多克隆抗体和单克隆抗体的区别详解

多克隆抗体和单克隆抗体的区别详解

多克隆抗体和单克隆抗体的区别:

多克隆抗体 单克隆抗体
 与抗原上不同表位结合的多种不同抗体  只识别抗原上一种表位的单一抗体
 非表位特异的  表位特异的
 与相似抗原有更高的交叉反应 低交叉反应
可能有较高背景干扰 低背景干扰
 各批次有所不同 每批次完全一致
 成本较低 成本较高
 制备耗时短 (约3个月) 制备耗时长 (约6个月)
多种宿主物种可选 宿主物种选择不多

什么是单克隆抗体?

Monoclonal-Antibodies-Icon/单克隆抗体定义:

单克隆抗体是仅与目标抗原某一特定表位结合的单一抗体

单克隆抗体的制备

单克隆抗体制备时首先要将免疫原注射到宿主动物体内,当免疫原诱发宿主产生免疫反应,脾脏就会产生大量不同种类的B-细胞。此时单一的B-细胞被提取出来,与骨髓瘤细胞杂交 (癌症B-细胞)。

之所以要将B-细胞与骨髓瘤细胞杂交,是因为健康正常的脾细胞无法在细胞培养基无限存活,而与骨髓瘤细胞杂交形成杂交瘤细胞后,该细胞就成为永生化胞株,不断产生抗体。

单一B-细胞从脾脏中分离,形成杂交瘤细胞后,产生的抗体就是单一抗体,只与目标抗原上某一特定的表位反应。

每一个杂交瘤生产出单一的单克隆抗体,这个杂交瘤就被赋予一个克隆号,以此来方便辨别这个特异的抗体是识别哪一个特定的表位。

B-细胞将单克隆抗体分泌至细胞培养基中,然后提取出来做后续的检测和纯化。

一旦单克隆抗体杂交瘤克隆生成,该克隆就十分稳定,可以重复使用,这就确保了每一批次的抗体是完全一致的。

杂交瘤也可以被注射到小鼠的腹腔中大量生产,杂交瘤分泌富含抗体的一种液体,被称作腹水,用注射器抽取,就可获得大量的单克隆抗体。

单克隆抗体适用于:

检测单一抗原

检测蛋白质家族的单一成员

不同实验/批次的结果稳定一致

细胞染色背景较低-很适用于IHC、ICC、IF等应用

量化蛋白质表达(例:流式或荧光细胞分选)

探测分子结构变化

探测磷酸化状态变化

为X射线晶体学探测目标

免疫治疗

单克隆抗体不建议用于:

根据同源性检测不同物种的目标蛋白

检测浓度较低的目标蛋白

检测形态变化了的蛋白

什么是多克隆抗体?

Polyclonal-Antibodies-Icon/多克隆抗体定义

多克隆抗体是与目标蛋白上多种不同表位结合的多种不同抗体。

多克隆抗体制备

多克隆抗体的第一步和单克隆抗体一样,都是将免疫原注射到宿主体内产生免疫反应,激活了多种B细胞。不同的是免疫过后,多克隆抗体就直接从免疫宿主的血清中分离出来,或纯化,没有与骨髓瘤细胞融合的过程。一旦宿主动物死亡,需要免疫新的动物,这时血清中的抗体就会有所不同。

根据制备方法的不同,功能自然也就有所不同了。虽然多抗每批次有轻微差别,但是因为它识别的表位多,这个差别影响并不算太大,而单克隆抗体虽然价格偏高,可是特异性更强更稳定。

多克隆抗体适用于:

检测有高同源性的抗原的已知或未知同种型

检测浓度较低的抗原

捕获尽可能多的抗原(例:IP或ChIP)

检测变性的蛋白

检测可能发生了糖基化或形态变化的目标蛋白

用多种检测方法检测一种原蛋白时

检测pH和盐度不同的溶液中的目标蛋白

多克隆抗体不建议用于:

量化检测,例:流式。由于不同表位的结合导致信号被放大加强,可能会导致结果不准确

当高同源性蛋白的交叉反应会引起问题时

StressMarq 提供大量单克隆和多克隆抗体,为研究人员提供更多的可选择性,以便更好的应用于实验。

如果您需要帮助选择适合您实验的抗体,请咨询金畔技术人员。

更多详细信息,请联系Stressmarq国内代理商-上海金畔生物

高分文献解读|共生白色念珠菌代谢物可增强巨噬细胞杀菌活性并防止脓毒症

高分文献解读|共生白色念珠菌代谢物可增强巨噬细胞杀菌活性并防止脓毒症

脓毒症(Sepsis)是因感染引起的反应失调导致的危及生命的器官功能障碍。肠道菌群被认为是脓毒症发展的关键调节剂,但是其在脓毒症中的作用尚不完全清楚。近期,南方医科大学陈鹏教授、姜勇教授、周宏伟教授、陈烨教授、龚伟教授团队在《Cellular & Molecular Immunology》(IF=24.1)上合作发表题为“A metabolite from commensal Candida albicans enhances the bactericidal activity of macrophages and protects against sepsis”的文章,在肠道菌群调控脓毒症研究方面取得了一系列新进展。该研究证明,白色念珠菌水平在细菌性脓毒症患者中显著降低,白色念珠菌培养的上清显著降低了盲肠结扎和穿刺(CLP)攻击小鼠和大肠杆菌的细菌载量,并改善了脓毒症猪的症状。


上海金畔生物非常荣幸能够作为供应商为该项研究提供高品质ELISA试剂盒,为生物医学领域的科研探索贡献一份力量。

 

引用产品

该项研究中使用了上海金畔生物(NeoBioscience Technology Co, Ltd)的QuantiCyto® Mouse IL-6 ELISA kit与QuantiCyto® Mouse TNF-α ELISA kit,检测小鼠血清中细胞因子的水平。

货号

产品名称

灵敏度

检测范围

EMC004

QuantiCyto® Mouse IL-6 ELISA kit(小鼠白细胞介素-6)

7.8pg/ml

15.6-1000pg/ml

EMC102a

QuantiCyto® Mouse TNF-α ELISA kit(小鼠肿瘤坏死因子-α)

15.6pg/ml

31.25-2000pg/ml

高分文献解读|共生白色念珠菌代谢物可增强巨噬细胞杀菌活性并防止脓毒症 


研究详情

脓毒症是一种危及生命的器官功能障碍综合征。尽管对脓毒症诊断和治疗已经取得了许多进展,但脓毒症的死亡率仍然保持在25-30%左右;如果包括脓毒症休克造成的后果,甚至可能增加到40-50%。巨噬细胞识别微生物病原体并分泌炎症细胞因子和趋化因子,促进病原体在吞噬体中的吞噬。此外,活性氧(ROS)在吞噬作用后产生,高水平的ROS有助于快速有效地杀死被吞噬的病原体。在巨噬细胞中,受sirtuin 2 (SIRT2)调控的烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(nicotinamide adenine dinucleotide phosphate, NADPH)是ROS生成的关键调节剂,用于抵消过量ROS造成的损伤。SIRT2的缺失将增加巨噬细胞的吞噬作用,使得控制巨噬细胞中SIRT2介导的ROS产生成为一种潜在的脓毒症治疗策略。

高分文献解读|共生白色念珠菌代谢物可增强巨噬细胞杀菌活性并防止脓毒症

研究表明,真菌共生体在预防侵袭性感染方面具有多种益处。研究团队评估了健康受试者和细菌性脓毒症患者(根据临床诊断未服用抗真菌药物)粪便中白色念珠菌的丰度,结果证明细菌性脓毒症患者的白色念珠菌显着减少。小鼠实验表明白色念珠菌培养物上清液中存在预防脓毒症的分子。


有效快速的细菌清除是脓毒症结果的基本决定因素,研究团队用白色念珠菌培养物的上清液处理小鼠,并评估了血液、腹腔灌洗液和肝脏样本中的细菌计数,并研究了上清液是否调节吞噬细胞的内在抗菌功能,结果表明白色念珠菌培养物上清液的有益作用与巨噬细胞杀菌活性的增加有关。在进一步研究中,团队发现白色念珠菌产生苯丙酮酸(PPA),并证明PPA 直接与巨噬细胞中的 SIRT2 结合,通过调节SIRT2/G6PD/NADPH 轴增强细菌感染后巨噬细胞产生 ROS,且SIRT2 依赖性 ROS 产生增加在 PPA 诱导的细菌清除中不可或缺。

为了进一步验证白色念珠菌培养上清液(Sup给药)和 PPA 在脓毒症临床相关大动物模型中的体内保护作用,在实验猪中进行了实验并得到了与小鼠模型中一致的结论,使用 Sup 或 PPA 促进细菌清除并对脓毒症猪的器官具有保护作用。

高分文献解读|共生白色念珠菌代谢物可增强巨噬细胞杀菌活性并防止脓毒症

最后,研究团队通过分析 PPA 在人类巨噬细胞功能中发挥的作用来调查这些基本发现是否可以进行临床转化,并证明PPA能够作为一种新型化合物来增强巨噬细胞的细菌清除能力。研究团队进一步评估了急性生理学和慢性健康评估 (APACHE) II 评分较高(>中值)的脓毒症患者的 PPA 循环水平,以确定人类不良疾病结果是否与 PPA 降低相关,证明了PPA 可能在人类细菌性脓毒症中发挥关键作用。

该项研究系统地评估了来自共生白色念珠菌的苯丙酮酸(PPA)对脓毒症发展的影响,证明了PPA在清除细菌性脓毒症患者细菌中的重要性并扩大了对脓毒症发展过程中宿主-真菌组相互作用的理解。因此,探索PPA及类似SIRT2抑制剂治疗等有效策略,可能为脓毒症的临床治疗提供新途径。

  

文献引用

Gu P, Liu R, Yang Q, et al. A metabolite from commensal Candida albicans enhances the bactericidal activity of macrophages and protects against sepsis. Cell Mol Immunol. 2023;20(10):1156-1170. doi:10.1038/s41423-023-01070-5

(原文链接:https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/37553429/)

 

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脓毒症(sepsis)是由细菌等病原微生物侵入机体引起的全身炎症反应综合征,病情凶险,病死率高。除全身炎症反应综合征和原发感染病灶的表现外,重症患者还常有器官灌注不足的表现。目前脓毒症的发病机制仍未完全阐明,围绕脓毒症进行的研究将为脓毒症的治疗和预防带来新的希望。


金畔提供小鼠种属脓毒症相关研究常用ELISA试剂盒,助力您的科研生活!

货号

产品名称

灵敏度

检测范围

EMC004

QuantiCyto® Mouse IL-6 ELISA kit(小鼠白细胞介素-6)

7.8pg/ml

15.6-1000pg/ml

EMC004QT

QuikCyto® Mouse IL-6 ELISA kit (Quick Test)(小鼠白细胞介素-6快速检测)

7.8pg/ml

15.6-1000pg/ml

EMC102a

QuantiCyto® Mouse TNF-α ELISA kit(小鼠肿瘤坏死因子-α)

15.6pg/ml

31.25-2000pg/ml

EMC102aQT

QuikCyto® Mouse TNF-α ELISA kit (Quick Test)(小鼠肿瘤坏死因子-α快速检测)

15.6pg/ml

31.25-2000pg/ml

EMC028

QuantiCyto® Mouse CRP ELISA kit(小鼠C反应蛋白)

11.7pg/ml

23.44-1500pg/ml

EMC001b

QuantiCyto® Mouse IL-1β ELISA kit(小鼠白细胞介素-1β)

7.8pg/ml

15.6-1000pg/ml

EMC001bQT

QuikCyto® Mouse IL-1β ELISA kit (Quick Test)(小鼠白细胞介素-1β快速检测)

7.8pg/ml

15.6-1000pg/ml

EMC005

QuantiCyto® Mouse IL-10 ELISA kit(小鼠白细胞介素-10)

1.95pg/ml

3.9-250pg/ml

EMC005QT

QuikCyto® Mouse IL-10 ELISA kit(Quick Test)(小鼠白细胞介素-10快速检测)

1.95pg/ml

3.9-250pg/ml

EMC116

QuantiCyto® Mouse IgG(Total) ELISA Kit(小鼠总免疫球蛋白G)

0.08ng/ml

0.156-10ng/ml

EMC113

QuantiCyto® Mouse CCL2/JE/MCP-1 ELISA kit(小鼠单核细胞趋化蛋白-1)

7.8pg/ml

15.6-1000pg/ml

EMC113QT

QuikCyto® Mouse CCL2/JE/MCP-1 ELISA kit (Quick Test)(小鼠单核细胞趋化蛋白-1快速检测)

7.8pg/ml

15.6-1000pg/ml

EMC101g

QuantiCyto® Mouse IFN-γ ELISA kit(小鼠γ干扰素)

3.9pg/ml

7.8-500pg/ml

EMC101g(H)

QuantiCyto® Mouse IFN-γ ELISA kit (High Sensitivity)(小鼠γ干扰素(高敏))

0.98pg/ml

1.95-125pg/ml

EMC101gQT

QuikCyto® Mouse IFN-γ ELISA kit (Quick Test)(小鼠γ干扰素快速检测)

3.9pg/ml

7.8-500pg/ml

以上产品均可提供现货,如需了解更多产品或咨询折扣,欢迎联系上海金畔生物!

上海金畔生物科技有限公司 

GE WHATMAN GD/X多层针头式滤器(玻璃纤维)6882-1316

【简单介绍】

GE WHATMAN GD/X多层针头式滤器(玻璃纤维)6882-1316,GD/X专为高颗粒含量的样品而设计,无色聚丙烯外壳,预滤层由GMF Whatman 150(密度按级划分)和GF/F玻璃微纤维介质组成,预滤层消除了样品污染物,即使是难于过滤的样品也有较小的操作压力。GD/X针头式滤器的过滤量是普通针头式滤器的3-7倍。

【详细说明】

GE WHATMAN GD/X多层针头式滤器(玻璃纤维)6882-1316

GE WHATMAN GD/X多层针头式滤器(玻璃纤维)6882-1316,GD/X专为高颗粒含量的样品而设计,无色聚丙烯外壳,预滤层由GMF Whatman 150(密度按级划分)和GF/F玻璃微纤维介质组成,预滤层消除了样品污染物,即使是难于过滤的样品也有较小的操作压力。GD/X针头式滤器的过滤量是普通针头式滤器的3-7倍。

GMF 150和GF/F由100%硼硅酸盐玻璃微纤维制成,创新的、梯度密度的GMF 150介质的zui上层为粗燥网格状,而底部光滑,可保留zui小1.0um的颗粒。GF/F滤层可保留zui小0.7um颗粒,预滤层下面是终滤膜。

GD/X结构提供了非常好的负载力并有很好的流速,避免产生像单层膜经常发生的高反压情况。

特点

  • 13和25 mm直径针头式滤器。
  • 13 mm滤器可过滤zui多10 ml样品,25 mm滤器可过滤10 ml以上样品(可过滤的样品量还依赖于待滤样品特征)。
  • 有无菌包装。
  • 无色聚丙烯外壳。
  • 有Whatman GMF 150(密度按级划分)和GF/F玻璃微纤维组成的特有预滤层。

优点

  • 去除样品污染物。
  • 即使是很难过滤的样品,也不需要很大操作压力。
  • 是普通滤器过滤量的3-7倍。

GE WHATMAN GD/X多层针头式滤器(玻璃纤维)6882-1316

应用-GD/X针头式滤器为高颗粒含量样品的过滤提供良好方案:

  • 溶解度测试
  • 含量均一性
  • 浓度分析
  • 常规样品准备
  • 食品分析,如牛奶、果汁等
  • 环境样品分析,如污水、有机污染物
  • 合成物分析

技术参数-GD/X针头式滤器

GD/X 13 mm GD/X 25 mm
外壳 聚丙烯(无色) 聚丙烯(无色)
过滤面积 1.3 cm平方 4.6 cm平方
zui大压力 100 psi(6.9bar) 75 psi(5.2bar)

滞留体积-充满滤器

-含有空气

0.5 ml 50ul(大约) 1.4 ml 250ul(大约)
尺寸 21.6*29.8 mm 20.8*29.8 mm
重量 3 g(大约) 3 g(大约)
流向 从进口处流入 从进口处流入
进口接头 Female lure lock Female lure lock
出口接头 Male lure  Male lure
灭菌 高压灭菌121℃(zui高131℃),1 bar (15psi),20分钟 高压灭菌121℃(zui高131℃),1 bar (15psi),20分钟
生物安全 所有材料符合USP Class VI 所有材料符合USP Class VI
玻璃微纤维预滤介质

100%硼酸盐玻璃纤维

GMF 150 10um:1um

GF/F 0.7um

100%硼酸盐玻璃纤维

GMF 150 10um:1um

GF/F 0.7um

订货信息-GD/X针头式滤器

订购:

孔径(um)     货号             介质          数量/包

GD/X13mm-非灭菌包装

0.2          6880-1302         CA            150pk

0.45         6880-1304         CA            150pk

0.2          6870-1302         Nylon         150pk

0.2          6871-1302         Nylon         1500pk

0.45         6870-1304         Nylon         150pk

0.45         6871-1304         Nylon         1500pk

0.2          6876-1302         PSE           150pk

0.45         6876-1304         PSE           150pk

0.2          6872-1302         PVDF          150pk

0.45         6872-1304         PVDF          150pk

0.45         6873-1304         PVDF          1500pk

0.2          6878-1302         PP            150pk

0.45         6878-1304         PP            150pk

0.2          6874-1302         PTFE          150pk

0.2          6875-1302         PTFE          1500pk

0.45         6874-1304         PTFE          150pk

0.45         6875-1304         PTFE          1500pk

1.6*         6882-1316         GF/A**        150pk

1.0*         6884-1310         GF/B**        150pk

1.2*         6886-1312         GF/C**        150pk

2.7*         6888-1327         GF/D**        150pk

0.7*         6890-1307         GF/F**        150pk

0.45*        6894-1304         GMF           150pk

注:*玻璃微纤维粒子保留级别

    **含GMF 150无GF/F预滤器

CA-醋酸纤维素    PES-聚醚砜    PTFE-聚四氟乙烯 

GF-玻璃纤维      PP-聚丙烯     PVDF-聚偏二氟乙烯

订货信息-GD/X针头式滤器

孔径(um)     货号             介质                             数量/包

GD/X25mm-非灭菌包装

0.2          6880-2502         CA                               150pk

0.2          6881-2502+        CA                               1500pk

0.45         6880-2504         CA                               150pk

0.45         6881-2504         CA                               1500pk

0.2          6869-2502         Nylon high charge(positive)     150pk

0.45         6869-2504         Nylon high charge(positive)     150pk

0.2          6870-2502         Nylon                             150pk

0.2          6871-2502         Nylon                             1500pk

0.45         6870-2504         Nylon                             150pk

0.45         6871-2504         Nylon                             1500pk

5.0          6870-2550         Nylon                             150pk

5.0          6871-2550         Nylon                             1500pk

0.2          6876-2502         PSE                               150pk

0.2          6905-2502         PSE                               1500pk

0.45         6876-2504         PSE                               150pk

0.45         6905-2504         PSE                               1500pk

0.2          6872-2502         PVDF                              150pk

0.2          6873-2502         PVDF                              1500pk

0.45         6872-2504         PVDF                              150pk

0.45         6873-2504         PVDF                              1500pk

0.2          6878-2502         PP                                150pk

0.45         6878-2504         PP                                150pk

0.45         6879-2504         PP                                1500pk

0.2          6874-2502         PTFE                              150pk

0.2          6875-2502         PTFE                              1500pk

0.45         6874-2504         PTFE                              150pk

0.45         6875-2504         PTFE                              1500pk

0.45         6882-2504         RC                                150pk

0.45         6883-2504         RC                                1500pk

1.6*         6882-2516         GF/A**                            150pk

1.6*         6883-2516         GF/A**                            1500pk

1.0*         6884-2510         GF/B**                            150pk

1.2*         6886-2512         GF/C**                            150pk

2.7*         6888-2527         GF/D**                            150pk

0.7*         6890-2507         GF/F**                            150pk

0.7*         6891-2507         GF/F**                            1500pk

0.45*        6894-2504         GMF**                             150pk

0.45*        6894-2504         GMF**                             150pk

0.45*        6895-2504         GMF**                             1500pk

1.5*         6892-2515         934-AH**                          150pk

0.2          6901-2502         CA                                 50pk

0.45         6901-2504         CA                                 50pk

0.2          6896-2502         PSE                                50pk

0.45         6896-2504         PSE                                50pk

0.2          6897-2502         PSE                                500pk

0.45         6897-2504         PSE                                500pk

0.2          6900-2502         PVDF                               50pk

0.45         6900-2504         PVDF                               50pk

0.45*        6902-2504         GMF*                               50pk

注:*玻璃微纤维粒子保留级别

    **含GMF 150无GF/F预滤器

   +产品仅适用于美国

CA-醋酸纤维素    PES-聚醚砜     PVDF-聚偏二氟乙烯

GF-玻璃纤维      PP-聚丙烯      RC-再生纤维素

GMF-玻璃微纤维   PTFE-聚四氟乙烯

1000ml 棕色 HDPE窄口试剂瓶

1000ml 棕色 HDPE窄口试剂瓶

货号:BS-RB-HDPE-1000-NA

规格:5个/包

品牌:Jinpan

棕色 高密度聚乙烯(HDPE)试剂瓶

 

– 高密度聚乙烯,化学耐受性强,坚固耐用

– 颜色:棕色,避光

– 耐受温度范围-80℃至121℃

– 辐照灭菌。

– 无内衬,螺纹处有专业防渗漏设计,高效防漏。

– 窄口设计,有效避免溶液挥发。

货号 BS-RB-HDPE-1000-NA
规格 5个/包
品牌 Jinpan

中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)ELISA试剂盒——BioPorto热销产品推荐

中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)ELISA试剂盒——BioPorto热销产品推荐

中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(neutrophil gelatinase-associated lipocalin,NGAL),也称为Lipocalin-2(脂质运载蛋白-2),是脂质运载蛋白家族的一个新成员,它是肾功能损伤早期的生物标志物。NGAL不仅仅存在于嗜中性粒细胞中,也会出现在特定的上皮细胞内,例如发生缺血性和毒性肾损伤过程中,肾小管上皮细胞中的NGAL将显著增加,在开始的两个小时内,尿液和血液中NGAL水平将显著增加,因此NGAL是早期急性肾损伤的敏感标志物。此外,NGAL也可以作为独立预测因子监测慢性肾脏疾病(CKD)的进展风险。这些特性,使得NGAL作为肾脏标志物新宠获得了越来越多的关注。

 

NGAL ELISA试剂盒

NGAL,适用于化学物质引发的肾功能损伤早期检测和药物代谢的肾损伤研究。BioPorto提供多种属的NGAL ELISA试剂盒,这些试剂盒可以帮助科研人员研究肾毒性和其他肾小管损伤源,通过提供基于物种特异性的检测,将临床前和临床研究联系起来。

 

NGAL ELISA Kit (human),CAT NO: KIT 036

中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)是脂质运载家族中的一种25 kDa的蛋白质,是肾损伤早期诊断的生物标志物。它通常在血浆和尿液中的表达量非常低,但是肾脏损伤后,NGAL水平迅速升高,在急性肾损伤诊断中具有重要的研究价值。

该试剂盒用于定量检测人尿液和EDTA处理的血浆中的NGAL含量(仅供研究使用)。使用常规的仪器即可读取数据,在4个小时内可得到检测结果。所有的组分在2-8℃ 保存,检测全程可在室温下操作。该试剂盒内提供即用型的标准品、试剂和包被好的板条,可节省操作时间,操作简单,分析快捷,可重复性好。

检测范围:10-1000 pg/ml

检测限:4 pg/ml

样品稀释:1/500(健康个体尿液为例)

检测时长:<4 h

货号

产品

规格

KIT 036

NGAL ELISA Kit

96 well

  

Mouse NGAL ELISA Kit,CAT NO: KIT 042

小鼠NGAL由180个氨基酸残基组成的单二硫桥接多肽链组成,理论分子质量为20.9 kDa,但糖基化使其在SDS-PAGE实验中所得分子质量增加到24 kDa。在某些情况下,小鼠NGAL可能与基质金属蛋白酶-9 (MMP-9)共表达并形成复合物,但该复合物如何连接尚不清楚,因为小鼠NGAL不像其人类同源物,不具有能够形成分子间二硫桥的第三半胱氨酸残基的能力。在成年小鼠中,NGAL在中性粒细胞、子宫腔上皮细胞和腺上皮细胞以及肺、脾、阴道和附睾中表达,它也可能在胚胎发育过程中和对各种刺激反应中的其他类型细胞中表达,比如某些肾细胞、LPS刺激的巨噬细胞、地塞米松刺激的L细胞和碱性成纤维细胞生长因子刺激的成纤维细胞等。

该试剂盒用于定量测定小鼠尿液、血清和血浆中的NGAL含量(仅供研究使用)。试剂盒内提供具备高度可重复性和易于使用的组分,即用型标准品和预包被的96孔ELISA酶标板。所有孵育均在室温下进行。仅需常规仪器即可读取数据。

检测范围:10-1000 pg/ml

检测限:0.75 pg/ml

样品稀释:1/1000(健康小鼠的尿液或EDTA处理的血浆为例)

检测时长:<4 h

货号

产品

规格

KIT 042

Mouse NGAL ELISA Kit

96 well

 

Monkey NGAL ELISA Kit,CAT NO: KIT 045

用于定量测定恒河猴(Macaca mulatta)或食蟹猴(Macaca fascicularis)的尿液、血浆或血清中的NGAL(仅供研究使用)。由于恒河猴NGAL尚未被分离出来,也没有开发出抗体或免疫化学检测方法来检测或测量它,因此没有关于该蛋白生理或病理功能的公开数据。然而,恒河猴NGAL的生物合成、定位和释放的特征可能与其他物种,特别是人类的同源物相似。本试剂盒的开发将NGAL作为肾损伤标记分子的应用扩展到恒河猴和与其密切相关的食蟹猴。

该试剂盒内提供具有高度可重复性和易于使用的组分,即用型标准品和预包被的96孔ELISA酶标板。所有孵育均在室温下进行。仅需常规仪器即可读取数据。

检测范围:10-1000 pg/ml

检测限:1.5 pg/ml

检测时长<4 h

货号

产品

规格

KIT 045

Monkey NGAL ELISA Kit

96 well

 

Rat NGAL ELISA Kit,CAT NO: KIT 046

大鼠NGAL由一个178个氨基酸残基组成的单双硫桥接多肽链组成,理论分子质量为20.5 kDa,但糖基化使其分子质量增加到25 kDa。在某些情况下,NGAL可能与基质金属蛋白酶-9 (MMP-9)共表达并形成复合物。在成年大鼠中,NGAL在肝脏、前列腺、肾脏、乳腺以及呼吸道和消化道上皮细胞中表达。在胚胎发育和对炎症介质的反应中,它可能在其他细胞类型中表达。NGAL在肝细胞中的表达在暴露于IL-1β而非IL-6时增加。

该试剂盒用于定量测定大鼠尿液、血清、血浆、组织提取物与培养基中的NGAL含量(仅供研究使用)。试剂盒内提供具有高度可重复性和易于使用的组分,即用型标准品和预包被的96孔ELISA酶标板。所有孵育均在室温下进行。仅需常规仪器即可读取数据。

检测范围:4-400 pg/ml

检测限:0.5 pg/ml

样品稀释:1/20000(健康大鼠尿液或EDTA处理的血浆为例)

检测时长:<4 h

货号

产品

规格

KIT 046

Rat NGAL ELISA Kit

96 well

 

 

品 牌 简 介

中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)ELISA试剂盒——BioPorto热销产品推荐

BioPorto Diagnostics A/S公司成立于2001年,是丹麦一家专门生产抗体和基于抗体的各种生物产品的公司,致力于为临床研究专业人员提供一系列高质量诊断测试和抗体。

BioPorto Diagnostics旗下产品主要为几种快速诊断试剂盒,包括诊断早期急性肾损伤的NGAL ELISA kit,评估原发性免疫缺陷的MBL Oligomer ELISA kit,同时还有相关其他种属的科研用试剂盒和抗原抗体。其最新推出的产品有检测人体血浆中的活性蛋白C-蛋白C抑制物(APC-PCI)复合物的APC-PCI ELISA kit,高纯度人IgE单克隆抗体,以及Glucagon-like peptide-1和Exendin-4相关的单抗。

 

更多详情可联系BioPorto中国代理商-上海金畔生物!

CEM Discover微波蛋白酶解

CEM Discover微波蛋白酶解

CEMDiscover微波蛋白酶解

产品编号:
市场价:¥0.00
会员价:¥0.00
品牌:CEM
生产厂家:CEM

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PYNN培安Discover微波蛋白酶解

CEM公司的研究专家发现,在特定控制的单模微波技术基础上,微波对于大量的酶蛋白,可起到解旋的作用酶在微波中的稳定性由于螺旋的存在会迅速降低,而二硫键是共价的,所以蛋白的结构具有稳定性。微波可以加强用胰蛋白酶酶解蛋白的能力,胰蛋白酶在最高55℃的微波条件下,就可得到最好的活化。用此单模微波进行胶体内酶消解仅仅只需5分钟,而按照传统方法则需要16小时才能完成。微波蛋白水解用于氨基酸分析,分析每个蛋白质里的氨基酸量需要水解过程。运用DISCOVER单模微波仅需15分钟即可完成。

 

·技术参数
1. 反应规模:30ul-1.0ml
2. 反应容器尺寸:1.5ml微型离心机发离机试管
3. 批处理:14个容器(平行)
4. 温度传感器:原位光纤
5. 搅拌:磁力搅拌
6. 操作界面:Discover控制面板或者通过外接软件包
6. 控制模式:SPS
7. 温度:55℃(此时蛋白酶得到最好活化)
8. 温差:1℃
9. 测温模式:光纤
10. 处理时间:15min
11. 风冷:5 PSI
12. 酶/蛋白比:1:100-1:10都可使用
 

·主要特点

SPS 蛋白酶解仪的优点:

1.重复性:保证所有实验的重复性结果
2.能力强:可适用于困难的疏水蛋白
3.高速处理:只需10分钏,而不是传统的1天
4.批通量大:每批可同时酶解14个样品
5.无须转移:配有密闭盖的标准1.5ml移液试管
6.应用方便:溶液内消解或胶体内消解均可
7.样品量少:只需30微升

Epicypher热销产品——CUTANA™ ChIC/CUT&RUN Kit

Epicypher热销产品——CUTANA™ ChIC/CUT&RUN Kit

Epicypher热销产品——CUTANA™ ChIC/CUT&RUN Kit

核酸酶靶向切割和释放 (CUT&RUN)技术是由Steven henikoff博士团队开发的一种染色质图谱分析方法,基于Ulrich Laemmli博士的染色质免疫切割技术 (ChIC),融合蛋白A与微球菌核酸酶 (pA-MNase),选择性原位切割与抗体结合的染色质。在CUT&RUN中,细胞或细胞核固定化在固相载体上,从溶液中分离出pAG-MNase裂解的DNA片段。该方法与二代测序(NGS)兼容,可提供高质量的组蛋白翻译后修饰(PTMs)和染色质相关蛋白(如转录因子;Figure 1)。

Epicypher热销产品——CUTANA™ ChIC/CUT&RUN Kit

ChIP-seq是组蛋白PTMs和染色质相关蛋白全基因组定位的主要方法。在这种方法中,染色质通过超声或酶消化破碎,然后免疫沉淀目标特异性片段。尽管进行优化,但ChIP-seq需要大量细胞(通常为105 – 106个细胞)而且需要深度测序input 染色质与免疫沉淀物质(通常为 >3000万 reads/次)来从背景中解析信号。

ChIC和CUT&RUN通过将基因组片段靶向释放到溶液中,彻底改变了染色质调控。通过这一创新,背景显著减少,允许使用少量细胞且每个反应仅需300 – 800万reads/次对组蛋白PTMs和染色质相关蛋白进行高分辨率基因组图谱的绘制(Figure 2)。简化的工作流程和节省的成本使ChIC/CUT&RUN适用于高通量研究表观遗传生物学。


Epicypher热销产品——CUTANA™ ChIC/CUT&RUN Kit

FIGURE 2 Representative genome browser tracks show CUTANA™ CUT&RUN results using 500,000 K562   cells.  Clear peaks with the expected distribution profile are observed using 3-8 million sequencing  reads per reaction for a variety of epigenetic targets, including histone PTMs (H3K4me3, H3K27me3,  H3K27ac), transcription factors (CTCF), epigenetic reader proteins (BRD4), writer enzymes (MLL1),   and chromatin remodelers (SMARCA4).  Rabbit IgG antibody shown as a negative control (top track).

CUTANA™ChIC/CUT&RUN试剂盒包含48个反应的材料,专为多通道移液而设计,以实现CUT&RUN的高通量优势。该试剂盒包括阳性(H3K4me3)和阴性(Rabbit IgG)对照抗体,以及SNAP-CUTANA™ K-MetStat Panel (16个DNA条形码设计核小体携带广泛研究的赖氨酸甲基化PTMs)的分装分量。K-MetStat Panel加入到对照反应中,直接监测实验成功与否并帮助排除故障。此外,在pAG-MNase切割后,将剪切的E. coli DNA添加到所有反应中,以控制文库构建并使NGS标准化。该试剂盒与细胞和细胞核兼容,包括冻存和交联样品(Figure 3)。

Epicypher热销产品——CUTANA™ ChIC/CUT&RUN Kit

FIGURE 3 Heatmaps show CUT&RUN signal (red) and background (blue) of H3K4me3-enriched regions flanking annotated transcription start sites (TSS, +/- 2 kb). Gene rows are aligned across conditions, showing that genome-wide enrichment is preserved across sample types.


尽管建议从500,000个细胞开始,但只需使用5,000个细胞即可生成可比较的数据(Figure 4)。对照组的加入以及与不同靶类型、样本和低细胞数的兼容性,使该试剂盒成为染色质图谱实验的首选解决方案。

Epicypher热销产品——CUTANA™ ChIC/CUT&RUN Kit

FIGURE 4 Representative genome browser tracks for H3K4me3 (low abundance target) and H3K27me3  (high abundance target) CUT&RUN experiments using decreasing amounts of K562 cells. At 5,000   cells, data quality is largely indistinguishable from standard conditions (500,000 cells).

 保存条件 

OPEN KIT IMMEDIATELY and store components at room temperature, 4℃, and -20℃ as indicated (see User Manual corresponding to Kit Version 3). Stable for 6 months upon date of receipt.

Room Temperature (RT)

4℃

-20℃

8-strip Tubes

ConA Beads

5% Digitonin

0.5 M EDTA

E. coli Spike-in DNA

1 M Spermidine

100 mM Calcium Chloride

Bead Activation Buffer

SNAP-CUTANA™ K-MetStat Panel

SPRIselect Reagent

Manufactured by

Beckman Coulter Inc.

Pre-Wash Buffer

H3K4me3 Positive Control Antibody

0.1×TE Buffer

Stop Buffer

Rabbit IgG Negative Control Antibody

pAG-MNase

 数据示例 

Epicypher热销产品——CUTANA™ ChIC/CUT&RUN Kit

Figure 1: CUT&RUN DNA fragment size distribution analysis

CUT&RUN was performed as described in Figure 5. Library DNA was analyzed by Agilent Tapestation®. This analysis confirmed that mononucleosomes were predominantly enriched in CUT&RUN (~300 bp peaks represent 150 bp nucleosomes + sequencing adapters).

Epicypher热销产品——CUTANA™ ChIC/CUT&RUN Kit

FIGURE 2 SNAP-CUTANA™ K-MetStat Spikein Controls

DNA-barcoded designer  nucleosomes (dNucs) representing 16 K-methyl PTMs: mono-, di-, and tri-methylation at H3K4, H3K9, H3K27, H3K36, and H4K20, as well as  unmodified control, were spiked into CUT&RUN  reactions prior to the addition of antibodies (IgG, H3K4me3). Spike-in barcodes were counted and  normalized from raw fastq files using the shell  script and analysis sheet available at  epicypher.com/19-1002. Barcodes for IgG (top;  normalized to total reads) and H3K4me3 (bottom; normalized to on-target) antibodies are  shown. The spike-ins confirmed optimal  experimental conditions (H3K4me3 antibody  specifically recovered the target dNuc, while IgG  showed no preferential enrichment).

Epicypher热销产品——CUTANA™ ChIC/CUT&RUN Kit

Figure 3: CUT&RUN genome-wide heatmaps

CUT&RUN was performed as described in Figure 5. Heatmaps show two replicates (“Rep”) of IgG (left) and H3K4me3 (right) kit control antibodies in aligned rows ranked by intensity (top to bottom) and colored such that red indicates high localized enrichment and blue denotes background signal.

Epicypher热销产品——CUTANA™ ChIC/CUT&RUN Kit

Figure 4: Representative gene browser tracks

CUT&RUN was performed as described in Figure 5. A representative 174 kb window at the TRMT2A gene is shown for two replicates (“Rep”) of IgG and H3K4me3 kit control antibodies. Representative tracks are also shown for antibodies to H3K27me3 and the transcription factor CTCF. The CUT&RUN kit produced the expected genomic distribution for each target. Images were generated using the Integrative Genomics Viewer (IGV, Broad Institute).

Epicypher热销产品——CUTANA™ ChIC/CUT&RUN Kit

Figure 5: CUT&RUN methods

CUT&RUN was performed using the CUTANA™ ChIC/CUT&RUN Kit starting with 500k K562 cells with 0.5 µg of either IgG (EpiCypher 13-0042), H3K4me3 (EpiCypher 13-0041), H3K27me3 (EpiCypher 13-0055), or 0.125 µg of CTCF (EpiCypher 13-2014) antibodies in duplicate. Library preparation was performed with 5 ng of DNA (or the total amount recovered if less than 5 ng) using the CUTANA™ Library Prep Kit (EpiCypher 14-1001/14-1002). Libraries were run on an Illumina NextSeq2000 with paired-end sequencing (2×50 bp). Sample sequencing depth was 3.5 million reads (IgG Rep 1), 3.8 million reads (IgG Rep 2), 4.7 million reads (H3K4me3 Rep 1), 6.9 million reads (H3K4me3 Rep 2), 6.6 million reads (H3K27me3 Rep 1), 4.7 million reads (H3K27me3 Rep 2), 3.9 million reads (CTCF Rep 1) and 4.6 million reads (CTCF Rep 2). Data were aligned to the hg19 genome using Bowtie2. Data were filtered to remove duplicates, multi-aligned reads, and blacklist regions. 

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产品名称

规格

14-1048

CUTANA™ ChIC/CUT&RUN Kit

48 Reactions

 

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