Tau单体：潜在的治疗靶点

由 MAPT 基因编码的微管相关蛋白 tau 主要在神经元中表达，在许多生理进程中发挥重要作用。神经元细胞内tau蛋白的异常过度磷酸化和 tau 聚集是阿尔茨海默病、帕金森病和许多其他所谓的 tau 蛋白病的典型标志，突出了理解和预防或逆转这一过程的必要性。通过针对 tau 进行治疗干预，研究人员希望改善患者的治疗效果，并为目前无法治愈的神经退行性疾病开发有效的治疗方法。

为什么要研究tau单体?

在正常情况下，tau 蛋白以单体的形式存在，在成人大脑中有六种不同的异构体（长度从 352 – 441 个氨基酸不等）1。它们参与调节微管组装和稳定性，这对于轴突生长和突触小泡的运输至关重要。然而，在病理条件下，过度磷酸化的 tau 单体与带负电的微管分离，首先聚集成寡聚体，然后聚集成神经原纤维缠结 (NFT)，随后导致神经元变性 2,3。

尽管tau 蛋白病理学还没有被完全了解，但目前有几种假设。其中一个是，从野生型 tau 衍生出的具有聚集能力的 tau 单体通过结构转变可能可以诱发聚集，而阻止这种转化的就具有治疗潜力4。另一个假说是溶酶体应激可能会刺激具有聚集能力的单体 tau 释放到细胞外空间，促使研究人员考虑抑制溶酶体胞吐作用的治疗效用 5。众所周知，疾病相关的突变会破坏 tau 中易于聚集的 VQIVYK 基序的稳定性，因此这被证明可能是一个有价值的治疗靶点6。

Tau 单体如何用于聚集实验?

各种模型已经被开发用来研究 tau 蛋白聚集过程，其中许多模型依赖重组 tau 单体在体外复制聚集体组装。有一种常用的方法是使用聚集诱导剂，例如聚阴离子（例如肝素）、脂肪酸（例如花生四烯酸）或预先形成的 tau 细丝，使用荧光探针硫黄素 T（结合富β折叠的结构）以实时监测聚集体的形成；利用这种方法可以比较不同 tau 异构体、截短的 tau 结构域或蛋白质突变形式的聚集情况3。其他类型的检测旨在研究在各种细胞系中过度表达 tau 单体的影响，也会使用硫磺素 T 等辅助方法来跟踪聚合的产生。

高品质  tau 蛋白单体用于聚集实验

StressMarq提供各种形态和种类的tau蛋白用于神经衰退研究。这些蛋白包括活性重组人Tau441 (2N4R), P301S 突变蛋白单体，有 E. coli 表达的(SPR-327) 和杆状病毒表达的 (SPR-473), 活性重组人Tau441 (2N4R) 野生型蛋白单体 (SPR-479), 活性重组人 Tau (K18), P301L 突变蛋白单体 (SPR-328), 以及活性重组人 Tau (K18) K280 缺失突变单体 (SPR-476). 另外还有活性重组人截短 Tau 片段(AA297-391) 蛋白单体 dGAE (SPR-444) 和 dGAE C322A 突变单体(SPR-445), 以及活性重组小鼠Tau441 (2N4R), P301S 突变蛋白单体 (SPR-474). 大部分蛋白都经过了硫磺素 T 检测来验证聚集性。

Thioflavin T is a fluorescent dye that binds to beta sheet-rich structures, such as those in tau fibrils. Upon binding, the emission spectrum of the dye experiences a red-shift and increased fluorescence intensity. Thioflavin T emission curves show increased fluorescence (correlated to tau aggregation) over time when truncated tau fragment (AA297-391) (dGAE C322A) monomer is combined with truncated tau fragment (AA297-391) (dGAE C322A) preformed fibrils (Type 1).

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