KU-0063794
货号：
IK0210
品牌：
Jinpan
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产品简介
| 别名 | 依托泊苷 |
| 英文名称 | KU-0063794 |
| CAS | 938440-64-3 |
| 分子式 | C25H31N5O4 |
| 分子量 | 465.54 |
| 纯度 | ≥98% |
| 单位 | 瓶 |
| 生物活性 | KU-0063794 是一种有效的，特异性的 mTOR 抑制剂，能够抑制 mTORC1 和 mTORC2，IC50 值均约为 10 nM[1-3]。 |
| IC50 | mTORC1:10 nM ；；mTORC2:10 nM [1-3] |
| In Vitro | Ku-0063794是细胞渗透物，抑制Akt，S6K和SGK的活化和疏水基序磷酸化，但不抑制RSK（核糖体S6激酶），一种不受mTOR调节的AGC激酶。 Ku-0063794还抑制由PDK1（3-磷酸肌醇依赖性蛋白激酶-1）磷酸化的Akt的T环Thr308残基的磷酸化。 Ku-0063794诱导mTORC1底物4E-BP1（真核起始因子4E结合蛋白1）的去磷酸化比雷帕霉素大得多，即使在mTORC2缺陷细胞中，表明mTOR的形式不同于mTORC1，或mTORC2磷酸化4E-BP1 。 Ku-0063794还抑制细胞生长并诱导G1期细胞周期停滞[1]。 Ku0063794不改变LNCaP细胞核中的核磷酸-Mst1-Thr-120水平，而Ku0063794或CCI-779增加C4-2细胞核中的磷酸-Mst1-Thr-120水平[2]。 GDC-0941和KU0063794的组合抑制4EBP1和S6的磷酸化程度与HCT116，DLD1和HT29细胞系中单一药剂NVP-BEZ235引起的磷酸化程度相似[3]。 |
| 激酶实验 | 在Hepes裂解缓冲液中新鲜裂解HEK-293细胞。通过与缀合至免疫前IgG的5-20μL蛋白G-Sepharose一起温育来裂解裂解物（1-4mg）。然后将裂解物提取物与5-20μL缀合至5-20μg的抗Rictor或抗Raptor抗体或免疫前IgG的蛋白G-Sepharose一起温育。所有抗体与蛋白G-Sepharose共价缀合。免疫沉淀在4℃下在振动平台上进行1小时。用Hepes裂解缓冲液洗涤免疫沉淀物四次，然后用Hepes激酶缓冲液洗涤两次。对于用于磷酸化S6K1的Raptor免疫沉淀物，对于最初的两个洗涤步骤，缓冲液包含0.5mol/LNaCl以确保最佳的激酶活性。从用PI-103孵育的血清剥夺的HEK-293细胞（1μM，1小时）分离GST-Akt1。从用雷帕霉素（0.1μM，1小时）温育的血清剥夺的HEK-293细胞中纯化GST-S6K1。通过在各种浓度的KU-0063794和GST-Akt1（0.5μg）或GST-S6K1（0.5μg）存在下添加0.1mM ATP和10mM MgCl 2来启动mTOR反应。反应在30℃下在振动平台上进行30分钟，并通过加入SDS样品缓冲液终止反应。然后将反应混合物通过0.22-μM-孔径的Spin-X过滤器过滤，并将样品用指定的抗体进行电泳和免疫印迹分析。 |
| SMILES | OCC1=CC(C2=CC=C3C(N=C(N=C3N4CCOCC4)N5C[C@@H](O[C@@H](C5)C)C)=N2)=CC=C1OC |
| 靶点 | mTOR |
| 细胞实验 | 用KU-0063794处理细胞24,48和72小时，并用新鲜溶解的KU-0063794每24小时更换培养基。为了测量细胞生长，用PBS洗涤细胞一次，并在PBS中的4％（v/v）多聚甲醛中固定15分钟。用水洗涤一次后，将细胞用0.1％结晶紫在10％乙醇中染色20分钟，并用水洗涤三次。用0.5mL 10％（v/v）乙酸（乙酸）从细胞中提取结晶紫20分钟。然后将洗脱液在水中1:10稀释，并定量590nm处的吸光度。为了评估细胞周期分布，通过胰蛋白酶消化收获细胞，在PBS中洗涤一次，并重悬于冰冷的水溶液中。 70％（v/v）乙醇。将细胞在PBS加1％（w/v）BSA中洗涤两次，并在含有50μg/ mL碘化丙锭和50μg/ mL RNase A的PBS加0.1％（v/v）Triton X-100中染色20分钟。使用FACSCalibur流式细胞仪和CellQuest软件测定细胞的DNA含量。以线性标度获得红色荧光（585nm），并且使用脉冲宽度分析来排除双峰。使用FlowJo软件确定细胞周期分布。 |
| 数据来源文献 | [1]. Garcia-Martinez et al. Ku-0063794 is a specific inhibitor of the mammalian target of rapamycin (mTOR). Biochem.J. (2009)421 29. [2]. Collak FK, et al. Threonine-120 phosphorylation regulated by phosphoinositide-3-kinase/Akt and mammalian target of rapamycin pathway signaling limits the antitumor activity of mammalian sterile 20-like kinase 1.J Biol Chem. 2012 Jul 6;287(28):23698-709. E [3]. Haagensen EJ, et al. The synergistic interaction of MEK and PI3K inhibitors is modulated by mTOR inhibition. Br J Cancer. 2012 Apr 10;106(8):1386-94. |
| 规格 | 5mg 25mg 50mg |
KU-0063794 是一种有效的，特异性的 mTOR 抑制剂。