LPS在不同模型的应用和诱导不同疾病模型的protocol

LPS在不同模型的应用和诱导不同疾病模型的protocol

炎症作为机体免疫应答的重要机制之一,一直是生命科学研究的热点方向,LPS(脂多糖)由于易于控制,模型重现性好,影响易于识别和测量等优势,成为建立急性炎症模型的金标准试剂。


LPS由一个多糖区域组成,该区域由被称为脂质A的特定糖脂部分锚定在细菌外膜上。脂质A是一种与羟基脂肪酸相连的葡萄糖胺双糖,羟基脂肪酸进一步被非羟基脂肪酸取代。脂肪酸的数量是内毒素免疫原性的主要决定因素。最活跃的脂质A含有6个脂肪酰基,存在于大肠杆菌和沙门氏菌等致病菌中。含有4或5种脂肪酸的低酰化脂质A,诱导宿主防御反应明显减少,并能以剂量依赖的方式抑制六酰化脂多糖引发的强烈内毒素反应。

LPS作用机制原理图

LPS在不同模型的应用和诱导不同疾病模型的protocol

-Cohen J. The immunopathogenesis of sepsis. Nature. 2002 Dec 19-26;420(6917):885-91. PMID: 12490963.



现总结LPS在不同模型的应用和

诱导不同疾病模型的protocol供研究者参考:



LPS诱导疾病模型

模型
产品
给药方式
PMID
小鼠急性肺损伤模型
LPS-EB (Standard)
气管内给药10 μg
35544597
应用:Reg1-MO抑制LPS诱导的急性肺部炎症。
LPS-EB Ultrapure
气管内给药200μg/kg BW
24007300
应用:NLRP3炎症小体是LPS/机械通气急性肺损伤低氧血症发生发展所必需的
LPS-EB Ultrapure
气管内给药200 μg/kg BW
32117318
应用:自噬通过下调LPS和机械通气诱导的急性肺损伤中的炎症小体活性和IL-1β来防止肺通透性增加和低氧血症。
小鼠炎症小体激活
LPS-EB Ultrapure
腹腔注射20 mg/kg BW
33017103
注:引自“Current Protocols in Immunology”,为非经典NLPR3炎症小体激活提供了详细的实验方案
小鼠脓毒症模型
LPS-EB  (Standard)
腹腔注射18mg/kg BW
31779628
应用:Poldip2 介导 LPS 诱导的脓毒症相关性脑病模型中的血脑屏障破坏。
LPS-EB Ultrapure
腹腔注射6mg/kg BW
30808756
LPS-EB VacciGradeTM
腹腔注射50mg/kg BW
应用:西方饮食调节小鼠免疫状态和对LPS引发的脓毒症的反应。
LPS-EB Ultrapure
腹腔注射5mg/kg BW
36586274
应用:潜在生物标志物TIFA通过调节细胞焦亡影响脓毒症诱导的急性肾损伤。
大鼠脓毒症模型
LPS-EP (Standard)
静脉给药2.5 μg/kg BW
26149990
应用:人参皂苷Rg1和Re通过与TLR4结合来对LPS诱导的脓毒症起预防作用。
大鼠牙周炎模型
LPS-PG (Standard)
牙龈内注射10 μg
30665148
应用: LPS-PG诱导的牙周炎模型的血清中Aβ肽水平升高。
小鼠牙周炎模型
LPS-PG  (Standard)
牙龈内注射0.5mg/kg BW
34342041
应用:Th17/Treg失衡调节牙周炎所致的认知功能障碍
小鼠脑炎模型
LPS-PG (Standard)
腹腔注射5mg/kg BW
36240654
应用:丙咪嗪可以抑制LPS-PG诱导的小胶质神经毒性。


备注:

LPS-EB Ultrapure (Cat. Code: tlrl-3pelps)  LPS-EB VacciGradeTM  (Cat. Code: vac-3pelps)(表中红色标记)是InvivoGen提供的产品。

不同疾病模型的protocol





*LPS诱导急性肺损伤(ALI)模型 PMID: 35544597  LPS-EB (Standard)

✍ 小鼠模型的建立:

1. 每只小鼠气管给药LPS(standard)10μg。

2. 在LPS处理前24h,给小鼠施用MO(包括Reg1-MOs组和control MO组)。

3.  LPS处理6h后,麻醉小鼠并采集样本。

✍ 小鼠模型的应用:

评价Reg1-MOs对LPS诱导的ARDS的体内治疗效果。


*“Two-hit” 模型(LPS和MV诱导的ALI模型) PMID: 24007300  LPS-EB Ultrapure

✍ 小鼠模型的建立:

1LPS-EB Ultrapure经气管给药,浓度为100 μg/ml,剂量为2 μl/g BW。

2. LPS处理90min后,将小鼠麻醉进行机械通气(MV)。小鼠经气管插管并通气共4小时。

3. MV结束后,对小鼠实施安乐死以收集样本。

✍ 小鼠模型的应用:

验证LPS和MV可导致IL-1β分泌和ALI发展的假设,该过程依赖于NLRP3炎性小体的激活。





*LPS诱导败血症模型 PMID: 30808756 LPS-EB Ultrapure  LPS-EB VacciGradeTM

✍ 小鼠模型的建立:

1. 脓毒症模型:腹腔注射LPS-EB Ultrapure 6 mg/kg BW。

2. 无菌(GF) 小鼠脓毒症模型:腹腔注射50 mg/kg BW的LPS-EB VacciGradeTM

✍ 小鼠模型的应用:

1. 脓毒症模型:探讨西方饮食(western diet ,WD)对脓毒症的影响。

2. GF小鼠脓毒症模型:测定WD依赖性脓毒症对菌群的依赖性。





*LPS诱导牙周炎模型 PMID: 30665148 LPS-PG (Standard)

✍ 小鼠模型的建立:

1. 双侧上颌第一、第二磨牙间的腭侧牙龈注射10 μl浓度为1mg /ml的 LPS-PG (Standard)

2. 注射后,每隔48小时再注射两次。

3. 诱导过程持续14 d,每侧共注射 LPS-PG (Standard)6次。

✍ 小鼠模型的应用:

测定牙周炎动物模型中β淀粉样蛋白(Aβ)肽的循环水平。




备注:

标记为红色的产品均来自InvivoGen。这些数据是基于InvivoGen品牌的高品质 LPS生成的,由于已知的TLR2交叉污染的影响或批次间内毒素水平的不准确评估,这些数据可能不适用于来自其他供应商的低质量LPS。


产品信息

产品

货号

规格

LPS-EB (Standard)

tlrl-eblps

5 mg

LPS-EB Ultrapure

tlrl-3pelps

5 x 10e6 EU

LPS-EB VacciGradeTM

vac-3pelps

5 x 10e6 EU

LPS-PG (Standard)

tlrl-pglps

1mg


更多详情请咨询Invivogen代理商-上海金畔生物

细胞凋亡与细胞坏死有哪些不同?

细胞凋亡与细胞坏死有哪些不同?

细胞凋亡跟细胞坏死,是有本质区别的,小欣为大家整理了细胞凋亡和细胞坏死的区别,供各位科研的伙伴们参考使用。

细胞凋亡(Apoptosis)是由基因控制的细胞自主的有序的死亡,能够维持内环境稳定,更好地适应生存环境。细胞凋亡是一个主动的过程,它涉及一系列基因的激活、表达以及调控等过程。

细胞坏死是极端的物理、化学因素或严重的病理性刺激引起的细胞损伤和死亡,是被动的非正常死亡过程。

区别点

细胞凋亡

细胞坏死

起因

生理或病理性

病理性刺激或剧烈损伤

范围

单个散在细胞

大片组织或成群细胞

细胞膜

保持完整,一直到形成凋亡小体

破损

染色质

凝聚在核膜下呈半月状

呈絮状

细胞器

无明显变化

肿胀、内质网崩解

细胞体积

固缩变小

肿胀变大

凋亡小体

有,被邻近细胞或巨噬细胞吞噬

无,细胞自溶,残余碎片被巨噬细胞吞噬

基因组DNA

有控降解,电泳图谱呈梯状

随机降解,电泳图谱呈涂抹状

蛋白质合成

调节过程

受基因调控

被动进行

炎症反应

无,不释放细胞内容物

有,释放内容物

在细胞凋亡过程中,有多种标志性特征可以被用于流式检测,如磷脂酰丝氨酸由细胞膜内侧转移至细胞膜外侧、Caspase蛋白酶的激活以及线粒体膜电位的丧失等。

上海金畔生物提供多款能准确地检测细胞凋亡的试剂产品,欢迎订购。以下产品只是部分,如需查找更多的产品,请联系我们上海金畔生物。

细胞凋亡相关检测产品(部分产品示例)


品牌 货号 产品名称 规格
Bio-Rad ICT097 FAM FLICA™ CASPASE-1 KIT 25 TESTS
Bio-Rad ICT923 FAM FLICA™ CASPASE-10 KIT 100 TESTS
Bio-Rad ICT093 FAM FLICA™ CASPASE-3/7 KIT 25 TESTS
Bio-Rad ICT091 FAM FLICA™ POLY CASPASE KIT 25 TESTS
Bio-Rad ICT946 MITOCHONDRIAL MEMBRANE POTENTIAL KIT 500 TESTS