BioVendor新推出miRNA检测方法—Two-Tailed RT-qPCR

目前检测microRNAs的挑战是通常两个传统的PCR引物不适合miRNA目标，因为引物的组合长度几乎是microRNAs长度的两倍。现有的技术通过使用例如发夹引物，添加polyA尾，或通过连接添加片段延伸微microRNAs已经解决了这个问题，然而，这些方法缺损害了检测的灵敏度和特异性。此外，这些方法不能检测在3’端修饰的microRNAs，因为会干扰延伸过程。

BioVendor新推出检测miRNA的Two-Tailed RT-qPCR方法提供了一个优越的解决方案。Two-Tailed RT-qPCR不是使用单一的结合探针，而是使用两个半探针（hemiprobes），它们结合到microRNA的不同片段，并通过折叠的系绳连接。虽然每一个半探针都太短而不能结合microRNA，但当两者互补时，它们就会协同结合。

图1. Two-Tailed RT-qPCR检测原理

● Two-Tailed RT-qPCR检测优势：

1. 引物结合特异性强

2. 形成cDNA后可以使用2个序列特异性引物进行PCR扩增

3. SYBR以及水解探针均可以使用

4. 适用一管多色以及单色qPCR后的双管多色的反转录

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