位,不易与其它蛋白质发生交叉反应。

由于具有高特异性,单克隆抗体非常适于用作实验中的一抗,其产生的背景染色信号通常显著低于多克隆抗体。

相较于多克隆抗体,单克隆抗体的同质性非常高。在相同的实验条件下,单克隆抗体实验之间的结果重现性非常高。

得益于其高特异性,单克隆抗体能够在相关分子的混合物中(例如在亲和纯化过程中)极为高效地结合抗原。

缺点:

特异性过高,以致于无法进行跨物种的检测。

与多克隆抗体相比,更易受化学处理造成的抗原表位丢失的影响。这可通过合并靶抗原相同的两种或多种单克隆抗体进行补偿(例如使用抗体组合试剂盒)。

多克隆抗体


特点:


识别任一抗原上的多个表位。所得血清为异质性抗体混合物,其亲和力各有不同。

多克隆抗体主要由 IgG 亚类组成。

通常使用多肽免疫原制备以独有表位为靶标的多克隆抗体,尤其是针对高同源性的蛋白家族。

抗体制备:

制备成本低廉且制备速度较快。

制备过程比单克隆抗体简单。

优点:

多克隆抗体可识别任一抗原上的多个表位,因此具有以下优点:

高亲和性:由于靶蛋白上的多个表位能够结合不止一个抗体分子,多克隆抗体可放大低表达水平靶蛋白的信号。但是,这会影响定量实验(如流式细胞术实验)结果的准确性。

可识别多个表位,有利于免疫沉淀 (IP) 和染色质免疫沉淀 (ChIP) 实验获得更好的结果。

与单克隆抗体相比,对微小抗原变化(例如多态性、糖基化异质性或者轻微变性)的包容性更强。

可识别与免疫原蛋白质具有高度同源性的蛋白质,还可用于筛查非免疫原物种的靶蛋白。

通常是检测变性蛋白质的首选。

多表位通常可提升检测的稳定性。

缺点:

易产生批次间差异。

产生大量非特异性抗体,可能会在某些应用中产生背景信号。

由于具有多个表位,检测免疫原序列的交叉反应性非常重要。

不适用于探测抗原的特定结构域,因为抗血清通常会识别多个结构域。

单克隆与多克隆抗体的主要区别总结:

单克隆抗体
多克隆抗体
制备成本高昂 制备成本低廉
应用技术之前需接受专门培训 制备技能要求不高
需要较长的时间制备杂交瘤细胞 制备速度较快
产生大量特异性抗体 产生大量非特异性抗体
仅识别一个抗原上的单一表位 识别任一抗原上的多个表位
制得的杂交瘤细胞为持续且可再生产的单克隆抗体来源 批次间可能存在差异
批次间无差异或差异较小

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多克隆抗体和单克隆抗体的区别详解

多克隆抗体和单克隆抗体的区别详解

多克隆抗体和单克隆抗体的区别:

多克隆抗体 单克隆抗体
 与抗原上不同表位结合的多种不同抗体  只识别抗原上一种表位的单一抗体
 非表位特异的  表位特异的
 与相似抗原有更高的交叉反应 低交叉反应
可能有较高背景干扰 低背景干扰
 各批次有所不同 每批次完全一致
 成本较低 成本较高
 制备耗时短 (约3个月) 制备耗时长 (约6个月)
多种宿主物种可选 宿主物种选择不多

什么是单克隆抗体?

Monoclonal-Antibodies-Icon/单克隆抗体定义:

单克隆抗体是仅与目标抗原某一特定表位结合的单一抗体

单克隆抗体的制备

单克隆抗体制备时首先要将免疫原注射到宿主动物体内,当免疫原诱发宿主产生免疫反应,脾脏就会产生大量不同种类的B-细胞。此时单一的B-细胞被提取出来,与骨髓瘤细胞杂交 (癌症B-细胞)。

之所以要将B-细胞与骨髓瘤细胞杂交,是因为健康正常的脾细胞无法在细胞培养基无限存活,而与骨髓瘤细胞杂交形成杂交瘤细胞后,该细胞就成为永生化胞株,不断产生抗体。

单一B-细胞从脾脏中分离,形成杂交瘤细胞后,产生的抗体就是单一抗体,只与目标抗原上某一特定的表位反应。

每一个杂交瘤生产出单一的单克隆抗体,这个杂交瘤就被赋予一个克隆号,以此来方便辨别这个特异的抗体是识别哪一个特定的表位。

B-细胞将单克隆抗体分泌至细胞培养基中,然后提取出来做后续的检测和纯化。

一旦单克隆抗体杂交瘤克隆生成,该克隆就十分稳定,可以重复使用,这就确保了每一批次的抗体是完全一致的。

杂交瘤也可以被注射到小鼠的腹腔中大量生产,杂交瘤分泌富含抗体的一种液体,被称作腹水,用注射器抽取,就可获得大量的单克隆抗体。

单克隆抗体适用于:

检测单一抗原

检测蛋白质家族的单一成员

不同实验/批次的结果稳定一致

细胞染色背景较低-很适用于IHC、ICC、IF等应用

量化蛋白质表达(例:流式或荧光细胞分选)

探测分子结构变化

探测磷酸化状态变化

为X射线晶体学探测目标

免疫治疗

单克隆抗体不建议用于:

根据同源性检测不同物种的目标蛋白

检测浓度较低的目标蛋白

检测形态变化了的蛋白

什么是多克隆抗体?

Polyclonal-Antibodies-Icon/多克隆抗体定义

多克隆抗体是与目标蛋白上多种不同表位结合的多种不同抗体。

多克隆抗体制备

多克隆抗体的第一步和单克隆抗体一样,都是将免疫原注射到宿主体内产生免疫反应,激活了多种B细胞。不同的是免疫过后,多克隆抗体就直接从免疫宿主的血清中分离出来,或纯化,没有与骨髓瘤细胞融合的过程。一旦宿主动物死亡,需要免疫新的动物,这时血清中的抗体就会有所不同。

根据制备方法的不同,功能自然也就有所不同了。虽然多抗每批次有轻微差别,但是因为它识别的表位多,这个差别影响并不算太大,而单克隆抗体虽然价格偏高,可是特异性更强更稳定。

多克隆抗体适用于:

检测有高同源性的抗原的已知或未知同种型

检测浓度较低的抗原

捕获尽可能多的抗原(例:IP或ChIP)

检测变性的蛋白

检测可能发生了糖基化或形态变化的目标蛋白

用多种检测方法检测一种原蛋白时

检测pH和盐度不同的溶液中的目标蛋白

多克隆抗体不建议用于:

量化检测,例:流式。由于不同表位的结合导致信号被放大加强,可能会导致结果不准确

当高同源性蛋白的交叉反应会引起问题时

StressMarq 提供大量单克隆和多克隆抗体,为研究人员提供更多的可选择性,以便更好的应用于实验。

如果您需要帮助选择适合您实验的抗体,请咨询金畔技术人员。

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抗体如何选择?选单克隆还是多克隆?

抗体如何选择?选单克隆还是多克隆?

使用抗体时选单抗还是多抗?相信很多同学都有这个疑问,单克隆抗体和多克隆抗体有什么区别呢?这个问题问得好,因为它们无论是在生产过程还是用途上都非常不同,了解了这些知识以后对选择合适抗体有很大的帮助。本篇总结了很多资料,下面就来给大家一一解答。

首先列出一个表格,让大家对多克隆抗体和单克隆抗体有一个简单的认识和对比

多克隆抗体 单克隆抗体
与目标蛋白上不同表位结合的多种不同抗体 只识别目标蛋白上一种表位的单一抗体
非表位特异的 表位特异的
与相似抗原有更多的交叉反应 交叉反应少
背景干扰较高 背景干扰低
各批次抗体有所不同 每批次抗体完全一样
成本较低 成本较高
制备耗时短 (大约 3 个月) 制备耗时较长 (大约 6 个月)
很多宿主物种可选 宿主物种选择不多

那么到底什么是单克隆抗体呢?

单克隆抗体的定义:单克隆抗体是仅与目标蛋白某一特定表位结合的单一抗体。

单克隆抗体的制备

简单来说就是将免疫原注射到宿主动物体内产生免疫反应,之后把B细胞从脾脏中移出,单种B细胞与骨髓瘤细胞融合为B细胞杂交瘤,成为一个永生化胞株。这样一来,杂交瘤的B细胞就会一直产出只识别单一表位的单克隆抗体,通常这个胞株会有一个特定的克隆号(clone number),用来与其他胞株区分。

杂交瘤接下来可以被注射到小鼠的腹腔中大量生产,杂交瘤分泌富含抗体的一种液体,被称作腹水,用注射器抽取纯化,就可获得大量的单克隆抗体。

单克隆抗体更适用于:

  • 检测单一抗原

  • 检测蛋白质家族的单一成员

  • 不同实验/批次的抗体检测结果稳定一致

  • 细胞染色背景较低-很适用于IHC、ICC、IF 等应用

  • 量化蛋白质表达 (例:流式或荧光细胞分选)

  • 探测分子结构变化

  • 探测磷酸化状态的变化

  • 为X射线晶体测试探测目标

  • 制作缺少特定细胞类型的动物模型

  • 免疫治疗

  • 单克隆抗体不建议用于:

  • 根据同源性检测不同物种的目标蛋白

  • 检测浓度较低的目标蛋白

  • 检测形态变化了的蛋白

什么是多克隆抗体呢?

多克隆抗体定义:多克隆抗体是指与目标蛋白上多种不同表位结合的多种不同抗体.

多克隆抗体制备

多克隆抗体的第一步和单克隆抗体一样,都是将免疫原注射到宿主体内产生免疫反应,激活了多种B细胞。不同的是免疫过后,多克隆抗体就直接从免疫宿主的血清中分离出来,或接着进行纯化,没有与骨髓瘤细胞融合的过程。一旦宿主动物死亡,需要免疫新的动物,这时血清中的抗体就会有所不同。

虽然多抗每批次有轻微差别,但是因为它识别的表位多,这个差别影响并不算太大,而单克隆抗体虽然价格偏高,可是特异性更强更稳定。可以说单抗和多抗是各有各的优点。

多克隆抗体更适用于:

  • 检测有高同源性的抗原的已知或未知同种型

  • 检测浓度较低的抗原

  • 捕获尽可能多的抗原 (例如 IP 或 ChiP)

  • 检测变性的蛋白

  • 检测可能发生了糖基化或形态变化的目标蛋白

  • 用多种检测方法检测一种原蛋白时

  • 检测 pH 和盐度不同的溶液中的目标蛋白

多克隆抗体不建议用于:

  • 量化检测,比如:流式。由于不同表位的结合导致信号被放大加强,可能会导致结果不准确

  • 当高同源性蛋白的交叉反应会引起问题时

更多详情请咨询上海金畔生物

基因编辑后克隆基因型确认酶试剂盒Takara Clontech

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基因编辑后克隆基因型确认
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Clontech 632611 Guide-it Genotype Confirmation Kit 100 Rxns ¥6,313 基因编辑后克隆基因型确认 基因编辑后克隆基因型确认 基因编辑后克隆基因型确认
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基因编辑后克隆基因型确认
Guide-it Genotype Confirmation Kit
每个细胞中大部分基因都拥有两个等位基因。CRISPR/Cas9基因编辑可以对特定基因的一个或两个等位基因引入插入突变或缺失突变(indels)。Guide-it Genotype Confirmation Kit提供了一种简单的方法,用于确认特定克隆是一个等位基因突变(单等位基因),还是两个等位基因突变(双等位基因突变),或者是未发生变化(野生型)。实验操作中涉及到从Cas9 和single guide RNA (sgRNA)处理的细胞中扩增靶点序列。扩增出的序列被用在重组Cas9和相同的sgRNA的体外剪切反应。剪切产物通过琼脂糖凝胶电泳,确定基因型。
基因编辑后使用该试剂盒,加快了在大量克隆中筛选所需基因型的进程。每个试剂盒包含足够的试剂,用于100次提取、扩增和剪切反应。
 
产品特点:
· Cas9 和sgRNA体外剪切实验,用于确定单等位基因突变和双等位基因突变
· 包括高纯度的重组Cas核酸酶,用于体外剪切实验
· 流程化的操作步骤,使用来自于细胞的目的基因组DNA直接扩增
 
产品应用:
· CRISPR/Cas9 基因编辑
· CRISPR/Cas9 基因编辑后,单等位基因突变和双等位基因突变的确定
 
实验例:
基因编辑后克隆基因型确认
A图:使用Cas9和靶向C4BPB 基因的sgRNA对HEK 293细胞进行基因编辑。使用Guide-it Genotype Confirmation Kit对获得的15个单细胞克隆进行C4BPB位点的基因型鉴定。图中左侧的野生型 (WT),单等位基因 (M),双等位基因 (B)在分析中作为对照。结果表明克隆1,4,10,12是野生型;克隆2是单等位基因突变;以及克隆3,5-9,11和13-15是双等位基因突变。
B图:对A图中挑选的克隆进行测序分析。每个结果中,小写字母代表的是野生型(WT)序列。对于那些在A图中使用基因型鉴定方法确认的双等位基因突变的克隆,进一步测序分析表明克隆7是杂合子,克隆9和11是纯合子。在克隆2中,检测到3种不同的等位基因,可能是因为在HEK 293细胞系中出现拷贝数变异。
(数据来源于Takara Bio USA, Inc.)
 
 
Code No. 产品名称
632611   Guide-it Genotype Confirmation Kit
 
产品详情请点击:基因编辑后克隆基因型确认
 
 

页面更新:2020-03-19 08:35:48

抗dFoO多克隆抗体生物试剂-Wako富士胶片和光

抗dFoO多克隆抗体生物试剂-Wako富士胶片和光

供货周期 一个月以上 应用领域 生物产业

Forkhead转录因子FoxO控制参与细胞周期,细胞死亡,代谢和氧化应激的各种细胞过程。 近的研究还提示FoxO是各种生物体的寿命调节的关键分子。

抗dFoO多克隆抗体生物试剂-Wako富士胶片和光

抗dFoxO多克隆抗体

 

 

◆背景

 

  Forkhead转录因子FoxO控制参与细胞周期,细胞死亡,代谢和氧化应激的各种细胞过程。 近的研究还提示FoxO是各种生物体的寿命调节的关键分子。 果蝇具有单个FoxO基因(dFoxO),其失活对于存活不构成影响。 然而,dFoxO似乎调节抵抗氧化应激和果蝇的衰老。 由于dFoxO的活性受磷酸化,泛素化和乙酰化调节,在使用该抗体的免疫印迹实验中可能出现多个dFoxO的条带。 该抗体可检测总dFoxO蛋白的内源水平。

 

 

应用

 

【免疫印迹】

 

抗dFoO多克隆抗体生物试剂-Wako富士胶片和光

 

  用抗dFoxO(1:3000稀释)与ECL Plus试剂组合检测dFoxO在苍蝇裂解物中的表达。

 

 

【免疫沉淀】

 

抗dFoO多克隆抗体生物试剂-Wako富士胶片和光

 

  来自S2细胞的内源性dFoxO用抗dFoxO免疫沉淀。

 

 

◆产品列表

 

产品编号 产品名称 规格
CAC-THU-A-DFOXO

Anti FOXO

果蝇FOXO抗体

100 μL

 

突变克隆试剂盒酶试剂盒Takara Clontech

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Clontech 638910 In-Fusion HD Cloning Plus(库存销售完毕即终卖) 50 Rxns ¥16,772 突变克隆试剂盒 突变克隆试剂盒 突变克隆试剂盒
Clontech 638911 In-Fusion HD Cloning Plus(库存销售完毕即终卖) 100 Rxns ¥28,914 突变克隆试剂盒 突变克隆试剂盒 突变克隆试剂盒
Clontech 638912 In-Fusion HD EcoDry Cloning Plus(库存销售完毕即终卖) 8 Rxns ¥4,079 突变克隆试剂盒 突变克隆试剂盒 突变克隆试剂盒
Clontech 638913 In-Fusion HD EcoDry Cloning Plus(库存销售完毕即终卖) 24 Rxns ¥10,292 突变克隆试剂盒 突变克隆试剂盒 突变克隆试剂盒
Clontech 638915 In-Fusion HD EcoDry Cloning Plus(库存销售完毕即终卖) 96 Rxns ¥20,548 突变克隆试剂盒 突变克隆试剂盒 突变克隆试剂盒
Clontech 638917 In-Fusion HD Cloning Plus CE(库存销售完毕即终卖) 50 Rxns ¥17,489 突变克隆试剂盒 突变克隆试剂盒 突变克隆试剂盒
Clontech 638918 In-Fusion HD Cloning Plus CE(库存销售完毕即终卖) 100 Rxns ¥27,394 突变克隆试剂盒 突变克隆试剂盒 突变克隆试剂盒
Clontech 638920 In-Fusion HD Cloning Plus(库存销售完毕即终卖) 96 Rxns ¥27,686 突变克隆试剂盒 突变克隆试剂盒 突变克隆试剂盒
Clontech 638956 In-Fusion® Snap Assembly EcoDry Master Mix 96 Rxns ¥13,133 突变克隆试剂盒 突变克隆试剂盒 突变克隆试剂盒
Clontech 638955 In-Fusion® Snap Assembly EcoDry Master Mix 32 Rxns ¥5,721 突变克隆试剂盒 突变克隆试剂盒 突变克隆试剂盒
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Clontech 638949 In-Fusion® Snap Assembly Master Mix 250 Rxns ¥12,931
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*红字为促销价格,促销时间: 2024年3月1日-2024年4月30日

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使用In-Fusion Cloning Kits可以进行PCR方法的DNA定点突变。一个精简的反应流程,就可以完成增加、删除或替换DNA区段,插入点突变,插入限制性位点等实验。
In-Fusion方法通过设计引物将突变(碱基变化、删除、增加)引入。以环形质粒作为模板,通过反向PCR即可生成带有突变区域的线性载体。这个线性载体可以通过In-Fusion再进行环化。试剂盒已经附带了高效感受态细胞。
 
产品特点
· 高效突变:体外定点突变,效率≥90%。
· 多用途:一个体系,可以进行替换、增加或删除最多12个碱基。
· 更少步骤:一个PCR反应即可;无需纯化或PCR产物的体外消化;无需连接。
· 方便性:试剂盒已附带高效感受态细胞。
 
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产品详情请点击:突变克隆试剂盒
 
 

页面更新:2023-09-18 09:06:29

Ph.D.多肽展示克隆系统 #E8101S 20 μg 克隆载体 16 μg 延伸引物-NEB酶试剂 New England Biolabs

上海金畔生物科技有限公司代理New England Biolabs(NEB)酶试剂全线产品,欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

产品资料 – 糖生物学与蛋白质工具 – 噬菌体展示

Ph.D.多肽展示克隆系统                              收藏

货 号
规 格
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#E8101S
20 μg 克隆载体 16 μg 延伸引物
2,629.00

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概述

Ph.D.多肽展示克隆系统是为方便使用者自制肽库而设计的,所展示的多肽与位于细菌噬菌体M13 表面的衣壳蛋白相融合。因此,此系统将展示肽与其编码基因相互关联。通过直接淘选法即可筛选到各种靶标的肽配基。M13KE 展示载体来源于M13,其克隆位点已改造,能使随机展示肽融合于次要包膜蛋白 pIII 的 N 端,因此每个病毒粒子带有 5 个展示肽。本系统使用噬菌体载体,而不是噬菌粒,主要是因为前者无需抗生素筛选和辅助噬菌体重复感染,从而简化了中间的扩增步骤。由于展示肽大于 20-30 个氨基酸会严重影响 pIII 的感染力,因此本载体仅适合短肽的展示。随克隆载体系统还提供一个插入延伸引物和详细的操作说明书。
 
Ph.D.多肽展示克隆系统                               #E8101S 20 μg 克隆载体 16 μg 延伸引物

参考文献

有关该产品特性和应用的相关文献请联系我们。 www.jinpanbio.com,www.jinpanbio.cn。

一步克隆试剂盒

一步克隆试剂盒

货号:BL625A

规格:10T

品牌: Jinpan

一步克隆试剂盒

一、产品简介

该产品是利用同源重组以及大肠杆菌的自我修复功能设计的一款无需酶切连接、高效、快速、价格优惠的体外重组试剂盒。

 

1. 核心原理:同源重组及大肠杆菌自我修复

 

二、产品优势

1. 操作简单,节省时间。

2. 不需要考虑载体及序列的酶切位点问题,可将目的序列任意插入载体的任意位置。

3. 可同时连接多个片段(3-5)。

4. 包装人性化,方便操作,保证酶活,-20℃可保存1年,-80℃可保存3年。

5. 保证实验质量的同时大大降低实验成本。

 

货号 BL625A
规格 10T
品牌 Jinpan
说明书下载 点击下载