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产品资料 – RNA 试剂 – RNA 连接酶和修饰酶
5´ 去腺苷化酶 收藏
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特性
DNA 和 RNA 5´ 末端的去腺苷化
Aprataxin 依赖的 DNA 修复检测
分析双核苷四磷酸
概述
酵母 5´ 去腺苷化酶是组氨酸三聚体(HIT)家族中的一员,属于组氨酸三聚体核苷结合蛋白(Hint)的分支。它是 aprataxin 在酵母中的直系同源物。人 aprataxin 的突变会导致神经系统疾病,如共济失调伴眼动失用症 I。通过从 DNA 的 5´ 末端去除 AMP(AMP-DNA 水解酶活性),人源 5´ 去腺苷化酶可以去除未连接中间体,它还可以通过去除 3´ –磷酸和 3´ –磷酸乙醇酸修复 DNA 的 3´ 末端损伤。人 aprataxin 作用于小分子,如核苷多磷酸双腺苷四磷酸(AppppA)和 lysyl-AMP。
5´ 去腺苷化酶是由酿酒酵母(S. cerevisiae)的 HNT3基因编码。 NEB 研究显示该蛋白能从 DNA 和 RNA的 5´ 末端去腺苷化,余下 5´ 末端磷酸。它也能切割 AppppA 生成 ATP 和 AMP。未检测出其对 lysylAMP 有作用。
来源
从携带编码酿酒酵母 5´ 去腺苷化酶质粒的 E. coli 菌株中纯化而得。
反应条件
20 μl 反应体系:1X NEBuffer 2 [50 mM NaCl,10 mM Tris-HCl,10 mM MgCl2,1 mM DTT (pH 7.9 @ 25℃) ],5–50 pmol 腺苷化 DNA (AMPDNA),30℃ 温育。
热失活:70℃ 20 分钟。
单位定义
1 单位指 30℃ 条件下,10 分钟从 5´ 腺苷化 DNA 寡聚体中去除 10 pmol AMP 所需的酶量。
浓度
50,000 units/ml。