小胶质细胞特异性抗体
兔源Iba1抗体,无标签
Iba 1是在巨噬细胞/小胶质细胞中特异性表达的分子量为17,000的钙结合蛋白。近来小胶质细胞备受关注,除了在神经营养/神经保护中起作用外,也已被证实通过产生NO,TNF-α和IL-1β对神经造成损伤。
该产品是与小胶质细胞特异性反应的兔多克隆抗体,适用于与星形胶质细胞特异性抗GFAP单克隆抗体进行双染色。
◆特点
● 抗原:对应于Iba1的C末端的合成肽
● 形式:TBS溶液(1mg / mL)
● 纯化:兔抗血清的抗原亲和层析纯化
● 特异性:
对小胶质细胞和巨噬细胞具有特异性,但不与神经元和星形胶质细胞发生交叉反应。
与人类,小鼠大鼠Iba1反应。
● 用法:
1.抗Iba1,兔(免疫细胞化学)适用于免疫细胞化学。 1-2μg/ mL使用
2.抗Iba1,兔(用于Westernblotting)适合于Westernblotting(免疫印迹)。 0.5-1μg/ mL使用。
◆应用
大鼠原代混合培养细胞双染色和相同视野的相位图像
◆免疫印迹实验
◆推荐准备工作
a)石蜡切片
1. 脱蜡
100%二甲苯10分钟,2次
⇓
100%乙醇5分钟,2次
⇓
80%乙醇5分钟
⇓
70%乙醇5分钟
⇓
dH2O,5分钟,2次
2. 用0.01M PBS洗涤,2次
3. 在0.3%H 2 O 2的甲醇溶液中孵育30分钟
4. 用0.01M PBS洗涤,3次
5. 室温(RT)下用封闭缓冲液(1.5%正常山羊血清和0.001M PBS的1%BSA)孵育2小时。
6. 4℃下在封闭缓冲液中与抗Iba1抗体(0.5μg/ mL)(Wako目录号019-19741)孵育过夜。
7. 用0.01M PBS洗涤,3次。
8. 与生物素化的抗兔IgG抗体(1:200)在封闭缓冲液中室温孵育1小时。
9. 用0.01M PBS洗涤,3次。
10. 室温下与Elite ABC试剂(0.01M PBS中的试剂A(1:50)和试剂B(1:50))孵育1小时。
11. 用0.01M PBS洗涤,3次
12. 在过氧化物酶溶液中孵育(0.05M Tris缓冲液的0.01%过氧化氢和0.05%DAB)
◆实验步骤链接
b)冰冻切片
冷冻的小鼠脑组织或培养的细胞应用4%多聚甲醛-PBS灌注固定。然后制备组织切片。制备后,将组织切片和培养的细胞用抗Iba1抗体免疫染色。
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