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产品资料 – 基因编辑 – 应用于CRISPR工作流程中的NEB特色产品
EnGen® Seq1 Cas9 核酸酶 收藏
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#M0668T
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产品特点：
• PAM 序列（5´- NAGA- 3´）允许靶向额外的基因组区域
• 是直接导入 Cas9/sgRNA 复合物进行基因编辑的理想选择
• 与 EnGen 突变检测试剂盒（NEB #E3321S）兼容
• 体外应用时，在 20°C至 45°C范围内具有活性
概述：
该酶克隆自马链球菌（Streptococcus equinus），是一种由 RNA 引导的核酸内切酶，可在靶向位点特异切割双链 DNA。靶向切割需要由 Cas9 和 116 nt sgRNA 组成的核糖核蛋白复合物。sgRNA 编码一个 20 核苷酸序列，与非靶链上 5´–NAGA–3´ 原间隔区相邻序列（PAM）上游的 DNA 靶向互补。EnGen Seq1 Cas9 在 PAM 上游的第 3 个碱基外进行 DNA 双链切割。EnGen Seq1 Cas9 在其蛋白质的 N 端和 C 端带有 SV40（Simian virus 40）T 抗原核定位序列（NLS）。
sgRNA 引导 S. equinus Cas9 核酸酶切割靶标 DNA 示意图
上图中，S. equinus Cas9（Seq1 Cas9）蛋白以米色显示，sgRNA 以蓝色显示，DNA 以灰色、绿色和红色显示。DNA 靶标以及前间隔序列以绿色显示，图中 R-loop 区域展示了靶标序列与向导 RNA 互补配对。Cas9 与 DNA 结合所需的 PAM 序列（protospacer adjacent motif）以红色显示，黑色三角标注 DNA 的切割位置。