Cygnus CHO HCP ELISA Kit 宿主细胞蛋白检测试剂盒
规格型号：96T/盒

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Cygnus CHO HCP ELISA Kit 宿主细胞蛋白检测试剂盒 产品介绍：

CHO HCP是第三代ELISA试剂盒，比之前试剂盒具有更广泛HCP反应性。新型试剂盒在检测CHO HCPs 蛋白方面有很多改进。新试剂盒具有更高的灵敏度，在抗体物和其它CHO表达蛋白中检测HCP蛋白可以精确到到十亿分之一百。第三代ELISA试剂盒经过大 量药物原料和中试样品检测评估，是工艺开发和大量释放试验检测的通用方法。抗体反应性使用传统2D 蛋白杂交技术（2D HPLC-ELISA）鉴定。2D HPLC-ELISA方法显示抗体对超过750种HCPs都具有反应性。用蛋白检测方法和ELISA正交试验表明这些多达750种的宿主细胞蛋白意味着高 于98%的蛋白种类均可用ELISA方法检测到。因此，这种抗体可以避免丢失任何重要的HCP蛋白。

产品使用时一定要做好保护措施：0.5M硫磺酸有强腐蚀性，要避免接触眼睛、皮肤和衣物。检测前所有试剂都要平衡到室温。

Cygnus CHO HCP ELISA Kit 宿主细胞蛋白检测试剂盒检测原理：

CHO检测 是一个双位点酶联免疫检测。样本中包含的CHO HCPs蛋白与标记有抗-CHO抗体的辣根过氧化物酶同时反应，反应发生在之前涂有一层吸附性抗-CHO蛋白抗体的微量滴定板中进行。免疫反应构成为夹层 式结构：固相抗休-HCP-酶标记抗体。反应结束后清洗微量滴定板去除未结合反应物。添加TMB作用底物反应。微量滴定板读数器上测定水解物浓度，水解物 浓度与CHO HCPs蛋白浓度成比例。用提供的标准液绘制标准曲线，根据读数可以计算出CHO HCPs蛋白含量。

检测过程：

取出所有试 剂平衡到室温→移取100µl anti-CHO:HRP（#F551）至每孔→分别移取50µl标准液，对照物和样品至待测孔→密封滴定板，摇床室温温育2小时，180rpm→清空小 孔，用纸吸干残留液，350µl清洗缓冲液清洗4次→加100µl TMB 作用物（#F005）→室温静置30分钟，不需摇床→加100µl反应终止液（#F006）→分光光度计450/650nm读数

结果分析：

标准液（0, 1, 3, 12, 40, 100ng/mL）可用于制作标准曲线，标准液浓度相当于免疫反应HCP总浓度。根据测定的小孔中标准液吸光值绘制标准曲线。数据分析可以使用计算机选配曲线，例如点到点，三次样本函数，或四参数逻辑曲线。不要使用线性回归分析修改样品吸光值，这样会出现显著误差。也可以手工绘图，Y轴标注吸光值，X轴标注浓度。然后根据样品吸光值计算出样品中HCP浓度。（操作时每一浓度标准液都要重复滴定到两个小孔中，以便计算平均分光光度值，样品也需计算平均吸光值）。

 组成成份：

● Anti-CHO:HRP（辣根过氧化物酶）　  　　　      1x12mL   F551（Product#）
● Anti-CHO微量滴定板　          　　　               12×8孔　  F552
● CHO HCP标准液（0, 1, 3, 12, 40, 100ng/mL）    1mL/瓶　 F553
● Stop Solution终止液（0.5M硫磺酸）  　　　      1x12mL　 F006
● TMB （3,3’,5,5’-四甲基联苯氨）　                      1x12mL　 F005
● Wash Concentrate清洗物（20倍浓缩）　            1x50mL   F004

 需自备物：

» 微量板分光光度计，双波长450 & 650nm
» 移液器-50L and 100L
» 可重复使用或多通道移液器-100L
» 微量板摇床（150 – 200 rpm）
» 样品稀释液（推荐使用Cat # I028）
» 1L清洗瓶
» 蒸馏水