ImmPRESS 检测试剂盒及其在双抗原染色中的应用
上世纪60年代初,人们发现生物素(biotin)与卵白素(avidin)之间具有高度亲和力,是自然界中具有最强亲和力的物质之一。到了70年代人们又发现生物素可以和抗体交联,且生物素或卵白素与过氧化物酶或荧光素结合后,并不影响它们的生物学活性。从此免疫组化方法进入生物素–卵白素检测系统时代,其代表如ABC、SP等检测系统,时至今日,它们仍被广泛应用。ABC方法是美国VECTOR公司最早推出的经典产品,它利用生物素和卵白素具有极高的亲和性这一生物学特征,将卵白素和生物素化辣根过氧化物酶按照一定的比例混合,形成ABC复合物(卵白素–生物素–过氧化物酶)。在生物素化的二抗结合一抗后,即可与上述ABC复合物形成抗原–抗体–生物素化二抗-ABC,最后用相应的底物显色。此种方法已经沿用了几十年,得到普遍认可,物美价廉,背景干净,但缺点是操作比较麻烦,灵敏度没有不及目前一些新的检测系统高。
ABC检测系统的优势在于可以将抗原抗体结合位点的信号进行多级放大,使得多种抗体可以应用于石蜡切片的检测。但是这种检测系统方法也存在缺陷,除了复杂耗时,难以标准化、对某些抗体检出率差以外,最大的问题可能是难以避免内源性生物素的干扰,造成非特异性背景染色,尤其在人体组织中,肝、肾等组织都有较多的内源性生物素,加上目前通用的抗原修复方法可以激活内源性生物素,非特异性背景染色在某些组织的免疫组化染色中不能满足研究的需要。
为了克服这一缺陷,人们想出了多种方法。其中最为巧妙的一种方法是用高分子葡聚糖作为载体将多个二抗分子和酶结合在一起,使得检测变得更简单。Vector公司的ImmPRESS系列产品就是将二抗分子和酶通过高分子葡聚糖聚合在一起而成,可以满足研究人员更高的需求。
Vector生产的ImmPRESS Universal检测试剂盒适合于一抗来源于小鼠和兔的免疫化学染色。试剂盒成分包括:50ml2.5%正常马封闭血清;50 ml 即用型 ImmPRESS(聚合酶–抗体)试剂。
产品名称 |
目录号 |
规格 |
ImmPRESS Anti-Goat Ig (peroxidase) Kit |
MP-7405 |
50 ml |
ImmPRESS Anti-Mouse Ig (peroxidase) Kit |
MP-7402 |
50 ml |
ImmPRESS Anti-Rabbit Ig (peroxidase) Kit |
MP-7401 |
50 ml |
ImmPRESS Universal Antibody (anti-mouse Ig/anti-rabbit Ig, peroxidase) Kit |
MP-7500 |
50 ml |